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DOI: 10.3791/55818-v
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여기에서는 MCS (Magnetic-activated Cell Sorting)를 사용하여 Perivascular Adipose Tissue (PVAT)에서 지방 세포 전구 세포 (Adipocyte Progenitor Cell, APC) 개체군을 분리하는 방법을보고합니다. 이 방법은 FACS (Fluorescence-Activated Cell Sorting)와 비교할 때 지방 조직 1g 당 APC의 증가 된 분리를 허용합니다.
이러한 분리 및 분화 프로토콜의 전반적인 목표는 혈관 주위 지방 조직에서 지방 세포 전구 세포를 얻고 성숙한 지방 세포로 분화를 유도하는 것입니다. 이 방법을 사용하면 혈관 주위 지방 조직에서 특이적이고 정의된 지방 세포 전구 세포 집단을 분석할 수 있으며, 형태, 생존력 및 증식 및 분화 가능성에 미치는 영향을 최소화할 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 형광 활성화 세포 분류에 비해 지방 조직 1g당 항원 제시 세포의 격리를 증가시킬 수 있다는 것입니다.
발가락 꼬집음에 대한 반응 부족을 확인한 후 흉골을 따라 쥐의 회음부까지 수직 정중선을 절개하여 복강에 접근합니다. 상장간막 동맥(superior interenteric artery), 작은 장간막 저항 혈관(small interenteric resistance vessels), 흉부 대동맥(thoracic aorta)을 노출시키고 장간막과 대동맥에 대한 모든 연결을 끊습니다. 생식선 지방 조직을 수집하고 분리된 지방 패드를 10밀리몰 힙이 보충된 Krebs-Ringer 중탄산염 완충액 또는 KRBB 용액의 새 용기로 옮깁니다.
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