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고성능 액체 크로마토그래피 분석 및 Synaptosomal 도파민 통풍 관의 사용에 의해 쥐에서 Dopaminergic ...
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JoVE Journal Neuroscience
Assessment of Dopaminergic Homeostasis in Mice by Use of High-performance Liquid Chromatography Analysis and Synaptosomal Dopamine Uptake

고성능 액체 크로마토그래피 분석 및 Synaptosomal 도파민 통풍 관의 사용에 의해 쥐에서 Dopaminergic 항상성의 평가

Full Text
13,048 Views
11:26 min
September 21, 2017

DOI: 10.3791/56093-v

Kathrine L. Jensen1, Annika H. Runegaard1, Pia Weikop2, Ulrik Gether1, Mattias Rickhag1

1Molecular Neuropharmacology and Genetics Laboratory, Lundbeck Foundation Center for Biomembranes in Nanomedicine, Department of Neuroscience and Pharmacology, Faculty of Health and Medical Sciences,University of Copenhagen, 2Laboratory of Neuropsychiatry, Psychiatric Center Copenhagen and Department of Neuroscience and Pharmacology,University of Copenhagen

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents two techniques to investigate dopamine homeostasis in mice: the assessment of dopamine transporter function through synaptosomal dopamine uptake and the analysis of dopamine levels in striatal tissue using high-performance liquid chromatography (HPLC). These methods allow for the evaluation of dopamine tissue content and transporter functionality, especially after in-vivo manipulations.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Dopamine Transporter Function
  • High-Performance Liquid Chromatography (HPLC)

Background

  • Dopamine plays a crucial role in various neural functions.
  • The dopamine transporter is critical for dopamine reuptake and homeostasis.
  • Understanding dopamine dynamics can provide insights into neurological disorders.
  • HPLC is a reliable method for quantifying neurotransmitter levels.

Purpose of Study

  • To provide protocols for assessing dopamine transporter function.
  • To measure dopamine content in the striatum of mice.
  • To facilitate the understanding of dopamine homeostasis post-manipulation.

Methods Used

  • The study utilizes synaptosomal preparations and HPLC for analysis.
  • Mice serve as the biological model, particularly focusing on their striatal tissue.
  • The protocols can be executed following chemogenetic manipulations or drug treatments.
  • Detailed steps are provided for brain dissection, tissue preparation, and analysis.

Main Results

  • Both methods enable robust measurement of dopamine levels and transporter activity.
  • The study provides insights into the parameters of dopamine homeostasis in a controlled setting.

Conclusions

  • The protocols established in this study enhance the understanding of dopamine transport dynamics.
  • They enable researchers to assess the impact of various manipulations on dopamine neurotransmission.

Frequently Asked Questions

What advantages does synaptosomal preparation offer?
Synaptosomal preparation allows for the isolation of synaptic terminals, providing a focused assessment of neurotransmitter dynamics without interference from other cell components.
How are dopamine levels measured in the study?
Dopamine levels are quantified using high-performance liquid chromatography (HPLC), which allows for precise analysis of neurotransmitter concentrations in tissue samples.
What interventions can affect dopamine homeostasis?
The methods implemented can be applied following chemogenetic manipulations, drug treatments, or behavioral training, influencing dopamine transporter function and levels.
What is the role of the dopamine transporter?
The dopamine transporter regulates dopamine signaling by reabsorbing dopamine from the synaptic cleft, thus playing a crucial role in maintaining neurotransmitter homeostasis.
How can this study's methods be adapted?
The techniques can be adapted for various experimental manipulations and different neuronal pathways, facilitating broader applications in neuroscience research.

Synaptosomal 도파민 통풍 관 및 고성능 액체 크로마토그래피 분석 대표 실험 도구 마우스에서 도파민 항상성 도파민 운송업 자의 기능과 striatal 조직에서 도파민의 수준을 평가 하 여 조사를 각각. 여기 선물이 도파민 조직 콘텐츠를 측정 하 고 도파민 운송업 자의 기능을 평가 하는 프로토콜.

이 프로토콜에는 두 가지 기술이 도입되었습니다. 첫 번째 연구의 목표는 시냅토솜 제제에서 도파민 흡수를 측정하여 도파민 수송체 기능을 평가하는 것입니다. 두 번째는 HPLC 분석을 통해 조직의 도파민 수치를 평가하기 위한 것입니다.

이러한 방법은 도파민 조직 함량을 측정하고 마우스에서 도파민 수송체의 기능을 평가하는 방법을 입증함으로써 도파민 항상성의 중요한 매개변수를 제공합니다. 이러한 기술의 주요 장점은 화학유전학적 조작, 체내 약물 치료 또는 동물의 행동 훈련과 같은 생체 내 조작 후 수행할 수 있다는 것입니다. HPLC 절차를 시연하는 사람은 신경정신의학 연구소의 부교수인 Pia Weikop입니다.

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신경 과학 문제 127가 도파민 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC) synaptosomal 도파민 통풍 관 synaptosomes 도파민 항상성 도파민 운송업 자

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