Name: 높은 처리량 측정 적합성 Leptospira interrogans Transposon 삽입 돌연변이 중 황금 시리아 햄스터 감염의 병렬 시퀀싱 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-12-18T12:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 50 s
Description: 학습하세요 고처리량 트랜스포존 시퀀싱 기법을 사용하여 Leptospira interrogans의 병원성 유전자를 식별하는 방법을 배우세요. 이 기술은 황금 시리아 햄스터 감염 모델에서 생체 내 적합성 결함이 있는 돌연변이체를 효율적으로 선별할 수 있습니다.

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이 작품 재향 군인 업무 공로 수상 (D.A.H.)에 의해 지원 되었다 그리고 건강의 국립 연구소는 부여 R01 AI 034431 (D.A.H.).

<ol><li>Murray, G. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome-wide+transposon+mutagenesis+in+pathogenic+Leptospira+species%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immun%22%5BJournal%5D)">Genome-wide transposon mutagenesis in pathogenic Leptospira species.</a> Infect Immun. 77 (2), 810-816 (2009).</li>
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<li>Ratet, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+imaging+of+bioluminescent+Leptospira+interrogans+in+mice+reveals+renal+colonization+as+a+stealth+escape+from+the+blood+defenses+and+antibiotics%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Negl+Trop+Dis%22%5BJournal%5D)">Live imaging of bioluminescent Leptospira interrogans in mice reveals renal colonization as a stealth escape from the blood defenses and antibiotics.</a> PLoS Negl Trop Dis. 8 (12), e3359(2014).</li>
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</ol>

저자는 공개 없다.

Intraperitoneally 42 L. interrogans 돌연변이 함께 도전 하는 햄스터에 대 한 우리의 파일럿 실험 결과17제공 됩니다, 하지만 우리는 돌연변이의 더 큰 수영장 Tn이 의해 상영 될 수 있습니다 기대 Transconjugants의 주파수는 낮은 때문에 (100-200 transconjugants/짝짓기), 몇몇 matings 큰 Tn-Seq 실험에 대 한 돌연변이의 충분 한 번호를 생성할 필요가 있습니다. 액체 문화에서 돌연변이의 많은 수를 유지 하는 해결 되어야 물류 도전을 선물 한다. 문화 깊은 96 잘 접시에 알을 품을 수 있다. 문화 밀도 420로 설정 하는 분 광 광도 계에 신호는 광학 밀도 의해 모니터링할 수 nm. 사용 하는 동물의 수의 결정 부분에 입력된 풀의 크기에 따라 고 전력 분석에 의해 결정 되어야 합니다. 대규모 실험에 대 한 전력 분석 협의 biostatistician에서 수행 되어야 하는 것이 좋습니다.
<p c...

Leptospira 종 등 일부 박테리아에 대 한 독성 유전자의 유전 도구 사용할 수 있는 제한 된 수 때문에 어렵습니다. 일반적으로 사용 되는 한 가지 방법은 각 돌연변이에 삽입 사이트의 식별 및 독성 테스트 동물 모델에서 개별 transposon 돌연변이의 임의의 transposon mutagenesis에 의해 돌연변이의 컬렉션의 창조 이다. 이 방법은 소모, 비싼, 고 동물의 많은 수를 요구 한다.
무작위 mutagenesis Leptospira interrogans병원 체에 대 한 처음으로 개발, 유전자 독성에 관련 된 동물 모델1에서 개별 돌연변이 테스트 하 여 확인 되었다. 돌연변이 신호에 그들의 잠재적인 역할 또는 운동 성 또는 그들의 예상된 외부 막 또는 표면 위치 같은 기준에 따라 선정 됐다. Leptospiral의 대부분으로 유전자 인코딩 알 수 없는 함수2의 가상 단백질, 선택 돌연변이 이러한 조건 제한에 따라 소설 leptospiral 독성 유전자를 발견 하는 능력.
더 최근에, L. interrogans transposon 돌연변이의 풀 infectivity 햄스터와 마우스 모델3에 대 한 상영 했다. 각 동물 수영장 최대 10 돌연변이에 전했다. 돌연변이의 infectivity 문화의 혈액과 신장에서 얻은 PCR에 의해 검색 된 경우 긍정적으로 득점 했다. 수영장에서 각 돌연변이 대 한 개별 PCR 반응 필요 하기 때문에 PCR 테스트 하는 것은 힘 드는. 문화에 각 돌연변이의 주파수는 계량 하지, 때문에 접근 했다 높은 감쇠 돌연변이의 id 쪽으로 치우친 다.
(테네시-Seq) 기법, 독성 유전자에 대 한 화면을 보다 효율적으로 하는 전략으로 시퀀싱 하는 transposon을 설명 합니다. 대규모 병렬 시퀀싱4,,56다음 transposon mutagenesis에 의해 돌연변이의 도서관의 창조 테네시-seq에 의하여 이루어져 있었다. 간단히, transposon 돌연변이 풀링된, 동물에 주사 고 나중 다른 장기 (출력 풀)에서 복구. 출력 풀에서 DNA 추출 및 금지 효소로 소화 또는 쥡니다에 의해 전단. 2 라운드 PCR transposon 삽입 사이트의 접속을 대상으로 수행 됩니다. 이 단계는 시퀀싱에 필요한 어댑터의 추가 수 있습니다. 결과 PCR 제품의 그들의 관계 되는 풍부, 돌연변이의 수영장의 초기 구성에 비해 함께 수영장의 각 돌연변이 transposon 삽입 사이트를 식별 하려면 높은 처리량 연속 분석 된다.
이 방법의 주요 장점은 많은 동물의 작은 수로 돌연변이 동시에 화면을 기능입니다. 테네시-Seq 새로운 Leptospira발견의 기회를 증가 하는 transposon 삽입 사이트의 사전 지식이 필요 하지 않습니다-특정 유전자 독성에 더 적은 시간 및 더 큰 효율성과 관련된. 설치류 모델에 치명적인 감염 감염 조직에 leptospiral 부담에서 상대적으로 높기 때문에 (일반적으로 104 조직의 108 박테리아/g)7,,89 또한 저수지 호스트 에서 10,11, 조직 문화, 생체 외에서 성장으로 인해 편견을 줄일 필요 없이 직접 분석 될 수 있다.
테네시-Seq 날짜를 설명 하는 대부분 세균성 병원 체 연구, insertional mutagenesis의 높은 주파수 통칭 데 모든 유전자4 내 여러 긴밀 한-간격 transposon 삽입 돌연변이 포함 하는 큰 풀과 감염을 허용 ,12,,1314. 또한 테네시-Seq는 mutagenesis 주파수는 훨씬 낮은6박테리아에 대 한 개발 되었습니다. Leptospira, 함께 transposon 돌연변이의 라이브러리 활용 설명 된 대로 Slamti 외15여 의해 transposon mobilizable 플라스 미드에 도입 하 여 생성할 수 있습니다. 그러나, L. interrogans 의 transposon mutagenesis의 주파수가 낮습니다. Transconjugant 주파수만 8.5 받는 당 10-8 x L. interrogans16 라이 긴장으로 세포와 될 것입니다 알려졌다 Himar1 transposon conjugative 플라스 미드에 도입 되었다, L. interrogans의 대부분 다른 종자와 마찬가지로 가난한 사람 여기에 설명 된 프로토콜 보렐 리아 burgdorferi는 transposon insertional mutagenesis의 주파수는 또한 낮은6에 대 한 개발에 기반 하는 부분 이다.
프로토콜17우리의 파일럿 실험에 대 한 낮은 함께 피로 transposon 삽입 돌연변이 고립 시키는에 다른 그룹의 성공 때문에 L. interrogans serovar Manilae 긴장 L495와 transposon mutagenesis 실시 LD50 (치명적인 복용량) 독성1. 우리 테네시-Seq에 의해 42 돌연변이 검사 하 고 여러 돌연변이 후보 후보 adenylate 있고 유전자에서 2 삽입을 포함 한 독성에 결함을 발견. 햄스터에 두 돌연변이의 개별 테스트 그들이 결핍 독성17에 확인.

<table><tbody><tr><td>스트렙토마이세스 kanamyceticus</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>K4000</td><td></td></tr><tr><td>2,6-디아미노피멜릭산</td>의 카나마이신 황산염 <td>Sigma-Aldrich</td><td>D1377</td><td></td></tr><tr><td>스펙티노마이신 디하이드로클로라이드 펜타하이드레이트</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S4014</td><td></td></tr><tr><td>Axio Lab A1 현미경(암시야 포함)</td><td>Zeiss</td><td>490950-001-000</td><td></td></tr><tr><td>DNeasy 혈액 및 조직 키트</td><td>Qiagen</td><td>69504/69506</td><td></td></tr><tr><td>MinElute PCR 정제</td><td>Qiagen</td><td>28004/28006</td><td></td></tr><tr><td>QIAquick PCR 정제 키트</td><td>Qiagen</td><td>28104/28106</td><td></td></tr><tr><td>모델 505 음파 분석기</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB-505</td><td></td></tr><tr><td>2.5" 컵 혼</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB-4625</td><td></td></tr><tr><td>비드 파열기 24</td><td>Omni International</td><td>19-010</td><td>Step 3.1.2.4</td></tr><tr><td>Terminal deoxynucleotidyl transferase</td><td>Promega</td><td>M828C</td><td></td></tr><tr><td>Master mix Phusion</td><td>Thermo Scientific</td><td>F531</td><td>게놈 라이브러리 준비, step 3.4.</td></tr><tr><td>DreamTaq Master Mix</td><td>Thermo Scientific</td><td>K9011/K9012</td><td>트랜스포존 삽입 부위 식별, 1.2단계.</td></tr><tr><td>dCTP</td><td>Thermo Scientific</td><td>R0151</td><td></td></tr><tr><td>ddCTP</td><td>Affymetrix/ USBProducts</td><td>77112</td><td></td></tr><tr><td>T100 Thermal cycler</td><td>BioRad</td><td>1861096</td><td></td></tr><tr><td>Qubit 2.0 형광측정기</td><td>Invitrogen</td><td>Q32866</td><td>step 3.6.</td></tr><tr><td>Qubit dsDNA HS 어세이 키트</td><td>Invitrogen</td><td>Q32851/Q32854</td><td>3.6단계.</td></tr><tr><td>Qubit 어세이 튜브</td><td>생명 기술</td><td>Q32856</td><td>단계 3.6.</td></tr><tr><td>PBS pH 7.2 (1X)</td><td>Gibco</td><td>20012-027 20012-050</td><td></td></tr><tr><td>일회용 메스 No10</td><td>Feather</td><td>2975#10</td><td></td></tr><tr><td>플라스틱 K2 EDTA 2ml 튜브</td><td>BD 진공 청소기</td><td>367841</td><td></td></tr> 주<tr><td>사기 U-100 26G x &frac12; &rdquo; 바늘</td><td>BD 진공 청소기</td><td>329652</td><td>IP 챌린지, 2.2.1 단계.</td></tr><tr><td>3mL Luer-Lok 팁 주사기</td><td>BD 진공</td> 청소기 <td>309657</td><td>심장 천자, 2.4.2단계.</td></tr><tr><td>25G X 5/8" 바늘</td><td>BD 진공 청소기</td><td>305901</td><td>심장 천자, 단계 2.4.2.</td></tr><tr><td>스토퍼가 있는 25mm 프릿 유리 베이스</td><td>EMD Millipore</td><td>XX1002502</td><td>여과 장치 시스템, 단계 1.1.7.</td></tr><tr><td>25mm 알루미늄 스프링 클램프</td><td>EMD Millipore XX1002503</td><td></td><td>여과 장치 시스템, 단계 1.1.7.</td></tr><tr><td>15ml borosilcate 유리 깔때기</td><td>EMD Millipore</td><td>XX1002514</td><td>여과 장치 시스템, 1.1.7 단계.</td></tr><tr><td>125ml 측암 삼각 플라스크</td><td>EMD Millipore XX1002505</td><td></td><td>여과 장치 시스템, 1.1.7단계.</td></tr><tr><td>아세테이트-셀룰로오스 필터 VVPP(기공 크기 0.1mm, 직경 25mm)</td><td>EMD 밀리포어</td><td>VVLP02500</td><td></td></tr></tbody></table>

높은 처리량 측정 적합성 leptospira interrogans transposon 삽입 돌연변이 중 황금 시리아 햄스터 감염의 병렬 시퀀싱

High-throughput Parallel Sequencing to Measure Fitness of Leptospira interrogans Transposon Insertion Mutants During Golden Syrian Hamster Infection

이 원고에서 우리는 transposon 시퀀싱 (Tn-Seq) 기술을 식별 하 고 계량 Leptospira interrogans 돌연변이 피트 니스 시리아 황금 햄스터의 감염 시 변경 설명 합니다. 테네시-Seq 임의의 transposon mutagenesis 높은 처리량 시퀀싱 기술의 힘 결합합니다. 동물 뒤에 수확 혈액과 조직의 몇 일 후 식별 하 고 각 기관 (출력 풀)에 있는 돌연변이의 수를 계량 transposon 돌연변이 (입력된 풀)의 수영장 도전입니다. 출력 풀 각 돌연변이의 vivo에서 적합성을 평가 하는 입력에 비교 됩니다. 이 방법은 돌연변이 동물의 제한 된 수에서의 대형 수영장의 수 있습니다. 사소한 수정이 프로토콜 렙의 어떤 동물 모델, 저수지 호스트 모델 쥐, 햄스터, 생체 외에서 연구 등 급성 감염 모델 수행할 수 있습니다. 테네시-Seq vivo에서 그리고 생체 외에서 피트 니스 결함 돌연변이 대 한 화면에 강력한 도구를 제공합니다.

그림 1에서 보듯이 transposon 돌연변이 L. interrogans 에 활용 하 여 도서관의 창조 여과 장치를 요구 한다. 우리는 각 짝짓기에서 100-200 transconjugants를 복구.
Transposon 삽입 사이트는 transposon의 끝을 대상으로 어느 정도 임의적인 PCR에 의해 생성 된 PCR 제품을 시퀀싱으로 각 돌연변이에 식별 되 고 인접 한 호스트 시퀀스15 (그림 2A). 어느 정도 임의적인 PCR의 결과의 예는 그림 2B에 표시 됩니다. 대부분의 경우에는 지배적인 amplicon 2 차 PCR 태그와 TnkN1...

여기를 식별 하 여 조직에서 transposon leptospiral 돌연변이 햄스터의 도전 후 계량 높은 처리량 시퀀싱 transposon mutagenesis 결합 기술을 설명 합니다. 이 프로토콜 생존 및 동물에 보급에 대 한 화면 돌연변이를 사용할 수 있습니다 하 고 생체 외에서 연구에도 적용 될 수 있습니다.

높은 처리량 측정 적합성 Leptospira interrogans Transposon 삽입 돌연변이 중 황금 시리아 햄스터 감염의 병렬 시퀀싱

In this manuscript, we describe a transposon sequencing (Tn-Seq) technique to identify and quantify Leptospira interrogans mutants altered in fitness ...

이 고처리량 트랜스포존 염기서열분석 기술의 전반적인 목표는 생체 내 및 체외 적합성 결함이 있는 트랜스포존 돌연변이를 식별하고 정량화하여 독성에 관여하는 렙토스피라 유전자를 식별하는 것입니다. 이 방법은 숙주 내 박테리아의 집락화, 전파 및 생존에 관여하는 유전자를 식별하는 것과 같은 렙토스피라 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 제한된 수의 동물로 많은 수의 돌연변이를 스크리닝할 수 있다는 것입니다.이 방법은 급성 렙토스피라증이 있는 햄스터 모델에서 렙토스피라 인터로간 돌연변이의 적합성을 조사하기 위해 고안되었지만, 만성 감염 모델, 체외 연구 및 기타 렙토스피라 균주를 통해서도 적용할 수 있습니다. 이 절차를 시연하는 사람은 Kritel Lourdault와 Karen Evangelista로, 둘 다 제 연구실의 박사후 연구원입니다. 먼저 여과 장치를 조립합니다.125mm 측면 암 삼각 플라스크에 베이스를 놓습니다. 베이스에 아세테이트 셀룰로오스 필터를 놓고 깔때기를 베이스에 고정합니다. 여과 장치를 진공 시스템에 연결합니다.다음으로, 5ml의 렙토스피라 배양액과 0.5ml의 E.coli 배양액을 깔때기에 추가합니다. 진공 청소기를 켜서 용액을 걸러냅니다. 그런 다음 박테리아 면이 위로 향하도록 필터를 DAP를 보충한 EMJH 플레이트에 놓습니다.밤새 섭씨 30도에서 접시를 배양합니다. 다음 날, EMJH 1ml가 들어 있는 15ml 튜브에 필터를 옮기고 튜브를 10초 동안 볼텍스하여 현탁액의 박테리아를 방출합니다. 그런 다음 현탁액을 5개의 EMJH 플레이트에 펴고 유리 구슬 또는 스프레더를 사용하여 카나마이신을 보충합니다.플레이트를 파라필름으로 감싸고 군체가 보일 때까지 섭씨 30도에서 거꾸로 배양합니다. 집락이 보이면 수집하여 카나마이신을 함유한 3ml의 EMJH로 개별적으로 옮깁니다. 그런 다음 섭씨 30도에서 150rpm 교반으로 튜브를 7-10일 동안 또는 밀리리터당 1억 개의 세포 밀도로 배양합니다.트랜스포존 삽입 부위를 식별하려면 중첩된 PCR을 수행합니다. 먼저 첫 번째 PCR을 위한 혼합물을 준비합니다. 그런 다음 배양물의 샘플을 PCR 혼합물에 추가합니다.첫 번째 반응을 실행한 후 두 번째 PCR을 위한 혼합물을 준비합니다. 반응 혼합물을 완료하기 위해 첫 번째 PCR에서 2마이크로리터의 PCR 생성물을 추가합니다. PCR을 실행한 후 아가로스 젤

high-throughput-parallel-sequencing-to-measure-fitness-leptospira

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

엔테로 박터 SP. YSU는 포도당 최소 염 배지에서 성장한다. 영양 요구 임의로 숙주 게놈 내로 그 자체를 삽입 transposome로 변환함으로써 생성된다. 돌연변이는 최소 배지에 복잡한 매체로부터 복제 도금에 의해 발견된다. 중단 된 유전자는 유전자 구조 및 시퀀싱에 의해 식별됩니다.

생성 엔테로 박터 SP. YSU 영양 요구는 트랜스포존 돌연변이 유발을 사용하여

Coxiella burnetii의는 인수 공통 질병 Q 열병에 대한 책임 의무적 세포 내 그람 음성 세균이다. 여기에서 우리는 Coxiella 형광 트랜스포존 돌연변이의 발생뿐만 아니라 자동 식별 및 결과 국제화, 복제 및 세포 독성 표현형의 분석 방법을 설명합니다.

세대와의 멀티 표현형 높은 콘텐츠 상영<em&gt; Coxiella burnetii의</em&gt; 트랜스포존 돌연변이

여기에 제시 된 대장균 또는 Shigella flexneri 세균성 활용을 사용 하 여 고밀도 transposon 삽입 라이브러리를 만들기 위한 간단한 방법이입니다. 이 의정서는 transposon의 임의의 게놈 삽입 하 여 독특한 돌연변이 박테리아에 수천의 수백의 컬렉션의 창조를 허용 한다.

밀도 Transposon 삽입 라이브러리를 사용 하 여 세균성 활용 Enterobacterial 종자와 같은 대장균 또는 Shigella flexneri 의 창조

클러스터의 pronuclear (PN) 주입은 정기적으로 짧은 구조 반복 (CRISPR) interspaced 그리고 CRISPR 관련 단백질-9 nuclease (CRISPR/Cas9) 시스템은 생산 하는 유전자 조작된 골든 시리아 햄스터는 매우 효율적인 방법. 여기, 우리는 유전자 녹아웃 햄스터 CRISPR/Cas9 시스템의 생산에 대 한 자세한 PN 주입 프로토콜을 설명합니다.

CRISPR/Cas9 복잡 한 Pronuclear를 주입 하 여 유전자 조작된 골든 시리아 햄스터의 생산

세균 적합성을 결정하기 위한 이 분자 기반 접근법은 디지털 PCR을 통해 정량화되는 독특한 게놈 DNA 바코드를 사용하여 미생물을 정확하고 정확하게 검출할 수 있도록 합니다. 프로토콜은 살모넬라 균주에 대한 경쟁 지수를 계산하는 것을 설명합니다. 그러나 이 기술은 유전적으로 가단성 유기체의 절대 정량화를 요구하는 프로토콜에 쉽게 적응할 수 있습니다.

살모넬라에서 피트니스의 높은 처리량 분석을 위한 디지털 PCR 기반 경쟁 지수

시퀀싱 (RH-seq)을 통한 상호 반심은 종 간의 특성 차이의 유전적 기초를 매핑하는 강력한 새로운 방법입니다. hemizygotes의 풀은 트랜스포종 돌연변이 발생에 의해 생성되고 그들의 체력은 높은 전반에 걸쳐 시퀀싱을 사용하여 경쟁적인 성장을 통해 추적됩니다. 결과 데이터의 분석은 특성의 근본적인 유전자를 찾아낸다.

게놈 전체 상호 Hemizygosity 분석을 통해 사카로 마이스 효모의 종 간의 열내성 차이의 유전 매핑

당사는 그람 음성 박테리아에 있는 포화 트랜스포슨 돌연변이 라이브러리를 생성하고 고처리량 시퀀싱을 위한 DNA 증폭기 라이브러리의 후속 준비를 생성하는 방법을 설명합니다. 예를 들어, 우리는 ESKAPE 병원체, 아신토박터 baumannii에초점을 맞추고 있지만,이 프로토콜은 그람 음성 유기체의 넓은 범위에 순종.

고처리량 시퀀싱을 위한 그람 음성 박테리아에 트랜스포슨 삽입 라이브러리 생성

여기서, 렙토스피라 종에서 특정 유전자 침묵에 대한 CRISPR 간섭(CRISPRi)의 적용이 기술된다. 렙포스피라 세포는 dCas9(촉매 "죽은" Cas9) 및 단일 가이드 RNA(sgRNA)를 발현하는 플라스미드와 의결합하여 변형되며, 원하는 게놈 표적에 염기 페어링을 담당합니다. 유전자 침묵의 유효성을 검사하는 방법이 제시된다.

렙토스피라의 병원성 종에서 유전자 침묵에 대한 CRISPR 간섭 (CRISPRi) 응용 프로그램

이것은 버크 홀더리아 유익한 공생에서 후보 곤충 식민지 요인을 식별하기위한 적응 된 방법입니다. 딱정벌레 숙주는 트랜스포슨 돌연변이 발생을 통해 생성된 무작위 돌연변이 라이브러리에 감염되며, 식민지 화 후 라이브러리 복잡성은 시험관내에서자란 대조군과 비교된다.

라그리아 빌로사 딱정벌레의 부르크홀더리아 글래디올리 공생에서 세균 식민지 요인을 해명하는 도구로 트랜스포슨 삽입 시퀀싱

여기에서는 생물 발광 이미징 및 PCR에 의해 L. infantum-Luc에 복강내(IP) 또는 치은내(IG)를 통해 감염된 골든 햄스터에 대한 종단 평가를 제시합니다. 햄스터는 감염 후 1일(1dpi), 감염 1주일(8dpi), 감염 후 3주(22dpi)에 평가를 받고 50번째 dpi와 감염 후 8개월에 안락사시켰다.

생체 내 루시페라아제를 발현하는 Axenic Amastigotes의 치은 접종에 의한 Leishmania infantum-infected Hamsters의 이미징

이 프로토콜은 결정-바이올렛 바이오매스 분석, 타임랩스 위상 차비 역학, 공초점 3D/매트릭스 매핑, SEM 초구조, 생체 내 햄스터 감염 모듈을 결합한 모듈형 BSL-2 워크플로우를 제공하여 렙토스피라 바이오필름의 기능적 역할을 배양, 정량, 특성화, 조사하여 실험실 간 돌연변이 및 반바이오필름 개입의 표준화된 평가를 가능하게 합니다.

렙토스피라 바이오필름의 정량적, 구조적, 기능적 분석을 위한 모듈식 워크플로우

학습하세요 고처리량 트랜스포존 시퀀싱 기법을 사용하여 Leptospira interrogans의 병원성 유전자를 식별하는 방법을 배우세요. 이 기술은 황금 시리아 햄스터 감염 모델에서 생체 내 적합성 결함이 있는 돌연변이체를 효율적으로 선별할 수 있습니다.

높은 처리량 측정 적합성 Leptospira interrogans Transposon 삽입 돌연변이 중 황금 시리아 햄스터 감염의 병렬 시퀀싱

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