Name: 반복된 측정에 대 한 수 있도록 전극 이식된 카 테 터와 깨어 있는 쥐에 Cystometric 및 외부 요도 괄약근 측정 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-01-30T13:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 7 s
Description: 배우세요 깨어 있는 쥐에서 반복적인 방광 기능 평가를 위한 수술적 전극 및 카테터 이식 기법을. 이 방법은 기능 비뇨기학 연구에서 질병이나 손상에 따른 방광 기능 변화를 정확하게 관찰할 수 있게 합니다.

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저자는 어떤 승인 필요가 없습니다.

여기에서 설명한 모든 절차는 동물 연구에 대 한 오스트리아 정부 윤리 위원회에 의해 승인 했다 (Bundesministerium 위한 Wissenschaft, Forschung und 엔터테인먼트, WF / V /3b) 연구소의 평가 대 한 협회 준수 했다 동물 사용에 대 한 동물 치료 지침입니다. 이 접근 방식을 사용 하는 쥐 여성, 12 주 된 루이스 쥐 했다. 프로토콜을 통해 불 임 악기를 사용 합니다.
1. 재료 준비
<ol><li>
카 테 터의 제조
	<ol>
<li>동물의 크기에 맞게 적절 한 길이 (20-25 cm)에 카 테 테 르 (폴 리 에틸렌 PE-50 튜브)를 잘라. 참고: 터널링 하 고 쉽게 처리에 대 한 몇 가지 여분의 길이 남겨 주세요.</li>
		<li>플레어 한쪽 둥근된 끝을 라이터. 최종 적절 한와 카 테 터의 무뚝뚝한 끝 확인 하십시오.</li>
		<li>봉기 끝 바로 아래 거짓말까지 2 m m 긴 실리콘 튜브 카 테 터를 놓습니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
전극의 제조
	<ol>
<li>20-25 cm는 (동물의 크기에 따라 적절 한 길이)의 소계 코팅 강철 와이어를 준비 합니다.</li>
		<li>실버 와이어 길이 2 cm를 준비 하 고 작은 루프 남아 때까지 끝을 트위스트. 한쪽 끝에 테 플 론 절연의 2mm 떨어져 스트립. 트위스트 실버 와이어 박탈된 강선에 결말 땜 납.</li>
		<li>기존의 매니큐어 코팅 영역에 적용 됩니다. 코팅 지구 4 m m 긴 폴 리 에틸렌 튜브를 준비 하 고 압축 집게에 열을 적용 하 여 끝 인감.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. 동물 준비
<ol><li>
마 취
	<ol>
<li>칵테일 적절 한 마 취를 사용 하 여 마 취를 일반에 대 한 기관에 의해 승인.</li>
		<li>Medetomidine (0.15 mg/kg)와 midazolam (0.08 mg/kg), 펜타닐 (0.01 mg/kg), 마 취 칵테일을 준비 하 고 27 게이지 바늘 1 mL 주사기에 의해 피하 주사.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
수술 준비
	<ol>
<li>전기 면도기, 성 기 영역과 견의 수준에서 다시 지역을 포함 하 여 함께 복 부를 면도.</li>
		<li>복 부를 소독 하 고 70% 에탄올 첫 번째 및 다음 3 번갈아 스크럽 povidone-요오드 솔루션 영역을 목.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. 방광 카 테 테 르 주입
<ol><li>제 3의 그리고 제 4 젖꼭지 (길이 약 2 ~ 2.5 c m)의 수준에서 낮은 중순 라인 개복 술은 피부와 복 부 근육에 대 한 수술 시저에 대 한 메스를 사용 하 여 수행 합니다.</li>
	<li>Cranio 꼬리 방향으로 복 벽을 안내 하 여 방광을 노출 하 고 다시 위치 피하기 위해 방광 뒤에 집게의 뒷면을 배치 하 여이 위치에 그것을 수정.</li>
	<li>테이퍼 팁 바늘으로 6-0 비 흡수 monofilament 봉합 사를 사용 하 여 방광 돔 주위 지갑 문자열 봉합을 놓습니다.</li>
	<li>내 지갑-문자열, 메스 팁 또는 18 G 바늘, 방광 카 테 터를 삽입 하 여 방광 돔 incise (프로토콜 단계 1 참조).</li>
	<li>멸 균 생리 0.9% 염화 나트륨 해결책 prefilled 카 테 터를 삽입 하 고 신중 하 게 테의 봉기 오프닝 방광 돔 바로 아래 위치까지 방광 카 테 터를 제거.</li>
	<li>지갑-문자열 봉합 테 주위를 확보 하 고 추가 고정을 위한 카 테 테 르 몸 주위 중지 봉합.</li>
	<li>천천히 무 균 생리 0.9% 염화 나트륨 해결책으로 카 테 터를 통해 방광을 작성 하 여 방광 돔 통해 누설에 대 한 확인 합니다.</li>
</ol>4. 요도 괄약근 전극 이식
<ol><li>3 개의 전극 이식에 대 한 준비 (프로토콜 단계 1 참조).</li>
	<li>하나의 전극 미래 null 전극의 추가 확인을 위해 색된 영구 펠트 펜으로 표시 합니다. 전극 70% 에탄올으로 소독. 참고:는 카 테 터는 열 및 화학 살 균 절차에 적합 합니다. 대신 감기 24 h에 대 한 전극 소독.</li>
	<li>복 부 절 개 수술가 위 치 골까지 확장 하지만 음모 관절을 잘라 하지 마십시오.</li>
	<li>요도 식별 하 고 무딘 주머니는 요도의 양쪽에 미세 집게를 사용 하 여 만들지만 혈관 또는 신경의 외상을 방지.</li>
	<li>이 창에서 요도 가까이 적절 한 지방 주머니를 식별 합니다.</li>
	<li>6-0 비 흡수 monofilament 봉합 사를 사용 하 여 적절 한 지방 주머니에 양측 전극 수정. 참고: 전극의 최종 위치는 요도의 중간 영역에서 양자 해야 합니다.</li>
	<li>묶어 6-0 비 흡수 monofilament 봉합 함께 2 개의 전극.</li>
	<li>요도의 거리 내에서 복 벽 근육을 표시 null 전극 봉합 모든 3 개의 전극 하나의 봉합 사를 함께 묶어.</li>
</ol>5. 터널링
<ol><li>터널링에 대 한 견 사이 작은 피부 절 개를 확인 합니다.</li>
	<li>목에 전극 와이어를 터널 정확한 위치에 대 한 최종 점검을 할 고 터널링 후 전극의 위치를 확인 합니다.</li>
	<li>터널 방광 카 테 터 견 수준-방광 왜곡을 피하기 위해 카 테 터를 터널링 하는 동안 방광에 주의. 이 위해 방광의 왜곡을 피하기 위해 방광 돔 들어가면서 테를 잡으십시오.</li>
	<li>4-0 polyfilament 흡수 봉합으로 연속 또는 중단 바늘으로 복 부 근육을 닫습니다. 중단된 매트리스 봉합 하 여 피부 절 개를 닫습니다.</li>
	<li>전극 와이어 및 카 테 터의 최대한 팽창 하 그것의 전체 길이에 동물을 스트레칭.</li>
	<li>어깨 근육 봉합 침 몰 하 여 카 테 터 및 전극 와이어를 해결.</li>
	<li>4-0 봉합으로 단일 스티치에 의해 피부를 닫습니다.</li>
</ol>6. 마구 피팅
<ol><li>동물의 머리 위로 마구 당겨 동물을 마구 하 고 두 개의 실리콘 스트립 사이 끝 위치를 앞 발을 당겨 있습니다. 배포자와 수술 전에 동물의 무게에 의해 마구 크기를 확인 합니다.</li>
	<li>전극 와이어의 크기를 조정 하는 드릴으로 마구 및 주문 품 구멍을 통해 전극의 중앙 구멍을 방광 카 테 터 터널.</li>
	<li>실리콘 스트립을 당겨 하네스를 조정 합니다. 그것은 너무 느슨한 하네스를 조정 하지만 일부 공간 쥐의 이동 능력을 유지 하기 위해 유지.</li>
	<li>케이블 스트랩 실리콘 스트립을 해결 하기 위해 사용 합니다.</li>
	<li>3 cm 위의 방광 카 테 터의 길이 잘라 하네스, 23-G 마 개에 연결 하 고 마지막으로 프로그램을 수정.</li>
</ol>7. 전극 커넥터의 제조
<ol><li>3 개의 작은 열 수축 튜브 (null 전극에 대 한 다른 색)을 준비 합니다. 적절 한 큰 크기에서 두 개의 추가 열 수축 튜브를 준비 합니다.</li>
	<li>나중에 연결할 여성 플러그 없이 너무 느슨하거나 너무 짧은 수 최적의 길이로 전극 와이어의 길이 단축. 3 개의 와이어 (약 2 m m), 테 플 론 절연을 벗기십시오 고 문자열로 강철 와이어 트위스트.</li>
	<li>모든 와이어에 큰 열 수축 튜브를 놓고 개별적으로 모든 3 개의 와이어에 대 한 작은 튜브 놓고 null 전극에 대 한 컬러 튜브를 사용 합니다.</li>
	<li>남성 3-연결-플러그 전극 땜 납. 중간에 null 전극 배치 하 고 3 개의 작은 개별 튜브 위의 납땜 영역 축소.</li>
	<li>남성 플러그 테두리를 개별 튜브 엔딩의 끝에 큰 튜브와 마지막 큰 튜브의 첫 번째를 축소 합니다.</li>
	<li>암 커넥터 하네스, 그리고 수정에 더 안전에 대 한 테이프의 조각을 고정 하 남성 플러그를 연결 합니다.</li>
</ol>8. 수술 후 관리
<ol><li>외과 영역을 청소 하 고 povidone-요오드 소독.</li>
	<li>생리대까지 깨어에 동물을 놓고 물 대체, 동안에 그리고 수술 후 현지 동물 보호 지침에 따라 0.9% 염화 나트륨 해결책을 제공 합니다.</li>
	<li>진통제를 관리 (meloxicam 1 mg/kg)과 항생제 (sulfadoxinum 200 mg, trimethoprimum 40 mg, 15 mg/kg) 결합 된 주입 솔루션으로 피하. 매일 두 번 (아침과 저녁), 진통제를 주고 5 연속적인 일 동안 항생제, 하루에 한 번 줄.</li>
	<li>주당 2 ~ 3 주사에 모든 후속 기간 동안 동일한 복용량에 항생제를 계속.</li>
	<li>마구의 적절 한 피팅을 위해 매일 확인 하 고 특히 목의 수술 필드 검사 수행. 면 그것은 너무 꽉 실리콘 스트립에서 신중 하 게 당겨 하네스를 조정 합니다.</li>
	<li>봉쇄를 피하기 위해 주에 한 번씩 정기적으로 테를 플러시.</li>
</ol>9입니다. Cystometric 측정을 위한 준비
<ol><li>수술 후 6 일 후 첫 번째 cystometric 측정을 수행 합니다. 참고: 이전 측정 카 테 테 르 주입 때문에 진통 약물 및/또는 urothelial 자극에 의해 좌우 될 수 있다.</li>
	<li>메인 스위치, 컴퓨터, 그리고 EMG 앰프를 켭니다.</li>
	<li>주사기 펌프를 실내 온도 따뜻하게 0.9% 염화 나트륨을 채우십시오. 3 방향 커넥터 하나 다른 펌프에서 시작 내림차순 방식으로 열고 튜브를 플러시. 참고: 확인 신중 하 게 나머지 공기 거품으로 거품 cystometric 측정을 변경할 것입니다.</li>
</ol>10입니다. 교정
<ol><li>프로그램 uroflowmeter 소프트웨어를 시작 하 고 교정에가 서.</li>
	<li>펌프와 동물에 대 한 3 방향 커넥터를 닫습니다.</li>
	<li>연결 된 압력 계 밸브 열고 프로그램에서 0을 누릅니다.</li>
	<li>100 mmHg로 압력 계에 압력을 조정 하 고 프로그램에서 100 mmHg 버튼을 누릅니다. 보도 교정 조정을 하기 확인 합니다. 창이 자동으로 닫힙니다.</li>
	<li>밸브는 압력 계를 닫고 측정을 위한 준비를 동물에 펌프에서 3 커넥터를 엽니다.</li>
</ol>11. 동물 데이터베이스 (DB 동물)
<ol><li>동물을 등록 하 게 동물 간결한 id입니다.</li>
	<li>스키, 치료의 시작, 카 테 테 르 주입, 실험적인 그룹, 및 동물의 생년월일의 날짜의 날짜와 같은 추가 데이터를 입력 합니다.</li>
	<li>데이터를 마지막으로 로그를 "기록 저장"을 눌러 하 고 파일을 저장 합니다.</li>
</ol>12. 녹음 전에 측정 설정
<ol><li>시작 버튼을 눌러 소프트웨어 프로그램을 시작 합니다.</li>
	<li>동물을 선택 하 고 자체 규모와 제로 압력을 누릅니다. 참고: 주의 restrainer에 동물을 배치 하는 동안 케이블 붙어 그런 EMG 케이블의 와이어의 제거 발생할 수로.</li>
</ol>13. 동물 준비
<ol><li>카 테 터 플러그를 제거 하 고 마구에서 EMG 플러그를 분리 하십시오.</li>
	<li>restrainer에 쥐를 넣어. restrainer 닫고 마구 클램프 잠금.</li>
	<li>카 테 터와 EMG는 restrainer에서 플러그를 얻을.</li>
	<li>고양이 단위로 restrainer 장소입니다. 튜브를 통해 꼬리를 넣고 움직임을 피하기 위해 테이프와 튜브를 수정.</li>
	<li>녹음 여성 EMG 커넥터 남성 EMG 플러그를 연결 합니다.</li>
	<li>0 압력을 한 번 더 누르고 작성/기록 관 카 테 터를 연결할. 소프트웨어에서 압력을 확인 하십시오. 참고: 압력 긍정적인, 5-10 cm H2O 기준선에 주위 해야 합니다. 압력 부정적인 경우에, 카 테 터는 정 맥에서 분리, 제로 압력 누르고 카 테 터를 다시 연결.</li>
</ol>14입니다. 녹음
<ol><li>카 테 터와 EMG 케이블 연결 실행된 펌프와 녹음을 누릅니다.</li>
	<li>충전 속도 μ/분에서 실험 요구에 적응.</li>
	<li>참고 시간 녹음 시작 및 로그도 서에 실내 온도.</li>
	<li>Cystometric 녹음을 중지 하려면 실행을 누르면 펌프 펌프를 중지 하 고 다시 한 번 녹음을 누릅니다. 참고: 펌프 해제 되며 펌프에 녹색 표시등이 꺼져.</li>
	<li>테 고 23 G 마 개 플러그를 사용 하 여 카 테 터 끝을 닫습니다. EMG 케이블을 분리 합니다.</li>
	<li>restrainer의 전면 열고는 restrainer에서 쥐를 안내 합니다. 참고: 신중 하 게, 쥐를 처리 하 고 전선 케이블의 모든 잠금을 모니터링 합니다.</li>
	<li>테 하네스 다시 연결 합니다. 하네스, EMG 플러그를 다시 연결 하 고 플러그 주위에 테이프의 조각을 넣어. 참고: 경우 동물 병 적인 낮은 요로 상태, 방광의 overdistention를 방지 하려면 수동으로 끝에 방광을 표현 한다.</li>
	<li>동물의 집으로 다시 놔입니다.</li>
	<li>눌러 종료 하 여 프로그램을 닫습니다.</li>
	<li>청소 restrainer와 비 커.</li>
	<li>펌프와 동물 콘센트에 3 방향 커넥터를 닫습니다.</li>
	<li>컴퓨터, EMG 단위와 메인 스위치를 통해 시스템을 종료 합니다. 참고: 데이터 측정된 쥐 ID의 하위 폴더 파일 "로그 데이터" 별도 폴더에 저장 됩니다. 단일 녹음 단일 쥐 ID 폴더에 날짜별으로 정렬 됩니다.</li>
</ol>

<ol><li>Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+for+urodynamic+investigation%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourol+Urodyn%22%5BJournal%5D)">Rodent models for urodynamic investigation.</a> Neurourol Urodyn. 30, 636-646 (2011).</li>
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</ol>

저자는 공개 없다.

이 프로토콜 영구 카 테 터와 요도 괄약근 전극 이식 기술 깨어, 가볍게 절제 된 쥐 오 줌 방광의 동시 분석 모두를 포함 하 여 기록 하는 cystometric의 수술 절차에 설명 하 고 외부 요도 괄약근입니다.
수술 하는 동안 중요 한 단계는 주의 방광 카 테 터, 누설 및 광범위 한 조작을 피하 이식 합니다. 또한, 요도 외부 괄약근에 양측 전극의 정확한 주입은 외부 요도 괄약근의 사운드 측정에 대 한 중요 합니다. 이식 후 수술 분야의 가까운 검사는 또한 동물의 건강 유지에 필수적 이다. 후속 동안 항생제 범위 테 라인으로 요로 감염의 발생에 따라 감염 예방에 도움이 됩니다.
Cystometric 측정, 동안 처리 쥐 조용한 하 고 이전 처리 되지 않은 쥐 보다 더 편안 하 게 될 것입니다. 따라서, cystometric 기록의 결과에 달라질 수 있습니다. 또한,는 restrainer 쥐를 더 어두운 앞 면적 confini...

오 줌 저장 및 무효화 기능 및 역 기능 분석, 대부분 연구 설치류 모델을 사용 했습니다. 반사의 순차적 활성화를 통해 방 생산 됩니다. 이러한 반사의 효율적인 배설1필수적 이다. Cystometric 기록 하는 기술을 신경 제어1방광 기능을 분석 하기 위한 유용한 도구를 제공 합니다.
쥐에 있는 대부분의 전통적인 cystometries에서 마 취, 주로 우 레 탄은2, 단일, 최종 분석으로 행해진다 고 방광에 전적으로 초점. 그러나, neurogenic 더 낮은 요로 기능 장애 (NLUTD) 같은 일부 pathologies에 오 줌 방광 뿐만 아니라 외부 요도 괄약근, 방광 출구는 역 기능3,4. 이것은 NLUTD 후속, 어려운 경우에 단일 cystometric 측정에서 방광 검사 합니다. 인 간에 게 비교는 신뢰할 수 있는 결과를 얻으려면, 방광 외부 요도 괄약근 기능 및 그것의 상호 작용2정확 하 게 측정 하기 위해 필수적 이다. 또한, 그것은 마 취는 방광 기능2,,56변경 가능성이 깨어 쥐에 기능 분석을 수행 하는 중요 한. 깨어 있는 동물에 기록 하는 좋은 cystometric 방광 기능과 오작동7의 식별을 위한 기초 이다.
작은 동물 cystometry 역 사용 (예를 들어, 고양이 cystometry 역 (CCS)) 작은 깨어 동물8cystometric 분석을 수행 하는 단위입니다. 영구 방광 카 테 터 및 이식된 외부 요도 괄약근 전극, 긴 시간 기간2동안 반복 측정을 수행할 수 있습니다. CCS에 대 한 유용한 도구를 제공 하는 따라서, neurogenic 비 및 NLUTD 평가 설치류 모델는 pathomechanisms 짧은 또는 중간 속 행 동안 변경할 수 있습니다. 또한,이 메서드는 restrainer 깨어 있는 쥐가에서 방광 측정을 사용 하 여 인 위 감소 cystometric 분석을 포함 합니다.
이 문서에서 우리 영구적으로 방광 카 테 터와 외부 요도 괄약근 전극, 깨어 있는 쥐에 cystometric 측정 함께 임 플 란 트 수술 접근 방식을 설명 합니다.

<table><tbody><tr><td>폴리에틸렌 튜브 PE 50</td><td>Becton Dickinson</td><td>427411</td><td>카테터</td></tr><tr><td>Prolene 6-0 (BV-1, 9.3 mm, 3/8c)</td> <td>Ethicon</td><td>EH7403H</td><td>봉합사</td></tr><tr><td>테프론 코팅 강선</td><td>Cooner 와이어</td><td>AS631</td><td>전극 재료</td></tr><tr><td>은선 0.250 mm</td><td>세계 정밀 기기</td><td>AGW1030</td><td>전극 재료</td></tr><tr><td>Rotilabo - PVC 튜브</td><td>칼 Roth</td><td>97241</td><td>하네</td></tr>스 <tr><td>Vicryl rapide 4-0 (P-3, 13 mm, 3/8c)</td><td>Ethicon</td><td>V4940H</td><td>봉합사</td></tr><tr><td>퀵 커넥트 단일 하네스</td><td>SAI 주입 기술</td><td>QCH-23CW</td><td>하네</td></tr>스 <tr><td>수축 튜브</td><td>ChiliTec</td><td>17894</td><td>전극 납땜</td></tr><tr><td>납땜 와이어 Pb60 Sn40</td><td>Stannol</td><td>LD0029</td><td>전극 납땜</td></tr><tr><td>플럭싱 agent 157</td><td>Castolin Eutectin</td><td>157 0150</td><td>전극 납땜</td></tr><tr><td>Conn Unshrouded Header HDR 3 POS, 2.54mm 솔더 ST Thru-Hole Box</td><td>Preci-dip</td><td>801-87-050-10-001101</td><td>전극 납땜</td></tr><tr><td>Conn 소켓 스트립 SKT 50 POS 2.54mm, 솔더 ST Thru-Hole Box</td><td>Preci-dip</td><td>890-18-003-10-001101</td><td>전극 납땜</td></tr><tr><td>쥐 방광 분석 패키지(펌프, 스케일, 압력 변환기, 방광 분석용 하드웨어 포함)</td><td>Catamount Research and Development Inc.</td><td>CAT-CYT-R</td><td></td></tr><tr><td>차동 증폭기 액티브 헤드스테이지</td><td>AD 기기</td><td>DP-311</td><td>EMG 증폭기</td></tr><tr><td>Restrainer 쥐용 중간 크기 200-300 g</td><td>emka Technologies</td><td>HLD-RM</td><td></td></tr><tr><td>Uro Dyn Software</td><td>Z&uuml; 대학</td><td></td><td>MTA 기반</td></tr><tr><td>암컷 쥐 (스트레인 루이스) 12 주 령</td><td>찰스 리버, 슐츠펠트, 독일</td><td></td><td>동물</td></tr></tbody></table>

반복된 측정에 대 한 수 있도록 전극 이식된 카 테 터와 깨어 있는 쥐에 cystometric 및 외부 요도 괄약근 측정

Cystometric and External Urethral Sphincter Measurements in Awake Rats with Implanted Catheter and Electrodes Allowing for Repeated Measurements

더 낮은 요로 함수는 주로 설치류에 cystometric 방광 기능 분석을 통해 평가 됩니다. 기존의 cystometries는 일반적으로 우 레 탄 마 취 터미널 분석으로 수행 됩니다. 그것은 잘 알려진 마 취 약물 방광 기능을 좌우할 수 있다입니다. 따라서,이 기법의 목표 가볍게 절제 된 깨어 쥐에서 방광 및 외부 요도 괄약근의 cystometric 측정을 수행 것입니다. 이 위해 방광 카 테 테 르 방광 돔에 이식 합니다. 그 후, 두 개의 전극 외부 요도 괄약근에 양측 이식 되 고 접지 전극 응답 골격 근육을 봉합. 방광 카 테 터와 3 개의 전극은 마침내 목 지역으로 피하 터널링 고 마구에 부착. 이 기술은 낮은 요로 더 낮은 요로 기능을 평가 하기 위해 같은 동물에 여러 개의 시간 지점에서 측정할 수 있습니다. 이 기술의 주요 응용 프로그램 동시 오 줌 방광 및 외부 요도 괄약근 기능 깨어 건강 한 쥐에는 질병 또는 상해의 유도 후의 후속 이다. 또한, 이후 더 낮은 요로 모니터링 평가 질병/부상 및 치료 효능을 모니터링 하는 동안 수행할 수 있습니다.

깨어 cystometric 측정의 과정을 보여주는 회로도 그림 1 에서 제시 하 고 방광 카 테 테 르 주입에 대 한 내부 해부학 그림 2에 표시 됩니다. 수술 수술 후 진통 약 2 헤 고 항생제, 프로토콜에 설명 된 대로 커버 통증과 감염 수술 후 5 일 이상. 통증의 흔적 그 후 발견 되었다. 복 부, 복 부 봉합, 그리고 목 봉합의 두 번 매일 주의 검사는 동물의 건강을 유지 하는 데 필요한. 마구 제어 (위치 및 견고) 일단 매일 첫 번째 5 일 및 나중에 정기적으로 실시 되어야 한다. 복 부 봉합 10일 수술 날에 제거할 수 있습니다.
우리는 염증 방지 하려면 수술 후 처음 10 일 동안 소프트, 비 우 디 침구를 사용 합니다. ...

이 프로토콜 먼저 외부 요도 괄약근 전극, 그리고 두 번째, 오 줌 방광 및 요도 외부의 함수의 측정 함께 방광 카 테 터의 영구 이식의 수술 절차에 설명 이식된 깨어 동물에 괄약근입니다.

반복된 측정에 대 한 수 있도록 전극 이식된 카 테 터와 깨어 있는 쥐에 Cystometric 및 외부 요도 괄약근 측정

Lower urinary tract function is mainly assessed by means of cystometric bladder function analysis in rodents. Conventional cystometries are usually ...

이 외과적 개입의 전반적인 목표는 방광량 측정 중에 의식이 있는 쥐에서 방광의 기능을 관찰하는 것입니다. 이 방법은 진행성 질환이나 부상으로 인한 방광 기능의 변화와 같은 기능적 비뇨기과 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 경고 쥐에서 반복적인 방광 측정 기록을 허용한다는 것입니다.수술을 위해 동물을 마취한 후 견갑골 수준에서 생식기 부위와 등 부위를 포함한 복부를 면도합니다. 그런 다음 복부와 목 부위, 앞발과 뒷발을 70% 에탄올과 포비돈 요오드 용액을 사용하여 소독합니다. 메스를 사용하여 세 번째와 네 번째 젖꼭지 수준에서 낮은 정중선 개복술로 수술을 시작합니다.절개 부위를 2-2.5cm 길이로 만든 다음 수술 용 가위를 사용하여 복부 근육을 자릅니다. 다음으로, 두개꼬리 방향으로 복벽을 따라 절개하여 방광을 노출시킵니다. 그런 다음 집게 뒷면을 사용하여 방광을 고정합니다.이제 테이퍼 팁 바늘이 있는 6-0 비흡수성 모노필라멘트 봉합사를 사용하여 방광 돔 주위에 지갑 끈 봉합사를 놓습니다. 봉합사를 삽입한 후 지갑 끈 안의 방광 돔에 카테터를 위한 구멍을 만듭니다. 메스나 18게이지 바늘을 사용하십시오.다음으로, 멸균 생리학적 염화나트륨 용액이 미리 로드된 카테터를 삽입합니다. 방광 카테터의 돌출된 구멍이 방광 돔 바로 아래에 올 때까지 방광 카테터를 조심스럽게 집어넣습니다. 이제 카테터 주위에 지갑 끈 봉합사를 고정하고 카테터 본체 주위에 봉합사를 중지하여 카테터를 더욱 단단히 고정합니다.진행하기 전에 카테터를 통해 방광에 용액을 천천히 채워 방광 돔 주변의 누출을 확인하십시오. 누출을 막으려면 카테터 주위에 다른 정지 봉합사를 추가하십시오. 먼저 이식을 위해 세 개의 전극을 준비합니다.하나의 전극에 영구 잉크를 표시하여 null 전극으로 식별합니다. 그런 다음 세 가지 모두를 70% 에탄올로 소독합니다. 전극을 이식하려면 먼저 수술용 가위를 사용하여 공중 교향을 절단하지 않고 복부 절개 부위를 치골까지 확장하십시오.다음으로, 요도를 확인하고 양쪽에 뭉툭한 주머니를 만듭니다. 주머니를 만드는 동안 혈관이나 신경에 외상을 입히지 마십시오. 그런 다음 요도를 닫을 수 있는 적절한 지방 주머니를 식별합니다.이제 6-0 비흡수성 모노필라멘트 봉합사를 사용하여 두 개의 전극을 지방 파우치에 양측으로 고정합니다. 그런 다음 두 전극을 서로 봉합합니다. 전극은 요도의 중간 영역에서 양측이어야 합니다.다음으로, 표시된 null 전극을 요도의 복벽 근육에 봉합합니다. 그런 다음 단일 봉합사로 세 개의 전극을 모두 함께 고정합니다. 터널링 절차를 시작하려면 견갑골 사이를 작게 절개한 다음 복부에서 목까지 장치를 터널링합니다.다음으로 전극선을 목에 터널을 뚫습니다. 전극과 관련된 위치를 확인하십시오. 다음으로, 방광 카테터를 견갑골 높이까지 터널을 뚫습니다.그렇게 하는 동안 방광이 뒤틀리지 않도록 방광 돔에 들어가기 직전에 카테터를 잡도록 주의하십시오. 다음으로, 4-0 폴리필라멘트 흡수성 봉합사로 연속 또는 중단 스티치를 사용하여 복부 근육을 닫습니다. 그런 다음 중단된 매트리스 봉합사를 사용하여 절개 부위를 닫습니다.이제 동물을 전체 길이로 늘려 전선의 길이를 알아냅니다. 그런 다음 어깨 근육에 가라앉은 봉합사를 사용하여 카테터와 전극 와이어를 고정합니다. 4-0 봉합사의 단일 스티치를 사용하여 피부를 닫아 계속합니다.다음으로, 쥐의 머리 위로 하네스를 당긴 다음 실리콘 스트립 사이에 네 개의 팔다리를 완전히 당깁니다. 이제 방광 카테터를 하네스의 중앙 선체로 터널을 뚫습니다. 그런 다음 하네스에 미리 뚫린 맞춤형 구멍을 통해 와이어를 통과시킵니다.와이어가 제자리에 있는 상태에서 실리콘 스트립을 당겨 하네스를 조정합니다. 쥐의 움직임을 방해하지 않도록 하네스를 최대한 조이십시오. 조정이 완료되면 케이블 스트랩을 사용하여 스트립을 고정합니다.이제 방광 카테터의 길이를 줄여 하네스 위로 3cm 연장합니다. 그런 다음 카테터를 23게이지 스토퍼에 연결하고 하네스에 고정합니다. 전극선을 하네스에 단단히 부착하는 것이 중요합니다.먼저 독특한 색상의 작은 열수축 튜브를 세 개 짧게 자릅니다. 그런 다음 세 개의 와이어를 모두 고정하기 위해 약간 더 큰 두 개의 열수축 튜브를 만듭니다. 이제 전극선의 길이를 조정하여 너무 느슨하거나 너무 짧지 않게 꽂을 수 있습니다.그런 다음 각 와이어에서 2mm의 절연체를 벗겨내고 노출된 나사산을 꼬습니다. 다음으로, 세 개의 와이어 모두에 두 개의 큰 열 수축 튜브를 공급한 다음 null 전극을 식별하기 위해 고유한 색상을 사용하여 각 와이어 위에 하나의 작은 열 수축 튜브를 공급합니다. 이제 전극을 수 3 연결 플러그에 납땜하십시오.null 전극을 중간에 놓고 납땜 지점 위의 세 개의 작은 개별 튜브를 축소합니다. 더 큰 튜브 중 하나를 다른 열 수축 위로 접고 다른 하나를 수 플러그의 경계에서 접습니다. 그런 다음 수 플러그를 하네스에 연결하고 발수 테이프로 연결을 고정합니다.수술 성공률은 약 80%였으며 실패한 절차는 주로 플러그에서 전극선이 분리되었기 때문입니다. 수술 후 7일이 지나면 쥐는 일반적으로 분석할 준비가 되었습니다. 기록된 방광량 측정에는 일반적으로 측정당 3번의 연속 배결 주기가 포함되었으며, 이는 쥐의 불안 및 취급 상태에 따라 20분에서 40분 정도 걸렸습니다.그런 다음 주요 판독 매개변수에는 기준선, 임계값, 평균 및 최대 배뇨근 압력 판독값, 배뇨량, 유량 및 시간, 방광의 준수 여부, 외부 요도 괄약근 EMG 활성이 포함됩니다. 이 비디오를 시청한 후에는 반복적인 깨어 방광 측정 기록을 위해 영구 방광 카테터와 외부 요도 괄약근 전극을 이식하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다. 일단 숙달되면 이식이 제대로 수행되면 90분 이내에 완료될 수 있습니다.개발 후, 이 기술은 비뇨기과 분야의 연구자들이 경보를 발병하는 쥐의 기능적 비뇨기과 측면을 탐구할 수 있는 길을 열었습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

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