RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
ko_KR
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/56829-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
이 프로토콜의 목표는 다양 한 연구 질문을 해결 하기 위해 사용 될 수 있는 인공 와우 이식의 동물 모델을 제공 하는입니다. 잠재적인 응용 프로그램 제약 개입 또는 청각 임계값 또는 전극 임피던스에 유익한 효과 대 한 전기 자극의 평가 포함합니다.
이 수술 절차의 전반적인 목표는 기니피그를 사용하여 인공와우를 이식하는 신뢰할 수 있고 다재다능한 동물 모델을 제공하는 것입니다. 이 방법은 인공와우 이식 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 예를 들어, 약학적 중재 또는 새로 개발된 전극이 잔존 청력 보존 또는 전극 임피던스에 유익한 효과를 제공하는지 여부. 기니피그의 가장 큰 장점은 상대적으로 큰 내이에 빠르게 접근할 수 있어 안전하고 신뢰할 수 있으며 다재다능한 인공와우 이식 동물 모델을 만들 수 있다는 것입니다.
이 절차를 위해 수술 현미경, 드릴, 가열판 및 맥박 산소 측정기를 실험자 주위에 배치하여 수술 중에 쉽게 다룰 수 있도록 하는 것이 중요합니다. 가열 패드를 섭씨 38도로 설정하십시오. 멸균 기술을 따르십시오.
모자, 마스크, 장갑을 착용하십시오. 그런 다음 인공와우 이식을 위해 멸균된 수술 도구를 배치합니다. 다음으로, 한쪽 끝에서 3mm의 절연체를 조심스럽게 제거하고 다른 쪽 끝에서 5mm의 절연체를 제거하여 3.5cm 길이의 테프론 절연 금선을 준비합니다.
다음으로 2.5cm 길이의 두 번째 금선을 자르고 양쪽 끝에서 5mm의 단열재를 제거합니다. 그런 다음 두 전선을 알코올로 소독하십시오. 다음으로, 텍스트 프로토콜의 지시에 따라 마취 칵테일을 사용하여 기니피그를 마취합니다.
그런 다음 머리를 면도하고 가열판에 엎드려 놓습니다. 다음으로 작은 후두경으로 기니피그 입을 조심스럽게 열고 흡인을 사용하여 구강에서 음식물 찌꺼기를 모두 제거합니다. 그런 다음 저항이 느껴질 때까지 위까지 천천히 밀어 넣어 위관을 식도에 조심스럽게 삽입합니다.
산소 포화도 수준을 확인하여 튜브가 기관에 있지 않은지 확인하십시오. 다음으로, 생리식염수, 5%포도당, 엔로플록사신의 혼합물을 23게이지 바늘을 사용하여 목의 지방 패드에 주입합니다. 포비돈-요오드와 70% 에탄올을 번갈아 가며 스크럽하여 수술 부위를 준비한 다음 동물을 드레이프합니다.
진통제 사용의 경우 리도카인은 필요에 따라 동물에게 마취제를 다시 투여합니다. 메스를 사용하여 귓바퀴 뒤쪽 3-5mm의 2-3cm 피부 절개로 수술을 시작합니다. 출혈을 치료하려면 양극성 소작기를 사용하십시오.
그런 다음 청각 수포의 돌출부를 촉진하고 15번 수술용 메스 또는 수술용 가위를 사용하여 후이륜 부위의 근육을 조심스럽게 자릅니다. 수포에서 근육을 절개하려면 근육을 부드럽게 옆으로 밀고 견인기를 사용하여 절개 부위의 전체 길이를 노출시켜 수포에 방해받지 않고 접근할 수 있도록 합니다. 이제 숫자 15 메스의 끝을 사용하여 수포에 구멍을 뚫습니다.
뼈에 구멍이 뚫렸을 때, 필요에 따라 구멍을 확대하여 중이 구조를 검사합니다. 동물을 굴절된 위치에 놓고 개구부를 검사합니다. 달팽이관의 기저부 회전과 둥근 창 틈새가 보여야 합니다.
굴절된 위치에 있는 동안 동물의 산소 수치를 주시하십시오. 계속 진행하려면 엎드린 동물의 위치를 변경하고 직사각형 절개를 사용하여 꼭짓점을 노출시킵니다. 다음으로 절제 피부를 제거하고 골막을 절개하고 메스를 사용하여 골막을 닦아냅니다.
다음으로 3.5cm 와이어의 노출된 3mm 끝에 작은 고리를 만듭니다. 그런 다음 금선의 다른 쪽 끝을 피하로 꼭지점으로 안내합니다. 마이크로 겸자를 사용하는 18게이지 말초 정맥 카테터를 통해.
두 번째 마이크로 집게를 사용하여 철사의 갈고리 끝을 중이에 조심스럽게 배치합니다. 그런 다음 동물의 머리를 굴절시켜 수포루를 통해 둥근 창 틈새의 영역을 시각화하고 마이크로 집게를 사용하여 금색 와이어를 뼈 돌출부에 연결합니다. 이제 금선에 부드러운 장력을 유지하면서 27 게이지 바늘에서 전달되는 10-15 마이크로 리터의 시아 노 아크릴레이트를 사용하여 수포루의 두개골 가장자리에 고정합니다.
이제 금선에서 기준선 측정을 수행할 수 있습니다. 다음으로, 전극을 장착하려면 동물을 엎드린 자세로 놓으십시오. 그리고 1mm 버 드릴을 사용하여 람다 봉합사에서 1mm 앞에 두 개의 구멍을 만듭니다.
경막을 손상시키지 마십시오. 그런 다음 구멍에 나사를 삽입하여 전극 커넥터를 고정합니다. 이제 18게이지 말초 정맥 카테터를 사용하여 커넥터에서 두개골에 최대한 가까운 조직층의 수포까지 전극을 안내합니다.
그런 다음 주걱을 사용하여 나사 사이에 0.5-0.7ml의 반유체 치과 시멘트를 포장하고 나사 사이에 전극 커넥터를 배치합니다. 치과용 시멘트가 굳어지는 동안 커넥터를 제자리에 안정적으로 유지하십시오. 동물을 옆으로 재배치한 상태에서 둥근 창에서 1mm 떨어진 곳에 달팽이관루를 조심스럽게 뚫어 진행합니다.
5000rpm에서 0.5mm 다이아몬드 버를 사용하여 드릴링합니다. 다음으로, 전극을 scala tympani에 4mm 조심스럽게 삽입하십시오. 그런 다음 전극을 빼내고 삽입을 반복합니다.
그런 다음 시아노아크릴레이트를 적용하여 전극을 고정합니다. 안정적인 이식은 더 많은 청력 역치 이동을 제공합니다. 따라서 원치 않는 경련 움직임의 가능성을 최소화하기 위해 테이블에 전극을 삽입하는 데 사용되는 암을 안정화하는 것이 중요합니다.
그런 다음 약 0.3ml의 치과 시멘트로 수포루를 닫습니다. 그리고 치과 시멘트가 수포로 변위되는 것을 피해야 합니다. 그런 다음 5-0 흡수성 봉합사를 사용하여 후이도 절개를 닫습니다.
그런 다음 동물을 엎드린 자세로 돌립니다. 그런 다음 집게를 사용하여 꼭짓점에서 직사각형 절개의 뒤쪽 가장자리를 잡습니다. 그리고 가위로 동물의 목에 2 센티미터의 피하 터널을 만듭니다.
터널을 통해 집게를 사용하여 2.5cm 금선을 이식합니다. 전선이 덜 노출된 끝을 커넥터의 지정된 핀에 놓고 연결을 납땜합니다. 다음으로, 둥근 창 틈새 전극을 커넥터의 해당 핀에 납땜합니다.
땜납을 완료한 후 절연 핀과 전극을 완전히 덮기 위해 더 많은 치과 시멘트를 바르십시오. 이것으로 이식이 완료됩니다. 제시된 동물에서 수술 전후 빈도별 CAP 임계값은 낮은 빈도에서 거의 변하지 않았습니다.
반면 약 25-30데시벨의 임계값 이동은 8킬로헤르츠에서 시작하는 고주파 영역에서 달성되었습니다. 이식된 전극에 대한 이물질 반응은 크게 다를 수 있습니다. 눈에 보이는 반응이 없을 수 있으며, 고막의 넓은 부분이 섬유화 조직으로 채워질 수 있습니다.
CI 전극 삽입 중에 골 나선형 층판을 파괴하는 것도 가능합니다. 이 경우, 골절은 나선형 신경절 세포의 손실, 전정관의 섬유화 및 골형성, 코르티 기관의 소실을 일으켰습니다. 이러한 골절은 일부 동물에서 예상보다 높은 역치 이동을 설명할 수 있습니다.
이 기술을 숙달하면 제대로 수행되면 2시간 30분 안에 완료할 수 있습니다. 수술 중 청력 측정을 수행하면 전체 절차에 필요한 시간이 상당히 늘어날 수 있습니다. 이 동영상을 시청한 후에는 기니피그에게 인공와우를 삽입하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.
이 동물 모델을 사용하여 이 분야의 다양한 연구 질문에 답할 수 있습니다.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
11:49
Related Videos
11.9K Views
04:00
Related Videos
560 Views
09:06
Related Videos
14.8K Views
07:03
Related Videos
7.7K Views
06:05
Related Videos
6.6K Views
06:16
Related Videos
3.6K Views
09:25
Related Videos
2.3K Views
08:30
Related Videos
3.7K Views
05:14
Related Videos
1.1K Views
07:19
Related Videos
509 Views