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트랜스-내부 세포 배아 줄기 세포의 대량 주입 리드 더 높은 Chimerism 요금
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JoVE Journal Biology
Trans-inner Cell Mass Injection of Embryonic Stem Cells Leads to Higher Chimerism Rates

트랜스-내부 세포 배아 줄기 세포의 대량 주입 리드 더 높은 Chimerism 요금

Full Text
11,041 Views
05:53 min
May 29, 2018

DOI: 10.3791/56955-v

Gregory J. Scott1, Artiom Gruzdev1, Thomas B. Hagler1, Manas K. Ray1

1Knock Out Mouse Core,NIEHS/NIH

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a modified protocol aimed at increasing chimeric production without the need for additional equipment. The technique focuses on a simple orientation change of the embryo during injection, which can enhance embryo yield and potentially shorten the timeline to germline transmission.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Developmental Biology
  • Genetics

Background

  • Chimeric production is essential for various biological studies.
  • Traditional methods may require costly equipment and extensive training.
  • Improving efficiency in chimera production can benefit many laboratories.
  • This protocol aims to simplify the process while maintaining effectiveness.

Purpose of Study

  • To enhance the production of chimeras without incurring additional costs.
  • To reduce the training time required for laboratory personnel.
  • To provide a straightforward method that can be easily adopted by researchers.

Methods Used

  • Harvesting embryos by blotting the uterus to remove excess blood.
  • Using a low magnification dissecting microscope for embryo placement.
  • Implementing a modified embryo orientation during injection.
  • Demonstrating the procedure by a trained biologist.

Main Results

  • The modified procedure successfully increased chimeric production.
  • Laboratories reported improved efficiency with no additional costs.
  • Participants found the method easy to learn and implement.
  • Potential for reduced timelines to germline transmission was observed.

Conclusions

  • This protocol offers a cost-effective solution for enhancing chimeric production.
  • It simplifies the process, making it accessible to more laboratories.
  • Future studies may explore further optimizations of the technique.

Frequently Asked Questions

What is the main advantage of this protocol?
The main advantage is that it requires no additional equipment and minimal training.
Who demonstrated the procedure?
The procedure was demonstrated by Thomas Hagler, a biologist and graduate student.
How does the orientation change affect embryo production?
Changing the orientation during injection can increase the number of embryos produced.
Is specialized training required for this method?
No, the method is designed to be easy to learn and implement.
Can this method be applied to less than optimal ES cells?
Yes, it can help improve efficiency even with less than optimal ES cells.
What are the implications of reduced timelines to germline transmission?
Reduced timelines can accelerate research and development processes in genetic studies.

여기 우리는 새로운 장비를 사용 하지 않고 키메라 생산을 증가 하는 프로토콜을 제시. 주입에 대 한 배아의 단순한 방향 변경 생산, 배아의 수를 증가 하 고 잠재적으로 생식 전송 타임을 줄일 수 있습니다.

이 수정된 절차의 전반적인 목표는 추가 비용이나 긴 교육 기간 없이 키메라 생산을 늘리는 것입니다. 이 방법은 특히 ES 세포가 최적이 아닌 경우 실험실에서 키메라 생산을 보다 효율적으로 수행하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 추가 장비와 전문 교육이 필요하지 않다는 것입니다.

오늘 절차를 시연하는 사람은 Thomas Hagler입니다. 그는 핵심 실험실에서 일하는 생물학자이자 대학원생입니다. 배아를 적출하려면 실험실 조직에 자궁을 닦아 여분의 혈액을 제거하고 장기를 새로운 60mm 접시에 담아 저배율 해부 현미경으로 만듭니다.

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