Name: 수혈 또는 쥐 Inotropic 에이전트 없이 복구 심폐 바이패스 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-03-23T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 54 s
Description: 학습하세요 쥐 심폐 바이패스 모델을 이용하여 수혈이나 이노트로픽 제제 없이 장기 합병증을 연구하는 방법을. 이 기법은 심혈관 수술의 합병증 예방 전략 개발에 기여합니다.

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감사는 그들의 기술 지원에 대 한 박사 토니 폭포와 박사 M. Funamoto에 확장 됩니다.

실험 전에 모든 쥐 주어져야 한다 1 주일 적응. 동물에 모든 외 과적 치료 및 실험 동물 사용 (www.nap.edu/catalog/5140.html) 또는 다른 적절 한 윤리 지침에 대 한 가이드에 따라 밖으로 실행 한다. 프로토콜 진행 하기 전에 해당 교육 기관에서 동물 복지 위원회에 의해 승인을 받아야 한다. 모든 후속 절차는 무 균 조건 하에서 수행 되어야 합니다.
1. CPB 회로 준비
참고: 장갑, 안경, 그리고 깨끗 한 코트 또는 일회용 가운 등 개인 보호 장비를 착용 하십시오.
<ol><li>CPB 회로의 설정<ol>
<li>CPB 회로를 그림 1에 표시 된 대로 수정된 신생아 막 oxygenator 미리 정 저수지와 폴 리 염화 비닐 튜브를 연결 합니다. 모든 연결 꽉 물 누설 하지 않습니다 확인 합니다.</li>
		<li>CPB 회로 제조 업체의 프로토콜에 따라 롤러 펌프 장치에 설정 합니다.</li>
		<li>높이 조절 테이블에 롤러 펌프를 유지 하 고 실험 책상 아래 10 cm 테이블의 높이 조정 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>CPB 회로의 못쓰게<ol>
<li>헤 파 린 그리고 CPB 회로 못쓰게 위한 7% 나트륨 중 탄산염 해결책의 0.5 mL 0.1 mL와 hydroxyethyl 전 분 용액의 혼합 12 mL</li>
		<li>부드럽게 회전 하는 펌프 롤러 못쓰게 솔루션의 11 mL와 회로 프라임. 공기를 배기에 대 한 저수지로 18-게이지 배기 바늘을 넣어.</li>
		<li>기울이기는 oxygenator와 deair를 막 oxygenator를 여러 번을 누르십시오. 공기 공기 색 전 증 및 부족 한 산소를 완전히 왜곡 해야 합니다. 회로 못쓰게 동안 저수지에 설정 하는 전기 열 램프에 의해 회로 열.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2입니다. CPB의 앞에 절차
참고: 외과 분야와 장치는 70% 알콜 또는 사용 하기 전에 비밀이 암모늄 화합물에 의해 소독 되어야 한다.
<ol><li>마 취 및 동물 설정<ol>
<li>3.0 %isoflurane 혼합 공기 흡입은 기화 기에서와 쥐를 anesthetize 작업 대에 쥐를 설정 하 고 기도로 16 게이지 정을 넣어야. (예: 진통 노출량 및 주파수에 관한 당신의 현지 동물 보호 지침에 따라 buprenorphine 0.005 mg/kg 사우스 캐롤라이나) 참고: 쥐 깊은 마 취에 하 고 반사를 잃게 해야 합니다. 호흡 리듬 되어야 하지만, 체포 되지.</li>
		<li>전기 열 패드와 장비 운영 테이블에 쥐를 전송 합니다. 해 양의 8 mL/kg, 70 사이클/분, 호흡 비율과 산소 센서에 의해 모니터링 영감된 산소 분수의 30%와 기계 환기를 시작 합니다.</li>
		<li>1.5-2.0% isoflurane CPB 개시에서 케 타 민/xylazine의 추가 관리와 마 취를 유지 합니다.</li>
		<li>직장 프로브를 사용 하 여 직장 온도 모니터링 합니다. 열 패드의 온도 조정 하 고 열 램프 회로 배치 여 normothermic 37 ° C의 온도 유지 합니다.</li>
		<li>부정사 위치에 쥐를 설정 하 고 바늘을 고정 하 여 4 개의 팔 다리를 스트레칭. 양측 어깨와 왼쪽된 복 부를 ECG 전극 바늘을 설정 하 여 심장 박동을 모니터링 합니다. 촉촉한 거 즈를 배치 하거나 건조를 방지 하기 위해 눈에 안과 연 고를 적용 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Cannulation<ol>
<li>Sprayingby 70% 에탄올 또는 다른 살 균 솔루션을 살포에 의해 전신의 표면 소독 후 양측 사 타 구니 지역에 바로 자 궁 경부 지역 면도칼으로 머리를 면도. (Lidocaine) 등 현지 마 취약 피부 절 개를 하기 전에 사용 해야 합니다. 참고: 대안, 절 개 사이트의 수술 스크럽 대신 몸 전체 사용할 수 있는 온도 있는 하락을 피하기 위해 70% 에탄올 스프레이.</li>
		<li>가 위 여 양자 사 타 구니 지역과 바로 자 궁 경부 지역에 피부 (약 5 m m)를 incise 하 고 퉁 명 스럽게 노출 바로 주요 대 퇴 동맥을 조직 해 부. 정 맥과 신경 근처에서 동맥을 신중 하 게 구분 합니다. 4-0 실크 및 노출에 의해 긴장으로 일반적인 대 퇴 동맥의 끝에 선.</li>
		<li>마이크로 위 동맥, 수직 방향에 의해 바로 일반적인 대 퇴 동맥의 동맥 벽 (약 1 m m) 고 신중 하 게 cannulate 24 게이지 정 맥 카 테 터 절 개에서 조직의 동맥을 모니터링 하기 위한 1 cm의 깊이에 압력과 가스 부분 압력 동맥 혈액에서을 분석.</li>
		<li>카 테 터에서 헤 파 린 나트륨 (500 IU/kg)을 관리 하 고</li>
		<li>2.2.2, 2.2.3 CPB 회로 동맥 주입 라인으로 일반적인 왼쪽된 대 퇴 동맥으로 24 게이지 정 맥 카 테 터를 cannulate를 단계를 따릅니다.</li>
		<li>17-게이지 멀티 오리 피스 angiocatheter 바로 내부 경 정 맥으로 삽입 하 고 오른쪽 아 트리 움 및 열 등 한 베 나 정 맥 (IVC)으로 사전. 카 테 터를 밀어 하지 않습니다 약 그릇을 쉽게 끊을 수 있다. 정 맥 배수 장치를 위한 CPB 회로에 카 테 터를 연결 합니다.</li>
		<li>오염을 방지 하는 촉촉한 거 즈와 cannulated 각 영역을 커버.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3입니다. CPB 중 절차
<ol><li>CPB 동안 0.8 L/분 oxygenator를 100% 산소 가스를 전달 하 고 30 사이클/분 호흡 속도 감소. 동맥 산소 부분 압력은 200에서 400 mmHg에 필요 합니다.</li>
	<li>CPB의 처음부터, CPB 개시 후는 체온의 즉각적인 드롭 완화 최대 42 ° C에 열 패드의 온도 설정을 늘립니다. 신체 온도 36 ° c.에 반환 될 때 설정 온도 37 ° C를 조정</li>
	<li>조심 스럽게 CPB 흐름을 시작 하 고 저수지에서 혈액의 볼륨에 대 한 감시. 빈 저수지는 공기 색 전 증을 일으킬 수 있습니다. 저수지에서 혈액의 볼륨 감소, 테이블 높이 조정 하거나 배수 카 테 터의 위치를 변경 하 여 펌프 흐름을 낮은. 다시 쉽게 오른쪽 아 트리 움 및 부정맥의 천공을 발생할 수 있습니다 정 맥 배수 테를 배치 하지 마십시오.</li>
	<li>증가 하 고 100 mL/kg에서 펌프 흐름을 유지/분, 평균 혈압은 70 mmHg에서 유지 하는 동안. 적절 한 혈압을 유지 하 고, 저수지에서 적어도 1 mL의 작은 볼륨 허용 됩니다. 저수지에서 혈액 1 mL 미만 있는 경우에, 그것은 장기에 공기 색 전 증을 발생할 수 있습니다.</li>
	<li>혈압 안정 하지 않으면 (는 CPB 후 빈 혈 발생할 수 있습니다) 회로를 못쓰게 솔루션의 2-3 mL를 추가 합니다.</li>
</ol>4입니다. CPB 후 절차
<ol><li>정 맥 배수 튜브 클램프 고 회로에서 그것을 제거 합니다. 점차적으로 혈압을 유지 하기 위해 동맥 회로에서 나머지 혈액 달 이다.</li>
	<li>70 사이클/분 호흡 속도 증가.</li>
	<li>배수 정 맥 카 테 터와 왼쪽된 동맥 카 테 터 제거 후 원심 인접 사이트에 있는 배를 선.</li>
	<li>CPB의 끝 후에 60 분 오른쪽 대 퇴 동맥에서 동맥 선을 제거 합니다.</li>
	<li>식 염 수와 각 상처를 청소 하 고 봉합 상처를 닫습니다.</li>
	<li>동물의 자연 스러운 호흡을 확인 한 후 마 취와 extubate intratracheal 튜브를 끝.</li>
	<li>따뜻하게 살 균 isotonic 체액을 관리 하 고 열 매트와 전기 열 램프를 사용 하 여 동물을 따뜻하게. 마 취에서 회복까지 자주 동물의 상태를 확인 합니다. 필요한 경우 호흡기 지원을 제공 합니다. 참고: 동물 시작 되 면 주위를 움직이고, 열원 수 있도록 따뜻한 또는 차가운 쪽을 선택 하는 동물 감 금 소의 부분에서 제거 한다.</li>
	<li>호흡이 완전히 회복 될 때까지 다른 동물의 회사를 제외 하 고 동물을 유지. 전체 복구까지 회사에 동물을 반환 하지 않습니다.</li>
	<li>마 취에서 회복 후에 음식 및 물 섭취 량을 확인 하 고 적절 한 영양 지원을 제공. 진통제를 관리 하 고 불편 이나 통증의 흔적을 확인.</li>
</ol>

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</ol>

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이 쥐 CPB 모델 HMGB-1, 선 동적인 응답 조절 핵심 전사 인자와 염증 성 cytokines의 혈 청 및 폐 식 수준 CPB 후 극적으로 증가 했다. 이전 임상 연구 보여주었다 HMGB-1 레벨의 혈 청 분 비 환자 심혈 관 수술11에 상승 그리고 CPB 동안 피크 혈 청 HMGB-1 레벨은 더 심각한 조직의 염증 반응 증후군과 연관 그리고 CPB12후 폐 산소 장애. 또한, 혈 청 HMGB-1 레벨은 심한 폐 렴과 급성 호흡 곤란 증후군 (아즈)13를 가진 환자에서 환자 실 사망률을 예측 하는 독립적인 바이오 마커. HMGB-1 활성화는 성공적으로이 쥐 CPB 모델에서 시뮬레이션 및 심각한 형사 요 관련 아즈 염증 성 cytokines와 관련.
CPB 관련 조직의 염증에 대 한 수많은 연구 조사 proinflammatory cytokine 식<...

1953, CPB1을 사용 하 여 첫 번째 심장 수술 박사 존 H. 긴팔원숭이 주니어에 성공적으로 수행 하 고 이후에 심장 혈관 수술에 필수적인 적임 되었다. 동안 기술 및 장치 극적으로 세련 된, CPB에 관련 된 다중 장기 합병증 여전히 손상, 심장 혈관 수술의 결과 그리고 수술 후 병 적 상태와 사망률2에 영향을 미칠 수 있습니다. CPB 관련 장기 손상 면역 체계 활성화 및 proinflammatory cytokines, 칭찬 활성화 및 산소 자유 래 디 칼2의 생산의 합성에 의해 발생 합니다. 그러나 그 이상,, 하지 되었습니다 완전히 해명 했습니다.
CPB의 임상 사용 업과 동물 모델 및 그 이후 CPB; pathophysiological 프로세스의 명확한 활성화 이 이러한 합병증을 피하기 위해 전략 개발에 전 임상 연구를 용이 하 게 수 있습니다. 이후 Popovic 외. 처음 보고 쥐 CPB 모델 19673, CPB 쥐 모델 세련 된, 그리고 점차적으로 더 큰 비용 절감 효과, 편리한 실험 과정 및 실험 방법에의 한 과다 큰 동물 모델의 장소를 유전 찍은 것과 단백질 수준입니다. 또한, 타고 난된 쥐 유전으로 동일한, 가능한 생물 학적 편견을 줄일 수 있습니다.
파브르 외. 처음 형사 요4의 여러 기관 sequelae 장기의 연구를 허용 하는 복구 모델 설립. 이 간단한 생존 모델의 장점은 유연성 (CPB 흐름 및 기간), 안정 된 중요 한 상태 및 재현성 조직의 염증입니다. 쥐 CPB 모델 CPB5, 동안 다중 장기 부상을 방지 하기 위해 목표로 치료 전략의 조사에 대 한 중요 한 되고있다 그리고 CPB 동안 임상 상황을 시뮬레이션을 위한 다양 한 모델이 최근에 개발 되었습니다. 드 랭 외. 심근 상해7에 관련 된 효소, 유전자, 그리고 조직학 응답 하 사용 될 수 있는 심장 마비 모델 개발. 피터 외 알. 심근 경색과 심장 disfunction 초점 국 소 빈 혈과 reperfusion 상해8통해 분석 하는 소형된 CPB 모델을 사용 하 여 제어 reperfusion 배열. Jungwirth 외. 먼저 깊은 저체온증이 순환 체포 (DHCA) 모델, DHCA 및 잠재적인 신경 전략6글로벌 국 소 빈 혈과 reperfusion 상해 명료 수 있는 설립. DHCA를 사용 하 여 연구 조사 저체온증, reperfusion, 혈-트리거 신호 이벤트9의 영향. 깊은 저체온증 활성화와 다양 한 효소의 비활성화에 영향을 미칠 수 있습니다 하 고 통로 기계 장치 알 수 없는10유지. 다른 한편으로, 심장 마비 모델 또는 심장 허 혈 모델 국 소 빈 혈과 reperfusion 심장 상해를 조사 하기 위해 사용 되어야 한다. 이러한 다양 한 쥐 CPB 모델을 매우 인간의 CPB 정리 CPB에 관련 된 병 적인 과정을 공개 하 고 CPB 관련 합병증을 줄일 수 있습니다.
이 프로토콜에서는 수혈 또는 쥐 inotropic 에이전트 없이 간단한 CPB 모델을 보여 줍니다. 이 모델은 장기간의 연구에 대 한 여러 기관 sequelae를 CPB의 수 있습니다.

<table><tbody><tr><td>설치류 인공호흡기 7025</td><td>Ugo Basile</td><td>7025</td><td>인공호흡기</td></tr><tr><td>OxiQuant B</td><td>ENVITEC</td><td>46-00-0023</td><td>산소 센서</td></tr><tr><td>CMA 450 온도 컨트롤러</td><td>CMA</td><td>8003759</td><td>온도 컨트롤러</td></tr><tr><td>CMA 450 가열 패드</td><td>CMA</td><td>8003763</td><td></td></tr><tr><td>CMA 450 직장 프로브</td><td>CMA</td><td>8003761</td><td></td></tr><tr><td>DIN(8) to 일회용 BP 변환기</td><td>ADInstruments</td><td>MLAC06</td><td></td></tr><tr><td>일회용 BP 변환기</td><td>ADInstruments</td><td>MLT0670</td><td></td></tr><tr><td>IX-214 데이터 레코더</td><td>iWorx 시스템</td><td>IWX-214</td><td>증폭기</td></tr><tr><td>LabScribe 소프트웨어</td><td>iWorx 시스템</td><td></td><td>소프트웨어</td></tr><tr><td>롤러 펌프</td><td>Furue 과학</td><td>모델 RP-VT</td><td>펌프</td></tr><tr><td>Happy Cath</td><td>Medikit</td><td>EB 19G 4HCLs PP</td><td>17게이지 다오리피스 혈관 카테터</td></tr><tr><td>SURFLO ETFE I.V. 카테터</td><td>Terumo</td><td>SR-OX2419CA</td><td>24게이지 혈관 카테터</td></tr><tr><td>산소 공급기</td><td>Mera</td><td>HPO-002</td><td></td></tr><tr><td>CPB 회로</td><td>Mera</td><td>맞춤형</td><td></td></tr><tr><td>Hespander 유체 용액</td><td>Fresenius Kabi</td><td>3319547A4035</td><td>하이드록시에틸 전분</td></tr></tbody></table>

수혈 또는 쥐 inotropic 에이전트 없이 복구 심폐 바이패스 모델

A Recovery Cardiopulmonary Bypass Model Without Transfusion or Inotropic Agents in Rats

심장과 폐 우회 (CPB) 심장 혈관 수술에 필수 되지 않습니다. CPB 기술 및 장치, 다중 장기 합병증의 극적인 세련미에도 불구 하 고 장기간에 관련된 형사 요 아직도 심장 혈관 수술의 결과 손상 하 고 수술 후 사망률 및 사망을 악화 시킬 수 있습니다. CPB의 임상 사용 업과 동물 모델 CPB, 하는 동안 발생 하는 병 태 생리 프로세스의 설명을 사용 하 고 이러한 합병증을 방지 하는 전략을 개발 하기 위해 전 임상 연구를 촉진. 쥐 CPB 모델은 유리한 그들의 더 큰 비용 절감 효과, 편리한 실험 과정, 풍부한 테스트 방법에서 유전자 또는 단백질 수준, 및 유전 일관성. 그들은 면역 체계 활성화 및 proinflammatory cytokines, 칭찬 활성화 및 산소 자유 래 디 칼의 생산의 종합 조사를 위해 사용할 수 있습니다. 쥐 모델 정제 그리고 점차적으로 큰 동물 모델의 자리를 차지 하는 있다. 여기, 우리는 수혈 또는 쥐 inotropic 에이전트 없이 간단한 CPB 모델을 설명합니다. 이 복구 모델의 장기 연구 CPB의 여러 기관 sequelae 수 있습니다.

그림 1 에서는 전체 CPB 회로. 이 모델에서 생리 적 변수 그림 2에 표시 됩니다 그리고 직장 온도 포함, 동맥 혈압, 심장 박동을 의미. 그림 3 CPB, 동맥 산소의 부분 압력, 동맥 이산화탄소가, 기본 초과, 혈 청 칼륨, 표현 및 수소의 잠재력의 부분 압력을 포함 하 여 동안 동맥 혈 가스 분석을 보여준다. 절차를 통해 심장 박동 및 평균 동맥 압력 안정 했다. 직장 온도가 못쓰게 볼륨에 의해 발생 하는 hemodilution 때문에 CPB의 시작 부분에서 감소. 동맥 산소의 부분 압력은 크게 막 산소 때문 CPB 동안 증가. 대표 되며 및 폐의 이미지를 얼룩 오신 그림 4, CPB 그룹 (그림 4</strong...

여기, 선물이 수혈 또는 쥐 inotropic 에이전트 없이 단순 복구 심폐 바이패스 모델을 설명 하는 프로토콜. 이 모델의 장기 연구 심폐 바이패스의 여러 기관 sequelae 수 있습니다.

수혈 또는 쥐 Inotropic 에이전트 없이 복구 심폐 바이패스 모델

Cardiopulmonary bypass (CPB) is indispensable in cardiovascular surgery. Despite the dramatic refinement of CPB technique and devices, multi-organ ...

이 절차의 전반적인 목표는 수혈 또는 수축제를 사용하지 않고 설치류 모델에서 심폐 우회술과 관련된 여러 장기 합병증을 조사하는 것입니다. 작은 동물에서 CPB에 대한 이 방법은 심혈관 세포 공급의 주요 작동을 개선하는 데 도움이 될 수 있습니다. 궁극적으로 이 기술을 사용하면 심폐 우회 수술에서 발생하는 합병증을 예방하기 위한 전략을 개발하는 데 도움이 될 것입니다.먼저 심폐 우회 회로를 설정하고, 폴리염화비닐 튜브를 CPB 회로용으로 사전 설계된 정맥 저장소와 연결하고, 튜브를 변형된 신생아 막 산소 공급기에 연결합니다. 그런 다음 모든 연결이 단단히 조여져 있고 누출되지 않는지 확인하십시오. 다음으로, 높이 조절 가능한 테이블에서 회로를 롤러 펌프에 고정합니다.그런 다음 표의 높이를 실험 평면 아래 10cm로 설정합니다. 이제 11ml의 프라이밍 솔루션으로 회로를 프라이밍하고 펌프 롤러를 부드럽게 회전시키기 시작합니다. 그런 다음 18 게이지 환기 바늘을 저장소에 넣고 저장소 위에 있는 열 램프를 사용하여 회로를 가열합니다.그런 다음 멤브레인 산소공급기를 기울이고 여러 번 트리거하여 라인의 공기를 제거합니다. 이 단계는 공기 색전증과 불충분한 산소화를 예방하는 데 필수적입니다. 쥐를 마취하고 삽관한 후 전기 가열 패드가 장착된 수술대로 옮깁니다.분당 70 사이클의 호흡수와 30%의 흡기 산소. 산소 센서를 사용하여 산소 수준을 모니터링하십시오. 마취를 유지하기 위해 1.5-2%의 이소플루란을 투여하고 CPB 시작 시 펜토바르비탈을 투여합니다.다음으로, 직장 온도 프로브를 설정하고 열 패드의 온도를 조정하고 램프로 회로를 가열하여 정상적인 열체를 유지합니다. 그런 다음 양측 어깨와 왼쪽 복부에 부착된 ECG를 사용하여 심박수를 모니터링합니다. 이제 쥐의 얼굴에 수분 거즈를 올려 눈을 가린다.다음으로, 양측 서혜부 부위와 오른쪽 경추 부위의 수염을 면도합니다. 그런 다음 70% 에탄올과 베타딘 또는 클로르헥시딘을 번갈아 가며 3회 스크럽하여 피부를 소독한다. 이제 쥐를 캐뉼레이션할 준비가 되었습니다.가위를 사용하여 양측 서혜부 부위와 오른쪽 경추 부위를 5mm 절개하여 수술을 시작합니다. 그런 다음 조직을 퉁명스럽게 절개하여 올바른 대퇴 대퇴 동맥을 노출시킵니다. 다음으로, 정맥 및 신경에서 동맥을 조심스럽게 분리하십시오.그런 다음 4-0 실크 봉합사를 사용하여 총대퇴 동맥 끝을 접합합니다. 그런 다음 오른쪽 대퇴 동맥을 1mm 수직 절개하고 24게이지 정맥 카테터를 사용하여 1cm 깊이까지 조심스럽게 캐뉼로 삽입합니다. 이 카테터를 사용하여 전신 동맥압을 모니터링하고 동맥혈의 가스 분압을 분석합니다.다음으로, 카테터를 사용하여 헤파린 나트륨을 투여합니다. 이 과정을 반복하여 왼쪽 총대퇴동맥을 캐뉼러하고 이 캐뉼라를 CPB 회로의 동맥 주입 라인으로 사용합니다. 다음으로, 17게이지 다중 오리피스 혈관 카테터를 오른쪽 내부 경정맥에 삽입하고 오른쪽 심방과 하대정맥으로 전진시킵니다.혈관은 쉽게 파열될 수 있으므로 부드럽게 하십시오. 그런 다음 정맥 배액을 위해 혈관 카테터를 CPB 회로에 연결합니다. 마지막으로, 오염을 방지하기 위해 각 캐뉼러 부위를 촉촉한 거즈로 덮습니다.이제 동물은 CPB를 사용할 준비가 되었습니다. CPB를 시작하기 전에 분당 100리터의 속도로 산소 공급기에 0.8% 산소 가스를 전달하기 시작하고 호흡수를 분당 30회로로 줄이십시오. 동맥 산소 분압을 수은 200mm에서 400mm 사이로 유지하십시오.다음으로, CPB 시작 후 즉각적인 체온 강하를 완화하기 위해 열 패드 온도를 섭씨 42도로 높입니다. 이제 CPB 흐름을 조심스럽게 시작하고 저장소의 혈액량을 주시하십시오. 저장소가 비어 있으면 공기 색전증이 발생할 수 있으므로 테이블 높이를 조정하여 펌프 흐름을 조정하십시오.유속을 변경하기 위해 정맥 배액 카테터의 위치를 변경하지 마십시오. 이 카테터의 움직임은 심방에 천공을 일으키거나 부정맥을 유발할 수 있습니다. 다음으로, 펌프 유량을 분당 킬로그램당 최대 100밀리리터까지 증가시킵니다.이제 평균 혈압을 수은 70mm로 유지하십시오. 혈압이 안정되면 저장소에 1ml의 소량의 혈액이 허용됩니다. 이보다 적으면 공기 색전증의 위험이 있습니다.혈압이 안정되지 않으면 회로에 2-3ml의 프라이밍 용액을 첨가하십시오. 체온이 정상으로 돌아오면 온열 패드 온도를 섭씨 37도로 낮추십시오. CPB가 완료된 후 정맥 배액관을 고정하고 회로에서 제거합니다.그런 다음 회로에 남아 있는 혈액을 동맥에 점차적으로 주입하여 혈압을 유지합니다. 다음으로, 호흡수를 분당 70 사이클로 높입니다. 그런 다음 정맥 배액 카테터와 왼쪽 동맥 카테터를 제거합니다.다음으로, 근위부와 원위부에 혈관을 접합합니다. 다음으로 오른쪽 대퇴 동맥에서 동맥선을 제거합니다. 그런 다음 식염수로 상처를 닦고 봉합사로 봉합한다.자발적 호흡이 시작되자마자 마취를 끝내고 기관내관을 발관한다. 그런 다음 데운 멸균 등장액을 투여하고 열 매트와 전기 열 램프를 사용하여 동물이 마취에서 회복될 때까지 동물을 따뜻하게 유지합니다. 동물을 주의 깊게 관찰하고 필요에 따라 호흡 보조를 제공하십시오.CPB 중 동맥혈 가스 분석에는 동맥 산소의 분압, 동맥 이산화탄소의 분압, 헤마토크리트, 염기 과잉, 칼륨의 혈청 발현 및 수소의 전위가 포함됩니다. 시술 내내 심박수와 평균 동맥압은 안정적이었습니다. 직장 온도와 헤마토크릿은 프라이밍 볼륨으로 인한 혈액 희석 때문에 CPB 초기에 감소했습니다.CPB 동안 동맥 산소의 분압은 막 산소화로 인해 크게 증가했습니다. CPB 후 폐의 헤마톡실린 및 에오신 염색은 대조군에 비해 CPB 그룹에서 간질성 부종, 염증성 세포 침투 및 출혈을 보여줍니다. 또한, 종양괴사인자 알파(tumor necrosis factor alpha), 인터루킨 6(interleukin six) 및 고이동성 그룹 박스 1(group box one)의 혈청 농도는 CPB 후 각각 증가하였다.이 비디오를 시청한 후에는 수혈 또는 엔트로피 제제 없이 대략적인 CPB 절차를 수행하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다. 이 기술을 숙달하면 제대로 수행하면 두 시간 안에 완료할 수 있습니다. 이 절차를 시도하는 동안 쥐의 혈역학을 자주 확인하는 것을 기억하는 것이 중요합니다.개발 후 이 기술은 심혈관 수술 분야의 연구자들이 CPB의 염증 및 기타 주요 장기 합병증을 탐구할 수 있는 길을 열었습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

이 논문은 갑작스런 심정지와 기존의 심폐 소생술을 시뮬레이션하는 흉부 압박, 인공호흡 및 전기 충격에 의한 전기적으로 유도된 심실세동 및 소생술의 쥐 모델을 설명합니다. 이 모델을 통해 심정지의 병태생리학에 대한 통찰력을 수집하고 새로운 소생술 전략을 탐색할 수 있습니다.

기존의 폐쇄 가슴 기술에 의해 쥐의 심실 세동의 모델 및 소생

이 문서에서는 마우스에 심폐 바이패스를 수행 하는 방법을 설명 합니다. 이 새로운 모델은 장기 손상에 관여 하는 분자 메커니즘의 조사를 촉진할 것 이다.

마우스 모델에서 심폐 바이패스: 새로운 접근

이 프로토콜은 순환기 죽음 후에 심장 기증의 타당성을 증가시키기 위하여 새로운 컨디셔닝 에이전트 또는 전략의 평가를 위한 간단하고 유연한 접근을 보여줍니다.

순환사망 후 심장 기증 전 임상 모델

여기에서는 결과를 개선하는 데 도움이 되는 쥐 폐 이식 모델에 대한 최적화를 제시합니다. 체중에 따른 커프스 사이즈 가이드, 4차 늑간 공간을 확인하기 위한 측정 전략, 상처 봉합 및 BAL(기관지폐포 세척) 체액 및 조직 수집 방법을 제공합니다.

온난 허혈/재관류 손상의 쥐 폐 이식 모델: 결과 개선을 위한 최적화

본 연구는 생존 사례의 경우 좌측 미니 흉곽 절개술 또는 비생존 사례의 경우 정중선 흉골 절개술을 사용하여 토끼의 급성 국소 심근 허혈 및 재관류 손상의 재현성이 높은 동물 모델을 보여줍니다.

토끼의 허혈 및 재관류 손상 모델

이 연구는 초보자가 배우고 수행할 수 있는 쥐의 재현 가능한 이종 복부 심장 이식 기술을 보여줍니다. 또한, 쥐의 새로운 대동맥 역류 모델은 이종 복부 심장 이식을 수행하고 수확 후 가이드와이어를 사용하여 기증자의 대동맥 판막을 손상시킴으로써 생성됩니다.

쥐의 수정된 이종 복부 심장 이식 및 새로운 대동맥 역류 모델

여기에서 우리는 쥐 모델에서 정상 체온 상피 보존 후 이종 국소 이식된 심장의 평가 프로토콜을 제시합니다.

Normothermic Ex-Situ 관류 이종 심장 이식의 쥐 모델

이 프로토콜은 심폐 우회술(CPB)의 신생아 돼지 모델을 설명하며, 순환 정지 및 심장 정지를 CPB에 이차적인 심각한 뇌 손상 및 기타 합병증을 연구하기 위한 도구로 사용합니다.

장기간의 순환 정지 후 체외 심폐 소생술의 소아 동물 모델

기증자 심장 보존 전략을 테스트하기 위한 생체 외 격리 작업 쥐 심장 프로토콜에 대해 설명합니다. 이 논문은 설치류 기증자 심장의 정적 냉장 보관에 사용하기 위한 프로토콜에 대해 설명합니다. 그러나 이 프로토콜은 순환사 및 뇌사 후 기증 후 얻은 기증자의 심장에도 사용할 수 있습니다.

기증자 심장 보존 전략을 테스트하기 위해 격리된 작업 쥐 심장 모델 사용

여기서 우리는 금 본위 것으로 보인다 orthotopic 쥐 뒷다리 - 사지 이식 절차를...

쥐에서 Orthotopic 힌드 - 림브 이식

학습하세요 쥐 심폐 바이패스 모델을 이용하여 수혈이나 이노트로픽 제제 없이 장기 합병증을 연구하는 방법을. 이 기법은 심혈관 수술의 합병증 예방 전략 개발에 기여합니다.

수혈 또는 쥐 Inotropic 에이전트 없이 복구 심폐 바이패스 모델

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