Name: 실험실 안정적인 파리와 다른 Muscoid Diptera의 양육 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-03T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min
Description: 학습하세요 Stomoxys calcitrans 안정파리 양육 방법을 간단한 4가지 재료 배지와 계란컵을 이용하여. 이 기술은 가축 해충 관리 연구와 비용 효율적인 실험실 사육에 필수적입니다.

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우리는 우리의 곤충 양육 절차를 개선 하기 위한 제안으로 기술 지원에 대 한 년 동안 우리와 함께 일 한 수많은 학생과 안토니 Weinhold 감사 하 고 싶습니다.

1. 달걀 컬렉션 (그림 1)
<ol><li>부추 기지 컵 준비, ~ 500 mL 비 커 (~ 40 ° C) 따뜻한 물으로 채워진 헝겊의 한쪽 끝을 놓으십시오. 컵의 양쪽을 중복 하 고 고무 밴드와 함께 해결. 컵 위에 다시 옷감의 느슨한 끝을 접어.</li>
	<li>안정적인 ~ 2 h. 벗 여성에 대 한 8-10 일 오래 된 파리의 장에 컵을 부추 기지 파리 장소는 옷감에 oviposit 것입니다.</li>
	<li>짜기 세척 병으로 작은 팬으로 egging 옷감의 장과 린스 계란에서 부추 기지 컵을 제거 합니다.</li>
</ol>2. 애벌레 양육 팬 준비
<ol><li>
매체 (수량 1 양육 팬에 대 한) 준비
	<ol>
<li>밀 밀기 울 (500 g), 나무 부스러기 (200 g) 및 10 L 플라스틱 접시 냄비에 생선 식사 (115 g)를 결합 하 고 잘 혼합.</li>
		<li>물 (25 ° C, 1600ml) 염화 중 탄산염 (50 g)를 추가 하 고 해산 때까지 섞는다.</li>
		<li>건조 재료와 아무 unwetted 소재 되도록 혼합 물 솔루션을 추가 합니다. 냄비에 매체 수준 하지만 압축 하지 마십시오.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
안정적인 비행 계란 추가
	<ol>
<li>팬의 길이 중간에 얕은 밭 고 랑을 확인 합니다.</li>
		<li>계란 피 펫 (그림 2)와 함께 밭 고 랑에서의 안정적인 비행 계란 (계란 ~ 8000) 1 mL를 입금. 참고: 플라스틱 졸업된 피펫으로 100 삽입 원하는 지점에서 절단 하 여 만든 계란 피 펫 메쉬 스크린 및 다시 함께 접착제로 붙이는 피 펫.</li>
		<li>계란을 건조를 방지 하기 위해 매체의 얇은 층으로 커버.</li>
		<li>베개 케이스 팬 커버, 고무 밴드와 라벨에 있습니다. 팬 애벌레 방에 배치 (23 ± 2 ° C, 30-50 %RH 및 12:12 [L:D] h photoperiod). 참고: 애벌레 개발 산란의 시간에서 10-14 일 걸립니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. 번데기 처리, 애벌레는 매체의 가장자리에 이동 7-9 일 후에 산란 Pupariate 13 또는 14 일
<ol><li>주로 밖으로 매체의 표면에 형성 하 고 깨끗 한 냄비에 배치 하는 빵 껍질 아래 팬의 가장자리 주위에, puparia 특 종.</li>
	<li>팬, puparia, ½에 ¾ 물을 가득 채우십시오. Puparia와 매체의 대단히 짧은 시간을 휴식. 매체의 밀 밀기 울 및 단백질 구성 요소 puparia 동안 싱크 > 1 일 오래 된 float19.</li>
	<li>부동, puparia 소재와 소 쿠리와 일련의 체 (#5, #7, #12, #20) 나머지 매체를 제거 하는 세척 일부 중간 구성 요소를 제거 합니다. #12 체는 puparia 수집 그리고 #20 구로 들어가기에서 고체 폐기물을 유지 합니다. 싱크 스프레이와 체 사이 puparia 워시.</li>
	<li>깨끗 한 냄비에, puparia #12 체에 린스. 물 ½ 전체 팬을 입력 합니다. 부동 puparia는 소 쿠리에 부 어 하 고 초과 물이 배수 수 있도록.</li>
	<li>전송 팬과 건조 화면 puparia 고갈이 고 드라이 (그림 3)까지 둡니다.</li>
</ol>4. 번데기 선반, Puparia 수집에 대 한 대체 방법 번데기 선반18 이다
참고: 선반에서에서 이루어집니다 플라스틱 컷의 조각 10 L 요리 팬 (길이 31.9 m x 세로 10.2 c m x 높이 10.2 c m)의 끝에서.
<ol><li>2.1에 설명 된 대로 매체를 준비 합니다. ~7.5 cm ~2.5 cm 깊이 한쪽에서 팬에 테이퍼 매체는 다른 깊이에.</li>
	<li>
양육 팬 및 선반 (그림 4)와 함께 크롤 링에서 애벌레를 방지 하기 위해 테이프의 얕은 끝에 중간에 선반을 배치.
	<ol>
<li>스폰지 (~14.5 x 9.0 x 4.5 c m3, 재생된 셀 룰 로스) 포화 (30.5 x 42 cm2, 면) 물 젖은 헝겊과 매체에서 한 반 인치 약 선반에 장소에 포장.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
2.2에 설명 된 대로 계란을 추가 하 고 진행 하기 전에.
	<ol>
<li>스폰지 유지 촉촉한 팬 매일 확인 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>선반, 스폰지 깨끗 한 접시에 천에서 린스 puparia 이동 및 산란 후 14 일 소 쿠리에 부 어.</li>
</ol>5입니다. 품질 관리
<ol><li>팬 (전체 무게)에서 생산 puparia의 모든 무게.</li>
	<li>100 puparia 격리, 무게 그리고 9 cm 배양 접시에에서 배치.</li>
	<li>수와 섹스 성인 ~ 5-8 일 후 출현 속도 섹스 비율을 결정. 필요한 경우 나중에 계산을 위해 냉동 실에 등장 성인 접시를 저장 합니다. 파리는 그들의 눈의 모양과 fronto 궤도 격판덮개20 또는 낮은 배율에서 생식 기의 너비에 의해 sexed.</li>
	<li>레코드 총 무게, 무게 100 puparia, 고 수가 등장된 성인 남성 및 여성.</li>
</ol>6. 혈액 준비
<ol><li>19 L 양동이 물 500 mL에 시트르산 나트륨 tribasic이 수화물의 70 g를 포함 하는 로컬 도살 장에서 신선한 소 혈액을 수집 합니다. 저 어 적극적으로 5-10 분 위한 혈액 및 실험실에 반환.</li>
	<li>제거 하는 소 쿠리를 통해 긴장 혈액 응고 하 고 수집 및 냉동 (-20 ° C)에서 저장소의 날짜와 레이블 2 L 용기에, 분할.</li>
	<li>냉동 고와 냉장고에 있는 장소에서 제거 컨테이너 2 일 전에 필요합니다. 피는 한번 해 동 하 고 최대 1 년 동안 냉동 실에 저장 ~ 2 주 동안 사용할 수 있습니다.</li>
</ol>7. 성인 유지 보수
<ol><li>감 금 소, 선 케이지 바닥 청소를 촉진 하기 위해 정육점 종이 준비.</li>
	<li>각 장에 50 g의 건조 안정적인 비행 pupae (~ 3500)를 배치 합니다. 성인 eclose 번데기 처리 후 며칠 몇 시간</li>
	<li>장소는 신선한 혈액 먹이 대 한 각 케이지 위에 여성 냅킨을 젖 었. 성인 일수로의 24 시간 안에 먹이 시작 하 고 산란 (출현 후 9-10 일) 전날까지 매일 반복 합니다.</li>
	<li>산란 (제 1), 후 케이지 4-8 h에 대 한 냉동 실에 놓고 종이 제거, frass 측면과 바닥 뜨거운 물에서 헹 구 고 세탁 세제와 염소 표 백제와 함께 모든 서피스를 제거 하 여 청소 합니다. 케이지 뜨거운 물으로 헹 구 고 건조 허용.</li>
</ol>

<ol><li>Cook, D. F., Dadour, I. R., Keals, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stable+fly%2C+house+fly+%28Diptera%3A+Muscidae%29%2C+and+other+nuisance+fly+development+in+poultry+litter+associated+with+horticultural+crop+production%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Econ.+Entomol%22%5BJournal%5D)">Stable fly, house fly (Diptera: Muscidae), and other nuisance fly development in poultry litter associated with horticultural crop production.</a> J. Econ. Entomol. 92 (6), 1352-1357 (1999).</li>
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</ol>

저자는 공개 없다.

안정적인 파리 있습니다 실제로 기판의 광범위 한 다양 한 개발 하 고 실험실에서 미디어의 많은 종류에 reared 수 있습니다. 나무 부스러기와 vermiculite bulking 요원으로 사용 했습니다. 질 석 작용, 하지만 어려운 매체 양육에서 분리 puparia 만들었고 비싼 (~$0.60/pan)를 했다. 아마이, puparia는 매체에서 분리의 추가 경직으로 인해 일수로 vermiculite, 나무 부스러기에 대 한 75% 57% 낮은 했다. 미루나무 부스러기 유사한 질 석, 어렵지만 때때로 조달 했다. 가장 중요 한 구성 요소는 식물 또는 cellulosic 자료를 발효 하 고 "열기" 또는 잘 화난 매체 및 암모니아 질소21,22를 유지 나타납니다. 안정 된 비행 거리 애벌레 순수한 배설물, 선호 하는 식물성 물질과 혼합 세 배설물에서에서 찾을 수 없습니다. 마음에 이러한 생각으로 여기에 설명 된 양육 절차 양육...

안정적인 파리, Stomoxys calcitrans (나), hematophagous 파리 그 고통 스러운 물린 가축 방목 동작을 방해, 통증을 유발 하 고 고통 동반자 동물 전세계 인간의 여가 활동을 중단 있습니다. 미 숙 안정 파리 발효 식물 문제, 동물 폐기물 오염 자주 개발. 변화 농경 관행 및 작물 생산 작물 잔류물, 호주1야채, 브라질2, 사탕수수와 파인애플 코스타리카3안정적인 파리의 심각한 발발. 동물 당 단지 14 안정 파리 경제 임계값4간주 됩니다, 비록 동물 당 2000 파리의 최근 발발5동안 했다. 이러한 감염 수준 가까운 0에 호스트 생산성을 감소 하 고 사망률6발생할 수 있습니다. Agronomically 관련된 발발 결과로 안정적인 파리 새롭게 관심을 받고 있다 고 실험실 식민지에 대 한 수요가 크게 증가 했다.
모든 holometamorphic 곤충에 관해서는 안정 파리 미 숙 또는 애벌레 단계에서 성장에 필요한 영양소의 모든 얻을. 따라서, 양육 시스템의 중요 한 요소는 애벌레 다이어트 또는 기판입니다. 안정적인 비행 거리 애벌레 관찰 되었습니다 필드7 에서 기판의 광범위 한 범위에서 개발 그리고 그들은 기판8,9의 미생물 지역 사회에 따라 결정 됩니다. 자연 애벌레 기판 분해 또는 자주 질소 폐기물 오염 식물 재료를 발효 주로 구성 됩니다.
실험실 양육에 대 한 안정적인 비행 거리 애벌레 기판 식물 재료와 소스를 추가 질소의 일반적으로 구성 됩니다. 수많은 자료 안정적인 비행 거리 애벌레 다이어트에 대 한 사용 되었습니다. 첫 번째 애벌레 다이어트 자연 기판 유사 하 고 귀리 밀 짚, 말 또는 암소 비료10,11발효 포함. 탄수화물 소스 밀 밀기 울12,,1314, 알 팔 파 식사12,,1314 등 상업 정립 화학 전문 개발 제조 업체 협회 (CSMA, 33% 밀 밀기 울, 27% 알 팔 파 식사, 맥주 효 모 40%과 립)13,14,,1516. 질소 소스 포함 효 모 현 탁 액12, 물고기 식사 및 염화 중 탄산염17. 불활성 bulking 자료 귀리 선체12, 사탕수수13, 질 석16, 나무 칩13,18 수송과 땅콩 선체14등이 다이어트에 자주 포함 됩니다.
실험실 양육의 기본 목표는 실험실 실험의 필드 인구를 반영 하는 결과 생산할 예정 이다 가능한 "강포한 유형"으로 순수와 유사한 제품을 생산 하는 것입니다. 이에 번 식 및 선택 최소화 될 필요 유지 유전자 다양성 및 영양 자원 필드에 비교 해야. 보조 목표는 노동과 비용을 최소화 하기 위해. 비용 최소화의 주요 구성 요소는 다이어트 로컬로 사용할 수 있는 구성 요소를 사용 하 여. 안정적인 비행 양육 시스템 제시는 이러한 목표를 충족 하기 위해 개발 되었다.

<table><tbody><tr><td>Diamalt</td><td>Premier Malt Products, Inc., Saddle Brook, NJ</td><td>2540</td><td></td></tr><tr><td>CSMA Fly media</td><td>Purina Animal Nutrition, Arden Hills, MN</td><td>5S6Z</td><td></td></tr><tr><td>Thin Maxi Pad</td><td>The Tranzonic Co., Cleveland, OH, USA</td><td>5001M</td><td></td></tr><tr><td>송아지 만나</td><td>MannaPro, 체스터필드, 미주리, 미국</td><td>만나 프로</td><td></td></tr><tr><td>암모늄 중탄산염</td><td>스펙트럼 화학 물질 Manufacturing Corp, Gardena, CA</td><td>A1125</td><td></td></tr><tr><td>밀기울, Coarse</td><td>Siemer Milling Company, Teutopolis, IL</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Wood shavings</td><td>Tractor Supply Company, Brentwood, TN</td><td>502770699</td><td></td></tr><tr><td>어분</td><td>소비자 공급 유통, North Sioux City, SD</td><td>F1550</td><td></td></tr><tr><td>성인 케이지</td><td>모든 알루미늄 창 회사, 링컨, Ne</td><td>사용자 정의</td><td>45 &회; 45 &회; 45cm, 18 &회; 16 메쉬 알루미늄 스크린, Stockinette 액세스</td></tr><tr><td>9 &times; 28cm 검은 면직물</td><td>Robert Kaufman Fabrics, Los Angeles, CA</td><td>K040-114</td><td>Egging 천</td></tr><tr><td>10 L 플라스틱 접시 팬</td><td>Rubbermaid, Saratoga Springs, NY</td><td>FG2951ARWHT</td><td>Larval 팬</td></tr><tr><td>Stockinette, Cotton, 12 inch x 25 yard roll</td><td>Tex-Care Medical Company, Burlington, NC</td><td>91311-225</td><td></td></tr></tbody></table>

실험실 안정적인 파리와 다른 muscoid diptera의 양육

Laboratory Rearing of Stable Flies and Other Muscoid Diptera

안정적인 파리, Stomoxys calcitrans, 가축, 인간, 동행자 동물 및 야생 동물 전세계의 심각한 해충 있습니다. 지난 20 + 년 동안, 농경 관행에 변화는 여러 국가에서 안정적인 파리의 심각한 발발에 결과. 이러한 발생 가축 생산 및 인간의 레크리에이션이이 해충에 대 한 연구 및 관리 노력을 증가 대 한 공개 요구의 결과로 중단. 실험실 연구에 대 한 안정적인 파리를 양육에 대 한 간단 하 고 저렴 한 절차 제공 됩니다. 절차는 로컬로 사용할 수 다이어트 부품, 장비 및 공급을 사용합니다. 절차는 얼굴 파리 (파리 자리 autumnalis), 경적 비행 거리 (Haematobia irritans), 그리고 집에서 파리 (파리 자리 부채)를 포함 하 여 다른 muscoid 파리를 양육에 대 한 적응 될 수 있다. 절차는 안정적인 비행 puparia 평균 12.5 mg와 ~ 35% 계란 성인 생존을 생성 합니다. 약 3000 파리 각 팬에서 생산 됩니다.

애벌레 pupariate 10-14 일 성인 등장 산란 후 14-16 일. 생성 시간, 달걀 계란, ~ 24 일 이다. 3 다른 bulking 요원와 두 식민지 5 월 2013 1 월 2017에 대 한 양육 데이터는 그림 5에 표시 됩니다. 미루나무 준 최고의 수익률, 3867 ±1442 (<img alt="Equation" src="/files/ftp_upload/57341/57341eq1.jpg"> ± 표준 편차) 무게 74 ±19% 일수로와 12.5 ±1.6 mg pupae 성인 설립된 실험실 식민지에 대 한 파리 2,872 ±1294 생산. 섹스 률은 약간 여성 0.97:1 (남성: 여성, 77,141 파리 1,184 팬에서 sexed) 쪽으로 편견. 성인 생존에 계란은 약 36%입니다. 불행히도, 미루나무 부스러기 소나무 부스러기를 자주 사용 하 게 강제를 더 어렵게 되고있다. 소나무와 생산은 낮은, 팬, ...

안정적인 파리 (Stomoxys calcitrans) 양육 절차 제공 됩니다. 절차는 다이어트 구성 요소, 장비 및 공급에 대 한 로컬 사용 가능한 재료를 사용합니다.

실험실 안정적인 파리와 다른 Muscoid Diptera의 양육

Stable flies, Stomoxys calcitrans, are serious pests of livestock, humans, companion animals and wildlife worldwide. During the last 20+ years, changes in ...

이 방법은 안정된 파리가 발달에 필요한 것과 같은 가축 곤충학의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 가장 큰 장점은 간단하다는 것입니다. 매체는 4가지 성분으로만 구성되어 있습니다.Stomoxys calcitrans 번식은 파리 주식에서 알을 모으는 것으로 시작됩니다. 여기에는 달걀 컵을 준비하는 것이 포함됩니다. 섭씨 40도의 물이 채워진 250ml 병에 천 끝을 담그십시오.그런 다음 헝겊으로 항아리 바깥쪽을 감싸고 고무 밴드로 천을 고정합니다. 물에 대한 접근을 제한하기 위해 용기 상단 위로 천의 느슨한 끝을 접습니다. 이제 이 컵을 8-10일 된 파리가 있는 우리에 넣으십시오.2시간이 지나면 임신한 암컷은 다음 세대를 위해 충분한 알을 산란할 것입니다. 일반적으로 2, 500 마리의 파리는 2 시간 내에 8-40, 000 개의 알을 생산합니다. 다음으로 물을 사용하여 달걀 천에서 계란을 헹구어 작고 빈 접시 팬에 넣습니다.이론적으로 알은 물에서 8시간에서 12시간 동안 생존할 수 있습니다. 그러나 시간을 5시간 이하로 제한하는 것이 가장 좋습니다. 알에서 유충을 기르려면 10리터 플라스틱 접시 팬에 신선한 플라이 미디엄을 만드십시오.그런 다음 계란을 위한 접시 팬의 길이를 따라 매체에 얕은 고랑을 만듭니다. 계란을 옮기려면 특수 계란 피펫을 만드십시오. 메쉬 스크린을 피펫에 삽입하여.원하는 위치에서 피펫을 절단하기만 하면 됩니다. 그리고 그 위치에서 100개의 메쉬 스크린을 피펫에 붙입니다. 그런 다음 계란 피펫을 사용하여 약 1ml의 계란을 모아 고랑에 넣습니다.이것은 약 8,000개의 알에 해당합니다. 그런 다음 계란이 건조되지 않도록 얇은 배지 층으로 계란을 덮습니다. 다음으로, 접시 팬을 표준면 베갯잇으로 덮고 고무 밴드로 고정합니다.접시 팬을 표준 사육 조건에서 유지하면 유충은 약 2주 안에 자랄 것입니다. 9일 이내에 유충은 매체의 가장자리로 이동하고 14일째에는 번데기가 될 것입니다. 많은 번데기는 음식 껍질 아래 접시 팬의 가장자리에서 찾을 수 있습니다.접시 팬에서 번데기를 정기적으로 퍼서 깨끗한 10리터 접시 팬에 옮깁니다. 번데기와 매체의 덩어리를 부수기 위해 물을 넣으십시오. 대부분의 음식은 가라앉고 번데기는 떠다닐 것입니다.모든 떠 다니는 물질을 체 더미로 옮기고 나머지 매체를 헹굽니다. 번데기는 숫자 12 체에 모일 것입니다. 번데기가 깨끗해 보일 때까지 헹군

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Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

Fopius arisanus 성공적으로 이러한 중요한 열대 해충의 생물 학적 제어에 사용되는 Tephritid 과일 파리의 달걀 애벌레 parasitoid입니다. 우리는 여기서 F.을 양육을위한 최적화된 프로토콜을 설명 쉽게 사용 가능한 재료를 사용하여 작은 규모 arisanus.

리어링을위한 최적화된 프로토콜 Fopius arisanus Tephritid 과일 Parasitoid 난다

우리는 자동으로 그리고 정확하게 검출 카운트, 그리고 그들의 비행 사운드에 기초하여 곤충 비행 분류 저렴 비침 가상 음향 광학 센서를 사용하는 시스템을 제안 하였다.

저렴한 센서와 곤충 검출 및 분류 플라잉

이 원고는 파리 개체군 케이지를 사용하여 정기적으로 Drosophila melanogaster 개체군을 배양하기 위한 자세한 프로토콜을 보고합니다.

(A)의 유지 보수<em&gt; 노랑 초파리</em&gt; 인구 케이지

무균 및 무균 조건에서 초파리 melanogaster의를 양육하는 방법이 제공된다. 플라이 배아는, 차아 염소산 나트륨에 dechorionated 멸균 다이어트에 무균 적으로 전송하고, 밀폐 용기에 양육된다. 박테리아와식이 요법과 배아를 접종은 무균 협회에 이르게하고, 세균의 존재는 전신 초파리 균질 도금에 의해 확인된다.

과일 비행을 양육<em&gt; 노랑 초파리</em&gt; 무균 및 무균 조건에서

이 절차의 전체 목표 설정, 유지 및 연구 설정에서 Eristalis tenax 의 포로 인구를 새로 것입니다.

양육 및 조사 연구에 대 한 Eristalis tenax Hoverflies의 유지 보수 장기

이 프로토콜 우리가 표준화 하 고 몇 년 동안 모기와 집 파리의 hemolymph를 직접 핵 산의 특정 수량을 제공 하는 데 사용 하는 microinjection 방법을 설명 합니다. 이 프로토콜 최소 주입 죽음 귀착되 고 통치의 복용량 상관 측정을 허용 한다.

재현할 수 dsRNA Microinjection 및 산란 검정 집 파리 모기에

우리는 모기와 초파리에서 살충제 감수성을 측정하기위한 국소 적용 생물 분석의 방법론과 중요성을 설명합니다. 제시된 분석은 높은 처리량이며, 곤충 질량을 이용한다 - 따라서 농도 대신에 질량-상대화된 치사량을 계산할 수 있게 한다-그리고 다른 유사한 방법들보다 더 낮은 가변성을 가질 가능성이 있다.

모기 및 초파리에 대한 살충제 독성을 정량화하기위한 국소 응용 생물 검정

이 논문은 Lower dipteran fly Bradysia (Sciara) coprophila의 실험실 유지 관리 (짝짓기 및 먹이 포함)를 간략하게 설명합니다.

Lower Dipteran Fly Bradysia (Sciara) coprophila의 실험실 유지 보수 : 새로운 / 오래된 신흥 모델 유기체

본 논문은 동물 사육, 알 처리, 부화 후 관리, 대표적인 성능 지표 및 해당 종의 수명과 생물학적 특성에 대한 개요를 포함하여 Carausius morosus 실험실 군락을 유지하기 위한 상세 프로토콜을 설명합니다.

실험실 환경 내 Carausius morosus (Phasmatodea, Insecta) 사육을 위한 표준화된 프로토콜

자연과 실험실에서 미생물 커뮤니티 - 인터뷰

학습하세요 Stomoxys calcitrans 안정파리 양육 방법을 간단한 4가지 재료 배지와 계란컵을 이용하여. 이 기술은 가축 해충 관리 연구와 비용 효율적인 실험실 사육에 필수적입니다.

실험실 안정적인 파리와 다른 Muscoid Diptera의 양육

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