Name: 플라즈마 응고는 큰 동물 모델에서 에서 Vivo에서 간 조직에의 평가 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-04T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 23 s
Description: 배우세요 돼지 모델을 활용한 간 조직의 플라즈마 응고 평가 방법입니다. 레이저 도플러와 적외선 열화상 카메라로 미세순환 및 온도를 측정하며, 에너지 설정과 응고 깊이의 상관관계를 분석합니다. 이 기법은 임상 간 수술 연구에 활용됩니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

저자 아무 승인 있다.

동물 연구로 원리의 실험실 동물 관리 (건강의 국가 학회 간행물 출간: 8, 2011 년) 독일 입법에 의해 경 세 하는 규칙을 따라 했다. 공식 허가 정부 동물 관리 사무실 (Landesamt 위한 Natur, Umwelt und Verbraucherschutz 노르 트 베스트 팔 렌, Recklinghausen, 독일)에서 부여 됩니다.
1입니다. 동물
<ol><li>열린 감 금 소에 여성 독일 landrace 돼지 (25-30 kg 무게)를 사용 합니다.</li>
	<li>그룹 (아르곤과 헬륨) 당 5 동물을 사용 합니다.</li>
	<li>실험 하기 전에 적어도 1 주일에 대 한 환경에 순응을 동물 허용. 물에 대 한 무료 액세스와 함께 수술 이전 24 시간에 대 한 빠른 동물.</li>
</ol>2입니다. 마 취
<ol><li>Premedicate 동물 마 취 제 (15 mg/kg 몸 무게 [BW]), xylazine (10 mg/kg BW), 및 아트로핀 (0.1 mg/kg BW) 근육 주사와 마 취의 유도 하기 전에 10 분.</li>
	<li>주변 정 맥 접근 배치 22 게이지 정의 귀 정 맥에 의해 설정 됩니다.</li>
	<li>Propofol 2 mg/kg 체중의 i.v. 주입 하 여 전신 마 취를 유도.</li>
	<li>부정사 위치에 동물을 놓고 2 cm. 피하 조직의 무딘 준비를 통해 정 맥 찾기의 길이 jugular 홈에 경도 피부 절 개를 수행 합니다. 정, 다음 Seldinger 와이어를 삽입 합니다.</li>
	<li>정을 철회 하 고 가이드를 통해 14 백. 카 테 터를 삽입 합니다. 가이드 와이어를 철회. 카 테 터는 내선 번호로 연결 하 고 스트랩 또는 봉합 하 여 카 테 터를 흥분 시키는.</li>
	<li>바로 후 두 경 삽입를 혀 밖으로 당기고. 풀 다운은 후두개는 후 두 경의 팁을 사용 합니다. 성 대를 통해 튜브를 삽입 합니다. Glottis 아래 갑을 놓고 팽창 합니다.</li>
	<li>36와 42 mm Hg 사이 끝 갯벌 부분 탄소 이산화 긴장을 유지 하 20-26 호흡/min과 10 ml/kg의 해 일 볼륨에서 40% 산소로 환기.</li>
	<li>1-1.5%의 농도에서 isoflurane와 3-4 µ g/k g/h의 농도에 펜타닐 마 취를 유지 합니다.</li>
	<li>4 mL/kg의 초기 속도로 벨의 젖 산 솔루션 공급/h, 8 mL/kg의 일정 한 주입 속도에 개복 술 후 증가/h.</li>
</ol>3. 수술 및 플라즈마 응고
<ol><li>표준 수술 테이블에 부정사 위치에 동물을 배치 합니다.</li>
	<li>표준 외과 살 균 제를 적용 하 여 피부를 소독 (2-프로 판 올 45 g/100 g, 1-프로 판 올 10 g/100 g, 비페닐-2-ol 0.2 g/100 g) 3 번 수술 면봉으로.</li>
	<li>메스와 액을 넓은 중간 선 개복 술 칼 프로세스에서 수행 하 고 외과 견인 기를 설치.</li>
	<li>플라즈마 응고 장치에 스위치, 아르곤 또는 헬륨 가스 병 사용된 캐리어 가스에 따라 오픈. 원하는 대로 3 L/분 선택 응고 장치 출력 전력에 가스 흐름을 조정 합니다. 참고: 두 노블 가스, 아르곤 또는 헬륨, 플라즈마 응고에 대 한 사용할 수 있습니다. 응고 효과 비교할 수 있습니다. 자세한 내용은 참조7 를 참조 하십시오.</li>
	<li>앞에서 설명한7왼쪽된 간 엽에 플라즈마 응고를 수행 합니다. 티타늄 형 (사각 조리개 1 x 1 c m2)를 사용 하 여 응고 영역을 표준화. 5 응고 프로브 거리 1 cm의 s. 5 mm (그림 1)의 coagulations 사이의 짧은 거리와 다른 전원 설정을 coagulations는 수행할 수 있습니다.</li>
	<li>간의 수확에 대 한 모든 인 대 연결 간을 나눕니다. 분리 하 고 문맥 및 일반적인 담 관의 긴 부분을 떠나 우수한 십이지 장 굴곡 위 간 작은 꽃 자루를 나눕니다. 위와 간 아래 caval 정 맥을 분할 하 고 기관 검색.</li>
	<li>간, 수확 후 돼지 0.16 g/kg BW pentobarbital i.v. 관리에 의해 안락사 되었다.</li>
	<li>버스트 압력 실험에 대 한 날카로운가 위 왼쪽된 중간 간 엽의 절반을 resect. 플라즈마 응고 컷 (100W 출력) 표면 또는 섬유 소 실 란 트 (그림 2)와 함께 잘라 표면 밀봉.</li>
</ol>4. 미세 측정
참고: 레이저 도플러 분광학은 적혈구의 움직임으로 인 한 도플러 이동 측정을 통해 조직에 혈액 흐름을 확인할 수 있습니다. 레이저 신호 이동 적혈구의 수와 상관 한다. 레이저 도플러 분광학 임상 사용 (예: 이식 의학)과 여러 번15확인.
<ol><li>레이저 도플러 유량 계 및 분 광 광도 계에 전환 합니다. 플랫 프로브를 사용 합니다.</li>
	<li>흐름 및 속도 대 한 기준 측정을 가져가 라. 저장 하거나 값을 확인 합니다.</li>
	<li>3.5에서 설명 된 대로 응고를 수행 합니다.</li>
	<li>응고 사이트 및 측정 흐름 및 속도에 플랫 프로브를 배치 합니다. 다시 저장 하거나 값을 참고 합니다.</li>
	<li>Coagulator 장치의 모든 전원 설정에 대 한 반복 합니다.</li>
</ol>5. 온도 측정
<ol><li>(열감지 카메라, 노트북, 및 적외선 온도계)에 시스템을 전환 하 고 측정을 수행 하기 전에 적어도 1 시간 동안 실행 하자.</li>
	<li>초점을 조정 하 고 응고 사이트에 열감지 카메라에 프레임을 봅니다. 20 보다 더 큰 온도 해상도 1024 x 768 픽셀의 해상도와 적외선 시퀀스를 검출 될 수 있다 mK. 고려, 그 응고와 주변 조직의 지역-열 전달에 의해 영향을-보기 중간에 위치 하 고 있습니다. 참고: 그것은 가능한 최적 공간 해상도 대 한 프레임의 픽셀을 포함 해야 합니다.</li>
	<li>2 분 동안 열감지 카메라와 함께 간 표면에 플라즈마 coagulator과 응고 과정을 기록 합니다.</li>
	<li>온도 기록 분석 소프트웨어와 함께 이미지 시퀀스 분석: 관심의 영역을 정의. 참고: 소프트웨어 시간 해당 평균 온도 과정을 계산합니다.</li>
</ol>6. 응고 깊이 측정
<ol><li>날카로운가 위 왼쪽된 중간 간 엽 수확.</li>
	<li>1 cm 두께가 응고 사이트를 삭제할. 추가 처리를 위해 3 m m 두꺼운 경도 세그먼트를 잘라.</li>
	<li>밤새 중립 10%와 4 ° C에서 수정 조직 샘플 버퍼링 말린. 열 용융 점 이상 2 ° C 파라핀 하 고 분할 영역을 포함. 프로세스 하룻밤입니다.</li>
	<li>되며/오신 얼룩을 수행 합니다.<ol>
<li>Deparaffinize 및 이후 2에 담거 서 조직을 수 화 x 크 실 렌, 100% 에탄올 (EtOH), 95 %EtOH, 70 %EtOH, 이온된 H2O 2 분.</li>
		<li>3 분 위한 마이어의 되며 솔루션 조직 샘플을 얼룩.</li>
		<li>이제 5 분 동안 수돗물에 씻어.</li>
		<li>3 분 오신 솔루션 조직 얼룩.</li>
		<li>3 분 2 x EtOH 95% 그리고 크 실 렌에 린스. 표준 설치 매체와 함께 탑재.</li>
	</ol>
</li>
	<li>(현미경 연결 된 카메라, 이미징 소프트웨어)에 시스템을 전환 합니다. 40 X 확대와 함께 모든 섹션을 보기.</li>
	<li>40 X의 확대는 개체 마이크로미터의 이미지를 가져가 라. 재조정 목표 창에서 버튼을 누릅니다. 수동 보정을 선택 합니다. 100 µ m. 대화 상자에서 m m 입력 0, 1 마이크로미터 이미지에 라인을 그릴 하 고 확인을 누릅니다.</li>
	<li>보기에서 길이 선택 > 분석 컨트롤 > 주석 및 측정 창. 마우스로 응고 여백에 간 표면에서 측정 합니다. 내보내기 또는 결과 참고. 같은 슬라이드에 다른 위치에 측정을 반복 합니다. 참고: 응고 깊이 쉽게 정상적인 hepatocyte 코드와 수축 된 세포질, pyknotic 핵 및 출혈 영역 괴의 영역 사이의 날카로운 차이로 정상적인 간 조직에서 분화 될 수 있다.</li>
	<li>두 측정의 평균을 계산 합니다.</li>
</ol>7. 버스트 압력 측정
<ol><li>(자동 펌프, 압력 미터)에 시스템을 전환 합니다. 3.7 단계에 따라 간 견본을 준비 합니다. 참고: 3-방법-자 지를 통해 연결 된 두 개의 병렬 펌프를 사용 합니다. 1500 mm Hg의 최대 압력은 단일 펌프와 함께 얻을 수 없습니다.</li>
	<li>햅 틱 작은 꽃 자루가 위 문맥, 일반적인 간 동맥 및 담 즙 덕트를 격리 합니다. 문맥 overholt 집게와 클램프와 monofil 봉합 4-0와 선. 일반적인 간 동맥 overholt 집게를 죄 십시오 그리고 monofil 봉합 4-0와 선.</li>
	<li>일반적인 담 관으로 채널 16 카 테 터를 삽입 하 고 2-0 비단 봉합 사로 선. 자동 펌프 카 테 터를 연결, 압력 미터 (그림 3)와 함께 3 자 지를 설치 합니다.</li>
	<li>식 염 수로 관류 주사기를 채우십시오.</li>
	<li>99 mL/h의 배달 속도와 자동 펌프를 시작 합니다.</li>
	<li>버스트 압력 누설 및 기록에 대 한 잘라 간 표면과 압력 미터를 모니터링 합니다. 참고: 누설의 더 쉬운 인식을 위해 특허 블루는 식 염 수 (2 mL 특허 블루 + 18 mL 식 염 수)을 추가할 수 있습니다. 버스트 압력 압력 미터에 압력의 손실의 시간을 주의 하 여 관찰 하는 것이 쉽습니다.</li>
</ol>

<ol><li>Link, W. J., Incropera, F. P., Glover, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+plasma+scalpel%3A+comparison+of+tissue+damage+and+wound+healing+with+electrosurgical+and+steel+scalpels%5BTitle%5D)+AND+%22ArchSurg%22%5BJournal%5D)">A plasma scalpel: comparison of tissue damage and wound healing with electrosurgical and steel scalpels.</a> ArchSurg. 111, 392-397 (1976).</li>
<li>Kwon, A. H., Inui, H., Kamiyama, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+laparoscopic+haemostasis+using+an+argon+beam+coagulator+for+blunt+traumatic+splenic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22EurJSurg%22%5BJournal%5D)">Successful laparoscopic haemostasis using an argon beam coagulator for blunt traumatic splenic injury.</a> EurJSurg. 167, 316-318 (2001).</li>
<li>Frilling, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effectiveness+of+a+new+carrier-bound+fibrin+sealant+versus+argon+beamer+as+haemostatic+agent+during+liver+resection%3A+a+randomised+prospective+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Langenbecks+ArchSurg%22%5BJournal%5D)">Effectiveness of a new carrier-bound fibrin sealant versus argon beamer as haemostatic agent during liver resection: a randomised prospective trial.</a> Langenbecks ArchSurg. 390, 114-120 (2005).</li>
<li>Raiser, J., Zenker, M. <a target="_blank" href="http://iopscience.iop.org/article/10.1088/0022-3727/39/16/S10/pdf">Argon plasma coagulation for open surgical and endoscopic applications: state of the art.</a> J Phys Appl Phys. 39 (16), 3520-3523 (2006).</li>
<li>Farin, G., Grund, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technology+of+argon+plasma+coagulation+with+particular+regard+to+endoscopic+applications%5BTitle%5D)+AND+%22EndoscSurgAllied+Technol%22%5BJournal%5D)">Technology of argon plasma coagulation with particular regard to endoscopic applications.</a> EndoscSurgAllied Technol. 2, 71-77 (1994).</li>
<li>Grund, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Argon+plasma+coagulation+%28APC%29%3A+ballyhoo+or+breakthrough%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Endoscopy%22%5BJournal%5D)">Argon plasma coagulation (APC): ballyhoo or breakthrough?</a> Endoscopy. 29, 196-198 (1997).</li>
<li>Glowka, T. R., Standop, J., Paschenda, P., Czaplik, M., Kalff, J. C., Tolba, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Argon+and+helium+plasma+coagulation+of+porcine+liver+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J+Int+Med+Res%22%5BJournal%5D)">Argon and helium plasma coagulation of porcine liver tissue.</a> J Int Med Res. , (2017).</li>
<li>Dowling, R. D., Ochoa, J., Yousem, S. A., Peitzman, A., Udekwu, A. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Argon+beam+coagulation+is+superior+to+conventional+techniques+in+repair+of+experimental+splenic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22JTrauma%22%5BJournal%5D)">Argon beam coagulation is superior to conventional techniques in repair of experimental splenic injury.</a> JTrauma. 31, 717-720 (1991).</li>
<li>Go, P. M., Goodman, G. R., Bruhn, E. W., Hunter, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+argon+beam+coagulator+provides+rapid+hemostasis+of+experimental+hepatic+and+splenic+hemorrhage+in+anticoagulated+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22JTrauma%22%5BJournal%5D)">The argon beam coagulator provides rapid hemostasis of experimental hepatic and splenic hemorrhage in anticoagulated dogs.</a> JTrauma. 31, 1294-1300 (1991).</li>
<li>Brand, C. U., Blum, A., Schlegel, A., Farin, G., Garbe, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+argon+plasma+coagulation+in+skin+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Dermatology%22%5BJournal%5D)">Application of argon plasma coagulation in skin surgery.</a> Dermatology. 197, 152-157 (1998).</li>
<li>Carus, T., Rackebrandt, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collateral+tissue+damage+by+several+types+of+coagulation+%28monopolar%2C+bipolar%2C+cold+plasma+and+ultrasonic%29+in+a+minimally+invasive%2C+perfused+liver+model%5BTitle%5D)+AND+%22ISRNSurg%22%5BJournal%5D)">Collateral tissue damage by several types of coagulation (monopolar, bipolar, cold plasma and ultrasonic) in a minimally invasive, perfused liver model.</a> ISRNSurg. , 518924(2011).</li>
<li>Bludau, M., Vallbohmer, D., Gutschow, C., Holscher, A. H., Schroder, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+measurement+of+gastric+mucosal+microcirculation+using+a+combined+laser+Doppler+flowmeter+and+spectrophotometer%5BTitle%5D)+AND+%22DisEsophagus%22%5BJournal%5D)">Quantitative measurement of gastric mucosal microcirculation using a combined laser Doppler flowmeter and spectrophotometer.</a> DisEsophagus. , (2008).</li>
<li>Beckert, S., Witte, M. B., Konigsrainer, A., Coerper, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+the+Micro-Lightguide+O2C+for+the+quantification+of+tissue+ischemia+in+diabetic+foot+ulcers%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">The impact of the Micro-Lightguide O2C for the quantification of tissue ischemia in diabetic foot ulcers.</a> Diabetes Care. 27, 2863-2867 (2004).</li>
<li>Erdogan, D., de Graaf, W., van Gulik, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adhesive+strength+of+fibrinogen-coated+collagen+patch+or+liquid+fibrin+sealant+in+an+experimental+liver+resection+model+in+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Surg+Res+Eur+Chir+Forsch+Rech+Chir+Eur%22%5BJournal%5D)">Adhesive strength of fibrinogen-coated collagen patch or liquid fibrin sealant in an experimental liver resection model in pigs.</a> Eur Surg Res Eur Chir Forsch Rech Chir Eur. 41 (3), 298-302 (2008).</li>
<li>Knobloch, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microcirculation+of+the+sternum+following+harvesting+of+the+left+internal+mammary+artery%5BTitle%5D)+AND+%22ThoracCardiovascSurg%22%5BJournal%5D)">Microcirculation of the sternum following harvesting of the left internal mammary artery.</a> ThoracCardiovascSurg. 51, 255-259 (2003).</li>
<li>Kanzler, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendation+for+severity+assessment+following+liver+resection+and+liver+transplantation+in+rats%3A+Part+I%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Recommendation for severity assessment following liver resection and liver transplantation in rats: Part I.</a> Lab Anim. 50 (6), 459-467 (2016).</li>
<li>Pehböck, D., Dietrich, H., Klima, G., Paal, P., Lindner, K. H., Wenzel, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anesthesia+in+swine+optimizing+a+laboratory+model+to+optimize+translational+research%5BTitle%5D)+AND+%22Anaesthesist%22%5BJournal%5D)">Anesthesia in swine optimizing a laboratory model to optimize translational research.</a> Anaesthesist. 64 (1), 65-70 (2015).</li>
<li>Nykonenko, A., Vávra, P., Zonča, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anatomic+Peculiarities+of+Pig+and+Human+Liver%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Transplant+Off+J+Middle+East+Soc+Organ+Transplant%22%5BJournal%5D)">Anatomic Peculiarities of Pig and Human Liver.</a> Exp Clin Transplant Off J Middle East Soc Organ Transplant. 15 (1), 21-26 (2017).</li>
<li>Fechner, G., von Pezold, J., Luzar, O., Hauser, S., Tolba, R. H., Müller, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modified+spectrometry+%28O2C+device%29+of+intraoperative+microperfusion+predicts+organ+function+after+kidney+transplantation%3A+a+pilot+study%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Modified spectrometry (O2C device) of intraoperative microperfusion predicts organ function after kidney transplantation: a pilot study.</a> Transplant Proc. 41 (9), 3575-3579 (2009).</li>
<li>Patterson, E. J., Scudamore, C. H., Owen, D. A., Nagy, A. G., Buczkowski, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiofrequency+ablation+of+porcine+liver+in+vivo%3A+effects+of+blood+flow+and+treatment+time+on+lesion+size%5BTitle%5D)+AND+%22AnnSurg%22%5BJournal%5D)">Radiofrequency ablation of porcine liver in vivo: effects of blood flow and treatment time on lesion size.</a> AnnSurg. 227, 559-565 (1998).</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

설치류 모델 간 수술에 대 한 오랜 시간16에 대 한 설정 됩니다. 그럼에도 불구 하 고, 큰 동물 모델 특정 이점을 제공:로 적용할 수 있는 인 간에 대 한 표준 수술 장비, 수술 기법 비교 임상 사용 표준 임상 평가 방법 수 없음 microsurgical 장비 필요 전송 실험. 예를 들어 표준 임상 혈액 검사 특별 한 실험실 테스트 방법 (그림 10)에 대 한 필요 없이 수행할 수 있습니다.
돼지는 심폐 연구에 대 한 적절 한 실험실 동물 그들의 생리학에 대 한 유사 인간17. 크기, 단편 구조 및 조직학 유사성 때문에 돼지는 또한 실험적인 간 수술18에 대 한 표준 실험실 동물 중 하나. 플라즈마 응고는 혜택 (유사 인간 생리학 및 표준 임상 장비 평가)7</su...

아르곤 플라즈마 응고 (APC) 3 년간1,2보다 더 복 부 수술에서 널리 사용 되는 악기 이다. 그것은 이차 hemostasis의 성취에 대 한 표준 기술 간 씰링 하 여 주요 hepatectomy 잘라 나중 출혈3을 방지 하기 위해 표면. 플라즈마 응고는 이온화 가스의 아크를 통해 전기 에너지를 전달 하는 고주파 electrocautery의 특수 형태 이다. Monopolar electrothermal hemostasis, 제공이 비접촉 기술 조직4에 충실 하는 전극 방지의 이점이 있다. 이온화 가스 빔 자동으로 낮은 전기 저항 지역으로 이동 하 고 아직 포장해 다른 지역에 건조로 인해 저항 상승 때 멀리 설정 되어. 이 응고5,6의 균일 한 제한 된 깊이 생성합니다. 응고 효과 영향을 미치는 요소는 활성화 시간, 응고 장치 및 조직에는 프로브에서 거리의 전원 설정. 헬륨은 플라즈마 응고7사용할 수 있는 다른 캐리어 가스 이다. 최근 임상 연구에 집중된 임상 결과 보다는 조직학 및 기능적인 결과3,8,9, 체 외에서 조사10에 초점을 맞춘 실험 연구 하면서 또는 격리 끼얹는다 장기11에 실험.
기본 프로토콜 돼지에 인간 표준 장비를 사용 하 여 임상 응용에 가까운 큰 동물 모델에서 플라즈마 응고의 효과의 연구를 수 있습니다: 레이저 도플러 유량 계에 의해 미세 noninvasively 평가 및 분 광 광도 계,이 표시12,13표준 임상 도구입니다. 응고 하는 동안 온도 변화를 적외선 온도계와 열감지 카메라 모니터링 된다. 조직학 되며/오신의 조직 샘플의 수확 후 섹션 스테인드 응고의 깊이 측정 됩니다. 이차 hemostasis에 대 한 다른 방법 가진 비교에 대 한 파열 압력 실험 수행 됩니다. 앞에서 설명한 기법14, 달리 이러한 혈압 제외 explanted 장기에 실시 하는 효과 관련. 플라즈마 응고의 로컬 효과에 설명된 조사, 뿐만 아니라 돼지 모델에서 또한 표준 혈액 검사를 맡아 수 있다.

<table><tbody><tr><td>자일라진 20 mg/mL</td><td>Vetoquinol GmbH</td><td>Xylapan</td><td></td></tr><tr><td>케타민 100 mg/mL</td><td>Ceva GmbH</td><td>Ceva 케타민 주사</td><td></td></tr><tr><td>아트로핀 100 mg / 10 mL</td><td>Dr. Franz K&ouml; hler Chemie GmbH</td><td>아트로핀설파트 K&ouml; hler 100mg 앰프.</td><td></td></tr><tr><td>프로포폴</td><td>Fresenius Kabi GmbH</td><td>프로포폴 1% MCT Fresenius</td><td></td></tr><tr><td>펜타닐</td><td>KG Rotexmedica GmbH</td><td>펜타닐 0,5mg Rotexmedica</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Abbot GmbH</td><td>Forene 100% (V/V) 250 mL</td><td></td></tr><tr><td>Ringer's lactate solution</td><td>Baxter Deutschland GmbH</td><td></td><td>나트륨 131mmol/l, 칼륨 5 mmol/l, 칼슘 2 mmol/l, 클로라이드 111 mmol/l, 젖산 29 mmol/l</td></tr><tr><td>외과 disinfactant</td><td>Sch &uuml; LKE & Mayr GmbH</td><td>Kodan Tinktur forte gef&auml; rbt 1l 104804</td><td></td></tr><tr><td>전동 현미경</td><td>Nikon Instruments Europe</td><td>Eclipse TE2000-E</td><td></td></tr><tr><td>현미경 카메라</td><td>Nikon Instruments Europe</td><td>Digitalsight DS-Qi1Mc</td><td></td></tr><tr><td>이미징 소프트웨어</td><td>Nikon Instruments Europe</td><td>NIS 요소 Vers. 4.40</td><td></td></tr><tr><td>플라즈마 응고기</td><td>S&ouml; ring GmbH</td><td>CPC-1000</td><td></td></tr><tr><td>아르곤 가스</td><td>Linde AG</td><td>아르곤 4.8&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>헬륨 가스</td><td>Linde AG</td><td>Helium 4.8</td><td></td></tr><tr><td>O2C</td><td>LEA Medizintechnik GmbH</td><td>O2C 버전 1212</td>(<td>LF-2 또는 LF-3 프로브 포함</td></tr><tr><td>) 적외선 온도계</td><td>Voltcraft</td><td>VOLTCRAFT IR 260-8S</td><td></td></tr><tr><td>열화상 카메라</td><td>InfraTec GmbH</td><td>VarioCAM HD head 820</td><td></td></tr><tr><td>열화상 분석 소프트웨어</td><td>InfraTec GmbH</td><td>IRBIS 3</td><td></td></tr><tr><td>Mayer의 Hematoxylin 솔루션</td><td></td><td>Merck 1.09249</td><td></td></tr><tr><td>Eosin 솔루션</td><td>VWR International GmbH</td><td>Merck 1.09844</td><td></td></tr><tr><td>롤러 펌프 Masterflex L / S easy Load</td><td>Cole-Parmer Instrument Company</td><td>모델 7518-10</td><td></td></tr><tr><td>Perfusorpump</td><td>B. Braun Melsungen AG</td><td>Perfusor secura FT</td><td></td></tr><tr><td>디지털 압력 미터</td><td>Greisinger 전자</td><td>GMH 3161</td><td></td></tr><tr><td>퍼퓨저 린지, 50 mL</td><td>B. 브라운 Melsungen AG</td><td>REF 8728810 F</td><td></td></tr><tr><td>퍼퓨저 라인, 유형 IV 표준, PVC 루어 잠금</td><td>B. 브라운 Melsungen AG</td><td>REF 8722960</td><td></td></tr><tr><td>3-Way 스톱콕, Dicofix C35C</td><td>B. Braun Melsungen AG</td><td>REF 16494 C</td><td></td></tr><tr><td>실크 2-0. 3 미터</td><td>Resorba</td><td>REF H5F</td><td></td></tr><tr><td>Vicryl 4-0 Sutupak</td><td>Ethicon</td><td>V1224H</td><td></td></tr><tr><td>NaCl 0.9 %</td><td>B. 브라운 Melsungen AG</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

플라즈마 응고는 큰 동물 모델에서 에서 vivo에서 간 조직에의 평가

Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo

플라즈마 응고 electrocautery의 형태로 나중 단계에서 출혈을 방지 하기 위해 주요 hepatectomy 후 큰 간 잘라 표면 밀봉 수십 년 간 수술에 사용 됩니다. 간 조직에 플라즈마 응고의 정확한 효과 가난 하 게 검사 합니다. 우리의 돼지 모델에서 응고 효과 임상 응용 프로그램에 가까운 시험 될 수 있다. 결합 된 레이저 도플러 유량 계 및 분 광 광도 계 문서 미세 변경 8 m m 조직 깊이에서 응고 하는 동안 noninvasively, 주관적인 임상 인상 넘어 hemostasis에 대 한 정량 정보를 제공 합니다. 응고 사이트에서 온도 응고 하는 동안 적외선 온도계 사전 및 사후 응고와 열감지 카메라 평가, 가스 빔 온도 측정 소자의 상한값 때문에 가능 하지 않습니다. 응고의 깊이 되며/오신 교정 후 개체 마이크로미터 섹션을 물 들일에 현미경으로 측정 되 고 전원 설정-응고 깊이 관계에 대 한 정확한 정보를 제공. 그것은 큰 혈관을 밀봉 하기 위하여 플라즈마 coagulator 불가능으로 씰링 효과 담 관에 시험 된다. 버스트 압력 실험 수행 됩니다 밖으로 배제 혈압 explanted 장기 효과 관련.

미세: 플라즈마 응고 다음 hemostasis 위한 진단 장치를 활용 하 여 미세 혈관 변화에 의해 설명할 수 있습니다. 142.7 ± 76.08의 기준 값에서 모 세관 혈액 흐름 (임의의 단위 (AU)로 표시) 감소 57.78 ± 49.57 하는 누구나 48.5 ± 7.26에 25 W 장치 출력 전력, AU AU 50 W와 5.04 ± 1.31 AU 100 W (그림 4).
온도: 열감지 카메라 (그림 5)와 함께 응고 사이트에서 온도 측정 했다. 단지 사소한 온도 변화를 적외선 온도계로 문서화 되었다. 그것은 보여주었다 32.42 ±의 기준 온도 2.27 ° c. 25 W 응고, 후 온도 33....

여기 선물이 비보에간 조직에 플라즈마 응고를 실험적으로 평가 하는 프로토콜. 돼지 모델에서 미세 레이저 도플러 검사, 응고 깊이 조직학 측정, 온도 적외선 온도계와 열감지 카메라와 덕트 씰링 효과 의해 응고 사이트에서 버스트 압력에 의해 문서화 실험입니다.

플라즈마 응고는 큰 동물 모델에서 에서 Vivo에서 간 조직에의 평가

Plasma coagulation as a form of electrocautery is used in liver surgery for decades to seal the large liver cut surface after major hepatectomy to prevent ...

이 방법은 에너지 설정, 아르곤과 헬륨 플라즈마 응고의 깊이 관계, 플라즈마 응고 과정 자체에 대한 임상 간 수술 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 대형 동물 모델이 임상 적용과 유사하고 특별한 장비가 필요하지 않다는 것입니다. 적외선 열화상 촬영은 온도 분포 및 온도 감소를 모니터링하는 데 사용할 수 있을 뿐만 아니라 호흡 속도 및 파이를 모니터링하는 데에도 사용할 수 있습니다.또한 염증 과정은 적외선 서모그래피로 모니터링할 수 있습니다. 절차를 시연하는 것은 우리 그룹의 기술자인 Pascal Paschenda가 맡을 것입니다. 절차를 시작하기 최소 1시간 전에 열화상 카메라 노트북과 적외선 온도계를 켜십시오.장비가 준비되면 마취된 25-30kg의 암컷 독일 재래돼지를 표준 수술대 위에 누운 자세로 놓고 표준 수술용 면봉을 사용하여 표준 수술용 소독제로 수술 부위를 세 번 소독합니다. 그런 다음 메스를 사용하여 xiphoid process에서 치골까지 넓은 정중선 개복술을 만들고 외과적 견인기를 설치하여 간 조직을 노출시킵니다. 기준선 미세순환 측정을 얻으려면 레이저 도플러 유량계와 분광 광도계를 켜고 평면 프로브를 사용하여 유량과 속도를 측정합니다.그런 다음 플라즈마 응고 장치를 켜고 적절한 캐리어 가스통을 열고 가스 흐름을 분당 3리터로 조정합니다. 적절한 응고 장치 출력 전력을 선택하고 응고 영역을 표준화하기 위해 1 x 1 평방 센티미터의 정사각형 조리개를 가진 티타늄 금형을 사용하십시오. 그런 다음 1cm 프로브 거리를 사용하여 5초 동안 영역을 응고시킵니다.응고 후 미세순환을 측정하려면 각 응고 부위에 플랫 프로브를 배치하여 각 부위의 흐름과 속도를 측정합니다. 각 부위의 온도를 측정하려면 열화상 카메라의 초점을 조정하고 열을 전달하는 응고 영역과 주변 조직이 시야의 중앙에 위치하도록 첫 번째 응고 부위 위에 프레임을 설정합니다. 간 표면의 혈장 응고체를 사용한 응고 과정을 2분 동안 열화상 카메라로 기록합니다.그런 다음 적절한 서모그래피 분석 소프트웨어를 사용하여 이미지 시퀀스를 분석합니다. 파열 압력을 측정하려면 먼저 자동 펌프와 압력계를 켜십시오. 다음으로, 간으로 연결된 모든 인대를 나누고 상십이지장 굴곡 위의 간 척추경을 나누어 문맥과 총담관의 긴 부분을 그대로 둡니다.그런 다음 간 위와 아래의 캐벌 정맥을 나누어 장기를 회수할 수 있도록 합니다. 날카로운 가위를 사용하여 왼쪽 내측 간엽의 절반을 절제하고 혈장이 절단면을 응고시킵니다. 간척추경에서 문맥, 총간동맥, 담관을 분리한다.오버홀드 집게를 사용하여 문맥을 고정합니다. 그런 다음 모노필 봉합사 4.0을 사용하여 용기를 접합합니다. 두 번째 한 쌍의 오버홀드 겸자로 총간동맥을 고정하고 다른 모노필 봉합사 4.0으로 동맥을 접합합니다.프렌치 16 카테터를 총담관에 삽입하고 2.0 실크 봉합사로 관을 결찰합니다. 그리고 카테터를 자동 펌프에 연결하십시오. 압력계가 있는 삼방향 마개를 설치하고 풍부한 주사기에 식염수를 채웁니다.시간당 99밀리리터의 공급 속도로 자동 펌프를 시작하십시오. 그런 다음 간 절단 표면과 압력계에서 누출을 모니터링하고 파열 압력을 기록합니다. 이 대표적인 실험에서 모세혈관의 혈류는 25와트의 장치 출력에서 기준선에서 약 60%, 50와트에서 66%, 100와트에서 거의 100% 감소했습니다.혈장 응고 중 또는 후에 온도 변화는 관찰되지 않았습니다. 혈장 응고는 정상적인 간 실질과 쉽게 구별할 수 있는 표재성 괴사 영역을 만듭니다. 헬륨 플라즈마 응고 후, 응고 깊이는 적용된 플라즈마 장치 출력 전력과 직접적인 상관 관계로 크게 증가합니다.이식된 왼쪽 내측 간엽의 절단면에서 수행된 파열 압력 측정은 헬륨 또는 아르곤 혈장 응고 후 차이가 없음을 보여줍니다. 이러한 기술을 사용하여 마지막은 국소 응고 효과를 정량화하고 혈장 응고의 담관 밀봉 효과를 추정합니다. 이러한 기술은 또한 인간 환자와 유사한 수술 환경에서 담즙과 지혈의 다양한 수단을 비교하는 데 사용할 수 있습니다.또한, 혈장 응고의 혈액 및 이중 억제 효과는 동일한 모델에서 주요 간절제술 후에 적용될 수 있습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 대형 동물 모델에서 아르곤 및 헬륨 플라즈마 응고의 주요 효과를 평가하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.

assessment-plasma-coagulation-on-liver-tissue-large-animal-model

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

이 비디오는 간 세포를 분리하기 전에 콜라겐 분해 효소 용액을 사용하여 문맥을 통한 마우스 간 관류 절차를 설명합니다.

In vivo Murine Liver Perfusion: 문맥을 통해 설치류 간에 용액을 주입하는 방법

간의 면역 세포를 안정적으로 생체 내 고해상도 이미징하는 것은 어려운 일입니다. 여기에서는 집중 치료 모니터링과 함께 생체 내 다광자 레이저 스캐닝 현미경을 통해 장기간(약 6시간)에 걸쳐 마우스 간에 있는 면역 세포의 이동 및 세포-세포-상호 작용을 연구할 수 있는 매우 민감하고 신뢰할 수 있는 방법을 제공합니다.

CXCR6.Gfp 기자 마우스를 사용하여 건강하고 병에 걸린 간에서 면역 세포의 장기 생체 내에 다중 광자 현미경 이미징

외상 환자 중 사망의 중요한 원인 인 통제되지 않는 출혈은 쥐 모델에서 표준 간 열화를 사용하여 모델링 할 수 있습니다. 이 모델은 일관된 혈액 손실, 생존을 가져오고 지혈제를 검사 할 수있게합니다. 이 기사에서는이 중요한 모델을 수행하기위한 단계별 프로세스를 제공합니다.

실시간 혈류 역학 모니터링을 이용한 마우스의 간경화로 모델링 된 통제 할 수없는 출혈성 쇼크

여기는 등 포털 압력, splanchnic 혈액 흐름, 조직의 hemodynamics 포털 고혈압 증후군 쥐에 성격을 나타내기 위하여 hemodynamic 매개 변수의 침략 적인 측정을 위한 상세한 프로토콜에 설명 합니다.

포털-고혈압 증후군 Cirrhotic 쥐에서의 침입 Hemodynamic 특성화

상당한 간 기증자 부족 이며 간 기증자에 대 한 기준을 확대 했습니다. Normothermic ex vivo 간 관류 (NEVLP)를 평가 하 고 장기의 기능을 수정 개발 되었습니다. 이 연구 NEVLP의 쥐 모델을 보여 줍니다 고 간 보존 부상 완화 pegylated catalase의 능력을 테스트 합니다.

Ex Vivo Normothermic 간 관류의 작은 동물 모델

우리 더 vivo에서 부분 간 미래에 엔지니어링을 공부에 대 한 전제 조건으로 쥐에서 vivo에서 단일 간 엽 관류 모델에 대 한 새로운 수술 기법을 설정 합니다.

Vivo에서 부분 간 엔지니어링을에서 위한 쥐를 기초로 새로운 수술 기법

이 프로토콜은 마우스에서 가능한 정밀 절단 간 조각의 생산을위한 간단하고 신뢰할 수있는 방법을 제공합니다. ex vivo 조직 샘플은 여러 날 동안 실험실 조직 배양 조건 하에서 유지될 수 있으며, 간 병리학을 검사하는 유연한 모델을 제공합니다.

뮤린 정밀 절단 간 슬라이스 간 생물학의 Ex Vivo 모델로

마취된 마우스에서의 정제된 꼬리 정맥 횡단절(TVT) 출혈 모델은 혈우병성 출혈의 평가를 위한 민감한 생체내 방법이다. 이 최적화 된 TVT 출혈 모델은 혈액 손실과 출혈 시간을 종점으로 사용하여 다른 모델을 정제하고 사망을 종점으로 피합니다.

꼬리 정맥 transection 출혈 모델 완전 마취 혈우병 A 마우스에서

자가 혈전을 사용하여 폐색전증의 최소 침습 랫드 모델을 확립하기 위한 자세한 방법론이 설명됩니다. 경색 부위를 정량화하고 폐동맥 나무를 시각화하기 위한 추가 방법도 제공됩니다.

자가 혈전을 이용한 폐색전증의 최소 침습적 쥐 모델 확립

랑겐도르프 기구와 관련된 대부분의 연구는 대형 포유류에 대한 시스템의 복잡성이 증가하기 때문에 작은 동물 모델을 사용합니다. 우리는 인간을 포함한 다양한 종에 걸쳐 사용할 수 있고 비교적 쉬운 데이터 수집을 허용하는 대형 동물 모델을 위한 Langendorff 시스템에 대해 설명합니다.

큰 동물 모델에 대한 격리 된 작업 심장 시스템

배우세요 돼지 모델을 활용한 간 조직의 플라즈마 응고 평가 방법입니다. 레이저 도플러와 적외선 열화상 카메라로 미세순환 및 온도를 측정하며, 에너지 설정과 응고 깊이의 상관관계를 분석합니다. 이 기법은 임상 간 수술 연구에 활용됩니다.

플라즈마 응고는 큰 동물 모델에서 에서 Vivo에서 간 조직에의 평가

더 많은 동영상 탐색