식물에 철 분 함량을 측정 하는 색도계 방법

선물이 색도계 프러시안 블루 메서드를 사용 하 여 식물 조직에 철 분 함량을 측정 하는 간단 하 고 신뢰할 수 있는 프로토콜.

의학적으로만 해도 생물학 분야의 핵심 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 예를 들어, 생물학 핵심 샘플에서 철을 어떻게 쉽게 정량화할 수 있습니까? 이 기술의 주요 벤처는 생산하기 쉽고 매우 정밀한 비색 기술이라는 것입니다.

이 기술을 선호하지만 철분 오염을 피해야 합니다. 이 방법의 시각적 데모는 여러 단계를 이해하는 데 도움이 됩니다. 이 절차를 시작하려면 표준 냄비 매체로 채워 5cm x 5cm 냄비를 준비합니다.

각 화분에 담배 씨앗을 하나씩 심습니다. 식물을 섭씨 23도의 긴 낮 조건에서 일정한 온도의 성장실로 옮깁니다. 화분에서 물이 빠질 때까지 수돗물로 관개하고 약 50일 동안 식물을 키웁니다.

이 시간이 지나면 실험에 적합한 농도로 관개에서 철분 처리를 시작하십시오. 이 용액으로 6-8일 동안 2일마다 식물에 관개하십시오. 그런 다음 금속 장비를 사용하지 않도록 손으로 줄기에서 잎을 분리하십시오.

이중 증류수를 채운 스프레이 병을 사용하여 각 잎을 청소합니다. 종이 타월로 잎을 말린 다음 종이 봉지에 옮깁니다. 잎이 채워진 봉지를 섭씨 80도의 일정한 온도로 설정된 오븐에 2-3일 동안 넣습니다.

모르타르와 절굿공이를 4% 염산 용액으로 두 번 청소합니다. 그리고 여과지를 사용하여 말리십시오. 절구와 절굿공이를 사용하여 마른 잎을 가루로 으깬다.

그런 다음 분말을 멸균 15ml 플라스틱 튜브에 옮깁니다. 먼저, 뚜껑이 없는 밀봉된 새 20ml 섬광 바이알의 무게를 잰다. 무게를 기록하거나 저울의 용기를 잰다.

그런 다음 으깬 잎을 넣으십시오. 바이알에 담긴 샘플의 무게를 측정하고 무게를 기록하십시오. 암면을 사용하여 바이알을 닫습니다.

샘플을 추가하지 않고 3개의 추가 바이알을 칭량하여 대조군으로 사용하고 각 중량을 기록하십시오. 다음으로, 샘플과 제어 바이알을 용광로로 옮깁니다. 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 잎을 태웁니다.

그런 다음 샘플을 약 섭씨 100도까지 식히십시오. 두꺼운 장갑과 핀셋을 사용하여 용광로에서 샘플을 제거하고 바이알을 바깥쪽으로 잡습니다. 바이알을 평평한 표면에 놓습니다.

암면(rock wool)을 제거하고 원래 뚜껑으로 바이알을 닫습니다. 그런 다음 3개의 대조군 바이알의 무게를 측정하고 평균 체중 증가를 계산합니다. 체중 증가가 회분 중량의 1% 이상이면 이 값을 측정 오류의 추정치로 사용합니다.

15ml 플라스틱 튜브의 무게를 잰다. 무게를 기록하거나 저울의 무게를 싣습니다. 그런 다음 재를 튜브로 옮깁니다.

이 값, 즉 재 무게를 기록하십시오. 다음으로, 1 몰의 염산 용액 5 밀리리터를 재에 첨가하십시오. 22마이크로미터 필터를 통해 재를 걸러냅니다.

그런 다음 동일한 필터를 통해 1몰 염산 용액 5ml를 추가로 추가하면 최종 샘플 부피가 10ml가 됩니다. 그런 다음 원자 분광법으로 측정하기 위해 각 샘플에서 4 밀리리터를 제거하십시오. 그리고 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 재 그램당 철 농도를 결정합니다.

먼저 이중 증류수 100ml에 페로시아나이드 칼륨 4g을 추가하여 프러시안 블루 용액을 준비합니다. Vortex를 혼합하고 사용할 준비가 될 때까지 섭씨 4도에서 보관하십시오. 사용할 준비가 되면 50밀리리터의 프러시안 블루 용액과 50밀리리터의 1몰 염산을 혼합하여 블랭크 용액으로 사용합니다.

그런 다음 피펫을 사용하여 이전에 얻은 샘플 0.5ml를 프러시안 블루 용액 0.5ml와 혼합합니다. 이 혼합물을 최소 1분 동안 그대로 두되 5분 미만 동안 그대로 두십시오. 이 혼합물을 큐벳으로 옮기고 분광 광도계를 사용하여 715나노미터에서 광학 밀도를 측정합니다.

그런 다음, 재 그램당 광학 밀도를 결정하고 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 철 농도 사이의 선형 회귀를 플로팅합니다. 21개의 담배 잎 샘플에서 얻은 대표적인 결과는 관개 용수의 철 농도가 잎의 철 함량에 큰 영향을 미쳤음을 보여줍니다. 그런 다음 21개 대표 샘플의 스펙트럼을 모두 프러시안 블루 방법으로 테스트합니다.

여기에서 볼 수 있듯이 715나노미터의 흡광도는 서로 다른 농도의 철 2와 철 3을 포함하는 용액을 측정하는 동안 최적의 파장입니다. 원자 분광법으로 얻은 철 농도 값과 프러시안 블루 방법으로 얻은 흡광도 값을 비교하여 얻은 선형 회귀 곡선을 사용하면 동일한 식물 유형의 새로운 샘플을 분석할 수 있습니다. HCL로 작업하는 것은 매우 위험할 수 있다는 것을 잊지 마십시오.

그리고 이 절차를 수행하는 동안 항상 눈 보호와 같은 예방 조치를 취해야 합니다. 선형 회귀에서는 결과가 현실적인 범위에 있는지 확인하는 것이 중요합니다. 개발 후 이 기술은 생물학 연구자가 식량 생산 또는 생물 정화를 위해 추가 식물을 탐색하는 데 도움이 될 수 있습니다.