당뇨병 마우스에서 만성 상처를 만드는 프로토콜

이 마우스 모델은 상처 만성의 의료 분야에서 질문에 대답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 모형의 주요 이점은 마우스에 있는 만성 상처가 인간에 있는 만성 상처의 많은 양상을 모방한다는 것입니다. 먼저 마우스를 깨끗한 표면에 놓고 꼬리의 베이스를 꼬집어 제자리에 고정합니다.

그런 다음 머리 깎기를 준비하고 마우스가 갑작스런 움직임을 하면 신속하게 당겨 버릴 준비를하십시오. 꼬리 주변을 포함하여 목에서 꼬리까지 등 전체를 면도합니다. 가장 효율적인 컷을 위해 모발 성장 방향에 대해 블레이드를 가볍게 실행합니다.

이 타박상이나 절단 할 수 있기 때문에 피부 깊숙이 클리퍼를 누르지 마십시오. 다음으로, 탈모 로션의 적용을 위해 피부를 준비합니다. 화학 적 화상을 방지하기 위해 물에 담근 종이 타월로 피부를 적십니다.

피부에 머리를 적시면 충분한 압력으로 가볍게 누릅니다. 그런 다음 피부가 젖은 동안, 15~20초 동안 작은 탈모 로션을 면도 부위에 문지릅니다. 일단 적용되면 로션이 20~45초 동안 피부에 반응하게 하십시오.

로션을 헹구기 전에 다양한 위치에서 로션을 가볍게 닦아 반응을 확인하십시오. 피부가 분홍색이고 털이 없는 경우 반응이 완료됩니다. 그런 다음 마우스를 잡고 씻어 내도록 합니다.

엄지 손가락으로 지배적 인 손을 사용하여 손바닥에 대한 꼬리의 베이스를 누르고 다른 손가락을 닫습니다. 그런 다음 마우스의 코를 물에서 위아래로 멀리 하면서 동물의 등에서 물이 뛰어오게 하십시오. 그런 다음 빠르지만 부드럽게 마우스 뒷면을 다른 손으로 문지르면 로션을 씻어 냅니다.

모든 탈모 크림을 제거 한 후 종이 타월로 피부를 건조시십시오. 로션을 귀, 꼬리 또는 얼굴 근처에 바르지 않는 것이 중요합니다. 이런 일이 발생하면 젖은 수건으로 로션을 즉시 닦은 다음 마우스 위로 물을 실행하여 이 부위의 손상을 방지하십시오.

크림을 사용한 후 어두운 패치가 발견되면 해당 부위에 크림을 다시 바르게 하십시오. 피부의 어두운 패치는 실험 기간 내내 더 빨리 머리를 성장할 것입니다. 그래서 필요한 경우 3 ~ 5 일마다 짧은 머리를 잘라.

상처 부위위에 있지 않은 패치 또는 두 개는 허용되지만 마우스 뒷면에 어두운 패치가 있는 경우 만성 상처 모델에 사용하지 마십시오. 모발을 제거한 후, 피부가 증착로 인해 너무 민감하기 때문에 상처를 입기 전에 적어도 하루 동안 혼자 마우스를 보관하십시오. 수술 30분 전에, 멸균 PBS에서 부프레노르핀 120마이크로리터를 마우스에 주입한다.

이 절차의 모든 볼륨은 60그램 마우스를 가정합니다. 수술 20분 전에 멸균 PBS에서 ATZ 내 480 마이크로리터를 마우스로 주입합니다. 복부의 양쪽에 볼륨을 분할.

ATZ를 투여한 후 수술이 시작될 때까지 마우스를 따뜻한 가열 패드 위에 작은 플라스틱 용기에 놓습니다. 작은 용기를 종이 타월로 덮어 열을 억제합니다. 마우스가 따뜻해짐에 따라 진정시켜야 합니다.

마취 상태를 확인한 후 상처를 진행하십시오. 상처 시술을 시작하려면 70%에탄올로 화학 닦기를 뿌려 마우스 뒤쪽을 닦아 상처 부위와 피부 표면을 청소합니다. 과도하게 닦지 마십시오 또는 피부에 존재하는 박테리아를 죽일 위험이있을 것입니다.

만성 상처 모델의 성공은 비멸 조건에 의존합니다. 이 마우스는 세균이 없고 전통적인 vivarium에 보관됩니다. 피부에 상주하는 세균성 미생물군유전체는 항산화 효소의 억제제로 치료시 만성 상처의 후속 개시 및 개발에 매우 중요합니다.

이제 상처가 있는 장소를 고려하십시오. 이상적으로는 마우스의 등쪽을 중심으로 하고 어두운 피부 패치를 사용하지 마십시오. 이제 30~45초 만에 드레싱 시술에 상처를 입습니다.

먼저 7밀리미터 스킨 생검 펀치를 원하는 상처 부위에 가볍게 누르고 펀치의 인상을 남길 수 있을 만큼 깊은 곳에 펀치를 비틀어 주세요. 그런 다음 핀셋으로 펀치의 중심을 당기고 수술 가위로 윤곽을 따라 절단하여 윤곽을 그리는 것으로 윤곽을 비우고 윤곽을 비우고 윤곽을 비우게합니다. 완성되면 투명 필름 드레싱의 절반 조각으로 상처를 단단히 덮습니다.

상처 후 10분 이내에 멸균 PBS에 MSA의 60 마이크로리터 알리쿼트를 바르고 MSA를 상처에 토폴로 하게 합니다. 나중에 수술 후 6 시간, 부프레노르핀의 또 다른 않습니다 관리. 추가 복용량 필요에 따라 주어질 수 있습니다.

만성 상처 개시는 6 시간 이내에 일어나고 상처 마진은 산화 스트레스에서 눈에 띄게 변경됩니다. 만성 상처는 처음 상처와 비교하여 열리고 확대된 상처이며 생물막을 함유하고 있습니다. 20 일 후, 상처는 전체 만성에 있습니다.

상처 부위를 지배하는 생물막 형성 박테리아에는 슈도모나스 아에루기노사, 엔터로박터 클로카, 다양한 황색포도상구균 종 등이 있습니다. 이 박테리아는 또한 인간의 만성 상처에서 발견. 이 비디오를 시청 한 후 당신은 쥐에 만성 상처를 만드는 방법에 대한 좋은 이해가 있어야합니다.

일단 이러한 만성 상처를 설립, 다음 상처 만성의 개시에 관련 된 세포 분자 메커니즘의 많은 조사 그들을 사용할 수 있습니다.