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DOI: 10.3791/58048-v
Hiromichi Nagayama1,2, Yuki Matsumoto1,2, Akira Tanave1, Motoko Nihei1, Tatsuhiko Goto3, Tsuyoshi Koide1,2
1Mouse Genomics Resource Laboratory,National Institute of Genetics, 2Department of Genetics,SOKENDAI (The Graduate University for Advanced Studies), 3Research Center for Global Agromedicine,Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Tameness 동물에 인간 (active tameness) 활성 접근에서 인간 (수동 tameness) 회피 응답의 감소와 증가 포함 한다. 여기, 우리는 3 행동 테스트 (활성 tameness, 수동 tameness, 및 숙박-에서-손을 테스트) 마우스의 능동 및 수동 tameness를 별도로 측정에 대 한 상세한 프로토콜을 설명 합니다.
이 방법은 각 마우스의 길들임 정도를 평가할 수 있으며, 이 데이터는 길들임과 관련된 유전자의 유전자 매핑과 같은 길들임에 대한 추가 연구에 매우 유용할 것입니다. 이 기술의 주요 장점은 이 방법을 사용하여 길들이기의 두 가지 주요 구성 요소인 능동적 길들임과 수동적 길들이기를 별도로 평가할 수 있다는 것입니다. 시연은 대학원생인 나가야마 히로미치 씨와 우리 연구실의 기술자인 니헤이 모토코 씨입니다.
시작하려면 디지털 카메라를 켜고 녹음을 시작하십시오. 그런 다음 한 쌍의 큰 핀셋을 사용하여 꼬리를 잡고 마우스를 부드럽게 집습니다. 마우스를 홈 케이지에서 야외 장치의 중앙으로 옮깁니다.
스톱워치를 시작한 후 장치의 왼쪽 하단 모서리에 손을 놓습니다. 손바닥이 위를 향하게 하여 손가락을 천천히 꾸준히 움직입니다. 천천히 손을 마우스 쪽으로 움직이고 마우스 본체 측면에서 10cm 떨어진 곳에서 멈춥니다.
마우스가 멀어지려고 할 때 이 거리를 유지하십시오. 마우스가 손에 접근하면 손을 같은 위치에 유지하고 손가락을 천천히 꾸준히 계속 움직입니다. 마우스가 팔을 위로 올라가려고 하면 다른 손으로 마우스를 제거하십시오.
1분 후 테스트를 종료합니다. 기기에 마우스를 배치한 후 왼손을 기기에 놓습니다. 그런 다음 천천히 꾸준히 손을 마우스 쪽으로 움직이고 손가락 끝으로 마우스를 부드럽게 터치합니다.
마우스가 멀어질 때까지 손가락 끝으로 마우스를 계속 터치합니다. 마우스가 접촉을 끊으려고 하면 손으로 마우스를 따라가서 접촉을 다시 시작합니다. 1분 후에 테스트를 종료합니다.
이전 테스트가 끝난 직후 한 쌍의 큰 핀셋을 사용하여 꼬리를 잡고 마우스를 들어 올려 왼쪽 손바닥에 부드럽게 놓습니다. 마우스가 손에서 떨어질 때까지 왼쪽 엄지 손가락으로 마우스를 부드럽게 스트로크합니다. 그런 다음 핀셋으로 마우스를 손바닥에 다시 놓습니다.
세 번째 시도 후 비디오 녹화를 중지하고 마우스의 무게를 잰다. 마우스를 가정용 케이지로 되돌린 후 장치의 열린 필드에 남아 있는 대변과 소변의 양을 기록합니다. 다음으로, 0.2% 요오드 살균제에 적신 종이 타월로 기기와 장갑을 닦고 마른 종이 타월로 기기를 닦습니다.
각 동작 인덱스에 키를 할당한 후 tanaMove 소프트웨어를 시작합니다. 그런 다음 분석할 비디오 파일을 창으로 끌어다 놓습니다. 파일이 로드되고 데이터 파일의 정보가 있는지 확인합니다.
CSV 상자가 올바른지 확인합니다. 준비 버튼을 클릭하고 다음 창에서 각 동작 인덱스에 할당된 키를 입력합니다. 그런 다음 재생 버튼을 클릭하여 비디오 파일을 시작하고 중지를 클릭하여 일시 중지합니다.
마우스가 손을 향해 향하거나 접근하는 것이 관찰되면 A를 누릅니다. Active Tameness Test 동안 마우스가 손을 향하지 않고 기관차가 관찰되면 R을 누릅니다.타이머 소리가 60초에 들리면 W를 길게 눌러 Active Tameness Test의 끝을 표시합니다.
왼손이 프레임에 들어가면 Passive Tameness Test에 대한 분석을 시작합니다. 마우스가 손 쪽으로 향하는 것이 관찰되면 A를 누르고, 마우스가 손을 향하지 않고 이동하는 것이 관찰되면 R을 누릅니다. 그런 다음 60초에서 타이머 소리가 들리면 W를 길게 누릅니다.
왼손이 프레임에 들어오는 것이 관찰될 때 Passive Tameness 분석을 시작합니다. 비디오가 재생되는 동안 마우스가 손에 접근하는 것이 관찰되면 A를 누르고, 마우스가 손을 향하지 않고 움직이는 것이 관찰되면 R 키를 누릅니다. 다시 한 번 60초에서 타이머가 들리면 W를 누릅니다.
그런 다음 테스트 중에 마우스가 손에 머물 때마다 T를 누릅니다. 테스트가 끝나면 중지를 클릭합니다. 그런 다음 뒤로 버튼을 클릭하여 새 창을 활성화하고 CSV 데이터 입력에 대한 새 파일 이름을 입력합니다.
그런 다음 준비 버튼을 클릭하고 새 창에 적절한 키를 입력합니다. 그런 다음 재생 버튼을 클릭하여 비디오를 다시 시작하고 Active Tameness Test의 분석을 시작합니다. 비디오가 재생되는 동안 마우스가 핸들러에 자발적으로 접촉할 때마다 T 키를 누릅니다.
타이머가 60초에 울리면 W를 길게 누릅니다.Passive Tameness Test 중에 마우스가 핸들러가 본체를 만질 수 있을 때 T를 누릅니다. 그런 다음 60초 후 타이머가 울리면 W를 길게 누릅니다. 그런 다음 중지 버튼을 클릭한 다음 뒤로 버튼을 눌러 CSV 데이터 출력의 파일 이름을 입력합니다.
그런 다음 준비 버튼을 클릭하여 할당된 키를 입력하는 새 창을 활성화합니다. 그런 다음 재생을 클릭하여 Active Tameness Test를 시작합니다. 마우스가 점프하는 것이 관찰되면 J를 누르고 60초 후 타이머가 울리면 W를 누릅니다.
중지 버튼을 클릭하면 비디오 관찰이 중지되고 타이머가 60초에 다시 울립니다. 그런 다음 뒤로 버튼을 클릭하고 CSV 데이터 출력의 파일 이름을 입력합니다. 그런 다음 보조 2 파일이 포함된 폴더에 모든 원시 데이터 파일을 저장합니다.
보조 2 파일을 열고 요약 버튼을 클릭합니다. 마지막으로, 추가 분석을 위해 결과를 별도의 파일로 저장합니다. 선택적 육종을 사용하여 높은 수준의 Active Tameness를 가진 마우스를 생산했습니다.
선택적 육종 그룹의 마우스는 Active Tameness Test에서 더 높은 점수를 받았으며, 대조군 마우스보다 인간의 손과 접촉하는 시간이 더 길었습니다. 두 그룹의 마우스는 방향, 이동 또는 점프 시간에 큰 차이가 없었습니다. 그러나 선택된 마우스는 Passive Tameness Test에서 더 높은 점수를 받았습니다.
또한, 선택된 마우스는 Stay-On-Hand 테스트에서 대조군 마우스보다 훨씬 더 오래 사람의 손에 머물렀습니다. 이 절차를 시도하는 동안, 다루기 경험이 각 마우스의 길들이기에 상당한 영향을 미칠 수 있으므로 Tameness 테스트를 수행할 때까지 마우스를 다루지 않는 것이 중요합니다.
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