Name: Bioaerosols 음이온 교환 수 지를 사용 하 여 바이러스의 검출 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-22T14:45:00.000+00:00
Duration: 6 min 10 s
Description: 배우세요 음이온 교환 수지를 활용한 바이오에어로졸 바이러스 검출 방법을 통해 공중보건 연구에 활용하는 기술입니다. 이 방법은 분자 검출 민감도를 높이고 현장 적용이 용이하여 다양한 바이러스 분포 연구에 기여합니다.

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이 작품은 농업 건강과 안전 (5U54OH008085)에 대 한 CDC/NIOSH 높은 평야 Intermountain 센터와 콜로라도 생명 과학 발견 평가 그랜트 프로그램 (14BGF-16)에서 자금에 의해 지원 되었다.

1. Bioaerosol 챔버의 설치 ( 그림 2참조)
<ol><li>
사전에 0.01 M 버퍼링 인산 염 분, pH 7.5 (PBS)의 20 mL와 함께 액체 impingers 로드 합니다.
	<ol>
<li>음이온 교환 수 지의 0.5 g을 추가 하 고 컨트롤 역할을 수행 하는 다른 액체 임 핀 저와 액체 impingers 중의 PBS 내 일시 중단.</li>
	</ol>
</li>
	<li>챔버 내부에 bioaerosol는 분무기를 직면 하는 어로 졸 후미와 클램프 스탠드를 사용 하 여 병렬로 위치 액체 impingers. 참고: 추가 정보에 대 한 그림 2 를 참조 하십시오.</li>
	<li>공동 직접 읽기 졸 모니터를 bioaerosol의 대량 농도 (mg/m3)을 측정 하 여 액체 impingers 가까이 찾습니다.</li>
	<li>추가적인 직접 읽기 계측 (실내 공기 질 모니터 및 열 풍속 계) 배치, 온도 등의 환경 변수를 모니터링 하는 액체 impingers 근처 상대 습도 바람 속도, 챔버 내에 bioaerosol.</li>
	<li>에 어로 졸의 혼합을 촉진 하기 위하여 bioaerosol 챔버의 모서리에 축 팬 들을 실행 합니다. 참고: 축 팬 고정 속도로 실행 하 고는 조정 가능 하다.</li>
</ol>2. 모델 Bioaerosolization 실험 ( 그림 3참조)
<ol><li>시리얼, 인산 염 버퍼 식 염 수 (PBS)에서 원하는 농도 MS2 살 균 소 및 인플루엔자 백신의 10 희석을 수행 합니다. 참고: 여기, 103.5 : FFU/mL는 종류 A와 B 독감 바이러스 백신 긴장의와 10 메서드를 보여 주기 위해5 PFU/mL MS2 살 균 소의 활용 됩니다. Titers는 inocula에 대 한 결정, 살 균 소는 대장균 HS (pFamp) R에에서 전파 되며 앞에서 설명한20으로 열거. 상용 백신 포함 알려진된 양의 4 라이브 감쇠 독감 바이러스 변종, 두 입력 인플루엔자 바이러스와 형광 초점 단위 또는: FFU 표현 두 B 형 인플루엔자 바이러스.</li>
	<li>100 mL PBS의에서 바이러스 성 입자의 원하는 농도의 정지를 만들어서 6 제트기 충돌 분무기의 유리 용기 내에서 inocula를 준비 하 고 사용자 지정 bioaerosol 챔버 내 설치.</li>
	<li>계측 변수 챔버 내에 bioaerosol, 온도, % 상대 습도, 이산화탄소 농도 등을 측정 하 고 바람 속도 (축 팬을 사용 하 여 생성)을 시작 합니다. 직접 읽기 졸 모니터를 사용 하 여 챔버 내에 bioaerosol 질량 농도 추적 하 고 시간과 실험 사이 일관성을 확립.</li>
	<li>Bioaerosol 챔버를 밀봉 하 고 공기 HEPA 필터와 10 분 동안 제거.</li>
	<li>6.9 kPa에서 분무기에 필터링 된, 건조 공기를 제공 합니다.</li>
	<li>각 bioaerosol 챔버 시험 (nebulizer)를 통해 바이러스 bioaerosols의 대상 농도 생성 합니다. 이 데모 5 mg/m3 의 농도와 bioaerosols 생성 됩니다.</li>
	<li>에 어로 졸의 대상 질량 농도 도달 하면 일단 nebulization을 중지 합니다.</li>
	<li>사용 하 여 기본 흐름 표준 각 샘플링 이벤트 전 / 후 볼륨 샘플링에 일관성을 보장 하는 행위 교정 12.5 L/분의 유량을 조정 되었습니다 각 액체 임 핀 저에 대 한 공기 샘플링 펌프를 작동 합니다. 공급 희석 HEPA 필터 라인 부근에 분무기를 사용 하 여 공기와 챔버에 일정 한 압력을 유지.</li>
	<li>적극적으로 샘플 당 500 L의 샘플링 볼륨을 달성 하기 위해 40 분의 기간에 대 한 bioaerosol 챔버 분위기를 샘플 합니다. 참고: 동시에 두 개의 펌프와 12.5 L/분 40 분에 대 한 샘플링은 bioaerosol의 1000 L의 샘플링에 대 한 허용 됩니다. 따라서, 실험의 완료에 예상 된다 bioaerosol 약 실에 있는 공기의 대부분을 샘플링 하 고 HEPA 필터 시스템을 통해 환경으로 출시 되었습니다. 이 입자 농도 감소에 의해 입증 됩니다. 후 실험 표면 10% 가구 표 백제와 70% 에탄올으로 소독 된다. 표시기;이 데모에 사용 됩니다. 그러나, 알려진 병원 성 유기 체는이 시스템에 사용 됩니다, 추가 biosafety 조치 수 있습니다 구현 필요에 따라.</li>
</ol>3. 핵 산 추출 및 qRT-PCR 검출
<ol><li>
음이온 교환 수 지에서 직접 하 고, 액체 impingers 내에서 사용 하는 액체에서 비교 목적을 위해 핵 산을 분리. 이 예제에서는 RNA 격리 절차 설명 하지만 비슷한 프로토콜 DNA 바이러스를 위해 사용 될 수 있습니다.
	<ol>
<li>음이온 교환 수 지에서 핵 산 격리입니다.<ol>
<li>살 균 50 mL 원뿔 튜브에 음이온 교환 수 지를 포함 하는 액체의 액체 임 핀 저의 모두를 전송.</li>
			<li>정착, 수 지 고 천천히 음이온 교환 수 지에서 액체 샘플을 가만히 따르다. 1 mL 피 펫 팁을 사용 하 여 음이온 교환 수 지에서 남은 액체의 모든을 제거.</li>
			<li>바이러스 성 RNA 격리 키트에서 포함 하는 음이온 교환 수 지에 직접 캐리어 RNA 바이러스 성 세포의 용 해 버퍼의 560 µ L을 추가 하 고 정기적으로 혼합과 실 온에서 10 분 동안 품 어.</li>
			<li>1 mL 피 펫 팁을 사용 하는 바이러스 성 전송 lysate (바이러스 성 세포의 용 해 버퍼) 살 균 1.5 ml 원뿔 튜브와 RNA 계속 바이러스 성 RNA 격리를 사용 하 여 격리 키트 ( 재료의 표참조) 제조업체의 지침에 따라 제외 하 고 그 RNA는 eluted 차입 버퍼의 60 µ L의 전체 볼륨에.</li>
		</ol>
</li>
		<li>핵 산 격리 액체 impingers에서.<ol>
<li>살 균 1.5 mL 원뿔 튜브에 액체 샘플의 140 µ L 플라스틱 고 RNA 격리 차입 버퍼의 60 µ L의 전체 볼륨에 RNA를 방출 하는 것 제외 하 고 제조업체의 지침에 따라 바이러스 성 RNA 격리 키트를 사용 하 여 수행 합니다. 참고: 140 µ L은 단일 단계 준비에서 여기 고용 특정 바이러스 성 RNA 격리 키트와 함께 처리할 수 있는 최대 샘플 볼륨입니다.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>앞에서 설명한23,24MS2 및 인플루엔자 A와 B 바이러스의 검출을 위한 qRT-PCR을 수행 합니다. 이 데모에서는 핵 산 있다의 5 µ L qRT-PCR에 사용 됩니다.</li>
</ol>

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<li>Perez-Mendez, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+a+simple+and+cost+effective+filter+paper-based+shipping+and+storage+medium+for+environmental+sampling+of+F-RNA+coliphages%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol+Methods%22%5BJournal%5D)">Evaluation of a simple and cost effective filter paper-based shipping and storage medium for environmental sampling of F-RNA coliphages.</a> J Virol Methods. 194 (1-2), 60-66 (2013).</li>
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</ol>

저자는 공개 없다.

이 프로토콜에서 bioaerosols 수정된 액체 impingers를 사용 하 여 민감한 바이러스 캡처 하는 방법을 설명 합니다. 방법은 탐지 및 정량화 bioaerosols에 바이러스 부하의 최적화 되어 있습니다. 여기 설명 하는 특정 수정 일반적인 액체 임 핀 저 안에 포함 된 액체에 음이온 교환 수 지의 추가 포함 한다. 이 메서드는 원심 분리, 여과, 강 수 기반 방법 등 다른 샘플 처리 기술 이러한 이점을 제공 하지 않는 반면 다운스트림 샘플 처리에 그것의 단순에 대 한 개발 되었다. 핵 산의 추출 대량 elutions에 대 한 필요성 및 궁극적으로 효과적인 샘플에서 감소를 통해 방법의 향상 된 탐지 감도에 기여 하는 여러 샘플 준비 단계를 만듦으로써 수 지에서 직접 수행 볼륨입니다. 또한, 그것은 보였다 그 immobilization 바이러스 성 입자의 고체에 표면 바이러스 핵 산의 증가 한 안정성 또는 바이러스 infectivity17,<sup class...

이 방법의 목적은 bioaerosols에서 부정 청구 바이러스의 분자 탐지를 촉진 하기 위하여 매우 중요 한 bioaerosol 샘플링 플랫폼을 제공. 미생물, 바이러스 성 입자를 포함 하 여 장시간 시간1bioaerosols에서 살아남을 수 있습니다. Bioaerosols 비교적 긴 거리를 여행 하 고 생존 및 infectivity, 산업 영향 받은 개인에서 6 킬로미터의 거리에 있는 타워에서 Legionnaires' 질병의 발발에 의해 입증으로 유지 수 및 18 사망자2결과. 간접 전송 bioaerosols 중재 하는 인 간에 게 바이러스의 여러 설정에서 발생할 수 있으며 학교와 레스토랑3,4노로바이러스 감염에 대 한 입증 되었습니다. 바이러스의 bioaerosol 전송의 생산 시설5, 바이러스의 운동에 주요 요인으로 간주 되 고이 전송 경로와 마찬가지로, 돼지 및 가금류 농장에서와 같은 농업 설정에서 발생할 수 있습니다. 6 , 7 , 8 , 9.
시위는 H5 독감 바이러스는 살아있는 동물에서 bioaerosols에서 발견 된 중국에서 시장 에서처럼 바이러스 라덴 bioaerosols의 효과적인 샘플링 신속한 진단 및 확산 방지를 위한 대비에 개선을 위한 수 고는 미국10,11. 현재 bioaerosol 샘플링 기술을 다른 입자 캡처 원칙의 숫자를 포함 하 고 impingers, 사이 클론, impactors, 및 필터12에 광범위 하 게 분류 될 수 있다. 그것은 철저 하 게 모든 장점을 커버 하이 프로토콜의 범위와 bioaerosols;에서 바이러스의 샘플링에 대 한 이러한 플랫폼의 단점 그러나, 그것은 바이러스 및 살 균 소13의 컬렉션에 대 한 이러한 샘플링 장치의 대다수는 최적화 되지 진술 될 수 있다. 또한, 바이러스 성 입자의 infectivity은 종종 부정적인 영향을, 액체 impingers 바이러스 infectivity 샘플링 장치 고체 impactors 또는 필터14보다 더 효과적으로 유지 하는 것으로 간주와 함께. 그러나, 하나의 액체 충돌의 단점은 대상 희석 효과, 바이러스는 비교적 많은 양의 (일반적으로 ≥20 mL) 액체 수집 용기에 수집 때문에 발생 합니다. 또 다른 중요 한 단점은 집중 입자를 액체 impingers의 차선의 효율성 포함 < 0.5 µ M 크기15. 그러나, 이러한 장치의 캡처 효율 immobilization 바이러스 성 핵 산 바이러스 infectivity16,17의 보존을 향상 시킬 수 있습니다으로 고체 행렬에 동원 정지에 의해 개선할 수 있습니다.
우리는 이전 음이온 교환 수 지 캡처 및 F-RNA 살 균 소, A 형 간염 바이러스, 인간 아 데 노비 루스, 고로18,19 포함 하 여 액체 매트릭스에서 바이러스의 농도 대 한 효과적인 도구입니다 증명 하고있다 ,20. 제조 업체에 의해 정의 된 대로이 작품에서 음이온 교환 수 지는 기능성된 4 급 아민 그룹 중재 하십시오 매력 및 액체 매체21 에서 음이온의 캡처 macroreticular 폴리스 티 렌 강한 기본 음이온 교환 수 지 . 따라서, 음이온 교환 수 지 그물 네거티브 표면 요금, 많은 장 바이러스, 인플루엔자 바이러스 및 다른 바이러스 관련 공공 및 동물 건강을 포함 하 여 바이러스를 캡처 예정 이다.
현재 프로토콜 액체 임 핀 저를 음이온 교환 수 지의 추가 포함 한다. 이 시스템에서 수 지 임 핀 저 액체에서 바이러스 성 입자에 대 한 보조 농도 단계 역할을 합니다. 핵 산 분자 분석에 대 한 집중된 샘플을 제공 하는 작은 볼륨에서 직접 eluted 수 다음. 따라서,이 방법의 주요 장점은 주로 샘플 볼륨 감소를 통해 바이러스 검출 감도에 개선 이다. 또한, 때문에 부정적인 충전 바이러스의 고유의 일반적인 캡처, 방법은 가능성이 많은 관심의 바이러스의 탐지를 위해 적용 가능한. 여기, 메서드는 백신 긴장의 유형 A와 B 형 인플루엔자 바이러스와 FRNA coliphage MS2 (MS2)에 대 한 보여 줍니다. 이러한 바이러스 그 후 앞에서 설명한22로 표준 qRT-PCR 분석 실험을 사용 하 여 검색 됩니다. 끝점 사용자 때문에이 메서드를 수행에 문제가 발생할 것을 기대 하지 해야 수정 현재 기존 장비 bioaerosol 샘플링 및 분석의 기존 흐름에 주요 중단을 구성 하지 않습니다.

<table><tbody><tr><td>Escherichia coli bacteriophage MS2 (ATCC 15597-B1)</td><td>American Type Culture Collection</td><td>ATCC 15597-B1</td><td></td></tr><tr><td>FluMist Quadrivalent</td><td>AstraZeneca</td><td>Contact manufacturer</td><td>이 백신의 바이러스 성분은 매년 변경될 수 있습니다.</td></tr><tr><td>CFX96 Touch Real-Time PCR 검출 시스템</td><td>Bio-Rad</td><td>1855195</td><td></td></tr><tr><td>프라이머 및 프로브</td><td>통합 DNA 기술</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>0.2 &마이크로; M 멸균 필터</td><td>NA</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>1L 파이렉스 병 또는 동급</td><td>NA</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>1mL 피펫 팁</td><td>NA</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>1mL 피펫 NA</td><td></td><td></td><td></td>NA</tr><tr><td>50mL 혈청학적 피펫</td><td>NA</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>PCR 튜브</td><td>NA</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Pipet-aid 또는 동급</td><td>NA</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>QIAamp 바이러스 RNA 미니 키트</td><td>Qiagen</td><td>52904</td><td></td></tr><tr><td>QuantiTect 프로브 RT-PCR 키트</td><td>Qiagen</td><td>204443</td><td></td></tr><tr><td>Amberlite IRA-900 chloride form</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>216585-500G</td><td></td></tr><tr><td>인산염 완충 식염수</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P5368-10PAK</td><td></td></tr><tr><td>물(분자생물학 등급)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>W4502-1L</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf DNA LoBind 마이크로 원심분리기 튜브</td><td>ThermoFisher</td><td>13-698-791</td><td></td></tr><tr><td>Falcon 50 mL 원추형 원심분리기 튜브&nbsp;</td><td>ThermoFisher</td><td>14-432-22</td><td></td></tr><tr><td>Falcon 폴리프로필렌 원심분리기 튜브</td><td>ThermoFisher</td><td>05-538-62</td><td></td></tr><tr><td>SuperScript III Platinum One-Step qRT-PCR Kit w/ROX</td><td>ThermoFisher</td><td>11745100</td><td></td></tr><tr><td>SKC Biosampler 20 mL, 3-piece glass set</td><td>SKC Inc.</td><td>225-9593</td><td></td></tr><tr><td>Vac-u-Go 샘플 펌프</td><td>SKC Inc.</td><td>228-9695</td><td></td></tr><tr><td>Collison 분무기(6-젯)</td><td>BGI Inc.</td><td></td><td></td>NA</tr><tr><td>HEPA 캡슐</td><td>PALL</td><td>12144</td><td></td></tr><tr><td>Q-TRAK 실내 공기질 모니터 8554</td><td>TSI Inc.</td><td></td><td></td>NA</tr><tr><td>Alnor 속도계 열 풍속계 AVM440-A</td><td>TSI Inc.</td><td></td><td></td>NA</tr><tr><td>SidePak AM510 개인용 에어로졸 모니터</td><td>TSI Inc.</td><td></td><td></td>NA</tr><tr><td>바이오에어로졸 챔버</td><td>NA</td><td>NA</td><td></td></tr></tbody></table>

bioaerosols 음이온 교환 수 지를 사용 하 여 바이러스의 검출

Detection of Viruses from Bioaerosols Using Anion Exchange Resin

이 프로토콜에서는 바이러스에 대 한 사용자 지정된 bioaerosol 샘플링 방법을 보여 줍니다. 이 시스템에서는, 음이온 교환 수 지에서 bioaerosols 부정 청구 바이러스의 효능 농도 액체 치는 행위 기반 공기 샘플링 디바이스와 결합 이다. 따라서, 수 지 bioaerosol 샘플링 워크플로에 추가 농도 단계 역할을 합니다. 바이러스 성 입자의 핵 산 추출 다음 결과 샘플 분자 분석에 대 한 적합 한 음이온 교환 수 지에서 직접 수행 됩니다. 또한,이 프로토콜 사용자 bioaerosol 챔버 다양 한 환경 조건과 환경 변수 온도, 습도, 등의 지속적인 모니터링에 대 한 허용 아래 바이러스 라덴 bioaerosols 생성할 수 설명 바람 속도, 고 졸 대량 농도입니다. 이 프로토콜을 사용 하 여의 주요 장점은 수정 되지 않은 기존의 액체 임 핀 저를 직접 비교를 통해 평가 바이러스 탐지의 감도 증가입니다. 다른 장점은 집중 다양 한 부정 청구 바이러스, 음이온 교환 수 지 (샘플 당 ~$0.14), 및 사용의 용이성의 저렴 한 비용을 포함 합니다. 단점 수 지 흡착 바이러스 성 입자의 infectivity 평가이 프로토콜의 무 능력을 포함 하 고 액체 샘플링 버퍼의 최적화에 대 한 필요는 임 핀 저 내에서 사용 하는 잠재적으로.

그림 1 에서 bioaerosols 액체 기반의 impingers 수 지의 포함을 통해 바이러스의 차지 기반 캡처의 뒤에 원리를 보여 줍니다. 그림 2 는 사용자 bioaerosol 챔버의 설치. 그림 3 에서는 aerosolization 실험 및 측정 품질 관리를 보장 하기 위해 설정에 관련 된 단계를 설명 합니다. 그림 4 는 qRT-PCR bioaerosols에서 캡처한 부정 청구 바이러스의 검출을 위한 증폭 곡선. 표 1 뇌관 및 프로브 qRT-PCR이이 연구에 사용 된 예제에서는 바이러스에 대 한 사용을 보여 줍니다.
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음이온 교환 수 지 기반 방법, 바이러스의 충돌-기반 bioaerosol 샘플링 시연 액체에 적응 합니다. 다운스트림 분자 탐지와 결합 하면 메서드 bioaerosols에서 바이러스의 손쉬운 및 민감한 감지.

Bioaerosols 음이온 교환 수 지를 사용 하 여 바이러스의 검출

This protocol demonstrates a customized bioaerosol sampling method for viruses. In this system, anion exchange resin is coupled with liquid ...

이 방법은 공중 및 수의학 건강에 중요한 바이오 에어로졸 내 바이러스의 유형, 수준 및 분포에 대한 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 방법의 주요 장점은 바이오 에어로졸에서 바이러스의 분자 검출 민감도, 현장 편의성 및 사용 편의성 향상입니다. 6-제트 충돌 분무기의 유리 용기 내에서 100ml 부피의 PBS에 있는 관심 바이러스 입자의 실험 농도에 대한 현탁액을 생성합니다.바이오 에어로졸 챔버를 설정하려면 20ml의 0.01몰 PBS를 2개의 액체 임핀저에 사전 로드한 다음 단일 임핀저에 0.5g의 음이온 교환 수지를 추가합니다. 임핑어를 조립합니다. 챔버 내에 서스펜션을 설치하십시오.클램프 스탠드를 사용하여 에어로졸 샘플러 흡입구가 분무기를 향하도록 바이오에어로졸 챔버 내부에 액체 임프링거를 평행하게 배치합니다. 액체 임프링어 근처에 직접 판독 기기를 배치하여 환경 변수를 모니터링하고 액체 임프저 근처에 추가 직접 판독 에어로졸 모니터를 배치하여 바이오 에어로졸의 질량 농도를 측정합니다. 그런 다음 바이오 에어로졸 챔버의 모서리에 있는 축 방향 팬을 작동하여 에어로졸의 혼합을 용이하게 합니다.챔버가 준비되면 바이오에어로졸 챔버 내의 변수를 측정하기 위한 기기를 시작합니다. 1차 유량 표준물질을 사용하여 샘플링 부피 간의 일관성을 유지하기 위해 시스템을 보정합니다. HEPA 여과 공기로 10분 퍼지를 위해 챔버를 밀봉합니다.여과되고 건조된 공기를 6.9킬로파스칼의 압력으로 분무기에 전달하여 바이러스 바이오 에어로졸의 목표 농도를 생성합니다. 에어로졸의 목표 질량 농도에 도달하면 분무를 중지하십시오. 그런 다음 분무기 근처에 있는 HEPA 여과 라인을 사용하여 희석된 공기를 공급하고, 챔버 내에서 일정한 압력을 유지하고, 40분 동안 바이오 에어로졸 챔버 대기를 적극적으로 샘플링하여 샘플당 500리터의 샘플링 부피를 달성합니다.기기의 교정은 공기 오염 물질의 농도를 측정하는 데 매우 중요합니다. 샘플링 트레인은 각 샘플링 이벤트 전후에 보정해야 합니다. 사전 및 사후 교정은 서로 5% 이내여야 합니다.샘플링이 끝나면 펌프를 끕니다. 음이온 교환 수지에서 핵산을 직접 분리하려면 액체 임프링어에서 액체를 포함하는 모든 음이온 교환 수지를 개별 멸균 50ml 원추형 튜브로 옮깁니다. 수지가 가라앉도록 한 후 1밀리리터 피펫 팁을 사용하여 수지에 남아 있는 액체를 제거하여 음이온 교환 수지의 액체 샘

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Research

연구

JoVE Journal

Environment

환경

이 방법은 높은 감도에 감염된 생쥐들의 bronchioalveolar 세척 (BAL) 유체에서 H1N1의 탐지를위한 적외선 염료 기반 이미징 시스템의 사용을 설명합니다. 이 방법론은 96에서 수행할 수 있습니다 - 또는 판 384 자, 시험 물질 &lt;10 μl 볼륨이 필요하고 여러 병원체의 동시 상영을위한 잠재력을 가지고 있습니다.

인플루엔자 바이러스에 대한 높은 처리량 검출 방법

Source: Schaeffer, J. W., Chandler, et al. Detection of Viruses from Bioaerosols Using Anion Exchange Resin. J. Vis. Exp. (2018).This video demonstrates the detection of viruses from bioaerosols using an anion exchange resin. A liquid impinger containing the resin is used to capture viruses from the air. The resin is collected and treated with a virus lysis buffer containing carrier RNA. The lysate is transferred to a microcentrifuge tube for viral RNA isolation, followed by qRT-PCR to amplify...

Anion Exchange Resin–Based Detection of Viruses from Bioaerosols

Source: Klaus, J. P. et al. Highly Sensitive Assay for Measurement of Arenavirus-cell Attachment. J. Vis. Exp. (2016)This video demonstrates the extraction of viral RNA from surface-bound virions on epithelial cells using silica spin columns. The method includes chemical lysis, RNA stabilization, and membrane-based purification for downstream quantification of virus-cell attachment.

Extraction of Viral RNA from Surface-Bound Virions Using a Silica Spin Column

우리는 분자 기반 인플루엔자 A, 신속하고 B 분석에 대해 설명합니다. 인플루엔자 분석은 분자 표지 프로브와 표적 탐지 뒤에 인플루엔자 특이 프라이머를 등온 증폭을 이용하여 15 분 이내에 각 대상을 감지합니다. 인플루엔자 A와 B의 분석은 사용자 친화적이고 수행 할 최소한의 실습 시간이 필요합니다.

빠른 분자 탐지 및 인플루엔자 바이러스 A와 B의 차별화

나노 크기의 PCR에 의한 DNA 및 RNA 기반 병원균 높은 처리량 테스트는 syndromic 개와 말 호흡기 PCR 패널을 사용하여 설명한다.

나노 PCR에 의한 동물 표본의 호흡기 병원체의 높은 처리량 검출

고 분해능 질량 분석 시연 보조 nanoelectrospray 이온화를 사용 하 여 실시간으로 exhaled 호흡의 화학 성분 특성화에 대 한 프로토콜 결합.

고 분해능 질량 분석을 결합 하는 보조 Nanoelectrospray 이온화를 사용 하 여 실시간 호흡 분석

신속 하 게 구축, 오프-그리드 실험실 설계 되었고 원격, 리소스 제한 전역 설정에 대 한 내장. 기능 및 물류 개선, 확장, 다기능 실험실 모듈의 중요 한 측면을 탐구 된다. 기본적인 실험실 작업에 대 한 점검 및 호흡기 바이러스 진단 테스트에 대 한 프로토콜 개발 이며 제시.

원격 실험실 관리: 호흡기 바이러스 진단

DNA 바이러스의 미량 검출을 위한 CRISPR/Cas12a 시스템과 재조합 중합효소 증폭을 결합한 프로토콜을 제시하고, 현장 진단 DNA 바이러스 검출을 위한 인공 지능 지원 분류를 통해 휴대용 스마트폰 현미경을 구축합니다.

RPA-CRISPR/Cas12a-SPM 및 딥러닝 기반의 DNA 바이러스 검출 시스템

다양한 박테리아 병원체는 호흡기 감염을 일으킬 수 있으며 정확하게 감지하고 신속하게 치료하지 않으면 심각한 건강 문제를 초래할 수 있습니다. 루프 매개 등온 증폭을 통해 이러한 병원체를 빠르고 정확하게 검출하면 임상 환경에서 호흡기 감염을 효과적으로 관리하고 제어할 수 있습니다.

Microfluidic-Chip-based Loop-Mediated Isothermal Amplification을 통해 하기도 감염을 일으키는 세균성 병원체의 신속한 검출

Acinetobacter baumannii의 빠르고 정확한 검출을 촉진하기 위해 A. baumannii 감염을 식별하기 위해 LbaCas12a 엔도뉴클레아제와 함께 Recombinase Polymerase Amplification(RPA)을 사용하는 프로토콜을 제시합니다.

Recombinase Polymerase Amplification/Cas12a 기반 시스템을 사용한 Acinetobacter Baumannii 감염의 빠르고 특이적 검출

여기서는 구리 및 은 기반 표면 코팅이 공기 필터에 적용된 항바이러스 효능을 평가하는 연구를 소개합니다. 바이오에어로졸 챔버와 Phi6 박테리오파지를 사용하여 이 방법은 자가 살균 실내 공기 기술을 위한 바이러스 불활성화 및 기계적 여과 효율을 정량화합니다.

코팅된 필터와 프리필터가 에어로졸화된 Phi6 바이러스의 감염성 및 농도에 미치는 영향 평가

배우세요 음이온 교환 수지를 활용한 바이오에어로졸 바이러스 검출 방법을 통해 공중보건 연구에 활용하는 기술입니다. 이 방법은 분자 검출 민감도를 높이고 현장 적용이 용이하여 다양한 바이러스 분포 연구에 기여합니다.

Bioaerosols 음이온 교환 수 지를 사용 하 여 바이러스의 검출

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