Name: 선택 및 아니오 선택 생물 검정 Pupation 환경과 Ectropis grisescens 의 출현 성공 공부 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-10-30T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 19 s
Description: 학습하세요 Ectropis grisescens의 선택 및 아니오 선택 생물 검정을 통해 토양 요인에 따른 번데기 선호도를 조사하는 방법을. 이 기술은 차나무 해충의 번데기 생태학과 생존율 연구에 활용됩니다.

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우리는 곤충 사육 및 실험 설정에 그들의 도움에 대 한 Yuzhen 원, Shiping Liang, Shengzhe 지 앤, 그리고 Yanjun 리 (임업 대학 및 조 경, 한국 중국 농업 대학) 감사 합니다. 이 작품은 국립 자연 과학 재단의 중국 (보조금 번호 31600516), 광 동 자연 과학 재단 (보조금 번호 2016A030310445), 그리고 과학 및 기술 계획 프로젝트의 광 동성 (보조금 번호 2015A020208010)에 의해 투자 되었다 .

1. 수 분-선택 생물 검정 E. grisescens 의 Pupation 취향 결정
<ol><li>
E. grisescens 의 성숙 마지막 탈피 애벌레를 얻기
	<ol>
<li>차 식물 (동백나무 sinensis L.)의 신선한 촬영 (길이 30-40 cm)를 잘라. 250 mL 삼각 플라스 크에 25-30 촬영을 삽입 합니다. 수돗물으로 플라스 크를 채우십시오. 플라스틱 분 지에 (와 함께 차 촬영) 플라스 크 3-4를 넣어 (상부: 51 cm 직경에서, 아래쪽: 직경에서 40cm, 높이: 16 cm).</li>
		<li>각 분 지에 차 싹의 잎에 E. grisescens 의 실험실 식민지의 1000-2000 애벌레 (두 번째에서 다섯 번째 탈피)를 해제 합니다. 유지 하는 통제 된 실험실 조건에서 이러한 애벌레 [빛의 14 h photoperiod 뒤 어둠의 10 h (14시 10분 L:D), 60-90% 상대 습도 (RH), 그리고 24-28 ° C]. 신중 하 게 전송 신선한 잎에 애벌레 손으로 모든 1-2 d. 매일은 분 지의 바닥에서 배설물과 파편을 제거 합니다.</li>
		<li>적극적으로 분 지의 바닥에 돌아다니는 차 새싹의 잎에서가 성숙한 마지막 탈피 애벌레를 선택 합니다. 충분 한 애벌레는 생물 검정에 사용할 수 있도록 적어도 240 성숙한 애벌레를 얻을. 참고:만 실험에 대 한 적극적으로 방황 애벌레를 선택 합니다. 이들은 pupate 준비 때문에 애벌레는 잎에 유지를 선택 하지 마십시오. 또한, 그들은 검색 하지 않습니다 적극적으로 적절 한 조건에 대 한 후 검정 경기장에 출시 되 고 있기 때문에 제한 된 모바일 활동 prepupae 선택 하지 마십시오.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
기판 준비
	<ol>
<li>수집 및 기판의 4 종류를 식별 (예를 들어, 모래, 모래 옥 토 1, 모래 2, 명 개 및 갯벌 명 개) 비 중계 방법20를 사용 하 여. 토양과 건조 기 &gt; 3 d, 80 ° C 오븐에서 모래 살 균 하십시오 그리고 그 후 완전히 건조 토양과 모래 50 ° C에서 기판 샘플의 건조 중량은 시간이 지남에 더 이상 변경 되지 않습니다 때까지 몇 주 동안.</li>
		<li>지상 나무 pestles와 박격포 건조 한 토양. 3 ㎜ 체 통해 접지 토양 및 모래를 체로 치십시오 고 sealable 비닐 봉지에 그들을 저장 합니다.</li>
		<li>계산 하는 각 기판의 다른 습기 내용 (모래, 모래 옥 토 1, 모래 명 개 2, 또는 갯벌 명 개)로2다음과 같습니다: <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/58126/58126eq1.jpg">
</li>
		<li>건조 한 토양 이나 5를 준비 하는 모래를 포함 하는 접착성 비닐 봉지에 증류수의 필요한 금액을 추가 %-20%-35%, 50%, 65% 및 80% 수 분 기판. 철저 하 게 믹스는 증류수와 토양 또는 모래.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
생물 분야 준비
	<ol>
<li>폴 리 프로필 렌 용기를 동등 하 게 분할 (상부: 길이 20.0 c m x 13.5 c m 폭, 아래 측에에서: 17.0 c m 길이에 폭, 높이 10.0 cm x: 6.5 c m) 방수 폴 리 염화 비닐 (PVC) 시트 6 실로 (높이: 3.5 c m). PVC 시트를 수정 하 고 뜨거운 접착제를 사용 하 여 균열을 봉인. 참고: 완전히 물 침투를 방지 하기 위해 모든 균열을 봉인.</li>
		<li>각 테스트에 대 한 채우기 기판의 동일한 종류를 사용 하 여 다른 습기 내용으로 6 실 (5%-20%-35%-50%, 65% 및 80% 수 분) (그림 1a). 참고: 각 테스트에만 다른 습기 내용의 기판의 1 종류를 사용 합니다. 무작위로 6 습기 내용으로 기질을 포함 하는 챔버의 순서를 지정 합니다.</li>
		<li>4-6 조각을 (그림 1b) 폴 리 프로필 렌 용기 뚜껑의 안쪽 표면에 테이프의 작은 조각을 사용 하 여 신선한 찻 잎을 붙여 넣습니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58126/58126fig1.jpg"> 그림 1: 선택 테스트에 대 한 검정 경기장의 예. (한) 방수 폴 리 염화 비닐 (PVC) 시트는 6 챔버로 폴 리 프로필 렌 용기를 동등 하 게 분할 하는 데 사용 됩니다. PVC 시트 뜨거운 접착제로 고정 되 고 어떤 균열 든 지 신중 하 게 밀봉 된다. 이 예제에서는 다른 습기 내용 (5%, 20%, 35%, 50%, 65% 및 80% 수 분)으로 모래 옥 토 2는 임의로 할당 된 순서에 있는 챔버를 채우는 데 사용 됩니다. (b) 신선한 차 잎 뚜껑의 안쪽에 붙여 있는 성숙 Ectropis grisescens 애벌레 발표 될 예정 이다. (c) PVC 시트 4 실로 4 종류의 가득 폴 리 프로필 렌 용기를 동등 하 게 분할 하는 데 사용 됩니다 기판 (모래, 모래 옥 토 1, 모래 2, 명 개 및 갯벌 명 개) 50% 수 분에. 이 그림에서 왕 외. 수정 되었습니다. 11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58126/58126fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<ol start="4"><li>
생물 검정 설정 및 데이터 기록
	<ol>
<li>30 성숙한 마지막 탈피 애벌레를 (단계 1.1.3에서에서 얻은) 폴 리 프로필 렌 컨테이너의 뚜껑에 붙여 신선한 찻 잎에 놓습니다. 조심 스럽게 뚜껑을 전복 하 고 폴 리 프로필 렌 용기를 단단히 커버.</li>
		<li>각 반복 테스트 8 x. 14:10 (L:D) photoperiod와 26 ° C에서 환경 챔버 속에서 검정 경기장 유지</li>
		<li>5 일에 각 약 실에 있는 토양의 표면에 pupae의 수를 계산 합니다. 또한, 생물 검정을 해체 하 고 기판 내 pupae의 수를 계산. 참고: 또는 기판 내에 라이브 pupae를 계산 합니다. 집게를 사용 하 여 번데기 후 복 부의 움직임을 관찰 하 여 번데기 생존 능력을 확인 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
데이터 분석
	<ol>
<li>각 테스트에 대 한 각 복제의 각 챔버에 pupae의 비율을 계산 합니다. 백분율 데이터를 로그 비 고객 및 Malmgren21에서 제공 하는 메서드를 사용 하 여 전송.</li>
		<li>번데기 (변환 된 데이터)는 단방향 분산 분석 (ANOVA)을 사용 하 여 각 실에서의 백분율을 비교 합니다. Α 의미 수준 설정 각 테스트에 대 한 0.05 =.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. 기판 선택 생물 검정 E. grisescens Pupation 환경 설정을 확인 하려면
<ol><li>단계 1.1 성숙한 마지막 탈피 애벌레를 반복 하 고 다른 습기 내용으로 기판 준비 하 1.2 단계. 이 시간 20%, 50% 및 80% 습기 기판만 필요 합니다.</li>
	<li>
생물 분야의 준비
	<ol>
<li>1.3.1 단계, 똑같이 4 챔버 PVC 시트를 사용 하 여 폴 리 프로필 렌 용기를 나눌 비슷합니다. PVC 시트를 수정 하 고 뜨거운 접착제를 사용 하 여 균열을 봉인.</li>
		<li>각 테스트에 대 한 4 종류의 약 실 채울 기판 (모래, 모래 옥 토 1, 모래 2, 명 개 및 갯벌 명 개)가 동일한 함량 (20%, 50% 또는 80% 수 분)와 임의로 할당 순서 (그림 1c). 1.3.3 뚜껑을 준비 단계를 반복 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>1.4 생물 검정 설정 하 고 데이터를 기록 하 고 데이터를 분석 하는 1.5 단계를 단계를 반복 합니다.</li>
</ol>3. 아니오 선택 생물 검정 토양 내 행동과 E. grisescens 의 출현 성공을 확인 하려면
<ol><li>단계 1.1 성숙한 마지막 탈피 애벌레를 반복 하 고 단계 3 습기 내용 (20%, 50% 및 80% 습도)에 4 기질 (모래, 모래 옥 토 1, 모래 2, 명 개 및 갯벌 명 개)을 준비 하는 1.2.</li>
	<li>
생물 검정 설정
	<ol>
<li>플라스틱 용기에 기판 추가 (상부: 지름에서 11.5 c m, 아래쪽: 직경에서 8.5 c m, 높이: 6.5 c m) 3 cm의 깊이에. 총에서 12 치료 (4 기판 종류와 3 습기 내용의 조합) 있을 것입니다 확인 합니다. 각 치료 7 반복 x.</li>
		<li>각 생물 분야의 기판에 15 성숙한 마지막 탈피 애벌레를 릴리스 합니다. 단단히 뚜껑을 취재 하 여 컨테이너를 봉인. 14:10 (L:D) photoperiod와 26 ° C에서 환경 챔버 속에서 생물 검정을 유지 참고: 있을 것입니다 필요가 없습니다 선택 생물 검정에서 설명 했 듯이 뚜껑에 신선한 찻 잎을 붙여 넣습니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
데이터 기록 및 분석
	<ol>
<li>3 일에 각 복제 기판의 표면에 어떤 죽은 애벌레와 번데기의 수를 계산 합니다. 다음과 같이 기판에 거머리 E. grisescens 개인의 비율을 계산. <img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/58126/58126eq2.jpg">
</li>
		<li>기록 신흥 성인 수 더 이상 성인 15 등장 때까지 매일 디 계산 출현 성공을 다음과 같습니다: <img alt="Equation 3" src="/files/ftp_upload/58126/58126eq3v2.jpg">
</li>
		<li>가량 개인과 일방통행 ANOVA를 사용 하 여 치료 중 출현 성공의 백분율을 비교 합니다. Α의 수준을 설정 = 0.05.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Dimou, I., Koutsikopoulos, C., Economopoulos, A. P., Lykakis, J. <a target="_blank" href="https://onlinelibrary.wiley.com/doi/pdf/10.1046/j.1439-0418.2003.00686.x">Depth of pupation of the wild olive fruit fly, Bactrocera (Dacus) oleae (Gmel.) (Dipt., Tephritidae), as affected by soil abiotic factors.</a> Journal of Applied Entomology. 127 (1), 12-17 (2003).</li>
<li>Chen, M., Shelton, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+soil+type%2C+moisture%2C+and+depth+on+swede+midge+%28Diptera%3A+Cecidomyiidae%29+pupation+and+emergence%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Impact of soil type, moisture, and depth on swede midge (Diptera: Cecidomyiidae) pupation and emergence.</a> Environmental Entomology. 36 (6), 1349-1355 (2007).</li>
<li>Holmes, L. A., Vanlaerhoven, S. L., Tomberlin, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Substrate+effects+on+pupation+and+adult+emergence+of+Hermetia+illucens+%28Diptera%3A+Stratiomyidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Substrate effects on pupation and adult emergence of Hermetia illucens (Diptera: Stratiomyidae).</a> Environmental Entomology. 42 (2), 370-374 (2013).</li>
<li>Renkema, J. M., Cutler, G. C., Lynch, D. H., MacKenzie, K., Walde, S. J. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s10340-011-0365-2">Mulch type and moisture level affect pupation depth of Rhagoletis mendax Curran (Diptera: Tephritidae) in the laboratory.</a> Journal of Pest Science. 84 (3), 281(2011).</li>
<li>Ellis, J. D. Jr, Hepburn, R., Luckman, B., Elzen, P. J. <a target="_blank" href="http://www.bioone.org/doi/abs/10.1603/0046-225X-33.4.794">Effects of soil type, moisture, and density on pupation success of Aethina tumida (Coleoptera: Nitidulidae).</a> Environmental Entomology. 33 (4), 794-798 (2004).</li>
<li>Pietrantuono, A. L., Enriquez, A. S., Fernández-Arhex, V., Bruzzone, O. A. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s10905-015-9499-z">Substrates preference for pupation on sawfly Notofenusa surosa (Hymenoptera: Tenthredinidae).</a> Journal of Insect Behavior. 28 (3), 257-267 (2015).</li>
<li>Buitenhuis, R., Shipp, J. L. <a target="_blank" href="https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1111/j.1439-0418.2007.01250.x">Influence of plant species and plant growth stage on Frankliniella occidentalis pupation behaviour in greenhouse ornamentals.</a> Journal of Applied Entomology. 132 (1), 86-88 (2008).</li>
<li>Zheng, X. L., Cong, X. P., Wang, X. P., Lei, C. L. <a target="_blank" href="http://www.bulletinofinsectology.org/pdfarticles/vol64-2011-209-214zheng.pdf">Pupation behaviour, depth, and site of Spodoptera exigua.</a> Bulletin of Insectology. 64 (2), 209-214 (2011).</li>
<li>Wen, Y., et al. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s10905-016-9572-2">Effect of substrate type and moisture on pupation and emergence of Heortia vitessoides (Lepidoptera: Crambidae): choice and no-choice studies.</a> Journal of Insect Behavior. 29 (4), 473-489 (2016).</li>
<li>Wen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.bioone.org/doi/abs/10.18474/JES16-12PT.1">Soil moisture effects on pupation behavior, physiology, and morphology of Heortia vitessoides (Lepidoptera: Crambidae).</a> Journal of Entomological Science. 52 (3), 229-238 (2017).</li>
<li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pupation+behaviors+and+emergence+successes+of+Ectropis+grisescens+%28Lepidoptera%3A+Geometridae%29+in+response+to+different+substrate+types+and+moisture+contents%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Pupation behaviors and emergence successes of Ectropis grisescens (Lepidoptera: Geometridae) in response to different substrate types and moisture contents.</a> Environmental Entomology. 46 (6), 1365-1373 (2017).</li>
<li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1226861518300797">No-substrate and low-moisture conditions during pupating adversely affect Ectropis grisescens (Lepidoptera: Geometridae) adults.</a> Journal of Asia-Pacific Entomology. 21 (2), 657-662 (2018).</li>
<li>Ge, C. M., Yin, K. S., Tang, M. J., Xiao, Q. Biological characteristics of Ectropis grisescens Warren. Acta Agriculturae Zhejiangensis. 28 (3), 464-468 (2016).</li>
<li>Xi, Y., Yin, K. S., Tang, M. J., Xiao, Q. <a target="_blank" href="http://www.insect.org.cn/EN/abstract/abstract13974.shtml">Geographic populations of the tea geometrid, Ectropis obliqua (Lepidoptera: Geometridae) in Zhejiang, eastern China have differentiated into different species.</a> Acta Entomologica Sinica. 57, 1117-1122 (2014).</li>
<li>Zhang, G. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detecting+deep+divergence+in+seventeen+populations+of+tea+geometrid+%28Ectropis+obliqua+Prout%29+in+China+by+COI+mtDNA+and+cross-breeding%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Detecting deep divergence in seventeen populations of tea geometrid (Ectropis obliqua Prout) in China by COI mtDNA and cross-breeding.</a> PloS One. 9 (6), e99373(2014).</li>
<li>Ma, T., et al. <a target="_blank" href="https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/acs.jafc.6b00339">Analysis of tea geometrid (Ectropis grisescens) pheromone gland extracts using GC-EAD and GC× GC/TOFMS.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 64 (16), 3161-3166 (2016).</li>
<li>Zhang, G. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Asymmetrical+reproductive+interference+between+two+sibling+species+of+tea+looper%3A+Ectropis+grisescens+and+Ectropis+obliqua%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+of+Entomological+Research%22%5BJournal%5D)">Asymmetrical reproductive interference between two sibling species of tea looper: Ectropis grisescens and Ectropis obliqua.</a> Bulletin of Entomological Research. , (2016).</li>
<li>Luo, Z. X., Li, Z. Q., Cai, X. M., Bian, L., Chen, Z. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+of+premating+isolation+between+two+sibling+moths%3A+Ectropis+grisescens+and+Ectropis+obliqua+%28Lepidoptera%3A+Geometridae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Evidence of premating isolation between two sibling moths: Ectropis grisescens and Ectropis obliqua (Lepidoptera: Geometridae).</a> Journal of Economic Entomology. 110 (6), 2364-2370 (2017).</li>
<li>Li, Z. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemosensory+gene+families+in+Ectropis+grisescens+and+candidates+for+detection+of+Type-II+sex+pheromones%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Chemosensory gene families in Ectropis grisescens and candidates for detection of Type-II sex pheromones.</a> Frontiers in Physiology. 8, article no: 953 (2017).</li>
<li>Chen, L. Q. Research on structure of soil particle by hydrometer method. Environmental Science Survey. 29 (4), 97-99 (2010).</li>
<li>Kucera, M., Malmgren, B. A. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/228645955_Logratio_transformation_of_compositional_data-a_resolution_of_the_constant_sum_constraint">Logratio transformation of compositional data: a resolution of the constant sum constraint.</a> Marine Micropaleontology. 34 (1-2), 117-120 (1998).</li>
<li>Hulthen, A. D., Clarke, A. R. <a target="_blank" href="https://onlinelibrary.wiley.com/doi/pdf/10.1111/j.1440-6055.2006.00518.x">The influence of soil type and moisture on pupal survival of Bactrocera tryoni (Froggatt) (Diptera: Tephritidae).</a> Australian Journal of Entomology. 45 (1), 16-19 (2006).</li>
<li>Alyokhin, A. V., Mille, C., Messing, R. H., Duan, J. J. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1023/A:1007849629409">Selection of pupation habitats by oriental fruit fly larvae in the laboratory.</a> Journal of Insect Behavior. 14 (1), 57-67 (2001).</li>
<li>Torres-Muros, L., Hódar, J. A., Zamora, R. <a target="_blank" href="https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1111/afe.12188">Effect of habitat type and soil moisture on pupal stage of a Mediterranean forest pest (Thaumetopoea pityocampa).</a> Agricultural and Forest Entomology. 19 (2), 130-138 (2017).</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

다른 토양 변수에 응답 pupation 환경 설정 몇 가지 해충6,9,,2223에 공부 되었습니다 했다. 예: Bactrocera tryoni (Froggatt)의 성숙한 애벌레의 기본을 공부 (Diptera: Tephritidae) 다른 토양 수 분 조건, 중 Hulthen 및 클라크22 가득 9 컨테이너를 포함 하는 3 x 3 라틴 스퀘어 디자인 설정 0%, 75% 또는 100% 필드 용량, 토양 및 25 성숙한 애벌레는 각 컨테이너의 표면에 발표 했다. Alyokhin 외. 23 나무 프레임, 36 센터 컨테이너 (건조 하거나 젖은) "체스판" 패턴 및 350-450 늦은 제 3 ...

곤충의 애벌레 및 성인 단계에 비해, 번데기 단계는 매우 빠르게 위험한 상황에서 벗어날 수 없다 pupae의 제한 된 모바일 능력으로 인해 취약 합니다. 곤충의 다양 한 그룹에서 사용 하는 일반적인 전략은 지상 아래 용 (예를 들면, 순서 Diptera에서에서1,2,3,4, 딱정벌레목5, Hymenoptera6, Thysanoptera7, 그리고 나비목8,,910,,1112) 지상 육 식 동물 및 환경 위험에서 그들을 보호 하기 위해. 그들의 많은 심각한 농업 및 임업 해충1,2,3,,45,6,7,8 ,,910,,1112. 토양 용 곤충의 성숙한 애벌레 일반적으로, 그들의 호스트를 두고 지상에가, 적절 한 사이트를 찾아, 흙으로 뚫으 용8,10번데기 챔버를 건설을 방황.
차 자 벌레, Ectropis grisescens 워렌 (나비목: Geometridae)의 가장 중요 한 defoliator 해충 중 동백 sinensis L.13식물 이다. 비록이 종이 1894 년에 처음으로 설명, 그것은 실수로 발견 되었습니다 Ectropis obliqua 프라 (나비목: Geometridae) 과거에 수십 년간14,15. 형태학, 생물학, 및 두 형제 종 사이의 지리적 분포 차이 일부 최근 연구14,,1516에 설명 했습니다. 예를 들어 장 외. E. grisescens 는에 비해 훨씬 넓은 분포 하는 반면 15 E. 오블리크 주로 중국의 3 개의 지방 (안후이, 강 소, 절 강)의 경계에서 발생 한 보고 E. 간접. 따라서, E. grisescens 으로 인 한 경제적 손실을 크게 간과 하 고, 그리고이 해충의 지식을 광범위 하 게 개정 하 고16,,1718,19 갱신 . 우리의 이전 연구 보여주었다 그 E. grisescens 토양 내에서 pupate을 선호 하지만 때 토양 (사용할 수 없음-pupation-기판 조건)11,12pupate도 수.
이 문서에서는 (1) 결정에 E. grisescens 의 pupation 기본 기판 종류 같은 요인 및 객관식 생물 검정를 사용 하 여 콘텐츠 분과 (2) 비 생물 적인 요인의 영향을 확인 하는 단계별 절차를 제공 합니다. pupation 동작 및에 아니오 선택 생물 검정을 사용 하 여 E. grisescens 의 출현 성공. 이러한 생물 검정의 모두 잘 통제 된 실험실 조건 하에서 지휘 된다. 또한, 이러한 생물 검정 pupation 행동에 다른 요인의 영향 및 다양 한 토양 용 곤충의 survivorship 적응 됩니다.

<table><tbody><tr><td>삼각형 플라스크</td><td>Bomex Chemical (Shanghai) Co., LTD</td><td>99</td><td>250 mL</td></tr><tr><td>플라스틱 분지</td><td>Chahua, Fuzhou, China</td><td>100</td><td>윗면: 지름 51cm; 아랫면: 지름 40cm; 높이: 16cm</td></tr><tr><td>지퍼 잠금 가방</td><td>Glad, 광저우, 중국</td><td>126/133</td><td></td></tr><tr><td>폴리프로필렌 용기</td><td>Youyou Plastic Factory, Taian, China</td><td>139/155/160/161/190</td><td>윗면: 20.0cm [L] &시간; 13.5cm [W], 바닥면 : 17.0cm [L] &times; 10.0cm [W], 높이 : 6.5cm</td></tr><tr><td>방수 polyviny 염화물 시트</td><td>Yidimei, Shanghai, China</td><td>141</td><td></td></tr><tr><td>Tape</td><td>V-tech, Guangzhou, China</td><td>VT-710</td><td></td></tr><tr><td>오븐 건조기</td><td>Kexi, Shanghai, China</td><td>KXH-202-3A</td><td></td></tr><tr><td>환경 챔버</td><td>생명 장치, 닝보, 중국</td><td>PSX-280H</td><td></td></tr></tbody></table>

선택 및 아니오 선택 생물 검정 pupation 환경과 ectropis grisescens 의 출현 성공 공부

Choice and No-Choice Bioassays to Study the Pupation Preference and Emergence Success of Ectropis grisescens

많은 곤충 애벌레와 어른으로 땅 위에 사는 고 땅 아래 pupate로. 그들의 라이프 사이클의 지상 단계에 비해 관심을 덜 지급 되었습니다 어떻게 환경 요인 영향에 이러한 곤충 때 그들은 토양 내에서 pupate. 차 자 벌레, Ectropis grisescens 워렌 (나비목: Geometridae), 차 식물의 심각한 해충 이며 중국 남부에 있는 거 대 한 경제적 손실 발생 했습니다. 프로토콜 설명 여기 객관식 생물 검정을 통해 조사 하는 것을 목표로, 마지막 탈피 여부 성숙 E. grisescens 애벌레 수 콘텐츠처럼는 기판 유형 및 수 분, 토양 변수를 차별 하 고 아니오-선택을 통해 결정 생물 검정, 콘텐츠의 기판 유형 및 습기 pupation 행동에 미치는 영향 및의 출현 성공 E. grisescens. 결과의 E. grisescens pupation 생태의 이해를 향상 시킬 것 이다 및 E. grisescens 인구 억제 위해 토양 관리 전술에 대 한 통찰력을가지고 있습니다. 또한, 이러한 생물 검정 survivorship 토양 용 해충의 pupation 동작에 다양 한 요인의 영향을 공부 하 고 수정할 수 있습니다.

수 분-선택 생물 검정 훨씬 더 많은 E. grisescens 개인에 pupated 또는 5%와 35% 습기 내 모래 80% 수 분 모래 (그림 2a)에 비해 보여주었다. 그러나, 훨씬 더 많은 개인 또는 토양 (모래 옥 토 1과 2와 갯벌 명 개)는 중간 함량 (그림 2b - 2d)를 했다 pupate 선호.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58126/58126fig2.jpg"> 그림 2: 수 분-선택 생물 검정에서 결과. 이러한 패널 (는) 모래, (b)의 다른 습...

여기, 선물이 토양 요인 (예, 기판 종류 및 습기 콘텐츠)에 대 한 응답 Ectropis grisescens 의 성숙한 애벌레의 pupation 선호를 조사 하는 프로토콜 선택 생물 검정을 사용 하 여. 우리 또한 제시 pupation 동작에 영향을 주는 요소를 확인 하려면 아니오 선택 생물 검정의 프로토콜의 survivorship E. grisescens.

선택 및 아니오 선택 생물 검정 Pupation 환경과 Ectropis grisescens 의 출현 성공 공부

Many insects live above the ground as larvae and adults and as pupate below the ground. Compared to the above-ground stages of their life cycles, less ...

이 방법은 차 잎 애벌레의 새끼 생태에 관한 중요한 정보를 제공 할 수 있습니다, 에트로피스 grisescens, 이러한 그들의 새끼 행동과 다른 환경 요인에 대한 응답으로 푸파 생존과 같은. 이 기술의 주요 장점은, 그것은 당신이 Ectropis grisescens의 pupation 환경 설정 및 출현 성공을 측정하는 등의 간단한 방법을 사용할 수 있습니다. 우선, 차 식물에서 신선한 싹을 잘라.그런 다음 250 밀리리터 삼각형 플라스크를 수돗물로 채우고 싹을 플라스크에 넣습니다. 플라스크를 3~4개의 플라스크를 플라스틱 분지로 옮는다. 다음으로, 일래센의 실험실 식민지에서 1, 000에서 2, 000 애벌레를 차 싹의 잎에 방출한다.통제된 실험실 조건에서 애벌레를 유지하십시오. 싹의 잎에서 떨어지는 성숙한 마지막 별 애벌레를 얻고 적극적으로 분지의 바닥을 따라 방황. 토양과 모래를 섭씨 80도 오븐 건조기에서 3일간 살균합니다.그런 다음 몇 주 동안 50섭씨에서 토양과 모래를 모두 건조시다. 기판 샘플은 시간이 지남에 따라 무게가 변하지 않을 때 충분히 건조됩니다. 말린 토양을 갈기 위해 나무 유봉과 박격포를 사용합니다.그런 다음 모래와 지상 토양을 3밀리미터 체로 체질합니다. 필요한 양의 증류수를 기판을 포함하는 밀봉된 가방에 넣고 철저히 섞습니다. 다음으로 PVC 시트를 사용하여 폴리프로필렌 용기를 6개의 동일한 챔버로 나눕니다.PVC 시트를 고정하고 뜨거운 접착제로 균열을 밀봉합니다. 다음으로, 6개의 챔버를 동일한 유형의 기판으로 다른 수분 함량으로 채웁니다. 작은 테이프 조각을 사용하여 폴리 프로필렌 용기의 뚜껑 의 내부 표면에 신선한 잎 4 ~ 6 조각을 붙여 넣습니다.다음으로, 챔버 용기의 뚜껑에 붙여진 잎에 성숙한 라스트 애벌레 30마리를 놓습니다. 뚜껑을 조심스럽게 뒤집어 용기를 덮습니다. 섭씨 26도에서 14~10광/어두운 광도가 있는 환경 챔버에서 바이오아세이 경기장을 유지합니다.5일째에는 각 챔버의 기판 표면에 새끼의 수를 계산합니다. 바이오아세이를 해체하고 푸파의 수를 계산합니다. 먼저 PVC 시트를 사용하여 폴리프로필렌 용기를 4개의 챔버로 나눕니다.그런 다음 뜨거운 접착제로 PVC 시트를 수정하고 밀봉하십시오. 용기의 챔버를 동일한 수분 함량과 무작위로 할당된 주문으로 4가지 유형의 기판으로 채웁니다. 그런 다음 테이프를 사용하여 신선한 차 잎을 뚜껑에 붙여 넣은 다음 용기에 뒤집어 놓습니다.다음으로, 애벌레를 나뭇잎으로 옮기고 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 데이터를 기록하고 분석합니다. 12기판 수분 함량 처리를 준비한 후, 플라스틱 용기에 기판을 추가합니다. 그런 다음 각 경기장의 기판에 15 성숙한 마지막 별 애벌레를 풀어 놓습니다.섭씨 26도에서 14~10광/암흑 광도가 있는 환경 챔버의 각 바이오아세이 경기장을 유지합니다. 셋째 날에는 각 경기장의 기판 표면에 새끼와 죽은 애벌레의 수를 계산합니다. 마지막으로, 15일 동안 새로운 성인이 나오지 않고 매일 신흥 성인의 수를 기록합니다.이 프로토콜에서, 수분 및 기질 선택 bioassays는 e.grisescens의 새끼 선호도를 연구하기 위하여 이용되었습니다. 수분 선택 바이오아세이는 80%의 수분 모래에 비해 5%와 35% 이내의 수분 모래에 더 많은 개인이 모여 있는 것으로 나타났다. 그러나, 훨씬 더 많은 개인 중간 수 분 함량으로 토양 또는 토양 내에서 새끼를 선호.기판 선택 바이오아세이는 모래가 20%의 수분 조건하에서, 그리고 80% 수분 조건 하에서 E.grisescens에 의해 가장 선호되었다는 것을 밝혔습니다. 그러나 50%의 수분 조건에서 4개의 기판 중에는 새끼 선호도가 발견되지 않았다. 개발 후, 이 기술은 곤충학 분야의 연구원들이 많은 토양 을 푸핑 곤충의 새끼 생태를 탐구할 수있는 길을 열었습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Environment

환경

씹는 곤충 herbivores 식물의 저항은 여러 가지 방법으로 테스트할 수 있습니다. 여기, 우리는 선택과 해충 종 피에리스 rapae에 대한 저항을 식별하는 모델 식물 Arabidopsis thaliana의와 노 선택 실험을 셋업하는 방법을 보여줍니다.

씹는 곤충에 A.의 thaliana의 저항을 테스트하기 위해 선택과 노 - 선택 Assays

이 기사에서는 번데기 내부를 그대로 유지하면서 곤충의 번데기를 제거하는 기술에 대해 설명하므로 추가 조사에 적합합니다. 예시 프로토콜은 Drosophila guttifera를 사용한 절차를 보여줍니다. 그러나 이 기술은 다른 초파리 종에 적용할 수 있습니다.

곤충 번데기 제거: 번데기 조사 방법

초파리 암컷은 기질 중에서 선택하고 알을 낳기에 매력적인 위치를 선택합니다. 이 비디오는 알을 낳는 선호 분석이라고 하는 의사 결정을 테스트하는 행동 분석에 대해 설명합니다. 특집 클립은 연구원들이 동시에 많은 암컷의 행동을 테스트할 수 있을 뿐만 아니라 비디오 녹화 및 광유전학 설정과도 호환될 수 있도록 하는 맞춤형 설정을 사용한 절차를 보여줍니다.

초파리 Egg-Laying Preference Assay: A Method to Test Decision-Making in Flys(알낳기 선호도 분석: 파리의 의사 결정을 테스트하는 방법)

C. elegans의 알을 낳는 행동은 발달, 생식 및 해부학 연구에서 중요한 정보를 제공할 수 있습니다.이 비디오는 알을 낳는 분석의 중요한 단계를 소개하고 약물의 생식 독성을 테스트하는 샘플 실험을 보여줍니다.

Egg Laying Assay: 예쁜꼬마선충의 알을 낳는 행동을 정량화하는 방법

수직, T-미로 olfactometer는 절지 동물의 행동 반응을 시금에 설명되어 있습니다. olfactometer은 두 잠재적 인 냄새 필드에 대상이 때 실험은 실험 대상으로 수행 선택권을 측정 할 수 있습니다. 모두 인력과 odorants의 반발이 장치와 함께 측정 할 수 있습니다.

Odorants에 Arthropod 응답을 수직 T-미로 초이스 분석

이 프로토콜은 단일 동물 해상도에서 Drosophila melanogaster의 산란 선호도를 테스트하기 위한 고처리량 분석을 설명합니다.  이 분석은 간단한 의사 결정 과정을 제어하는 유전자 및 회로 구성 요소를 식별할 수 있는 간단하고 효율적이며 확장 가능한 플랫폼을 제공합니다.

높은 처리량 분석은 개인의 알을 낳는 환경 설정을 검사합니다<em&gt; 노랑 초파리</em

유치 하 고 에메랄드 색 재 송곳 (EAB) 캡처 효과적인 함정 탐지 하 고 침입 해충 관리의 핵심 요소입니다. 이층 트랩, 재 나무 근처의 전체 태양에 시각과 후 각 신호를 통합 했으며 현장 실험에서 다른 함정 디자인 보다 EAB를 캡처할 가능성이 매우 높습니다.

에메랄드 색 재 송곳의 조기 발견을 위한 이층 트랩을 구축

여기서, 우리는 1) 연방 멸종 위기에 처한 마이애미 블루 나비(Cyclargus thomasi bethunebakeri)의실험실 포로 전파에 대한 프로토콜을 제시하고, 2) 미숙한 발달 시간 및 애벌레 스타디아의 수와 같은 기본적인 생활 역사 정보를 평가. 두 방법 모두 다른 ex situ 보존 프로그램과 함께 사용하도록 조정할 수 있습니다.

생명역사 지식과 효과적인 Ex Situ 보존 기술을 향상시키기 위한 위험에 처한 나비 포로 전파 프로그램

여기에 제시 헬 리코파 armigera 의 프로토콜입니다 (Hübner) 태아 미세 주입 및 CRISPR / Cas9 게놈 편집에 의해 생성 된 녹아웃 돌연변이 식별. 돌연변이 곤충은 생체 내의 다른 유전자 들 사이에서 유전자 기능 및 상호 작용의 추가 연구를 가능하게 합니다.

CRISPR/Cas9 게놈 편집 헬리코파 아르미게라 의 배아 미세 주입 및 녹아웃 돌연변이 식별 (휘브너)

여기에서, 날파리의 유충과 암컷에서 먹이 공급원과 산란 선호도를 평가하기 위한 두 가지 프로토콜이 상세히 설명된다. 이들은 두 가지 상호 작용 요소, 즉 기판 유형과 온도의 네 가지 선택으로 구성됩니다. 이 분석을 통해 유충의 먹이 공급원 선호도와 암컷의 산란 부위 선호도를 결정할 수 있습니다.

생활사 선택 탐색: 날파리 유충과 암컷 선호도에 대한 상호 작용 요인으로 온도 및 기질 유형 사용

AC-DC 전기 침투를 사용하여 사람의 손에 있는 Culex tarsalis 모기의 프로빙 및 섭취 행동을 연구하기 위한 절차가 설명되어 있습니다.

인간의 손에 Culex tarsalis 모기의 프로빙 및 섭취 행동 연구를 위한 AC-DC 전기 침투 검사

학습하세요 Ectropis grisescens의 선택 및 아니오 선택 생물 검정을 통해 토양 요인에 따른 번데기 선호도를 조사하는 방법을. 이 기술은 차나무 해충의 번데기 생태학과 생존율 연구에 활용됩니다.

선택 및 아니오 선택 생물 검정 Pupation 환경과 Ectropis grisescens 의 출현 성공 공부

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