Name: 쥐와 쥐에 Circumlimbal 봉합에 의해 유도 된 녹 내장의 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-10-05T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min
Description: 학습하세요 쥐와 쥐에서 원주형 봉합술을 이용해 만성 안압 상승을 유도하는 방법을. 이 기법은 녹내장 연구와 망막 신경절 세포 회복 메커니즘 연구에 활용됩니다.

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이 작품은 국가 건강 및 의료 연구 위원회의 오스트레일리아 프로젝트 그랜트 (1046203), 호주 연구 협의회 미래 친교 (FT130100338)에 의해 자금을.

모든 실험 절차는 과학적 목적, 호주에서 국민 건강 및 의료 연구 위원회에 의해 설정에 대 한 관심과 동물의 사용에 대 한 호주 코드 연습에 따라 실시 했다. 하 워드 Florey 연구소 동물 윤리 위원회에서 윤리 승인을 얻은 (승인 번호 13-044-UM 그리고 13-068-음 쥐와 생쥐, 각각).
1. 안 구내 압력 측정 의식 쥐에
<ol><li>실험실 리바운드 tonometer 쥐 설정으로 설정 합니다. 진정 동물을 부드러운 헝겊 조각에 깨어 쥐 swaddle 머리와 목 노출. 탐정의 가슴에 대하여 휴식 하는 동물의 다시 몸통 한 손에 부드럽게 잡으십시오. 참고: 국 소 마 취는 필요 하지 않습니다.</li>
	<li>사용 하 여 다른 손을가지고 쥐의 눈 근처 리바운드 tonometer IOP 프로브 팁은 약 2-3 m m에서 및 수직 각 막 정점에. 오른손을 사용 하 여 동물의 오른쪽 눈과 왼쪽된 눈에 대 한 왼손에 IOP를 측정.</li>
	<li>진정 하 고 측정 한 번 하는 쥐에 대 한 몇 초 동안 기다립니다. IOP 프로브 팁 부드럽게 명 중 각 막 정점 한번; 관찰 그리고 리바운드 tonometer 비프음을 한 번 듣고. 참고: 단일 비프음은 tonometer의 성공적인 측정, LCD 화면에서 읽을 수 있는 확인 합니다. 이중 비프음 측정 오류를 나타냅니다. 측정 오류 조사 및 각 막, tonometer, 또는 눈 꺼 풀 또는 각 막의 중앙이 아닌 일부 눈에 띄는 조사 방향에 과도 한 기울기 사이의 부적절 한 작동 거리 같은 요인에서 발생할 수 있습니다. 측정 오류에 관한 더 세부 사항에 대 한 제조 업체에서 리바운드 tonometer 설명서를 참조 하십시오.</li>
	<li>10 번에 1-2 초의 간격 1.3 단계를 반복, 이러한 측정에서 그 시간 지점에 대 한 평균 IOP 값을 파생. 5번째 읽기 후에 tonometer를 다시 설정 합니다.</li>
	<li>직렬 모니터링, IOP 하루의 고 일주 IOP 사이클20,21인 변화를 최소화 하기 위해 일관 된 조명 조건 하에서 같은 시간에 측정 합니다.</li>
</ol>2. 의식이 쥐 안 구내 압력 측정
<ol><li>제조업체의 지시에 따라 마우스 설정에 리바운드 tonometer를 설정 합니다.</li>
	<li>손으로 마우스를 억제, 그릴 케이지 위에 마우스 놓고 살짝 꼬리를 뒤로 당겨. 참고:이 동물 그것의 몸을 스트레칭 약간 앞 다리와 시도 자체를 앞으로, 금속 그릴에 그립을 자극할 것 이다.<ol>
<li>다른 손을 사용 하 여 즉시 귀 뒤에 느슨한 피부를 파악. 테일 링 손가락과 가운데 손가락 사이 (또는 작은 손가락과 손바닥 사이)를 개최 하 여 동물의 체를 보안 합니다. 참고: 질 식과 눈에 적용 압력을 피하기 위해 너무 꽉 피부를 파악 하지 않으려고.</li>
	</ol>
</li>
	<li>지금 무료 손 (처음 들고 꼬리), IOP 프로브 팁은 약 2-3 m m 및 수직 각 막 정점에 마우스의 눈 근처 리바운드 tonometer가지고. 다른 눈을 측정 하는 다른 눈 이제는 tonometer 앞 마우스를 회전 합니다.</li>
	<li>진정 하 고 측정의 단추 한 번 마우스를 기다립니다. IOP 프로브 팁 부드럽게 칠 각 막 정점; 관찰 단일 경고음이 시스템이 성공 측정을 확인. 참고: 이중 비프음 측정 오류를 나타냅니다. 그것을 두 번째 실험 읽기 및 문서 IOP 읽기 첫 번째 실험은 측정 하는 동안 도움이 됩니다.</li>
	<li>2.4 파생 된 IOP 10 성공적인 읽기를 반복 합니다. 5번째 읽기 후에 tonometer를 다시 설정 합니다. 읽기 1-2 초 간격을 허용 한다.</li>
	<li>쥐에서 직렬 측정에 의하여 오늘의 하 고 일관 된 조명 조건 하에서 동시에 마우스 IOP를 측정 합니다.</li>
</ol>3. 마 취 쥐 및 쥐에 안구 내부 압력 상승의 유도
<ol><li>70% 에탄올에 0.5% 액체와 수술 도구를 청소 합니다. 무 균 커튼으로 벤치를 커버. 오토 클레이 브 모든 수술 장비 사전. 적절 한 개인 보호 장비 (스 쿠와 멸 균된 장갑, 가운)을 착용 하는 모든 경험을 확인 하십시오.</li>
	<li>전신 마 취 유도, 유도 챔버에서 동물을 배치 합니다. 3 L/min의 유량에 O2 와 3-3.5 %isoflurane 제공 합니다.<ol>
<li>1.5 %2 L/min 전달 통해 수술 내내 설치류 얼굴 마스크에서 isoflurane와 마 취를 유지 합니다. 발 핀치 반사의 부재에 의해 마 취의 충분 한 깊이 확인 합니다.</li>
		<li>때 약 60 호흡/분 호흡 속도 유지 하기 위해 필요한 유량을 조정 하 여 호흡을 하지 마십시오.</li>
	</ol>
</li>
	<li>치료 컨트롤 역할을 contralateral 눈으로, 눈의 고혈압을 유발 하는 눈 하나를 임의로 선택 합니다. 국 소 마 취에 대 한 0.5 %proxymetacaine 안과 솔루션의 한 방울을 주는. 눈 표면을 청소, 살 균 정상적인 염 분의 3 mL와 함께 눈을 씻어 하십시오.</li>
	<li>커버는 살 균, fenestrated 수술 드 레이프, 봉합 될에 눈을 노출 된 동물.</li>
	<li>전세계 안구 결 막에 지갑 문자열 봉합을 수행 합니다. 쥐, 7/0 나일론 봉합 병렬 및 2mm 후부 limbus (그림 1) 짜 다. 쥐, 장소 10/0 나일론 봉합 1 m m는 limbus를 후부.<ol>
<li>알아서 하지 여 sclera에 침투. 수술 하는 동안 갑자기 동 공 팽창이 나타냅니다는 sclera 침투 가능성이 있다.</li>
		<li>5-6 앵커 포인트 쥐, 및 쥐에 4-5 앵커 포인트를 사용 하 여 결 막에 봉합 앵커.</li>
		<li>이러한 정 맥의 교차점에 결 막 아래 봉합을 스레딩 하 여 주요 episcleral 혈관에 직접 압축을 하지 마십시오. 참고: 쥐에 있는 주요 episcleral 정 맥의 압축을 피하는 것이 좋습니다, 하는 동안이 수행 되지 않습니다 정기적으로 쥐 마우스 눈에서 이러한 혈관의 낮은 가시성 때문에. 주요 정 맥 직접 압축 되지 않는다 하더라도 그것은 episcleral 정 맥 총에 작은 혈관 압력, 기여 지속적인된 IOP 상승 하는 요인이 될 수 있는 가능성이 (IOP 상승의 메커니즘에 대 한 논의 참조 하십시오).</li>
	</ol>
</li>
	<li>두 번째 간단한 매듭 (그림 1)에 의해 다음 매듭을 매 서 지갑 문자열 봉합 고정. 지나치게 높은 수술 후 IOP 스파이크를 방지 하려면 조 두 번째 매듭을 체결 직전 IOP를 측정할 수가 있다.<ol>
<li>IOP 너무 높게 되 면 부분적으로 봉합 ( 그림 1A화살표)의 한쪽 끝에 긴장을 방출 하 여 슬립 매듭을 조정 합니다.</li>
		<li>후 원하는 IOP 이루어집니다 (이상적으로 30-60 mmHg 쥐 또는 쥐에 30-40 mmHg), 봉합 ( 그림 1화살표)의 끝에는 연속 당기는 힘을 유지 하면서 두 번째 매듭에서 넥타이.</li>
		<li>두 번째 후 매듭 강화 되었습니다, 그리고 어떤 외국 몸 센 세이 션을 최소화 하기 위해 봉합의 끝을 잘라. 전신 마 취에서 회복 하는 동안 동물을 모니터링 합니다. 참고: 그것은 눈에 적절 한 내부 압축 되도록 때 첫 매듭을 매는 매듭을 사용 하는 것이 중요입니다. 몇 주 후 끝 결 막에 포함 되 고 일반적으로 주의 된다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. 모니터링 IOP
<ol><li>Post-operatively isoflurane 마 취 아래 2 분에서 첫 번째 IOP 측정을 가져가 라. 설치류는 앞서 언급 한 1 단계와 2 단계에 의하여 의식 회복 하는 때 그 후, IOP를 모니터링 합니다. 참고: 매일 첫 주에 한 번 또는 두 번 주당 그 후 두 번 (2 분, 1 시간), 첫 번째 하루 동안 IOP를 모니터링 합니다.</li>
</ol>5. 시 금 망막 구조와 기능
<ol><li>설명 된 대로 측정 dark-adapted electroretinogram (에) 망막 기능을 원하는 실험 끝 지점에서 (이 경우에 8 주 쥐 및 쥐에 있는 12 주 후), 케 타 민/xylazine와 복 주입을 사용 하 여 일반 마 취, 자세히 다른15,,1617. 참고: 우리가 발견 강력한 신경 절 세포 기능 장애, 망막 신경 섬유 층 숱이 고 신경 절의 세포 손실 8 ~ 12 주 사이의 기간에 대 한. 다른 사람 성공적으로 IOP 상승14,15의 긴 기간을 고용 했다.</li>
	<li>직후에 측정, 망막 신경 섬유 층 (RNFL)의 두께 스펙트럼 도메인 광학 일관성 단층 촬영 (SD-10 월) 16,18를 사용 하 여 전체 망막 두께 측정 합니다.</li>
	<li>종 적 연구의 끝에, 깊은 마 취 동물 안락사.<ol>
<li>해 부 조직학18, 다중 접합 항 체 (RBPMS) 또는 뇌 특정 homeobox/POU 도메인 RNA 의무적인 단백질 등 망막 신경 절 세포 (RGC) 특정 항 체를 사용 하 여 전체 마운트 망막의 예를 들어 immunostaining에 대 한 망막 단백질 3A (Brn3a)16,,1922.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Morrison, J. C., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9093024">A rat model of chronic pressure-induced optic nerve damage.</a> Experimental Eye Research. 64 (1), 85-96 (1997).</li>
<li>Feng, L., Chen, H., Suyeoka, G., Liu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+laser-induced+mouse+model+of+chronic+ocular+hypertension+to+characterize+visual+defects%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A laser-induced mouse model of chronic ocular hypertension to characterize visual defects.</a> Journal of Visualized Experiments. (78), (2013).</li>
<li>Chiu, K., Chang, R., So, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-induced+chronic+ocular+hypertension+model+on+SD+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Laser-induced chronic ocular hypertension model on SD rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (10), 549(2007).</li>
<li>Quigley, H. A., Addicks, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+experimental+glaucoma+in+primates.+I.+Production+of+elevated+intraocular+pressure+by+anterior+chamber+injection+of+autologous+ghost+red+blood+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Chronic experimental glaucoma in primates. I. Production of elevated intraocular pressure by anterior chamber injection of autologous ghost red blood cells.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 19 (2), 126-136 (1980).</li>
<li>Bunker, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+glaucoma+induced+by+ocular+injection+of+magnetic+microspheres%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Experimental glaucoma induced by ocular injection of magnetic microspheres.</a> Journal of Visualized Experiments. (96), (2015).</li>
<li>Weber, A. J., Zelenak, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+glaucoma+in+the+primate+induced+by+latex+microspheres%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Experimental glaucoma in the primate induced by latex microspheres.</a> Journal of Neuroscience Methods. 111 (1), 39-48 (2001).</li>
<li>Moreno, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+experimental+model+of+glaucoma+in+rats+through+intracameral+injections+of+hyaluronic+acid%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">A new experimental model of glaucoma in rats through intracameral injections of hyaluronic acid.</a> Experimental Eye Research. 81 (1), 71-80 (2005).</li>
<li>Hoyng, P. F., Verbey, N., Thorig, L., van Haeringen, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topical+prostaglandins+inhibit+trauma-induced+inflammation+in+the+rabbit+eye%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Topical prostaglandins inhibit trauma-induced inflammation in the rabbit eye.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 27 (8), 1217-1225 (1986).</li>
<li>Kezic, J. M., Chrysostomou, V., Trounce, I. A., McMenamin, P. G., Crowston, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+anterior+chamber+cannulation+and+acute+IOP+elevation+on+retinal+macrophages+in+the+adult+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Effect of anterior chamber cannulation and acute IOP elevation on retinal macrophages in the adult mouse.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 54 (4), 3028-3036 (2013).</li>
<li>Waisbourd, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+structural+and+functional+changes+after+intraocular+pressure+reduction+in+patients+with+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Graefe%27s+Archive+for+Clinical+and+Experimental+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Reversible structural and functional changes after intraocular pressure reduction in patients with glaucoma.</a> Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. 254 (6), 1159-1166 (2016).</li>
<li>Foulsham, W. S., Fu, L., Tatham, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+improvement+following+glaucoma+surgery%3A+a+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Visual improvement following glaucoma surgery: a case report.</a> BMC Ophthalmology. 14, 162(2014).</li>
<li>Anderson, A. J., Stainer, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+control+experiment+for+studies+that+show+improved+visual+sensitivity+with+intraocular+pressure+lowering+in+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">A control experiment for studies that show improved visual sensitivity with intraocular pressure lowering in glaucoma.</a> Ophthalmology. 121 (10), 2028-2032 (2014).</li>
<li>Ventura, L. M., Feuer, W. J., Porciatti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+loss+of+retinal+ganglion+cell+function+is+hindered+with+IOP-lowering+treatment+in+early+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Progressive loss of retinal ganglion cell function is hindered with IOP-lowering treatment in early glaucoma.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 53 (2), 659-663 (2012).</li>
<li>Zhao, D., et al. ARVO abstract number 3696 - B0043. annual meeting of Association for Research in Vision and Ophthalmology, Honolulu, Hawaii, USA. , (2018).</li>
<li>Liu, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+ocular+hypertension+induced+by+circumlimbal+suture+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Chronic ocular hypertension induced by circumlimbal suture in rats.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 56 (5), 2811-2820 (2015).</li>
<li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+Circumlimbal+Suture+Model+of+Chronic+IOP+Elevation+in+Mice+and+Assessment+of+Changes+in+Gene+Expression+of+Stretch+Sensitive+Channels%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Characterization of the Circumlimbal Suture Model of Chronic IOP Elevation in Mice and Assessment of Changes in Gene Expression of Stretch Sensitive Channels.</a> Frontiers in Neuroscience. 11, 41(2017).</li>
<li>Nguyen, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+Recording+of+Electroretinography+and+Visual+Evoked+Potentials+in+Anesthetized+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (113), (2016).</li>
<li>Van Koeverden, A. K., He, Z., Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29739991">Systemic hypertension is not protective against chronic IOP elevation in a rodent model.</a> Scientific Reports. 8 (1), 7107(2018).</li>
<li>Rodriguez, A. R., de Sevilla Muller, L. P., Brecha, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+RNA+binding+protein+RBPMS+is+a+selective+marker+of+ganglion+cells+in+the+mammalian+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Neurology%22%5BJournal%5D)">The RNA binding protein RBPMS is a selective marker of ganglion cells in the mammalian retina.</a> Journal of Comparative Neurology. 522 (6), 1411-1443 (2014).</li>
<li>Aihara, M., Lindsey, J. D., Weinreb, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Twenty-four-hour+pattern+of+mouse+intraocular+pressure%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Twenty-four-hour pattern of mouse intraocular pressure.</a> Exp Eye Research. 77 (6), 681-686 (2003).</li>
<li>Jia, L., Cepurna, W. O., Johnson, E. C., Morrison, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patterns+of+intraocular+pressure+elevation+after+aqueous+humor+outflow+obstruction+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Patterns of intraocular pressure elevation after aqueous humor outflow obstruction in rats.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 41 (6), 1380-1385 (2000).</li>
<li>Nadal-Nicolas, F. M., Jimenez-Lopez, M., Sobrado-Calvo, P., Nieto-Lopez, L., Canovas-Martinez, I., Salinas-Navarro, M., Vidal-Sanz, M., Agudo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brn3a+as+a+marker+of+retinal+ganglion+cells%3A+qualitative+and+quantitative+time+course+studies+in+naive+and+optic+nerve-injured+retinas%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Brn3a as a marker of retinal ganglion cells: qualitative and quantitative time course studies in naive and optic nerve-injured retinas.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 50 (8), 3860-3868 (2009).</li>
<li>Liu, H. H., Flanagan, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Mouse+Model+of+Chronic+Ocular+Hypertension+Induced+by+Circumlimbal+Suture%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">A Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension Induced by Circumlimbal Suture.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 58 (1), 353-361 (2017).</li>
<li>Liu, H. H., He, Z., Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversal+of+functional+loss+in+a+rat+model+of+chronic+intraocular+pressure+elevation%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmic+%26+Physiological+Optics%22%5BJournal%5D)">Reversal of functional loss in a rat model of chronic intraocular pressure elevation.</a> Ophthalmic & Physiological Optics. 37 (1), 71-81 (2017).</li>
<li>Liu, H. H., Zhang, L., Shi, M., Chen, L., Flanagan, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+laser+and+circumlimbal+suture+induced+elevation+of+intraocular+pressure+in+albino+CD-1+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Comparison of laser and circumlimbal suture induced elevation of intraocular pressure in albino CD-1 mice.</a> PLoS One. 12 (11), 0189094(2017).</li>
<li>Shen, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraocular+Pressure+Induced+Retinal+Changes+Identified+Using+Synchrotron+Infrared+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Intraocular Pressure Induced Retinal Changes Identified Using Synchrotron Infrared Microscopy.</a> PLoS One. 11 (10), 0164035(2016).</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

Circumlimbal 봉합 만성 눈의 고혈압의 새로운 모델입니다. 연구는 대표적인 결과 공급된16,18, 뿐만 아니라이 동물 모델은 최근 연구15,,2324,25의 수에 이용 되어 ,26. 이러한 이전 보고서에 걸쳐 비교는 방법은 모델 유도 동안 IOP 상승, 간단한 IOP 스파이크의 크기를 포함 하 여 반복 결과 생성 보여줍니다 (나중에 토론을 참조 하십시오). IOP 상승 강력한 RGC 변화를 유도 하는 데 필요한 기간은 8과 12 주 사이, 비록 모델 수 유지에 대 한 이상, IOP 상승14</s...

동물 모델 평가 잠재적인 치료 내정간섭으로 기본 녹 병, 잘을 처리 하는 세포의 실험실 조사에 대 한 중요 한 플랫폼을 제공 합니다. 여러 모델을 유도할 수 있는 지속적인된 intraocular 압력 (IOP) 상승, 녹 내장에 대 한 가장 중요 한 위험 요소를 생산 하기 위해 개발 되었습니다. IOP 상승에 적용 된 방법은 다음과 같습니다: episcleral에 고 식 염 수 주입 혈관1, 레이저 photocoagulation 배수 채널2 의 또는 limbal 혈관3및 intracameral와 같은 물질의 주입 빨간 유령 혈4, microbeads5,6 , 점 탄성 요원7. 각 방법의 장점과 한계는 있습니다.
녹 내장에 대 한 좋은 모델 외상, 염증 및 미디어 불투명도 등 최소한의 합병증과 질병 과정을 모방 해야 합니다. 이러한 합병증 IOP 상승, 유도 하는 데 사용 하는 절차와 자주 연결 되 고 결과의 해석을 혼동 수 있습니다. 예를 들어 paracentesis 앞쪽 챔버의 이물질은 도입 되지, 하는 경우에 표시 되었습니다 외상 및 염증의 전형적인 glaucomatous 변경8,9은 아닙니다 원인. 염증 방지의 중요성 뿐만 아니라 vivo에서 이미징 및 질병의 진행을 모니터링 하는 생리학 용이 광학 선명도 유지. 이러한 합병증 질환 조사, 영향을 미칠 수 있지만 그것은 어느 정도까지 불분명 모델 유도 하는 동안 눈을 관통 하지 않도록 더 있을 수 있습니다. Circumlimbal 봉합 접근 세계의 침투를 방지 하 고 망막의 구조와 기능의 비보에 경도 평가 용이 하 게. 더 중요 한 것은,이 모델은 필요할 때 봉합의 제거에 의해 초기 계획 값을 IOP를 반환 에서 이전 그들에서 다릅니다. 되돌릴 수와 돌이킬 수 없는 신경 절의 분자 상호 세포 상해10,11,12,,1314그리고 IOP 정규화 세포를 공부 하는 데 유용 수 있습니다.
이 문서는 모델 유도 대 한 기술에 초점을 맞추고. 쥐와 쥐에이 모델에 의해 유도 된 망막 상해의15,,1617,,1819자세히 다른 곳에서 찾을 수 있습니다.

<table><tbody><tr><td>정상 식염수</td><td>Baxter International Inc</td><td>AHB1323</td><td>수술 중 각막 수분 유지</td></tr><tr><td>클로르헥사딘 0.5%</td><td>Orion Laboratories</td><td>27411, 80085</td><td>수술 기구 소독</td></tr><tr><td>Isoflurane 99.9%</td><td>Abbott Australasia Pty Ltd</td><td>CAS 26675-46-7</td><td>소유명: Isoflo(TM) 흡입 마취제. 봉합 절차를 위한 산소 가스와 혼합된 제약 등급 흡입 마취제</td></tr><tr><td></td><td>Alcon Laboratories&nbsp;</td><td>1618611</td><td>소유 이름: 다른 쪽 눈을 촉촉하게 유지하는 Genteal, 안구 윤활제</td></tr><tr><td>바늘 홀더 (미세 수술)</td><td>World Precision Instruments</td><td>555419NT</td><td>안과 수술 중 바늘을 잡기 위해</td></tr><tr><td>Proxymetacaine 0.5%</td><td>Alcon Laboratories&nbsp;</td><td>CAS 5875-06-9</td><td>국소 안구 진통</td></tr><tr><td>가위 (미세 수술)</td><td>세계 정밀 기기</td><td>501232</td><td>결찰 중 과도한 봉합 그루터기를 줄이기 위해</td></tr><tr><td>외과 드레이프</td><td>생명 의료 용품</td><td>GM29-612EE</td><td>수술 중 멸균 환경 보장</td></tr><tr><td>쥐 (미세 수술)를 위한 봉합 바늘닌</td><td>보 의료 바늘</td><td>151109</td><td>8-0 둥근 바늘이 부착 된 나일론 봉합사, 절삭 날 3/8, 이중 바늘, 봉합 길이 30cm</td></tr><tr><td>마우스 봉합 바늘 (미세 수술)</td><td>닌보 의료 바늘</td><td>160905</td><td>10-0 나일론 봉합사 둥근 바늘, 절삭 날 3/8, 이중 바늘, 봉합 길이 30cm</td></tr><tr><td>핀셋 (미세 수술)</td><td>World Precision Instruments</td><td>500342</td><td>안구 수술 중 조직 조작</td></tr><tr><td>리바운드 안압계</td><td>TONOLAB, iCare, 핀란드 헬싱키안</td><td>압 모니터링을 위한</td> <td>TV02</td></tr></tbody></table>

쥐와 쥐에 circumlimbal 봉합에 의해 유도 된 녹 내장의 모델

A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice

Circumlimbal 봉합 만성 안구 내부 압력 (IOP), 녹 내장에 대 한 잘 알려진 위험 요소를 높이기에 의해 설치류의 실험 녹 내장을 유발 하는 기술 이다. 이 프로토콜에서는 긴 에반스 쥐 및 C57BL/6 쥐에이 기술에 대 한 단계별 가이드를 보여 줍니다. 일반 마 취, "지갑-문자열" 봉합 결, 적도 주위와 눈의 limbus 뒤에 적용 됩니다. 동료 눈 치료 컨트롤 역할을 합니다. 우리의 연구는 쥐에 대 한 8 주와 12 주 마우스의 기간의 기간 동안 IOP 리바운드 tonometry 국 소 마 취 없이 의식이 있는 동물에 의해 정기적으로 측정 된 높은, 남아. 두 종에서 sutured 눈 보여주었다 electroretinogram 기능을 우선 내부 망막 장애와 일치. 광학 일관성 단층 촬영 망막 신경 섬유 층의 선택적 숱이 보였다. 조직학 발견 횡단면에 쥐 망막의 신경 절 세포 층에 세포 밀도 하지만 다른 세포 층에 변화가 감소. 신경 절 세포 특정 표시 (RBPMS)와 함께 평면 탑재 마우스 retinae의 얼룩 ganglion 셀 손실 확인. Circumlimbal 봉합은 간단한, 최소한 침략 적이 고 비용 효율적인 방법으로 쥐 및 쥐에서 신경 절 세포 상해에 이르게 눈의 고혈압을 유발 하.

쥐18 및 마우스16 다음 결과 이전에 보고 된 고 여기 요약 된다. Circumlimbal 봉합 사 생산 IOP 상승 쥐와 생쥐 (그림 2)에서 비슷한 패턴. 간단한 IOP 스파이크, 최대 58.1 ± 2.7 mmHg 쥐에서와 쥐, 38.7 ± 2.2 mmHg 봉합 수술 후 즉시 발견 되었다. 쥐, IOP 크기 3와 24 시간, 각각15에 44 ± 6 mmHg 그리고 32 ± 2 mm Hg, 수 시간이 지남에 따라 점차적으로 감소. 이 초기 IOP 스파이크 후 IOP 몇 주 동안 상대적으로 안정 유지. 실험 기간 동안, IOP 눈 고혈압 (OHT) 눈에 의해 높은 남아 ~ 쥐에 8 주 동안 9 mmHg ~ 쥐에서 12 주 동안 5 mmHg.
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만성 안구 고혈압 쥐와 쥐, 일치 녹 내장 망막 신경 절 세포의 기능 및 구조 저하로 이어지는 circumlimbal 봉합을 적용 하 여 유도 된다.

쥐와 쥐에 Circumlimbal 봉합에 의해 유도 된 녹 내장의 모델

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known ...

이 방법은 장기간 IOP를 상승시킬 수 있는 재현 가능하고 최소한의 침습적 방법을 제공합니다. 이것은 우리가 녹내장을 더 잘 이해하는 데 도움이 될 것입니다. 이 기술의 장점은 IOP 고도가 쉽게 되돌릴 수 있으므로 연구원이 만성 압력 고도에서 회복할 수 있는 눈의 능력을 조사할 수 있다는 것입니다.이 방법의 시각적 데모는 봉합과 긴장 매듭을 묶는 것만으로는 원고를 읽는 것만으로는 배우기 어렵기 때문에 중요합니다. 훌륭한 지원을 위해, 우리는이 기술에 새로운 하나를 권장, 현미경에서 봉합 연습. 먼저 깨어있는 쥐를 부드러운 천으로 껴안고 동물을 진정시다.몸통을 한 손에 부드럽게 잡고, 동물들은 다시 수사관의 가슴에 누워 머리와 목을 노출시다. 다른 손으로 쥐 눈 근처에 리바운드 토노미터를 가져와 서 인터큘러 프로브의 끝이 약 2 ~ 3 밀리미터 떨어져 있고 각막 정점에 수직이 되도록하십시오. 쥐가 진정될 때까지 몇 초 간 기다린 다음 측정 버튼을 한 번 누릅니다.IOP 프로브의 상단을 관찰하면 각막 정점을 한 번 부드럽게 치고 리바운드 토노미터 비프음이 들립니다. 1~2초 후에 측정값을 반복합니다. 총 10개의 측정값을 만들어 시간점에 대한 평균 IOP 값을 도출합니다.다섯 번째 판독 후 토노미터를 재설정합니다. 모니터링을 시작하면 당일 같은 시간에 IOP를 측정합니다. 그리고 일관성 조명 조건에서, IOP 사이클로 인한 변화를 최소화합니다.마취 된 설치류를 멸균 펜에스테레이션 수술 커튼으로 덮어 눈을 봉합합니다. 다음으로, 마취의 수술 평면을 보장 한 후, 7-10 나일론 봉합사를 사용하여 7-10 봉합봉병 병렬 및 2 밀리리터 후방을 림푸스에 짜서 전 세계 의 bulbar 결막에 지갑 문자열 봉합사를 수행하십시오. 그의 clera를 관통하지 않도록주의하십시오.외과 수술 중 갑작스런 부포팽창은 클clera가 침투했을 가능성이 있음을 나타냅니다. 5~6개의 앵커 포인트를 사용하여 쥐 결막에 봉합사를 고정합니다. 이러한 정맥의 횡단에서 결막 아래 봉합사를 스레딩하여 주요 상피 정맥에 직접 압축을 피하십시오.슬립 매듭을 묶어 지갑 끈 봉합사를 고정합니다. 그런 다음 간단한 매듭을 묶고 느슨하게 유지합니다. 지나치게 높은 수술 후 IOP 스파이크를 피하기 위해, 보조는 IOP를 측정해야합니다.IOP가 너무 높은 것으로 판명되면 봉합사의 한쪽 끝에 있는 장력을 부분적으로 해제하여 슬립노트를 조정합니다. 원하는 IOP3

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

이 비디오는 마취된 쥐에서 상공막 정맥에 고긴장성 식염수를 주입하여 녹내장 유도를 보여줍니다. 식염수는 슐렘관을 통해 섬유주 그물망으로 들어가 조직 흉터를 유발하여 수액 유출을 차단하고 안압을 높입니다. 높은 압력은 망막 신경절 세포를 손상시켜 녹내장을 유발합니다.

쥐에서 녹내장을 유도하기 위한 고긴장성 식염수 주입 기술

이 비디오에서 마취된 쥐는 홍채각막각을 차단하기 위해 자기장 아래 전방에 자기 구슬을 주입하는 안구 시술을 받습니다. 이 막힘은 섬유주 그물망을 방해하여 수액 배출을 막고 안압을 증가시켜 망막 신경절 세포와 시신경을 손상시킵니다. 이것은 녹내장과 같은 상태로 발전합니다.

Experimental Glaucoma Induction via Iridocorneal Angle Obstruction In a Mouse Model

출처: Lani-Louzada, R., et al., 설치류의 외과적 유도 녹내장에 대한 변지 혈관신경총의 전원형 소작. J. Vis. Exp. (2022)이 비디오는 쥐 모델에서 상승된 안압(IOP)의 유도 및 모니터링을 보여줍니다. 이 과정에는 변부 혈관을 소작하는 것이 포함되며, 그 결과 혈관 폐색과 안압 상승이 발생합니다. 그런 다음 쥐가 회복되도록 하고 IOP는 비교를 위해 실험 눈과 대조 눈 모두에서 정기적으로 모니터링됩니다.

 쥐 모델에서 상승된 안압 유도

만성 안구 고혈압 쥐의 눈 섬유주 레이저 광응고술을 사용하여 유도된다. 안압 (IOP)는 레이저 치료 후 몇 개월 동안 상승합니다. 시력 실험 동물의 대비 감도의 감소는 optomotor 테스트를 사용하여 모니터링 할 수 있습니다.

비주얼 결함의 특성을 만성 안구 고혈압의 레이저 유도 마우스 모델

우리는 녹내장을 모델링하기 위해 쥐의 눈에 자기 미세구를 주입하여 안압(IOP) 상승을 유도하는 방법을 제시합니다. 이것은 강한 압력 상승과 광범위한 신경 세포 사멸로 이어집니다. 이 프로토콜은 수행하기 쉽고, 반복 주입이 필요하지 않으며, 안정적이고 오래 지속되는 안압 상승을 생성합니다.

실험 녹내장은 안구하는 미소 자석을 투여 한

여기서는 관찰 녹내장, 망막 신경절 세포의 손실을 초래 쥐 눈 안압을 유도 프로토콜을 제시한다. 자기 마이크로 비드는 전방에 주입과 방수의 유출을 차단하는 자석을 이용하여 홍채 각막 각도에 매료된다.

자기 마이크로 비드 폐색 모델 마우스의 녹내장 안구 고혈압 종속 유도합니다

녹내장은 망막 신경절 세포의 손상이 특징입니다. 동물 모델에서 녹내장을 유도하면 이 질병에 대한 연구에 대한 통찰력을 제공할 수 있습니다. 여기에서는 생체 내 쥐 모델에서 망막 신경절 세포의 소실을 유도하고 분석을 위한 전체 마운트 망막의 준비를 보여주는 절차를 간략하게 설명합니다.

녹내장 유도 절차<em&gt; 생체</em&gt; 쥐 모델 및 전체 마운트 망막 준비

여기서, 우리는 실리콘 오일의 내카메라 주입에 의해 마우스 눈에 안구 고혈압 과 녹내장 신경 변성을 유도하는 프로토콜을 제시하고 전방 챔버에서 실리콘 오일 제거를위한 절차는 높은 안구 압력을 반환 정상적인.

마우스의 가역성 실리콘 오일 유도 안구 고혈압 모델

여기에서는 망막 변성, 녹내장, 당뇨병 성 망막증 및 근시 모델에서 생체 내 망막 및 안구 구조를 시각화하기 위해 스펙트럼 도메인 광학 간섭 단층 촬영 (SD-OCT)을 사용하는 방법을 설명합니다.

광학 간섭 단층 촬영을 사용한 설치류 모델에서 안구 질환의 생체 내 구조 평가

이 프로토콜의 목표는 아급성 안구 고혈압을 유발하는 변연 혈관 신경총의 360° 열 소작을 기반으로 하는 녹내장 신경 퇴행의 새로운 모델을 특성화하는 것입니다.

설치류의 외과적으로 유도된 녹내장에 대한 Limbal Vascular Plexus의 전체 원형 소작

학습하세요 쥐와 쥐에서 원주형 봉합술을 이용해 만성 안압 상승을 유도하는 방법을. 이 기법은 녹내장 연구와 망막 신경절 세포 회복 메커니즘 연구에 활용됩니다.

쥐와 쥐에 Circumlimbal 봉합에 의해 유도 된 녹 내장의 모델

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