Name: 냄새에 대 한 바람 터널 중재 곤충 행동 분석 실험 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-30T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 25 s
Description: 배우세요 곤충의 냄새 매개 행동을 분석하는 바람 터널 실험 방법을 화학 생태학 연구에 활용하세요. 이 기법은 행동 활성 화합물을 식별하고 곤충의 전체 행동 양상을 관찰하는 데 유용합니다.

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M. Tasin는 지속 가능한 개발 (Formas, 부여 2013-934)에 대 한 스웨덴 연구 위원회에 의해 지원 되었다.

1. 유리 튜브 준비
<ol><li>유리 튜브를 준비 (예., 직경 2.8 c m, 길이 13 m) 한쪽 플라스틱 스냅 캡을 닫습니다.</li>
	<li>출장된 유리 튜브로 10 곤충 하 고 고무 밴드를 사용 하 여 거 즈와 나머지 끝을 커버 합니다. 허용 온도, 조명 조건 및 적어도 2 시간을 위한 바람 터널 공간의 습도에 순응 하는 곤충. 참고: 각 튜브 안에 곤충의 수 종 및 연구 질문에 따라 달라 집니다.</li>
</ol>2. 냄새 소스 준비 하기
<ol><li>분무기 프로토콜입니다.<ol>
<li>희석된 headspace 컬렉션 또는 합성 냄새 믹스 1 mL 기밀 주사기를 채우십시오. 참고: 희석된 headspace 또는 합성 냄새 혼합 콘텐츠 곤충 종 및 연구 질문에 따라 달라 집니다. 일반적으로 사용 하는 농도 정통 냄새 소스의 자연 방출 속도 일치 해야 합니다.</li>
		<li>튜브 어댑터를 사용 하 여 FEP 튜브에 주사기 끝을 연결 하 고 주사기 펌프에 주사기를 삽입.</li>
		<li>주사기 펌프를 시작 합니다.</li>
		<li>광대역 초음파 발생기를 시작 합니다. 참고: 분무기에서는 어로 졸의 릴리스 토치 출시 시점까지 빛을 가리키는 하 여 확인할 수 있습니다.</li>
		<li>튜브 및 노즐의 내부를 청소 하는 치료 사이 10 분의 최소 96% 에탄올 스프레이 실행 합니다. 모든 순수 에탄올 전용된 별도 주사기를 사용 하 여 청소.</li>
		<li>사용 후 주사기와 96% 에탄올과 노즐 끝을 청소.</li>
	</ol>
</li>
	<li>본격적인 냄새 소스 프로토콜입니다.<ol>
<li>바람 터널 또는 2 L headspace 컬렉션 항아리에 정통 냄새 소스를 삽입 합니다.</li>
		<li>Headspace 컬렉션 항아리 실험실 공기 흐름에 연결 하 고 바람 터널에. 참고: 수집 식물 자료 가능한 실험의 시작에 닫고 물으로 작은 유리병에 잘라 끝을 삽입 하 여 시 들고 방지 합니다. 금액 및 식물 재료의 종류 또는 다른 정통 냄새 소스 곤충 종 및 연구 질문에 따라 달라 집니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>위치 보유자 180 cm에 insect(s)와 함께 유리 튜브 향하게 냄새/영상 소스와 30 cm는 지상에서. 출장된 끝 맞 바람 가리켜야 합니다.</li>
</ol>3. 시작 프로토콜
<ol><li>두 개의 카메라를 사용 하 여 다음 두 가지 보기를 캡처. 비행 경기장 위에 카메라를 탑재 하 고 두 가지 뷰를 잡으려고 각도.</li>
	<li>뚜껑을 엽니다.</li>
	<li>타이머를 시작 합니다. 참고: 다른 종의 필요, 예를 들어응답에 서로 다른 시간 프레임., 애플 과일 나 방 (Argyresthia conjugella) 4 ~ 5 분11, 내 응답 하지만 grapewine 나 방 (Lobesia botrana) 요구 응답 최대 20 분 18.</li>
	<li>비행 패턴을 관찰 하 고 비행 특성 및 맞 바람 방향에 특별 한 주의. 예를 들어미리 정의 된 행동 범주에 따라 비행 성능 점수., 짧은 거리 (최소 20 cm), 지향 방향된 비행 비행 긴 거리 (< 5 cm 원본에서) 고 방문. 참고: 촬영 및 3D 추적 2 개의 카메라를 사용 하 여 비행 특성에 더 자세한 정보를 제공을 사용할 수 있습니다. 일반적으로, 카메라 비행 경기장 위에 탑재 되며 두 가지 뷰를 잡으려고 각도.</li>
	<li>바람 터널 냄새 깃털 밖의 벽에 방문 하는 곤충을 수집 하 고 다시 소유자에 대체. 참고: 곤충 한 기회를 맞 바람 비행 냄새에 반응 하 고 교체 하지 부여 수 있습니다.</li>
	<li>변경 치료 사이 유리 하드웨어를 청소 합니다. 참고: 자주 제어 치료 가능한 오염 소스를 식별 하기 위해 실행 해야 합니다.</li>
	<li>CO2 를 사용 하거나 실험 후 동결 곤충 안락사 참고: 연구 문제에 따라 여성 수 수 달걀 개발에 대 한 득점 또는 시각적으로 날개 또는 안테나의 상태를 확인 하는 검사.</li>
</ol>4. 청소
<ol><li>모든 금속 및 유리 하드웨어 에탄올과 물으로 세척 하 고 건조까지 둡니다.</li>
	<li>모든 금속 및 유리 하드웨어 6 h 오염 물질 제거를 위한 300 ° C에가 열.</li>
</ol>

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</ol>

바람 터널은 많은 곤충4,9에 대 한 매력적이 고 구 충 제 냄새를 식별 하는 데 유용한 도구입니다. 사운드 지식 생태학, 생물학 및 공부 하는 곤충의 행동, 그것의 비행 특성을 쉽게 확인 될 수 있다와 환경 조건, 풍속, 시각적 자극 및 냄새 응용 프로그램에 맞게 맞출 수 있습니다. 미세 조정 가능한 가장 매력적인 소스를 사용 하 여 바람 터널 매개 변수를 새로운 종으로 밖으로 시작 하는 때 추천 된다. Kairomones, 이것은 일반적으로 라이브 호스트 공장 설비 재료 또는 자연 식품 소스 페로몬, 함께 갇힌 호출 여성 또는 남성 (에 따라 공부 하는 곤충). 방충제를 식별 하려면 적개심9를 측정 하는 매력적인 소스에 대 한 필요가 하다. 이러한 초기 결과 또한 더 실험에 대 한 기준으로 될 것입니다.
바람 터널 크기 자유 운동...

바람 터널 실험실 테스트의 semiochemicals 곤충 비행 응답을 허용 하는 곤충 화학 생태학 연구에 중요 한 도구입니다. 제어 바람 스트림으로 냄새를 방출 하 여 이러한 자극에 곤충의 행동 응답 직접 소스를 향해 그들의 맞 바람 비행을 공부 하 여 모니터링할 수 있습니다. 후각이 있는 많은 곤충은 그들의 생물 환경1와 상호 작용 하는 가장 중요 한 감각 메커니즘입니다. 곤충은 짝짓기에 대 한 적합 한 파트너를 찾을 수 냄새 신호를 사용 합니다. 마찬가지로, 그들은 그들 자신, 또는 자손에 대 한 먹이를 찾아 호스트 자원에서 부케를 냄새를 사용 합니다. 식물 곤충 수 분 효율성을 확보 하 여 과즙과 꽃가루 보상 함께에서 꽃 냄새를 릴리스 합니다. 이러한 모든 휘발성 신호 환경에 수 동적 확산 그리고 곤충 식별 하 고 그들의 개인적인 관련성을 해석 해야 합니다. 휘발성 환경으로 출시 되 서 분자는 필 라 멘 트, 결국 깨진 되 고 소란과 유포2희석 하기 전에 긴 거리 향하게, 초기 농도 유지로 바람과 함께 여행. 곤충은 휘발성에 있는 변화 신호 및 소스 쪽으로 맞 바람, 그들의 움직임을 직접 검색할 수 있습니다. 곤충 매력적인 냄새, 접촉 시 빠른 맞 바람 질주와 비행 행동을 표시 하 고3,4기둥 옆으로 재배치 냄새 손실 시 캐스팅. 곤충 안테나의 sensilla에 후 각 신경의 공동 화 된 배열 수 발병과 놀라운 고해상도5 와 깃털 접촉의 손실에 대 한 행동 응답을 촉진 하 고 비슷한 구분 하기 위해 곤충을 활성화 6서로 다른 소스 발생 하는 냄새 분자. 비행, optomotor anemotaxis, 불리는 동안 시각적 피드백은 바람의 방향, 개체 및 상대 변위2,7식별 기본적 이다. 감각 상호 작용 및 정교한 행동의 사용에 의해 곤충 3 차원 환경에서 포인트 소스를 찾을 수 있습니다.
곤충 attractants 및 방충제의 식별 몇 가지 중요 한 적용된 측면을 가질 수 있습니다. 많은 해충 곤충 성 페로몬 (intraspecific 신호) 합성 고 짝짓기 행동8방해를 공기 중으로 출시 될 수 있습니다. 페로몬과 kairomones (interspecific 신호) 대량 트랩에 사용할 수 있습니다, 유치 하 고 트랩 해충 상태의 직접 정보 제공을 모니터링에서 죽 일. 같은 모기9, 구 충, 또한 바람 터널 생물 검정에 공부 될 수 있다. 이러한 방법은 농민에 대 한 관리 및 의사 결정 지원 시스템 통합된 유해물의 중요 한 부분이 재생합니다.
바람 터널 생물 검정, 어디 냄새 중재 행동 레 퍼 토리의 모니터링할 수 있습니다, 해충을 대체 하거나 농약 사용의 영향을 줄일에 대 한 잠재적인 새로운 도구를 식별 하는 강력한 방법입니다.
바람 터널 디자인의 뒤에 이론적 추론은 철저 하 게 설명된10. 여기, 우리는 바람 터널 건설, 냄새 응용 프로그램 및 바람 터널 검정 프로토콜을 결정 하기 위해 몇 가지 실험에 사용 된 비행 행동을 설명 합니다. Nibio (å s, 노르웨이)에 바람 터널 (그림 1) 스크래치 방지 투명 폴 리 카보 네이트에서 생성 됩니다. 비행 아레나 67 cm 높이 88 c m, 길이 200 m 이다. 비행 경기장 앞 한 추가 폴 리 카보 네이트 섹션, 길이 30 c m입니다. 바람 터널의이 부분 냄새의 응용 프로그램에 대 한 유틸리티 섹션 역할을 합니다. 경우에 휘발성은 폴 리 카보 네이트의 접촉으로 얻을 비행 분야에서 주택 그들은 수 있습니다 나중에 다시 나올 고 세션 사이 오염. 유틸리티 섹션의 각 끝에 따라서 천공된 금속 격자가입니다. 두 격자는 공기 흐름을 제한 하 고 맞 바람 측에 약간의 압력을 만듭니다. 이 결과 downwind 측면에 층 류 흐름을 증가. 맞 바람 그리드 54% 영역을 열고 제공 하 터널의 단면에 걸쳐 균등 하 게 분산 된 8 m m 구멍 천공된 금속 격판덮개에서 이루어집니다. Downwind 그리드는 3 mm의 구멍이 고 51% 영역을 엽니다. 이 난 기류를 감소 하 고 냄새 보장 여행 비행 경기장의 길이 아래 중앙 기둥. 냄새 깃털 좁은 원뿔의 모양 그리고 연기의 사용에 의해 구상 될 수 있다. 비행의 바닥에 아레나, 플라스틱 또는 종이 원형 (직경에서 15 cm 5)에서 다양 한 크기의 곤충 비행 하는 동안 시각적 피드백을 제공에 배치 됩니다. 비행 아레나의 유틸리티 섹션에서 맞 바람 끝에 25 여 50 cm 액세스 도어가 있다. 비행 아레나의 downwind 끝 배기 필터 섹션 사이, 곤충 처리 위한 60 cm 오픈 지역이 이다. 이 액세스 영역은 0.8 m m 메쉬 직물 방으로 탈출 하는 곤충을 방지 하기 위해 측면에 적용 됩니다.
공기는 팬에 의해 첫 번째 필터 하우징으로 그려집니다. 그것은 24 고용량 활성 목탄 필터에 의해 순화 하 고 터널에서 발표 하기 전에 공기 먼지 필터를 통해 전달 합니다. 터널 종료 공기 방으로 다시 출시 되기 전에 유사한 필터 하우징 통해 전달 됩니다. 그것은 배기 연기 후드를 통해 건물의 외부에 공기를 도움이 될 수 있습니다. 두 필터 하우징에 팬 같은 흐름으로 실행 됩니다. 두 팬 들 연속 조 광 기 스위치와 다른 바람 속도 유량 계를 사용 하 여 측정 된다. 공기 속도 테스트 하는 종에 따라 달라 집니다. 30 cm s-1 은 종종 좋은 출발점입니다. 작은 곤충에 대 한 이상적인 공기 속도 줄일 수 있습니다, 그리고 강한 고객을 위한 최고 속도 높을 수 있습니다 상대 비행 거리를 증가.
바람 터널 방 온도, 습도, 광도의 제어를 촉진 한다. LED 스트립 확산 광원 위의 만들려고 3mm 불투명 poly(methyl methacrylate) 창 뒤에 고 비행 경기장 뒤에 배치 됩니다. 두 광원 독립적으로 제어할 수 있습니다.
냄새 응용 프로그램은 여러 가지 방법으로 얻을 수 있습니다. 일반적으로, 냄새는 비행 경기장의 맞 바람 끝의 센터에서 공기에 해제 됩니다. 연구 질문에,에 따라 릴리스 포인트 노출 되거나 적용 될 수 있습니다. 금속 메쉬와 함께 유리 실린더 (10 cm 직경, 길이 12.5 c m) (2 × 2 mm 메쉬 크기) downwind 측에 수 있습니다 차단 냄새 소스 시각과 곤충에 대 한 방문 플랫폼으로 제공 하는 동시에. 많은 실험에서 수평 유리 플랫폼 냄새 소스, 또는 릴리스 포인트 가까이 시각적 신호를 제공 사용할 수 있습니다. 또한 동시 선택 분석 실험을 촉진 하기 위해 사이드 옆에 두 개의 냄새를 해제 기회가입니다. 릴리스 포인트는 다음 20 cm 떨어져 놓이고 냄새 깃털 터널 아래로 중간에서 중복. 선택 다음 어떤 깃털에 의해 곤충은 맞 바람 따라 식별할 수 있습니다.
바람 터널 디자인 많은 휘발성 릴리스 메서드를 지원합니다. 예를 들어 특정 냄새와 같은 작물 공장11,12에 의해 방출 된 배경 냄새 앞 발표 수 있습니다. 또한, 다른 시각적 자극 테스트13,14될 수 있습니다. 실험적인 체제는 각 종 및 연구 질문에 적응 해야 합니다.
공장 부품, 디스펜서에서 합성 냄새 같은 자연 냄새 소스 비행 경기장에 직접 도입 될 수 있습니다. Visual에서 냄새 중재 동작을, 냄새 소스를 덮을 수 있다, 또는 외부에서 숯불 필터링 된 실험실의 공기 공급 통해 비행 경기장에는 휘발성 실시. 냄새 소스 다음 유리 항아리에 국한 되 고 공기는 밀려 항아리를 통해 바람 터널 테 플 론 튜브와 유리 파이프를 통해. 출시 시점에 최고 속도 분야에서 바람의 속도 일치 해야 합니다.
특정 혼합 비율에 냄새를 풀어, 분무기를 사용할 수 있습니다. 분무기는 원추형 팁와 10 µ L 분-1에서 액체 흐름을 촉진 하기 위하여 삽입된 microbore 초음파 노즐. 노즐 광대역 초음파 발전기에 연결 되 고 120 kHz에서 동작 한다. 주사기 펌프 분무기 노즐에 냄새 샘플을 추진 하고있다. 플 루 오 르 에틸렌 프로필 렌 (FEP) 튜브 0.12 m m 내경 1 mL 기밀 주사기 및 노즐 연결 됩니다. 에탄올에 팽창 하 고 공기, 축소 배관 어댑터 내부 볼륨으로 꽉 끼는 촉진 한다. 노즐의 진동에서 생성 된에 어로 졸 방울 크기 주파수 의존 이며 특정 용 매 사용에 따라 달라 집니다. 작은 물방울 증발 하 고 휘발성으로 바람 터널 아래로 가져. 다른 분무기 디자인 또한 존재 하 고 유리 모 세관 구동 압 전을 활용 하 여 저렴 버전 비슷한 솔루션15을 제공 한다.
Headspace 컬렉션 또는 합성 혼합 스프레이 함께 사용할 수 있습니다. 샘플 원하는 농도에 순수 에탄올 희석 됩니다. 휘발성 컬렉션, 수집 시간에 해당 하는 샘플을 희석 수 있습니다. 즉, 휘발성 컬렉션 샘플링 이상의 3 h는 릴리스 3 h에 해당 하는 10 µ L 분-1 에서 분무기에서 1800 µ L를 희석 한다.
수동 관측에 의해 직접 또는 포스트 hoc 비디오 분석에 의해 비행 행동의 식별을 할 수 있습니다. 지향적인된 비행 임의의 비행에서 구별 한다. 중재 하는 냄새 문제는 다음과 같은 특성에 의해 인식 될 수 있다: 냄새에 걸쳐 지그재그 비행 기둥, 깃털, 내부 때 바로 맞 바람 비행 하 고 깃털을 연락처가 손실 되 면 다시 반복. 매력적인 깃털의 손실 시 곤충 또한 지그재그 손실된 깃털3,4에 다시 연결 하는 아치를 증가 함께 시작할 수 있습니다. 이 행동은 매력적인 냄새를 따라 곤충 소란과 바람 방향 변화에 대처 하기 위해 필요로 하는 곳 필드 설정에 기본적 이다. 비행 패턴 균일 하 고 곤충 순서에서 다릅니다. 예를 들어, blowflies 등 강한 전단지 나 방, 보다 넓은 주조 패턴을 빨리 맞 바람 방향 있고 바람 속도 더 상대적인 비행 경로 촉진 하기 위하여 증가 되어야 한다.
곤충의 비행 또한 촬영 수 있습니다. 단일 카메라와 함께 간단한 비행 특성 x y 좌표16그려서 설명할 수 있습니다. 두 개의 카메라 동기화 프레임 캡처를 사용 하 여 3D 비행 외부 소프트웨어17를 사용 하 여 재건 수 있습니다. 비행 트랙 다음 비행 속도 거리, 바람 방향 비행 각도 냄새 깃털에 관하여 비행 특성에 대 한 세부 정보에 대 한 정보를 분석할 수 있습니다. 사용자 정의 및 상용 장비와 소프트웨어를 사용할 수 있는 자동 프레임별으로 추적 하 고 있습니다. 교정 프레임 참조 하는 실제 공간을 사용 해야 하 고 직선 광각 렌즈는 렌즈 왜곡을 최소화 하기 위해 사용 해야 합니다. 가장자리와 모서리 바람 터널 분야에서와 같은 시각적 배경 소음을 줄이기 위해 그리고 배경 차별에 곤충을 최대화 하기 위해 주의 해야 합니다. 적외선 광원, 반사를 사용 하 여 (예., 야행성 모기에서) 흑백 CCD 카메라17촬영 수 있습니다.

<table><tbody><tr><td>비행 경기장</td><td>모든</td><td>NA</td><td>필터 하우징에 맞게 구성</td></tr><tr><td>필터 하우징 x 2</td><td>Camfill Farr</td><td></td><td>먼지 및 숯 필터 포함</td></tr><tr><td>팬 x 2</td><td>Fischbach</td><td>모델 D640/E35</td><td>연속 조광기 스위치가 있는 조용한 팬</td></tr><tr>천<td>공 그리드</td><td>모든</td><td>NA</td><td>두 개의 다른 열린 공간이 필요합니다(예: 54 및 51%</td></tr><tr><td>유량계</td><td>).Swema air</td><td>Swema air 300</td><td>풍속 식별</td></tr><tr><td>초음파 분무기</td> 원<td>추형 팁과 삽입된 마이크로보어가 있는</td><td>SonoTek</td><td></td> 분무기 노즐</tr><tr><td>광대역 초음파 발생기</td><td>SonoTek</td><td></td><td>함수 발생기</td></tr><tr><td>주사기 펌프</td><td>CMA 미세 투석</td><td>CMA 102</td><td>액체 전달</td></tr><tr><td>FEP 튜브 CMA</td><td>미세 투석</td><td></td><td>0.12mm 내부 직경</td></tr><tr><td>튜빙 어댑터</td><td>CMA 미세 투</td><td></td>석 내부 <td>용적 제로를 위한 커넥터</td></tr><tr><td>기밀 주사기</td><td>모든</td><td>NA</td><td>1000 &마이크로; 헤드스페이스 수집 및 합성 혼합물을 위한 L 주사기</td></tr><tr>기밀<td>주사기</td><td>모든&nbsp;</td><td>NA</td><td>1000 &마이크로; L 스프레이어 청소용 주사기</td></tr><tr><td>토치</td><td>모든</td><td>NA</td><td>스프레이 릴리스를 확인하기 위한 작은 광원</td></tr><tr><td>타이머</td><td>알람</td> 기능이 있는 모든 <td>NA</td><td>타이머&nbsp;</td></tr><tr><td>곤충 방출용 홀더</td><td>모든</td><td>NA</td><td>금속 구조</td></tr><tr><td>조명</td><td></td>, <td>낮은 열 생성으로 인해 모든 NA LED가 선호됨</td><td></td></tr><tr><td>모이스처라이저</td><td>모든</td><td>NA</td><td>크기는 풍동실의 부피에 따라 다름</td></tr><tr><td>온도 제어</td><td>모든</td><td>NA</td><td>온도 범위는 종에 따라 다름</td></tr><tr><td>유리관</td><td>모든</td><td>NA</td><td>튜브 (지름 2.8cm, 길이 13cm)&nbsp; 곤충</td></tr><tr><td>스냅 캡</td><td>모든</td><td>NA</td><td>유리관에 맞는 스냅 캡</td></tr><tr><td></td><td>모든</td><td>NA</td><td>유리관을 닫을 수 있는 직물</td></tr><tr><td>고무 밴드</td><td>모든</td><td>NA</td><td>거즈를 제자리에 고정하기 위해</td></tr><tr><td>유리 실린더</td><td>모든</td><td>NA</td><td>냄새 차단 및 착륙 플랫폼용 실린더 (직경 10cm, 길이 12.5cm)</td></tr><tr><td>유리 항아리</td><td>모든</td><td>NA</td><td>동적 헤드스페이스 수집을 위한 유리병</td></tr><tr><td>커넥터 및 튜브</td><td>모든</td><td>NA</td><td>튜브 및 커넥터는 유리병 유형에 따라 다름</td></tr><tr><td>공기 공급</td><td>모든</td><td>NA</td><td>실험실 공기 또는 병에서</td></tr><tr><td>숯 필터</td><td>모든</td><td>NA</td><td>외부 공기 청소용 sypply</td></tr><tr><td>바이알</td><td>모든</td><td>NA</td><td>식물 재료를 신선하게 유지하기 위해 물이 담긴 작은 바이알</td></tr><tr><td>오븐</td><td>모든</td><td>NA</td><td>금속과 유리 제품을 300도까지 가열하여 오염을 제거합니다.</td></tr></tbody></table>

냄새에 대 한 바람 터널 중재 곤충 행동 분석 실험

A Wind Tunnel for Odor Mediated Insect Behavioural Assays

후각이 가장 중요 한 감각 메커니즘은 많은 곤충은 그들의 환경과 상호 작용 및 바람 터널은 곤충 화학 생태학을 공부 하는 훌륭한 도구입니다. 곤충 감각 상호 작용 및 정교한 동작을 통해 3 차원 환경에서 포인트 소스를 찾을 수 있습니다. 이 동작의 정량화는 해충 제어 및 의사 결정 지원 위한 새로운 도구의 개발에서 핵심 요소입니다. 층 류 기류와 적당 한 비행 섹션 바람 터널, 기내 피드백에 대 한 시각적 단서와 냄새의 응용 프로그램에 대 한 옵션의 다양 한 이후 매력적인 식별 수 있습니다 복잡 한 행동을 측정 하기 위해 사용할 수 있습니다 또는 방충제 냄새, 곤충 비행 특성, 시각 냄새 상호 작용 및 attractants 및 악취 환경에서 배경 냄새로 느린 사이 상호 작용. 바람 터널 실험실 설정에서 곤충의 행동 레 퍼 토리를 중재 하는 냄새의 이점을 보유 하고있다. 제어 설정에서 행동 조치 곤충 생리학 및 필드 응용 프로그램 사이의 링크를 제공합니다. 바람 터널 유연한 도구 이어야 하며 쉽게 변경 설정 및 다양 한 연구 질문에 맞게 하드웨어를 지원 해야 합니다. 여기서 설명 하는 바람 터널 설치 주요 단점은 합성 휘발성 혼합 필드 응용 프로그램을 개발할 때 특별 한 주의 필요로 하는 깨끗 한 냄새 배경 이다.

Blowflies 임시 애벌레 성장 기판19,20를 나타내는 죽은 동물 로부터 냄새를 강력 하 게 응답 합니다. 자연 냄새 소스로 죽은 쥐를 사용 하 여, 우리는 15 일 오래 된의 비행 동작의 세부 정보를 조사, 여성 C. vicina, 또는 냄새 릴리스 포인트13옆 시각적 자극 없이 성관계. 자연적인 시각적 큐를 제거 하려면 우리는 위에서 설명한 유리 항아리 시스템 사용. 30 cm s-1 blowflies 표시, 이상의 80% 이륙 downwind 바람 터널 끝에 터널 ( 의 맞 바람 부분으로 제어 하 고 지향 운동 고급 그들의 60% 이상 지향적인된 비행 행동의 바람 속도와 그림 2). 지향적인된 비행 행동에 시각적 표시의 더 큰...

여기, 우리는 건설 및 기술 바람 터널의 사용 냄새 중재 곤충과 행동 분석에 대 한. 바람 터널 설계와 시각적 자극 없이 여러 방법으로 악취 소스 출시를 촉진 한다. 풍 동 실험은 행동 활성 휘발성 화학 물질을 식별 하는 중요 한 방법.

Olfaction is the most important sensory mechanism by which many insects interact with their environment and a wind tunnel is an excellent tool to study ...

이 방법은 행동 활성 성분을 식별하는 것과 같은 화학 생태 분야의 주요 질문에 대답할 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 우리가 많은 다른 방법으로 냄새를 방출 할 수 있다는 것입니다, 우리는 곤충의 전체 행동 레퍼토리를 모니터링 할 수 있습니다. 고무 밴드를 사용하여 거즈로 유리 튜브를 준비합니다.10개의 곤충을 준비된 유리 튜브에 분리하고 나머지 끝을 플라스틱 스냅 캡으로 덮습니다. 곤충이 바람터널 실의 온도, 조명 조건 및 습도에 적어도 2시간 동안 적응할 수 있도록 합니다. 여기서 분무기 프로토콜은 냄새 소스를 준비하는 것으로 입증된다.합성 냄새 혼합물로 1 밀리리터, 가스가 단단한 주사기를 채우고 주사기를 주사기 펌프에 삽입합니다. 튜빙 어댑터를 사용하여 불소 에틸렌 프로필렌 튜브에 주사기 팁을 연결합니다. 이제 주사기 펌프를 시작하고 광대역 초음파 발생기다음에 시작하십시오.분무기에서 에어로졸의 방출은 방출 지점 아래에서 빛을 지점에서 확인할 수 있습니다. 유리 튜브를 곤충과 함께 홀더에 180센티미터 의 다운윈드를 냄새 시각적 소스에서 내리고 지면에서 30센티미터 를 배치합니다. 뚜껑이 덮인 끝은 바람을 가리켜야 합니다.프로토콜을 시작하려면 캡을 열고 타이머를 시작합니다. 비행 패턴을 관찰하고 비행 특성과 바람 방향에 특별한주의를 기울이는. 여기에 표시, 착륙하지 않고 지향 비행이다.착륙을 하는 지향 비행은 컨트롤로 포함된 천연 냄새 소스에 표시됩니다. 이륙의 클로즈업은 여기에서 볼 수 있으며, 천연 냄새 소스에 착륙을 클로즈업하는 것을 볼 수 있습니다. 이륙, 짧은 거리에서 의향 비행, 장거리 비행 지향, 착륙 과 같은 미리 정의된 동작 범주에 따라 비행 성능을 점수매기십시오.바람터널 벽에 착륙하는 곤충을 수거하고, 악취 깃털 바깥쪽에 있는 곤충을 모아 홀더로 다시 교체한다. 퓨어 에탄올 전용 별도의 주사기를 사용하여 모든 청소를 하십시오. 치료 사이에 최소 10 분 동안 96 %의 에탄올로 분무기를 실행하여 튜브와 노즐의 내부를 청소하십시오.사용 후 주사기와 노즐 끝을 96%에탄올로 청소하십시오. 완료되면 모든 금속 및 유리 하드웨어를 에탄올과 물로 세척하고 건조할 때까지 둡니다. 모든 금속 및 유리 하드웨어를 6시간 동안 섭씨 300도로 가열하여 오염 물질을 제거합니다.타격 파리의 시각적으로 안내 된 냄새 반응은 여기에 표시됩니다. 시각적 자극이 있고 없는 비행 행동에 대한 세부 사항을 연구했습니다. 착륙 응답에 시각적 신호의 상당한 효과가 있었다, 하지만 다른 행동 단계에.완두콩 나방의 착륙 반응과 해당 휘발성 수집의 비교가 여기에 제시됩니다. 두 가지 유형의 단서를 향해 비슷한 착륙이 기록되었습니다. 완두콩 꽃 휘발성의 합성 혼합은 자연 꽃 휘발성에 비해 약간 낮은 착륙귀착됩니다.여기에 합성 블렌드에 대한 사과 과일 나방 반응에 식물 휘발성 배경의 효과를 나타내고 있다. 복잡한 블렌드와 심플한 블렌드가 있는 냄새 디스펜서는 깨끗한 배경을 가진 비슷한 바람의 매력을 낳았습니다. 그러나, 사과 휘발성 배경에 포함 될 때, 나방은 복잡한 혼합을 선호.이 절차를 시도할 때는 비행 패턴이 균일하지 않다는 것을 기억하는 것이 중요합니다. 그것은 곤충 주문에 따라 많이 다릅니다. 블로우 플라이는 강한 전단지이며 나방에 비해 더 넓은 주조 움직임을 가지고 있습니다.풍관은 손에 있는 질문에 따라 악취를 풍터널에 방출하는 다양한 방법을 용이하게 합니다. 우리는 냄새 디스펜서에서 해제 할 수 있습니다, 본격적인 소스에서, 합성 믹스, 헤드 스페이스 컬렉션. 또한, 특정 악취는 배경 냄새 위에 방출될 수 있고, 상이한 시각적 자극을 사용할 수 있으며, 투선택 바이오아세이스를 수행할 수 있습니다.풍동 실험은 응용 연구뿐만 아니라 기본 연구에서 행동 활성 화합물과 화학 물질을 식별하는 데 중요한 도구입니다. 좋은 예는 해충 방제 도구를 개발하려는 경우입니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

이 비디오를 문서에서, 우리는 안정적이고 제어 형상과 odorant의 그라디언트의 건설을 허용하는 새로운 방법을 설명합니다. 우리는 간단히 다음과 그라디언트가 후각 결함 (전체 및 부분 후각 상실증)의 화면으로 사용할 수있는 방법을 설명하고 chemotaxis 행동보다 미묘한 기능을 연구하기 위해 서요.

Drosophila의 유충에서 냄새 기반 행동의 고해상도 측정

여기서 우리는 후각 자기 - 밧줄 (OMT) 장치에 대한 취득 비디오 이미지를 최적화하는 방법에 대해 설명합니다. 우리는 또한 visuo - 후각 융합을 공부 두 가지 샘플 실험 프로토콜을 설명합니다.

Drosophila의 비행 중 시각 인한 악취 추적

초파리는 복잡한 후각 시스템을 가지고 있으며, 수백 가지 냄새 물질을 구별할 수 있으며, 후각을 사용하여 행동 결정을 지시할 수 있습니다. 이 비디오는 파리의 후각 행동 반응을 연구하는 방법인 4방향 후각계 분석에 대해 설명합니다. 주요 프로토콜 클립은 테스트 파리를 처리하는 방법과 분석을 수행하는 동안 중요한 단계가 무엇인지 보여줍니다.

Four-Way Olfactometer Assay: 초파리에서 냄새 유발 반응을 평가하는 방법

수직, T-미로 olfactometer는 절지 동물의 행동 반응을 시금에 설명되어 있습니다. olfactometer은 두 잠재적 인 냄새 필드에 대상이 때 실험은 실험 대상으로 수행 선택권을 측정 할 수 있습니다. 모두 인력과 odorants의 반발이 장치와 함께 측정 할 수 있습니다.

Odorants에 Arthropod 응답을 수직 T-미로 초이스 분석

이 비디오 문서에서는, 우리는 초파리 비행 성인 과일의 후각에 의존 식품 검색 행동에 대한 배고픔이나 포만감의 효과를 측정 할 수있는 자동화 된 분석을 설명합니다.

먹이 찾아 돌아다 행동에 대한 단일 비행 분석에 초파리

우리는 Y-미로 분석을 사용하여 초파리의 행동에 냄새 물질의 영향을 나타 내기 위해 선택 테스트를 제시한다.

테스트<em&gt; 초파리</emY-미로 분석과&gt; 후각

자동화 추적 시스템 Flywalk는 초파리에서 냄새 유도 행동 고해상도 정량화를 위해 사용된다.

에서 냄새 유도 행동의 고해상도 정량화<em&gt; 초파리</em사용&gt;<em&gt; Flywalk</em&gt; 패러다임

여기에서는 최대 100마리의 식초파리(Drosophila melanogaster)의 후각 반응을 분석하기 위한 행동 설정 및 데이터 분석 방법을 설명합니다. 이 시스템은 단일 또는 다중 후각 자극과 함께 사용할 수 있으며 신경 세포 하위 집합의 광유전학적 활성화 또는 침묵에 적응할 수 있습니다.

의 컴퓨터 추적하여있는 분석 후각 행동<em&gt; 초파리</em&gt; 네 사분면의 후각에

냄새 소스 지역화하는 능력 벌레의 생존에 필요한 인공 냄새 추적에 적용될 것으로 기대된다. 곤충 제어 로봇은 실제 silkmoth에 의해 구동 로봇 플랫폼을 통해 곤충의 냄새 추적 능력을 평가하기 위해 우리가 할 수있다.

곤충 제어 로봇 : 이동 로봇 플랫폼은 곤충의 냄새 추적 능력을 평가하는

우리는 초파리 Drosophila melanogaster 에서 짝짓기 행동에 영향을 미치는 환경 및 유전 신호를 분석하는 분석법을 시연합니다.

환경에서 신호의 결합 효과에 미치는 영향을 시험하는 방법<em&gt; Drosophila melanogaster</em

배우세요 곤충의 냄새 매개 행동을 분석하는 바람 터널 실험 방법을 화학 생태학 연구에 활용하세요. 이 기법은 행동 활성 화합물을 식별하고 곤충의 전체 행동 양상을 관찰하는 데 유용합니다.

냄새에 대 한 바람 터널 중재 곤충 행동 분석 실험

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