2018년 9월 14일
여기 우리는 수동 조직의 알레르기 (PSA) 및 적외선 온도계를 사용 하 여 음식 알레르기 마우스 모델에서 몸 온도 차이 정확 하 게 측정 하는 새로운 방법을 제시. 이 절차는 이전 PSA 결과에 정확 하 게 중복 되었습니다.
이 방법론은 알레르기 및 면역학 분야의 주요 질문, 특히 체온 변화와 관련될 수 있는 표현형에 관한 질문들을 해결하는 데 도움이 됩니다. 이 기술의 주요 장점은 저렴하고 비침습적이며 마취가 필요하지 않다는 것입니다. 이 기술의 의미는 연구원이 마취의 효력을 제거하는 동안 온도 측정 도중 마우스의 긴장 그리고 고통을 감소시키고, 또는 행동 표현형을 시각화하는 것을 허용합니다.
마취 후 마우스 체온을 측정하려면 호흡 속도 또는 부동성에 의한 체온을 확인하고 검지 손가락과 엄지 손가락및 꼬리를 핑키 핑거로 목의 육두로 마우스를 잡습니다. 실험실 벤치 표면에 평행하게 마우스를 유지하면서, 두 개의 상부 젖꼭지 사이의 복부 표면에서 2 ~ 5 밀리미터 떨어진 온도계의 외부 평평한 표면아래 적외선 온도계 센서를 배치합니다. 그런 다음 온도계의 방아쇠를 일으켜 동물의 온도를 측정하여 마우스와 온도계를 안정적으로 유지합니다.
마취없이 마우스 체온을 측정하려면 꼬리 의 중간에 마우스를 선택하고 복부를 노출시하십시오. 마우스가 앞발로 직선 가장자리 표면에 고정하고 트리거를 잡고 온도를 측정하도록 허용합니다. 또는, 마우스가 온도계의 상부 직선 가장자리를 잡고 마우스가 온도 계의 바로 위에 복부를 가지고 온도계의 외부 평평한 표면에 앉게 할 수 있도록 합니다.
수동 전신 아나필락시스 감광의 경우 26 게이지 바늘을 장착한 1밀리리터 주사기를 사용하여 새로 준비된 안티 디니트로페놀 또는 DNP, PBS의 IgE, 각 수신자 동물의 후면에 대부분의 지퍼 와 가장 두 번째 젖꼭지 사이의 중간선에 부분적으로 말다툼을 주입한다. 주사 후 24시간, 각 수령인 동물의 체온을 측정하고, 갓 준비된 DNP 인간 혈청 알부민 100마이크로리터가 장착된 30게이지 바늘을 장착한 1밀리리터 주사기를 적재한다. 수동 전신 과민성 쇼크를 유도하기 위해, 눈 의 내측에 바늘을 눈 뒤쪽을 겨냥한 얕은 각도로 삽입하고, 전체 용액을 레트로 궤도 정맥 부비동에 정맥내로 주입한다.
그런 다음 마우스를 완전한 재조정까지 모니터링하여 복구 케이지에 혼자 놓고 70 분 동안 10 분마다 체온과 활동을 측정합니다. IgE 감세 마우스는 20분 에서 섭씨 3도의 최대 온도 하락을 나타내고 PBS 대조군 마우스는 도전 후 같은 기간 내에 섭씨 1.1도의 최대 하락을 나타낸다. 행동 관찰은 또한 관찰된 온도 강하와 마우스 활동 사이의 관계를 평가하기 위하여 비 마취동물에서 수행될 수 있다.
이러한 대표적인 마우스 식품 알레르기 챌린지에서 PBS 대조군은 2CA 억제제 치료군에 비해 도전 후 10분 동안 상당한 온도 저하를 입증하였다. 이 음식 알레르기 도전에서 활동 점수 및 온도 하락의 평가는 데이터의 두 세트 사이 통계적으로 유의한 상관 관계를 제시했습니다. 이 절차에 따라, 마우스 체온 측정과 관련된 다른 실험은 체온 변화와 관련된 행동 표현형에 관한 추가 질문에 대답하기 위해 수행 될 수있다.
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본 논문은 적외선 온도계를 사용하여 수동적 전신 아나필락시스 및 식품 알레르기 마우스 모델의 체온 차이를 측정하는 새로운 방법을 제시합니다. 이 기술은 비침습적이며 이전 연구들에서 성공적으로 재현되었습니다.
마우스 알레르기 모델에서 비침습적 온도 모니터링을 통해 마취제로 인한 혼란 변수 없이 생리학적 및 행동적 표현형을 동시에 평가할 수 있습니다. 이러한 접근 방식은 측정 중 동물의 자연스러운 상태를 유지함으로써 아나필락시스 및 식품 알레르기의 기전 연구에서 데이터의 신뢰도를 향상시킵니다. 이 방법은 열 반응이 면역 활성화와 상관관계를 갖는 타겟 검증 및 표현형 스크리닝 워크플로우를 지원합니다.
이 방법은 면역 도전 시험 중 실시간 열 모니터링을 가능하게 함으로써 표현형 관찰과 기전적 통찰력을 연결하며, 이를 통해 발견 생물학 워크플로우에 통합됩니다.