Name: 수동 체계 알레르기 및 식품 알레르기 평가 하는 동안 적외선 온도계를 사용 하 여 마우스 신체 온도 측정 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-09-14T14:45:00.000+00:00
Duration: 4 min 34 s
Description: 학습하세요 수동 체계 알레르기 및 식품 알레르기 연구에서 적외선 온도계를 사용한 마우스 체온 측정법을. 이 비침습적 방법은 마취 없이 정확한 온도 측정이 가능하여 동물의 스트레스를 줄이고 알레르기 반응 관련 행동 표현형을 관찰할 수 있습니다.

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연구 실험실 NIH에 의해 지원 되었다 가와카미에 부여: R01 AR064418-01A1, R01 HL124283-01, R21 AI 115534-01, 및 R41AI124734-01.

모든 동물 실험은 알레르기와 면역학에 대 한 동물 관리 및 사용 라호야 연구소의 위원회에 의해 승인 되었다.
1. 마우스 Anesthetization 동안 신체 온도 측정
<ol><li>마 취 유도 상자에 마우스를 놓습니다. 5 %isoflurane 산소 1 L/min 흐름을 사용 하 여 anesthetize. 참고: Anesthetization 확인 때 마우스 자발적인 운동 중단 되었습니다 모바일 30 s. 또는 모니터 호흡 속도, 그리고 쥐 매 2 당 1 호흡 호흡은 일단 s anesthetization 확인 이상, 또는.</li>
	<li>마우스는 검지 손가락과 엄지손가락으로 목의 목 덜 미를 잡고 하 고 더 낮은 복 부를 노출 하려면 새끼 손가락으로 꼬리를 잡고.</li>
	<li>땅에 병렬의 시체와 함께 마우스를 잡고 아랫 배는 아래 적외선 온도계 센서를 놓습니다. 참고: 외부 평평한 표면 온도계 (아니라 센서의 표면)의 복 부의 표면에서 약 2-5 m m 이어야 한다. 이 복제 결과 온도 측정 동안 마우스 (2 절에서 설명한) 마 취는 하지. 그것은 복 부의 대상 사이트를 확인 해야 합니다. 위 두 젖꼭지 사이 목표로 일관 된 결과 수 있습니다.</li>
	<li>온도 측정 하는 방 아 쇠를 잡으십시오. 마우스와 온도계의 안정적 개최를 확인 합니다.</li>
</ol>2. 마우스 마 취 없이 신체 온도 측정
<ol><li>꼬리의 중간으로 마우스를 선택 합니다.</li>
	<li>
마우스의 복 부를 노출 합니다.
	<ol>
<li>마우스는 오픈 케이지 나 케이지-상단의 forepaws의 입술 같은 직선-가장자리 표면에 개최를 허용 합니다. 참고: 마우스를 상체 스트레칭과 복 부를 노출 수 있습니다.</li>
		<li>또는, 마우스는 온도계의 위쪽 직선 가장자리에 유지 하는 것을 허용 하 고 적외선 센서 이상 그것의 복 부와 온도계의 외부 평면 표면에 앉아 마우스. 참고: 언제 든 지 뒷 발 온도계의 표면에 쉬고 발 복 부 표면에서 센서를 방해 하지는 확인 합니다. 온도계 발 방해와 복 부의 그것 보다 낮은 온도 측정 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>온도 측정 하는 방 아 쇠를 잡으십시오. 참고: 마우스 이동; 하는 경향이 있다 마우스는 상대적으로 덜 모바일 때 온도 측정을 복용 하 여 본문의 동일한 위치를 지속적으로 측정 하는 방법에 주의.</li>
</ol>3. 수동 조직의 알레르기7
<ol><li>
하루 0: 면역 글로불린 E (IgE)와 감광 성.
	<ol>
<li>PBS에서 100 µ g/mL의 농도에서 안티-dinitrophenyl (DNP) IgE의 (마우스) 당 200 µ L를 준비 합니다.</li>
		<li>Intraperitoneally 단계 3.1.1 또는 PBS에만 준비 하는 안티-dinitrophenyl (DNP) IgE의 200 µ L를 주사 (PBS 전용은 부정적인 제어). 주입에 대 한 26 G 바늘을 사용 합니다. 그냥 약 두 가장 열 등 한 젖꼭지 사이 중간에 측면 주사 수행 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
제 1 일: DNP HSA와 알레르기 유발.
	<ol>
<li>준비 하는 100 µ L (마우스) 당 DNP HSA의 0.9%에 10 mg/mL의 농도에 NaCl.</li>
		<li>1.1 단계에서 설명한 대로 쥐를 anesthetize.</li>
		<li>1 단계에서 설명한 기술을 사용 하 여 체온을 측정 합니다.</li>
		<li>DNP HSA 단계 3.2.1에서에서 준비의 100 µ L를 정 맥 주사. 30g 바늘을 사용 하 여 주입을 위해. Retroorbital 정 맥 공동에는 주사를 수행 합니다. 눈 뒤에 목표로 얕은 각도에서 눈의 중간에 바늘을 삽입 합니다.</li>
		<li>주입 후 개별 장에 쥐를 놓습니다. 쥐 마 취에서 회복을 확인 합니다. 그들은 각 성 하 고 자발적으로 모바일을 관찰 합니다.</li>
		<li>적외선 온도계를 사용 하 여 체온을 측정 하 고 그들의 활동 70 분 마다 10 분 합니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. 마우스 모델의 음식 알레르기8,9
참고: 회로도 그림 2에 표시 됩니다.
<ol><li>
하루 0: 민감하게 OVA/졸업생와 쥐.
	<ol>
<li>OVA (0.5 mg/mL) 및 졸업생 (10 mg/mL) PBS에 함께 (마우스) 당 100 µ L를 준비 합니다. 30 분 동안 낮은 설정에 소용돌이입니다.</li>
		<li>1.1 단계에서 설명한 대로 쥐를 anesthetize.</li>
		<li>4.1.1 단계에서 준비 된 OVA/졸업생 혼합물의 100 µ L를 각 마우스를 주사 intraperitoneally 26 G 바늘을 사용 하 여. 주: 소용돌이 OVA/졸업생 혼합 다시, 각 주입 전에 짧게 최고 확인 무 균된 혼합물. 사출 사이트에 대 한 자세한 내용은 단계 3.1.3을 참조 하십시오.</li>
		<li>주입 후 다시 새 장에 그들의 원래 마우스를 놓습니다. 쥐 마 취에서 회복을 확인 합니다. 그들은 각 성 하 고 자발적으로 모바일을 관찰 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
14 일: OVA/졸업생과 두 번째 민감 화를 수행 합니다.
	<ol>
<li>4.1.1와 4.1.2, 4.1.3 단계를 반복 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
일 28-46: OVA와 쥐에 게 매일 도전.
	<ol>
<li>100 µ L (마우스) 당 OVA의 PBS에 250 mg/mL의 농도에서 준비 합니다. 참고: 혼합 해야 한다 보다는 소용돌이와 손으로 부드럽게 앞뒤로 출 렁 여 거품 형성을 최소화 하기 위해.<ol>
<li>음식 알레르기 억제제를 사용 하는 경우9억제제 준비 합니다. PBS에서 1 mg/mL의 농도에서 억제 물의 (마우스) 당 100 µ L를 준비 합니다. 이 각 마우스에 대 한 억제제의 100 µ g의 배달을 허용합니다. 참고: 생쥐는 하나의 도전 하루 동안 총 gavage 볼륨의 200 µ L을 처리할 수만 마우스, 당 억제제의 100 µ L를 초과 하지 마십시오. 100 µ L 인 OVA 도전 뿐만에 필요한 100 µ L 최대 권장 억제제 사용에 대 한 볼륨입니다.</li>
		</ol>
</li>
		<li>1.1 단계에서 설명한 대로 쥐를 anesthetize.</li>
		<li>구두로 gavage 각 단계 4.3.1에서에서 준비 된 OVA 솔루션 PBS 마우스 당 gavaged의 100 µ L에 OVA (25 mg)의 100 µ L로 마우스.<ol>
<li>억제제를 사용 하는 경우 준비 단계 4.3.1.1에서에서 OVA 도전 하기 전에 30 분 억제제 (또는 PBS 제어)의 gavage에 대 한 다음 단계에 설명 된 동일한 기술을 이용 한다. 30 분 후 다음 단계로 이동.</li>
			<li>1 mL 주사기 gavage 바늘을 사용 합니다. 주사기에 OVA의 100 µ L를 차지 합니다.</li>
			<li>입;에 바늘을 삽입 다음, 식도 통해 바늘을 밀어 부드럽게 목 구멍의 왼쪽 또는 오른쪽으로 바늘을 가리키는. OVA의 100 µ L를 주사. 참고: 바늘은 되도록 하지 기도에, OVA를 주입 하기 전에 호흡 활성 관찰 합니다. 바늘의 삽입 됩니다 또한 수 저항 일찍 경우 식도 아닌 기관에 들어갔습니다.</li>
		</ol>
</li>
		<li>자신의 개인적인 새에는 마우스를 놓습니다. 자 품질의 쉽게 관찰에 대 한 침구 없이 감 금 소를 사용 합니다.</li>
		<li>마 취에서 회복을 확인 합니다. 쥐 자각 하 고 자발적으로 모바일을 관찰 합니다.</li>
		<li>2 절에서 설명한 기술을 사용 하 여 timepoints 10, 20, 40, 및 60 분 쥐의 체온을 측정 합니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Finkelman, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anaphylaxis%3A+lessons+from+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Allergy+and+Clinical+Immunology%22%5BJournal%5D)">Anaphylaxis: lessons from mouse models.</a> The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 120 (3), Quiz 516-507 506-515 (2007).</li>
<li>Lee, J. K., Vadas, P. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21668816">Anaphylaxis: mechanisms and management.</a> Clinical and Experimental Allergy: Journal of the British Society for Allergy and Clinical Immunology. 41 (7), 923-938 (2011).</li>
<li>Newsom, D. M., Bolgos, G. L., Colby, L., Nemzek, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+body+surface+temperature+measurement+and+conventional+methods+for+measuring+temperature+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Contemporary+Topics+in+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Comparison of body surface temperature measurement and conventional methods for measuring temperature in the mouse.</a> Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 43 (5), 13-18 (2004).</li>
<li>Wong, J. P., Saravolac, E. G., Clement, J. G., Nagata, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+murine+hypothermia+model+for+study+of+respiratory+tract+influenza+virus+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Development of a murine hypothermia model for study of respiratory tract influenza virus infection.</a> Laboratory Animal Science. 47 (2), 143-147 (1997).</li>
<li>Quimby, J. M., Olea-Popelka, F., Lappin, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+digital+rectal+and+microchip+transponder+thermometry+in+cats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+American+Association+for+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Comparison of digital rectal and microchip transponder thermometry in cats.</a> Journal of American Association for Laboratory Animal Science. 48 (4), 402-404 (2009).</li>
<li>Mei, J., Riedel, N., Grittner, U., Endres, M., Banneke, S., Emmrich, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body+temperature+measurement+in+mice+during+acute+illness%3A+implantable+temperature+transponder+versus+surface+infrared+thermometry%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Body temperature measurement in mice during acute illness: implantable temperature transponder versus surface infrared thermometry.</a> Scientific Reports. 8 (1), 3526(2018).</li>
<li>Doyle, E., Trosien, J., Metz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocols+for+the+induction+and+evaluation+of+systemic+anaphylaxis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Protocols for the induction and evaluation of systemic anaphylaxis in mice.</a> Methods in Molecular Biology. 1032, 133-138 (2013).</li>
<li>Brandt, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mast+cells+are+required+for+experimental+oral+allergen-induced+diarrhea%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Clinical+Investigations%22%5BJournal%5D)">Mast cells are required for experimental oral allergen-induced diarrhea.</a> The Journal of Clinical Investigations. 112 (11), 1666-1677 (2003).</li>
<li>Ando, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histamine-releasing+factor+enhances+food+allergy%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Clinical+Investigations%22%5BJournal%5D)">Histamine-releasing factor enhances food allergy.</a> The Journal of Clinical Investigations. 127 (12), 4541-4553 (2017).</li>
<li>Brandt, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+IL-4%2FIL-13+signaling+to+alleviate+oral+allergen-induced+diarrhea%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Allergy+and+Clinical+Immunology%22%5BJournal%5D)">Targeting IL-4/IL-13 signaling to alleviate oral allergen-induced diarrhea.</a> The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 123 (1), 53-58 (2009).</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

설명 하는 프로토콜은 마 취의 사용 없이 온도 측정 하는 목적으로 설립 되었다. 상대적 용이성은 온도 판독을 얻을 수 있습니다에 불구 하 고 스트레스와 다른 주위 온도 처리 등 더 확실 한 효과 뿐만 아니라이 기술을 수용 하는 몇 가지 경고가 있다.
첫째, 실험을 통해 일관 된 온도 판독을 유지 하기 위해 온도 측정 되 고 위치 해야 합니다. 수 미리 정해진 해부학 랜드마크를 사용 하 여 및 조사 했다 시체의 측정을 복제할 수 있어야 합니다. 위치입니다. 보호 하는 마우스의 forepaws는 감 금 소 또는 온도계의 지의 입술 같은 직선-가장자리 표면에 복 부는 온도계의 적외선 센서에 쉽게 노출 됩니다. 일반적으로, 복 부 일관 된 결과 대 한 몇 가지 유연성을 허용 하는 큰 표면 영역입니다. 또한, 복 부는 마우스의 등 쪽 표면 보다 엷 머리 하 고 따라서 더 정확한 신체 온도 독서에 대 한 있습니다.
둘째, 뒷 발 때 온도 측...

체온의 측정은 동물에 과민 증상의 효과 모니터링의 필수적인 부분 모델1,2되었습니다. 온도 차이 마우스3,4직장 프로브의 온도계에 의해 전통적으로 측정 되었다. 이러한 측정 조사 안정적으로 변수; 간의 온도 차이 묘사는 그러나,이 방법은 시간이 많이 걸리는 절차 이며 몸 핵심 온도 증가 시킬 수 있는 마우스, 조 난 발생. 직장 검색 해도 점 막 찢 어 및 감염3발생할 수 있습니다. 또한, 고통 없이 측정 온도3직장 프로브를 삽입 하기 위해 쥐를 취 한다. 이것은 느린 과정, 그리고 그것은 시간의 짧은 기간 내에 연속으로 온도 측정을 금지. 또한, 마우스 활동 고기까지 마 취는 완전히 없어진, 또 다른 시간이 걸리는 과정은이 시간 동안 관찰 될 수 없습니다. 더 최근에, 다른 신뢰할 수 있는 방법으로 체온을 측정 하는 피하 이식된 수동 적외선 트랜스폰더 태그 또는 무선 송신기는 온도 센서3,,56을 포함 하는 사용 됩니다. 그들은 이상적인 방법으로 일부 연구자에 의해 받아들여진다, 비록 이러한 방법은 높은 초기 비용 및 마우스, 피부 또는 신체의 다른 부분에서 온도 센서의 외과 이식 때문에 조 난 널리 사용 되지 않습니다.
온도 차이 질병 모델1,2에서 증상의 정확한 반영을 설명 하기 위해 마우스와 이어야 합니다 깨어 온도 측정 하는 동안 그들의 정상적인 phenotypic 활동에 복귀 하실 수 즉시 전후 측정. 이 위해, 우리는이 달성 될 수 있는 방법 모색.
우리의 목표는 정확 하 고 저렴 하 게 측정 마우스 몸 온도, 무감각을 위한 필요 없이 중 고 온도 측정의 시간 후 고기 행동의 관찰 수 있도록 활동에 제한 없이 했다. 이 목표를 달성 하기 위해 그것은 분명 그 보다 적게 침략 적인 기술 표준 직장 온도 프로브 보다 필요 했다. 적외선 온도계는 정확한 온도 수치를 임상 의학, 소아과, 특히에서 수십 년 동안 사용 되어 왔습니다. 그것은 임상 신속 하 고 정확 하 게 온도 측정 유아와 적극적으로 모바일는 까다로운 아이 얻을 수 있다 다른 방법 되었습니다. 우리는 쥐에이 같은 기술을 구현 하 고 마 취 없이 온도 얻기 위해 성공적인 방법을 개발 했습니다. 중요 한 것은, 우리는이 메서드는 또한 측정을 통해 마우스의 활동을 관찰 하는 수 있는 동안 온도 변화에 관한 확고 수동 조직의 알레르기 결과 복제 능력을 보여줍니다. 또한, 우리 메서드 사용 하 여 같은 다른 증상, 체온은 실제로 정확 하 게 반영 활동 수준 및 전반적인 표현 형의 입증을 동시에 조사 하는 동안 음식 알레르기 쥐의 체온을 평가 하는 마우스입니다.

<table><tbody><tr><td>비접촉 적외선 온도계</td><td>SinoPie</td><td>DT-8861</td><td></td></tr><tr><td>안티-디니트로페닐 (DNP) IgE</td><td>시그마 Aldrich</td><td>D8406-.2MG</td><td></td></tr><tr><td>PrecisionGlide 30 G 바늘</td><td>BD</td><td>305128</td><td></td></tr><tr><td>PrecisionGlide 26 G 바늘&nbsp;</td><td>BD</td><td>305111</td><td></td></tr><tr><td>1 mL 주사기</td><td>BD</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>디 니트로 페닐 - 인간 혈청 알부민</td><td>Biosearch 기술</td><td>D-5059-10</td><td></td></tr><tr><td>닭 달걀 흰자위의 오브 알부민</td><td>시그마 Aldrich</td><td>A5503-50G</td><td></td></tr><tr><td>Imject 명반</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>77161</td><td></td></tr><tr><td>동물 먹이 바늘, 일회용</td><td>Fisher Scientific</td><td>01-208-87</td><td></td></tr></tbody></table>

수동 체계 알레르기 및 식품 알레르기 평가 하는 동안 적외선 온도계를 사용 하 여 마우스 신체 온도 측정

Mouse Body Temperature Measurement Using Infrared Thermometer During Passive Systemic Anaphylaxis and Food Allergy Evaluation

마우스 신체 온도 측정은 알레르기 및 과민 증상 조사에 대 한 파라마운트 중요 합니다. 온도 판독을 위한 직장 프로브는 일반적, 그리고 그들은 정확 하 고 귀중 한 이런 맥락에서 입증 되었습니다. 그러나, 온도 측정의이 방법 동물에 상해 없이 프로브를 삽입 하기 위해 취 수에 쥐를 요구 한다. 이 마우스의 다른 고기를 동시에 관찰 하는 능력을 제한 합니다. 온도 측정 하는 동안 다른 고기를 조사 하기 위하여 직장 프로브는 이상적, 그리고 또 다른 방법은 원하는. 여기, 우리가 동등한 신뢰성 체온 측정 프로브를 직장을 유지 하면서 마우스 마 취에 대 한 요구 사항을 나빠지고 온도 측정의 비 침범 성 방법 소개. 2, 150 m m 사이의 범위에서 신체 표면 온도 감지 하는 적외선 온도계를 사용 합니다. 이 신체 온도 측정 방법은 수동 시스템 알레르기 실험 쥐에 있는 동안 온도 변화 트렌드를 안정적으로 복제에 성공입니다. 우리 몸 표면 온도 약 2.0 ° C 직장 프로브 측정, 보다 낮은 보여주지만 온도 하락의 정도 같은 추세는 다음과 같습니다. 또한, 같은 기술을 사용 하 여 온도 및 활동 레벨을 동시에 평가 하는 식품 알레르기 모델에서 쥐를 관찰.

수동 체계 알레르기: iv 주입에 대 한 10 주 오래 된 여성 BALB/c 마우스 했다 마 취. 주입, 이전 1 단계에 설명 된 대로 그들의 체온 (비디오 1)를 측정 했습니다. 그림 1 은 4 주사 후 두 모집단의 온도 추세를 보여줍니다. IgE 응 마우스 PBS 컨트롤 마우스 20 분71.1 ° C의 최대 드롭 했다 하는 동안 20 분 3.0 ° C의 최대 온도 하락을 보여주었다. 또한,이 과정을 통해 활동 점수 각 마우스의 이동에 따라 평가 했다. 마우스는 어떤 동요 없이 처음 관찰 되었다. 다음, 그들은으로 계산기의 손을 소개 하 고 마우스와 부드러운 접촉 하 여 동요와 함께 관찰 되었다. 그들의 반응에 따라, 쥐 평가 고 1 ~ 3의 규모에 득점. 1의 점수를 나타냅니다 마우스 움직이기 또는 동요; 없이 최소한 모바일 2의 점수는 동요...

여기 우리는 수동 조직의 알레르기 (PSA) 및 적외선 온도계를 사용 하 여 음식 알레르기 마우스 모델에서 몸 온도 차이 정확 하 게 측정 하는 새로운 방법을 제시. 이 절차는 이전 PSA 결과에 정확 하 게 중복 되었습니다.

Mouse body temperature measurement is of paramount importance for investigating allergies and anaphylactic symptoms. Rectal probes for temperature ...

이 방법론은 알레르기 및 면역학 분야의 주요 질문, 특히 체온 변화와 관련될 수 있는 표현형에 관한 질문들을 해결하는 데 도움이 됩니다. 이 기술의 주요 장점은 저렴하고 비침습적이며 마취가 필요하지 않다는 것입니다. 이 기술의 의미는 연구원이 마취의 효력을 제거하는 동안 온도 측정 도중 마우스의 긴장 그리고 고통을 감소시키고, 또는 행동 표현형을 시각화하는 것을 허용합니다.마취 후 마우스 체온을 측정하려면 호흡 속도 또는 부동성에 의한 체온을 확인하고 검지 손가락과 엄지 손가락및 꼬리를 핑키 핑거로 목의 육두로 마우스를 잡습니다. 실험실 벤치 표면에 평행하게 마우스를 유지하면서, 두 개의 상부 젖꼭지 사이의 복부 표면에서 2 ~ 5 밀리미터 떨어진 온도계의 외부 평평한 표면아래 적외선 온도계 센서를 배치합니다. 그런 다음 온도계의 방아쇠를 일으켜 동물의 온도를 측정하여 마우스와 온도계를 안정적으로 유지합니다.마취없이 마우스 체온을 측정하려면 꼬리 의 중간에 마우스를 선택하고 복부를 노출시하십시오. 마우스가 앞발로 직선 가장자리 표면에 고정하고 트리거를 잡고 온도를 측정하도록 허용합니다. 또는, 마우스가 온도계의 상부 직선 가장자리를 잡고 마우스가 온도 계의 바로 위에 복부를 가지고 온도계의 외부 평평한 표면에 앉게 할 수 있도록 합니다.수동 전신 아나필락시스 감광의 경우 26 게이지 바늘을 장착한 1밀리리터 주사기를 사용하여 새로 준비된 안티 디니트로페놀 또는 DNP, PBS의 IgE, 각 수신자 동물의 후면에 대부분의 지퍼 와 가장 두 번째 젖꼭지 사이의 중간선에 부분적으로 말다툼을 주입한다. 주사 후 24시간, 각 수령인 동물의 체온을 측정하고, 갓 준비된 DNP 인간 혈청 알부민 100마이크로리터가 장착된 30게이지 바늘을 장착한 1밀리리터 주사기를 적재한다. 수동 전신 과민성 쇼크를 유도하기 위해, 눈 의 내측에 바늘을 눈 뒤쪽을 겨냥한 얕은 각도로 삽입하고, 전체 용액을 레트로 궤도 정맥 부비동에 정맥내로 주입한다.그런 다음 마우스를 완전한 재조정까지 모니터링하여 복구 케이지에 혼자 놓고 70 분 동안 10 분마다 체온과 활동을 측정합니다. IgE 감세 마우스는 20분 에서 섭씨 3도의 최대 온도 하락을 나타내고 PBS 대조군 마우스는 도전 후 같은 기간 내에 섭씨 1.1도의 최대 하락을 나타낸다. 행동 관찰은 또한 관찰된 온도 강하와 마우스 활동 사이의 관계를 평가하기 위하여 비 마취동물에서 수행될 수 있다.이러한 대표적인 마우스 식품 알레르기 챌린지에서 PBS 대조군은 2CA 억제제 치료군에 비해 도전 후 10분 동안 상당한 온도 저하를 입증하였다. 이 음식 알레르기 도전에서 활동 점수 및 온도 하락의 평가는 데이터의 두 세트 사이 통계적으로 유의한 상관 관계를 제시했습니다. 이 절차에 따라, 마우스 체온 측정과 관련된 다른 실험은 체온 변화와 관련된 행동 표현형에 관한 추가 질문에 대답하기 위해 수행 될 수있다.

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Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

쥐 호흡 생리학과기도 염증 세포의 샘플링의 반복 측정이 바람직하지만, 일반적으로 가능하지 않습니다. 여기 구두기도 염증 세포의기도 기능 항 진성과 샘플링의 반복 측정을 허용 쥐를 intubating에 대한 반복 방법을 설명합니다.

에어웨이 저항 측정 및 마우스에 Bronchoalveolar 세척 유체 샘플링에 대한 가역, 비침습 방법

알레르기 천식의 실험 마우스 모델은 질병 pathogenesis를 공부하고 새로운 치료제 개발에 새로운 가능성을 제공합니다. 이러한 모델은 잘 알레르기 면역 반응,기도 염증과 폐의 pathophysiology을 규제하는 측정 요소에 적합합니다.

알레르기 항원 유도 천식의 Murine 모델

이 동영상은 미세유체 카트리지 기반 화학발광 시스템을 사용하여 혈청 특이적 면역글로불린 E를 검출하는 프로토콜을 보여줍니다. 혈청 IgE는 카트리지의 반응 영역에 고정된 별개의 알레르겐과 상호 작용하며, 이후 과산화효소 접합 항-IgE 항체 및 화학발광 기질로 검출되어 여러 알레르겐 특이적 IgE를 동시에 검출할 수 있습니다.

알레르겐 특이적 면역글로불린 E를 위한 미세유체 카트리지 기반 검출 시스템

Electronic von Frey 측정은 염증 사건 전후에 지속적으로 가해지는 압력 자극에 대한 설치류의 기계적 인출 임계값의 변화를 빠르고 정확하게 측정할 수 있기 때문에 고전적인 von Frey 필라멘트에 대한 효과적이고 개선된 대안입니다.

전자 폰 프레이 장치를 사용하여 생쥐의 뒷발에서 촉각 감도의 변화를 측정합니다.

비만 세포와 호염기구의 활성화를 특징으로 알레르기 반응은, IgE 항체의 가교 및 염증 매개 물질의 방출에 의해 구동된다. 알레르기 반응의 정량적 인 평가는 알레르겐 공격 후 혈관 투과성의 변화를 모니터하는 에반스 블루 염료를 사용함으로써 달성 될 수있다.

마우스에 현지 아나필락시스 측정

설명 된 항 원 자주 나노 입자와 자극 B 세포 활성화에서 생체 외에서 그리고 vivo에서에서 그들의 사용의 준비가 이다. 일관 되 고 강력한 항 체 응답 새로운 땅콩 알레르기 모델의 개발을 주도. 항 원 리를 생성 하기 위한 프로토콜은 다른 항 원 및 예방 모델을 확장할 수 있습니다.

질병-특정 항 체의 생성에 대 한 항 원 리

이 종이 알레르기 진단에 미세 화학 카트리지 기반 시스템의 유용성 평가와 특정 혈 청 면역 글로불린 E를 탐지 하기 위한 프로토콜을 제공 합니다.

검출 하는 혈 청 알레르기 항 원 특정 면역 글로불린 e (sIgE) 바이오 미세 기술의 응용

호염기구 활성화 시험은 유세포 분석에 의한 활성화 마커의 측정을 통해 특정 자극의 존재하에 호염기구 활성화의 검출을 기반으로 IgE 매개 알레르기 반응을 평가하기위한 보완적인 체외 진단 시험입니다.

알레르기 진단을 위한 호염기구 활성화 검사

마우스와 쥐는 원격 온도 트랜스폰더를 외과적으로 이식한 다음 테스트 환경과 절차에 익숙해집니다. 근육 온도의 변화는 홈 케이지의 약리학 적 또는 문맥 적 자극에 반응하여 또는 규정 된 신체 활동 (즉, 일정한 속도로 러닝 머신 걷기) 중에 측정됩니다.

마우스와 쥐의 골격근 열발생 측정

여기에서 우리는 인간과 실험실 동물에서 식사 후 갈색 지방 조직 활성을 측정하기 위한 프로토콜을 제시합니다.

갈색 지방 조직 활동의 변화를 감지하기 위한 적외선 열화상 촬영

학습하세요 수동 체계 알레르기 및 식품 알레르기 연구에서 적외선 온도계를 사용한 마우스 체온 측정법을. 이 비침습적 방법은 마취 없이 정확한 온도 측정이 가능하여 동물의 스트레스를 줄이고 알레르기 반응 관련 행동 표현형을 관찰할 수 있습니다.

수동 체계 알레르기 및 식품 알레르기 평가 하는 동안 적외선 온도계를 사용 하 여 마우스 신체 온도 측정

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