Elevated Plus Maze Test Combined with Video Tracking Software to Investigate the Anxiolytic Effect of Exogenous Ketogenic Supplements

Csilla Ari; Dominic P. D&#8217;Agostino; David M. Diamond; Mark Kindy; Collin Park; Zsolt Kov&#225;cs

doi:10.3791/58396

외인성 케톤 생성 보충제의 불안 완화 효과를 조사하기 위해 비디오 추적 소프트웨어와 결합된 Elevated...

JoVE Journal
Behavior

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Elevated Plus Maze Test Combined with Video Tracking Software to Investigate the Anxiolytic Effect of Exogenous Ketogenic Supplements

외인성 케톤 생성 보충제의 불안 완화 효과를 조사하기 위해 비디오 추적 소프트웨어와 결합된 Elevated Plus Maze 테스트

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05:42 min

January 7, 2019

DOI: 10.3791/58396-v

Csilla Ari¹, Dominic P. D’Agostino^2,3, David M. Diamond^1,2, Mark Kindy^4,5,6, Collin Park¹, Zsolt Kovács⁷

¹Department of Psychology, Hyperbaric Neuroscience Research Laboratory,University of South Florida, ²Department of Molecular Pharmacology and Physiology, Metabolic Medicine Research Laboratory, Morsani College of Medicine,University of South Florida, ³Institute for Human and Machine Cognition, ⁴Department of Pharmaceutical Sciences, College of Pharmacy,University of South Florida, ⁵James A. Haley VA Medical Center, ⁶Shriners Hospital for Children, ⁷Savaria Department of Biology,ELTE Eötvös Loránd University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Summary

여기에서는 설치류 동물 모델의 불안 수준 변화를 조사하기 위한 프로토콜을 제시합니다. 비디오 추적 소프트웨어와 함께 사용되는 EPM(elevated plus maze) 테스트는 전임상 실험실 시나리오에서 다양한 잠재적 불안 완화 치료의 효과를 문서화할 수 있는 신뢰할 수 있는 방법을 제공합니다.

Transcript

elevated plus maze는 다른 방법에 비해 더 인도적인 방식으로 실험실 설치류 모델에 대한 다양한 잠재적 불안 완화 치료의 효과를 문서화하는 방법입니다. 이 방법의 가장 큰 장점은 고소공포증과 열린 공간을 피하는 것 외에도 어두운 공간과 닫힌 공간 모두에 대한 설치류의 본능적인 성향에 의존한다는 것입니다. 제 연구실의 공동 연구자인 Collin Park이 절차를 시연하는 데 도움을 줄 것입니다.

실험하기 며칠 전에 동물의 몸통을 잡고 실험자에게 적응할 수 있도록 1분 동안 잡고 다뤄줍니다. 그런 다음 치료를 시작하기 전에 동물의 체중을 측정하여 치료를 위한 투여량 계산을 결정합니다. 다음으로, 케톤을 보충하기 전에 5일 동안 물을 사용하여 위내 위내 방법에 동물을 익숙하게 합니다.

불안 분석을 위해 elevated plus maze 또는 EPM Apparatus를 사용하십시오. EPM Apparatus를 직접 비추는 대신 천장에서 간접 조명을 사용하여 조명을 켭니다. 네 개의 암이 모두 비슷하게 조명되는지 확인합니다.

움직임 추적 소프트웨어의 설치 키를 USB 2.0 포트에 연결하고 소프트웨어를 설치합니다. 그런 다음 실험 영역 위에 카메라를 고정하고 실험이 진행되는 동안 움직이지 않도록 합니다. 마지막으로 사용 설명서를 사용하여 이동 추적 소프트웨어 시스템에서 새로운 실험을 설정합니다.

동물을 실험 구역에 넣으십시오. 그런 다음 시간 제어 패널의 시작 버튼을 눌러 데이터 수집 프로세스를 시작합니다. 시험실에서 EPM 데이터는 수동 및 소프트웨어를 사용하는 두 가지 방법으로 수집합니다.

눈이 먼 관찰자는 커튼으로 분리되어 있습니다. 추적 프로세스 기록이 끝날 때까지 기다리거나 시간 제어판의 중지 버튼을 누르십시오. 그런 다음 실험 영역에서 동물을 제거하십시오.

마지막으로, 분석 도구에 액세스하려면 실험 도우미 표시줄에서 분석 버튼을 누릅니다. trials와 시간 간격을 선택하여 분석하고 보고서를 생성합니다. 실험을 시작하기 30분 전에 집에 있는 우리에 있는 쥐를 실험실로 옮기는 것부터 시작하세요.

EPM의 네 팔의 교차점에 쥐를 놓고 실험자의 반대편에 열린 팔을 향하도록 합니다. 비디오 추적 소프트웨어를 실행하고 5분 동안 동물의 행동을 수동으로 기록합니다. 그런 다음 동물이 EPM에서 떨어지면 동물을 집어 올려 떨어뜨린 EPM의 동일한 지점에 다시 놓습니다.

이 동물의 행동 데이터를 분석에서 제외합니다. 5분 테스트가 끝나면 비디오 추적 소프트웨어를 중지합니다. EPM에서 동물을 제거하고 홈 케이지에 다시 놓습니다.

마지막으로 소독 세제와 수돗물로 EPM을 청소합니다. 종이 타월로 기기를 말리십시오. 만성적인 섭식 후, KSMCT 그룹의 쥐는 대조군에 비해 팔을 벌리고 있는 데 훨씬 더 많은 시간을 보냈습니다.

KS 그룹은 대조군에 비해 중앙에서 훨씬 더 많은 시간을 보냈습니다. 그리고 LKE, KS, KSMCT 그룹에서 대조군에 비해 팔을 닫은 채 보내는 시간이 적습니다. KS와 KSMCT 그룹의 쥐는 열린 팔에서 훨씬 더 먼 거리를 이동했습니다.

LKE, KS 및 KSMCT 그룹의 쥐는 대조군에 비해 닫힌 팔에서 이동한 거리가 현저히 적었습니다. 또한, 7일간의 구강 배척 후 두 팔을 벌려 보내는 시간은 KE 그룹에서 더 많았지만 KE, KS 및 KSMCT 그룹에서 중앙에서 감소했습니다. 폐쇄 암에 대한 진입 건수도 KE 및 KS 그룹에서 투여 7일 후 현저히 낮아졌습니다.

실험자로부터 반대쪽을 향하는 교차로에서 일관된 장원에 장비의 모든 쥐를 배치하는 것이 매우 중요합니다. 설치류에 대한 EPM 분석은 불안 완화 효과 및 작용 메커니즘에 관여하는 뇌 영역에 영향을 미치는 다양한 치료의 효과를 조사하는 데 적합하고 민감한 방법입니다.