마우스에서 뇌간 에서 데이터 수집 및 분석 음성 응답 청력 측정

뇌간 은 임상 신경 생리학에서 중요한 도구입니다 반응 청력 측정을 불러 일으켰다. 요즘, 뇌간 은 약리학 및 유전 동물 모델 모두를 포함하는 기초 과학 및 전임상 연구에서도 반응 청력 측정을 불러 일으켰다. 여기에서 우리는 청각 뇌간 반응이 마우스에서 성공적으로 기록되고 분석될 수 있는 방법에 대한 상세한 설명을 제공합니다.

이 프로토콜은 마우스에서 클릭 및 톤 버스트 불러 온 청각 뇌간 응답을 계획, 수행 및 분석하는 방법에 대한 자세한 정보를 제공합니다. 이 기술의 주요 장점은 약리학 및 돌연변이 마우스 모델의 복잡하고 빠른 청각 프로파일링을 허용한다는 것입니다. alt-er-ed 초기 APP에 대한 새로운 통찰력과 쥐와 쥐의 청각 처리에 대한 관련 변경은 인간에게 번역 될 수 있습니다.

따라서,이 방법은 청각, 신경 및 질병의 특성화 및 표화에 중심적으로 중요합니다. 이 방법은 난독증, 저혈당 및 항문증의 식별에 가장 중요합니다. 예를 들어, 연령 관련, 소음 유발 대사, 선천성 및 aspi-met-acury 청력 손실뿐만 아니라 기형 이나 기형, 부상 및 신 생물로 인한 청력 적자.

이 기술에 익숙하지 않을 경우 시스템의 적절한 전기 배치 및 사전 실험 적 교정에 특별한주의를 기울여야합니다. 이 방법의 시각적 데모는 마취, ABR 레코딩, ABR 필터링 프로세스 및 자동화된 ABR neur-o-lass-es를 설명하는 데 매우 중요합니다. 먼저 마이크에 연결된 사전 증폭기를 보정하기 최소 5분 전에 켜서 시스템의 평형을 허용합니다.

오실로스코프를 켭니다. 그런 다음 마이크를 배치, 실험 뮤린 귀를 모방하기 위해, 큐비 칸을 감쇠 소리 내부 사전 앰프에 연결. 다음으로, 시판되는 처리 및 획득 소프트웨어를 열고 클릭 및 톤 버스트에 대한 자극 프로토콜을 프로그래밍합니다.

클릭 자극 엔터티로 시작하여 클릭 임계값을 분석하고 결정합니다. 왼쪽 귀와 오른쪽 귀의 ABR 대칭이 뒤따릅니다. 그리고 ABR 진폭과 대기는 나중에.

다음으로 동일한 소프트웨어를 사용하여 Sig-Gen RZ 자극 설계 소프트웨어를 사용하여 톤 버스트 자극 프로토콜을 확인합니다. 또한 Bio-Sig RZ 인수 소프트웨어에서 자극 설정을 검사합니다. 과학적 질문에 따라 테스트할 적절한 주파수 범위를 프로그래밍하고 적용해야 하는 주파수 범위가 큰 스피커의 기술적 기능을 충족하는지 확인합니다.

평균화의 경우, 예를 들어 클릭 또는 톤 버스트 수를 초당 20회, 평균 25밀리초의 평균 지속 시간 및 사전 증폭기의 증폭 계수20회로 설정합니다. 그런 다음 ABR 데이터 수집에 적합한 샘플링 속도를 확인한 다음 6개의 폴링 버터 가치 필터를 사용하여 필터를 전달합니다. 필요한 경우 노치 필터를 활성화합니다.

보정:CAL200K 파일을 선택하고 소프트웨어 내에서 보정 구성 모드를 활성화하여 톤 버스트 교정을 시작합니다. 그리고 실험 조건에 따라 둘레를 선택합니다. 프로세서 시스템을 사용하여 교정 절차를 실행합니다.

음압 레벨 또는 SPL 제한, 주파수 범위 및 분포면에서 마이크와 스피커의 기술 사양이 조화를 이루는지 확인합니다. 그런 다음 미리 정의된 클릭 자극 프로토콜을 선택하고 시작합니다. 한 번의 클릭 SPL을 실행하여 오실로스코프의 온라인 빠른 4-ay 변환에 의해 사운드 자극스펙트럼을 분석하여 요구 사항과 일치하는지 확인합니다.

1~42킬로헤르츠 범위 내에서 미리 정의된 톤 버스트 자극 프로토콜을 선택하고 시작합니다. 오실로스코프 및 온라인 FFT를 사용하여 기록된 음향 테스트 자극의 주파수 스펙트럼을 확인합니다. 마지막으로 생성된 교정 파일을 톤 버스트 자극 프로토콜에 로드하여 톤 버스트 보정을 완료합니다.

먼저 음향 감쇠 칸막이 안에 마취 된 마우스를 배치하여 음향 폼이 늘어서 있습니다. 축기 뇌줄기의 기록을 위해 청각 전위전도, 측정할 귀에 따라 좌우 피나의 정점에 하부 진피 스테인리스 스틸 전극을 삽입한다. 다른 쪽 끝에는 바이노럴 레코딩을 위해 음극을 오른쪽과 왼쪽 피나 에 배치합니다.

동물의 엉덩이에 접지 전극을 배치합니다. 삽입 전에, 전극의 하부 진피 고정이 보장되는 스테인레스 스틸 전극의 끝에 후크 모양을 형성한다. 그리고 일단 삽입되면, 마우스의 로스트럼을 큰 스피커 반대 10센티미터 제대로 놓습니다.

모든 전극을 헤드 스테이지에 연결하고 임피던스를 확인합니다. 그런 다음, 각 기록 전에 모든 전극의 임피던스 측정을 수행하여 적절한 전극 위치 지정 및 전도도를 확인합니다. 하나의 라우드 스피커를 사용하여 무료 필드 조건에서 AR을 기록합니다.

마지막으로 자동화된 임계값 감지 및 웨이브 대기 시간 분석을 통해 ABR 분석을 수행하여 양수 피크및 음파를 결정합니다. 일반 청력 성능을 분석하는 첫 번째 단계로 0에서 90 사이의 다양한 SPL에 대한 클릭 유발 AR을 자동화된 ABR 임계값 감지 시스템을 사용하여 조사되었습니다. 다른 톤 버스트 주파수에 의해 연상되는 ABR 임계값 수준에서잠재적인 변경이 분석되었습니다.

예시 마우스 라인에서 Cav3.2 plus, 마이너스 및 Cav3.2 마이너스에서 마이너스는 대조군에 비해 클릭 및 톤 버스트 관련 청력 임계값을 증가시켰습니다. 마지막으로, 클릭 유발 ABR 진폭 성장 기능 및 ABR 파형 대기 시간 분석은 웨이블렛 기반 접근법을 통해 수행되었다. 후자는 내이와 뇌간 내 청각 정보 처리에 관심있는 유전자의 가능한 스파시오 - 측두적 영향에 대한 통찰력을 허용합니다.

피카의 측정 및 시스템 교정에 적절한 ABR 전극 배치는 이 기술을 수행하는 데 필수적입니다. 여기에 제시된 청각 접근 방식은 원격 분석 시스템과 함께 사용하여 복잡하고 중간 대기 시간 및 후기 청각 방출 잠재력을 분석할 수도 있습니다. 이것은 청각, 신경 및 신경 질환의 특성화와 phenotyping에 도움이됩니다.