Name: 병원 체 또는 의약품 및 두뇌와 그들의 상호 작용에 의해 장벽 횡단 연구를 인간의 혈액-뇌 인터페이스 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-09T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 52 s
Description: 학습하세요 인체 혈액-뇌 장벽 미니브레인 모델을 활용한 바이러스 및 생물분자의 뇌 횡단 메커니즘. 이 방법은 신경감염 및 약물 전달 연구에 활용됩니다.

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이 연구는 사노 피 파스퇴르 파스퇴르에 의해 Incitative 그랜트 (PTR 435)를 포함 하 여 파스퇴르에서 내부 교부 금에 의해 및 "성립 드 지원 à 라 검색" 제공 된 교부 금에 의해 지원 되었다. A. 다 코스타는 사노 피-파스퇴르 그랜트와 플로리안 Bakoa에 의해 지원 되었다는 ANRT에서 제공 하는 박사 학위 부여의 (협회 국립 드 라 검색 외 드 라 Technologie). 우리는 유용한 토론에 대 한 홍보 피에르 올리비에 Couraud와 박사 피렌체 밀러에 빚을입니다.

시스템의 지적 재산권은 특허 32, 35 , 38참조.

이 문서에서 우리는 cellulo을 구축 하는 방법을 시연 혈액/뇌 인터페이스, BBB-Minibrain, BBB 모델과의 문화를 결합 하 여 하나의 키트로 뇌 세포 (Minibrain) 뇌를 혼합. 이 시스템은 생물학으로 관련, 쉽게 설정 하 고 세포 배양에서 잘 훈련 된 경험에 대 한 처리.
BBB의 다른 어떤 생체 외에서 모델에 관해서는 장벽의 견고의 과감 한 제어 적용 되는 경우 신뢰할 수 있는 결과 얻을 것 이다. 침투성 및 부적당 한 침투성 값 (즉, Pe정 1.2 보다 더 높은)와 모든 삽입을 폐기 해야 합니다에 대 한 삽입은 신중 하 게 테스트 되어야 합니다.
FBS 샘플 BBB의 특성을 해제 하지 않는 한 일괄 처리를 식별 하기 위해 신중 하 게 시험 되어야 한다. 동일한 통보는 바이러스에서 입자 또는 생체 희석은 자동차 매체에 관한 만들 수 있습니다. 그것은 또한 luminal 구획의 중간 구...

두뇌는 뇌 실질과 혈액-뇌 장벽 (BBB) 이라는 혈액의 교류를 제한 하는 비 투과성 구조에 의해 조직의 순환에서 분리 된다. 주로 대뇌 내 피 세포의 구성, BBB는 동적 이다, 혈관 주위 microglia 및 이웃 뇌 실질의 신경 상호 작용 합니다. BBB의 세 가지 주요 기능은 생성 및 유지 관리의 영양소와 독성 부상 방지와 뇌의 공급 또는 병원 체1,2에 공헌 하는 신경 기능에 대 한 이온 항상성 뇌 항상성 및 그 기능3의 유지 보수. 이 그래서 몇 가지 약물만 BBB4,5교차 수 있습니다 효율적입니다. 현재, 분자 BBB 통과 되며 뇌에 확산 여부를 예측 하기 위해 사용할 수 있는 방법을 ex vivo 연구 부검 소재, 이미지 추적 MRI (자기 공명 영상) 또는 애완 동물 (위치 방출에 의해 인간의 자원 봉사자의 두뇌에서에 구성 단층 촬영) 또는 pharmacodynamics와 동물6,,78pharmacokinetic 전 임상 연구. 이러한 기술 및 모델 애완 동물의 제한 된 해상도 MRI6,8, 분자 (즉, 예를 들어 항 체 기반 분자)는 가난 하 게 계량 하기 어려움의 낮은 감도 같은 몇 가지 한계를가지고 7뇌 관통 하 고는 전 임상에 대 한 그들의 높은 비용 및 동물 실험의 연구.
마지막 포인트는 3R의 규칙, (대체, 감소 및 동물 실험의 상세) 규제 행정 질문이 연구원은 급히 동물에 과학적으로 정확한 대안을 개발 하기 때문에 중요 한 실험9,10,11,12,13,,1415.
지난 수 십년 동안 여러 체 외 모델 BBB의 제안 되었습니다16,,1718 필터에 배양 하 여 막 마우스, 쥐, 소, 돼지 등 다른 종에서 내 피 세포를 삽입. 마찬가지로 지금까지 인류의 관한 1 차 셀의 부족 하 고 어려운 여부 메시지가 불멸 하 게 뇌 내 피 세포 또는 줄기 세포 인간 파생19,20, 기반 인체 모델을 개발 하는 연구원 21. 이러한 장벽을 BBB의 적절 한 생체 외에서 서로게이트는 내 피 세포 마커, 긴밀 접합 마커, 경과 전송기, 용 질 운반대, 수용 체, 표현 하 고 내 피 자극 20에 응답. 내 피 세포와 다른 세포 유형 (즉, 이다, 신경 또는 pericytes22,23,24) 코팅 필터 막 삽입을 사용 하 여 몇 가지 BBB 모델 분석 했다. 이러한 공동 문화의 목표 이다/신경 또는 pericytes 수용 성 요인의 분 비를 이용 하 여 BBB 물리적 특성을 증가 했다.
그럼에도 불구 하 고, 이러한 모델의 연구 하 고 장벽 통과 되 면 마약 후보자의 운명을 예측 뇌 실질을 포함 되어 있습니다. 따라서, 우리의 목표는에 cellulo를 건설 했다 혈액/뇌 인터페이스, BBB-Minibrain, 하나의 키트로 BBB 모델과 혼합된 뇌 세포의 문화를 결합 하 여. BBB-Minibrain multiwell 셀 문화 접시의 우물에 삽입 된 다공성 필터 구성 된 문화 시스템을 사용 합니다. 필터는 인간의 뇌 내 피 세포 선 BBB 약25,,2627, BBB를 테스트에 대 한 신뢰성이 입증 되었습니다 hCMEC/D3 셀으로 입힌 다. Minibrain, 인간의 뉴런의 공동 차별화 된 문화 그리고 이다 NTera/Cl2.D1 셀 선28,29 에서 파생 된 인간 microglial 셀 라인 함께 혼합 켐/Cl530 비율에 해당 하는 microglia31뇌 신경 이다 비율 대 접시의 바닥에 잘 재배 이다.
BBB와 그들의 운명은 실질에 약물의 통로 공부, 외 cellulo 모델에는 혈액-뇌 인터페이스 두뇌 (neuroinvasiveness), 뇌 (neurotropism)에 분산에 병원 체의 항목을 해결 하기 위해 강력한 도구가 될 수 있습니다. 그리고 그들은 뇌 실질 세포에 독성 (neurovirulence)을 발휘할 수 있다. Neurovirulence 및 neuroinvasiveness 연구는 효율적인 cellulo 모델에서의 개발에서 유익 하 고 대체 동물 모델을 것 이다. 우리 프랑스 Neurotropic 바이러스 스트레인 황열병 바이러스 (즉, FNV YFV33,34)의 준비 하는 데 사용에 드문 바이러스 돌연변이의 neuroinvasive 표현 형 시연 BBB-Minibrain 키트32를 사용 하는 라이브 YFV 백신과 neuroregenerative 및 신경 biomolecule 라는 Neurovita (라고 NV 이제 원고)35의 통행 중단. 때문에 네바다도 자연스럽 게 세포 막 십자가 BBB, NV BBB를 포함 하 여 생물 막 십자가 관통 분자 (CPM)36셀으로 라마의 단일 체인 항 체의 가변 부분 (VHH)와 융합 했다. CPM 속성의 VHH 전자 점과 VHH37의 길이에 의존 것으로 보인다.
Cellulo 테스트에서이 pharmacokinetic 수행 및 동물, 및 이상적으로 긴장에서 그들의 행동을 예측할 수 있을 것 같은 시간에 pharmacodynamics 분석 하기 전에 잠재적으로 BBB를 교차 수 있는 분자 정렬 가능 하 게 한다 실질입니다. 이 시스템은 생물학적으로 적절 하 고 쉽게 설정 하 고 셀 문화26,29,,3038에 잘 훈련 된 전문가 의해 처리. Cellulo 테스트에서 그러한 관심 두 배 것: 한 손으로 전 임상 시험의 비용을 절감 하 고 반면에 동물 실험의 사용을 줄이고.

<table><tbody><tr><td>12웰 플레이트</td><td>Corning</td><td>3336</td><td></td></tr><tr><td>5-fluoro-2' deoxyuridine</td><td>Merck-Sigma Aldrich</td><td>F0503</td><td></td></tr><tr><td>85mm 페트리 접시</td><td>Sarstedt</td><td>83-3902-500</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Nf200</td><td>Merck-Sigma Aldrich</td><td>N4142</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-mercapto-ethanol</td><td>Merck-Sigma Aldrich</td><td>M3148</td><td></td></tr><tr><td>CHME/Cl5</td><td>Unit&eacute; de Neuroimmunologie Virale</td><td>Dr Lafon</td><td></td></tr><tr><td>CMC</td>에게 요청 시<td>Calbiochem</td><td>217274</td><td></td></tr><tr><td>Cytosine &beta;-D-arabinofuranoside</td><td>Merck-Sigma Aldrich</td><td>C1768</td><td></td></tr><tr><td>Dark 96 웰 플레이트</td><td>Corning</td><td>3915</td><td></td></tr><tr><td>DMEM F12</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>31330-038</td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Merck-Sigma Aldrich</td><td>D2650</td><td></td></tr><tr><td>Endogro IV</td><td>Millipore</td><td>SCME004</td><td>내피 세포 매체</td></tr><tr><td>에탄올</td><td>Carlo Erba</td><td>529121</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Hyclone</td><td>SV30015-04</td><td></td></tr><tr><td>포름 알데히드</td><td>Merck-Sigma Aldrich</td><td>252549</td><td></td></tr><tr><td>GIEMSA</td><td>RAL 진단</td><td>320310</td><td></td></tr><tr><td>염소 - 안티 마우스</td><td>잭슨 면역 연구</td><td>115-545-003</td><td></td></tr><tr><td>염소 - 안티 토끼</td><td>써모 피셔 Scientific</td><td>R37117</td><td></td></tr><tr><td>HBSS with Ca2+-Mg2+</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>14025-100</td><td></td></tr><tr><td>hCMEC/D3</td><td>Cedarlane</td><td>CLU512</td><td></td></tr><tr><td>Hepes 1M</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>15630-070</td><td></td></tr><tr><td>Hoescht 33342</td><td>Merck-Sigma Aldrich</td><td>33263</td><td></td></tr><tr><td>Laminine</td><td>Merck-Sigma Aldrich</td><td>L6274</td><td></td></tr><tr><td>L-글루타민</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>25030-024</td><td></td></tr><tr><td>Lucifer Yellow</td><td>Merck-Sigma Aldrich</td><td>L0259</td><td></td></tr><tr><td>MEM 10X</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>21430</td><td></td></tr><tr><td>MEM 1X</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>42360</td><td></td></tr><tr><td>Ntera/Cl2D.1</td><td>ATCC</td><td>CRL-1973</td><td></td></tr><tr><td>파라포름알데히드</td><td>전자 현미경 과학</td><td>15714</td><td></td></tr><tr><td>Ca2+-Mg2+</td><td>Thermofisher Scientific</td> 없이 PBS <td>14190</td><td></td></tr><tr><td>PBS-Ca2+-Mg2+</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>14040-091</td><td></td></tr><tr><td>펜/스트렙</td><td>Eurobio</td><td>CXXPES00-07</td><td></td></tr><tr><td>Poly-D-Lysine</td><td>Merck-Sigma Aldrich</td><td>P1149</td><td></td></tr><tr><td>Prolong Gold</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>P36930</td><td></td></tr><tr><td>Qiashredder</td><td>QIAGEN</td><td>79656</td><td></td></tr><tr><td>쥐 콜라겐 I</td><td>Cultrex</td><td>3443-100-01</td><td></td></tr><tr><td>레티노산 All-Trans</td><td>Merck-Sigma Aldrich</td><td>R2625</td><td></td></tr><tr><td>RNA 정제 키트</td><td>QIAGEN</td><td>74104</td><td></td></tr><tr><td>SDS</td><td>Merck-Sigma Aldrich</td><td>L4509</td><td></td></tr><tr><td>중탄산나트륨 5.6%</td><td>Eurobio</td><td>CXXBIC00-07</td><td></td></tr><tr><td>Sodium Pyruvate</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>11360</td><td></td></tr><tr><td>T75 Cell+ Flask</td><td>Sarstedt</td><td>83-1813-302</td><td>민감한 부착 세포를 위한 특정 표면 처리(Cell+)가 있는 조직 배양 폴리스티렌 플라스크</td></tr><tr><td>Transwell</td><td>Corning</td><td>3460</td><td>폴리에스터 다공성 멤브레인 배양 인서트</td></tr><tr><td>Trypsin-EDTA</td><td>Merck-Sigma Aldrich</td><td>T3924</td><td></td></tr><tr><td>초순수</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10977-035</td><td></td></tr><tr><td>우리딘</td><td>Merck-Sigma Aldrich</td><td>U3750</td><td></td></tr><tr><td>Versene</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>15040-033</td><td>EDTA</td></tr><tr><td>YFV-FNV</td><td>IP 다카르</td><td>백신 바이알</td><td></td></tr></tbody></table>

병원 체 또는 의약품 및 두뇌와 그들의 상호 작용에 의해 장벽 횡단 연구를 인간의 혈액-뇌 인터페이스 모델

A Human Blood-Brain Interface Model to Study Barrier Crossings by Pathogens or Medicines and Their Interactions with the Brain

초기에 관련 신 경계 의약품의 심사와 그들의 침투와 장벽와 뇌 실질의 상호 작용에 대 한 cellulo BBB 모델에서 신뢰할 수 있는 여전히 충족된 필요. 이 간격을 채우기 위해 우리는 폴 리 에스테 트라이-인간의 뇌 세포 (뉴런, 이다 microglial 세포)의 문화에 의해 형성 된 다공성 멤브레인 문화 삽입 인간의 BBB 모델은 Minibrain와 결합 하 여 BBB-Minibrain, cellulo 모델에서 2D 설계 되었습니다. BBB-Minibrain BBB, 뉴런에이 분자의 특정 대상으로 확인 하 고 약물의 신경 보호 속성 후 보존 되었다 표시를 통해 신경 보호 약물 후보 (예: Neurovita), 전송 테스트를 허용 약 BBB를 교차 했다. 우리 또한 그 BBB-Minibrain 내 피 세포 장벽을 가로질러 바이러스 입자의 흐름을 감지 하 고 neuroinvasive 바이러스 입자는 Minibrain의 감염을 모니터링 하는 재미 있는 모델을 구성 하는 설명 했다. BBB-Minibrain은 신뢰할 수 있는 시스템, 쉽게 치료 또는 모욕 후 연구원 셀 문화 기술에서 훈련 및 뇌 세포 고기의 예측에 대 한 처리. Cellulo 테스트 등의 관심은 두 가지 것: 소개 하는 한편 약물 개발의 초기 단계를 derisking 하 고 다른 한편으로 테스트 하는 동물의 사용을 줄이고.

BBB-Minibrain에서 cellulo 실험은 혈액-뇌 인터페이스의 모델.
BBB-Minibrain는 상위 레벨에 혈액 구획 및 혈액-뇌 인터페이스 (그림 2AB)의 낮은 수준에 두뇌 구획을 모방 하기 위해 폴 리 에스테 르 막 문화 삽입 시스템에 설정 됩니다. BBB 형성 필터에 hCMEC/D3 내 피 세포와 luminal 구획 및 뇌 세포 (뉴런, 이다 microglial 세포)의 Minibrain 인간의 트라이 문화를 포함 하는 abluminal 구획 그것에 의하여 이루어져 있다. Minibrain 셀 클래식 트라이 문화 인구 표현 형 (그림 1, 하단 오른쪽 패널)과 급행 특정 셀 다 코...

여기에 우리가 현재에 cellulo BBB (혈액 뇌 장벽)의 설정을 설명 하는 프로토콜-Minibrain 폴리에스터 다공성 막 문화 인간의 BBB에 걸쳐 생체 또는 전염 성 요원의 전송 평가 시스템 삽입 및 그들의 이웃 뇌 세포에 생리 적 영향입니다.

The early screening of nervous system medicines on a pertinent and reliable in cellulo BBB model for their penetration and their interaction with the ...

이 인간의 혈액-뇌 인터페이스 모델은 신경 시스템으로 분자의 전송을 공부에 유용. 미생물을 연구하는 것 뿐만 아니라 감염된 뇌통증 종양에 도달합니다. 이 혈액 뇌 장벽 또는 BBB 모델에 미니 뇌를 추가하면 BBB가 뇌에서 행동하는 원인이되는 병원체와 분자의 연구를 할 수 있습니다.절차를 가장 많이 하는 플로리안 바카오, 내 실험실에 대 한 박사 과정 학생. BBB 미니 뇌 폴리에스테르 막 배양 삽입 장치를 설정하려면, 삽입 농도 불완전한 내피 세포 배지당 제4 세포에 5배 10으로 세포를 희석시키고 12웰 플레이트에 삽입된 각 폴리에스테르 막 배양배소에 적절한 양의 세포를 첨가한다. 그런 다음, 세포가 100%의 합류에 도달할 때까지 인서트와 세포 배양 배양 인큐베이터를 배치합니다.12 개의 웰 플레이트를 1 밀리리터의 폴리 D-lysine로 실내 온도에서 4 시간 동안 잘 잡습니다. 하룻밤 사이에 라미닌 1 밀리리터가 뒤따랐습니다. 라미닌을 내피 세포 배지의 1밀리리터로 교체하여 5%의 태아 소 혈청 또는 FBS로 보충합니다.이 곳을 인큐베이터에 1시간 동안 배치합니다. 미니 곡물을 준비하려면 CHME 클론 5 개의 세포에서 인간 뉴런 성상 세포를 부드럽게 시험합니다. 세포 펠릿을 완전한 내피 세포 배지와 연결합니다.5구째 에 3.6배 10회 에서 5구신경및 성상세포는 0.4배 10배로 계산한 후, 5차 CHME 클론 5세포에 12개의 웰 플레이트가 있다. 그리고 12 웰 플레이트를 시드. BBB 미니 뇌를 구성하기 24 시딩 후 24 시간 신선한 완전한 내피 세포 배지로 사용 된 매체를 대체하고 대뇌 마이크로 혈관 내피 세포 코팅 폴리 에스테르 막 배양을 미니 뇌 세포 에 걸쳐 전달한다.그런 다음 BBB많은 뇌 장치를 인큐베이터에 넣습니다. BBB 미니 뇌 내피성 투과성을 검증하려면 새로운 12 웰 플레이트에 잘 당 1.5 밀리리터의 수송 버퍼를 추가합니다. 그리고 각 필터를 거꾸로 뒤집어 내피 세포 장벽에 영향을 주지 않고 배지를 조심스럽게 제거합니다.각 필터를 수송 버퍼 채워진 플레이트의 한 웰에 넣고 각각의 우물에 0.5 밀리리터의 루시퍼 옐로우를 추가합니다. 그런 다음 10 분 동안 인큐베이터에 플레이트를 넣고 필터를 12 웰 플레이트로 채워진 새로운 운송 버퍼로 옮킨다. 입증 된 바와 같이 BBB 많은 뇌 장치를 설정 한 후, 황열병 바이러스희석의 프랑스 신경 영양 바이러스 균주의 3500 플랫폼 단위와 2 % FPS 내피 세포 매체의 50 마이크로 리터를 추가, 매우 신중하게, 발광 구획의 상단에.2%FBS 내피 세포 배지의 50 마이크로리터로 대조군 BBB 미니 뇌를 바이러스 없이 접종한다. 그런 다음 바이러스가 24 시간 동안 인큐베이터에 많은 뇌 장치를 노출 배치합니다. 다음 날, 내피 세포 투과성 및 동반자를 결정하기 위해 인서트를 제거하고 입증된 것과 마찬가지로.중간 구획에서 바이러스 티터를 결정하기 위해 각 우물에서 샘플 1 밀리리터를 저장합니다. 아블루미날 구획에 발광 구획이 누출되는 것을 피하기 위해 부드럽게 삽입할 수 있습니다. 혈액 뇌 장벽을 가로 질러 생체 분자를 대상으로 하는 뉴런의 수송을 연구하려면, 인서츠에 관심있는 생체 분자를 추가하고 세포 배양 인큐베이터에 플레이트를 반환합니다.24시간 후에 원격으로 삽입하고 내피 투과성을 결정합니다. 그런 다음 미니 뇌 내에서 관심있는 생체 분자의 존재를 검출하기위한 적절한 항체로 많은 뇌 세포를 얼룩지게합니다. 인간 뇌성 마이크로 혈관 내피 세포는 그들의 생물학적 기능에 대한 주요 관련 단백질인 rececptoers, Efflux 수송기 또는 수송기의 모든 하위 집합을 표현합니다.황열병 바이러스의 일부 프랑스 신경 열대 바이러스 균주는 24 시간에 혈액 뇌 장벽을 교차 할 수 있습니다. 바이러스는 그 때 두뇌 세포 안쪽에 바이러스의 곱셈에 의해 다음 이틀 동안 증폭합니다. 또한, 특정 바이러스 성 바이오마커의 발현은 이 신경 침습성 바이러스 집단이 미니 뇌 세포에 직렬로 통과되고 바이러스 부하와 엄격하게 상관관계가 있을 때 자극된다.분자 신경 태그 Neurovita를 관통 하는 구획 세포의 한계에 추가 된 후 혈액 뇌 장벽을 교차 하 고 인간의 신경 세포를 대상으로 할 수 있습니다. 세포 관통 분자 신경 태그 델타 neurovita 내 피 세포 장벽을 교차, 하지만 덜 효율적으로 인간의 뉴런을 대상으로. 작은 중간 구획에 추가 된 후, 세포 관통 분자 Neuro-Tag Neurovita 혈액 뇌 장벽을 교차 하 고 인간의 신경 세포의 축 하를 재생할 수 있습니다., 상처 후.신경타구 신경비타 델타의 비활성 형태인 신경꼬리를 관통하는 세포와는 대조적입니다. 축 하 스크래치 세포 침투 분자 신경 태그 Neurovita 후 적용 하는 경우 상처받은 뉴런의 신경 보호 및 x 구역 재생을 트리거합니다. 엄격하게 관행의 좋은 이익을 위해.I 세포 구절을 과도하게 사용하지 마십시오. 중간 및 영역의 일부 유사성을 유지하고 마이코 플라즈마의 부재를 확인하려고합니다. 미니 뇌와 약물 사이의 상호 작용은 관심의 미생물이 화학화 성적 증명서에 의해 더 연구 될 수있다 또는 기술이라고 고전적인 생물학.

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Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

이 비디오에서는 혈액-뇌 종양 장벽을 모방한 체외 모델을 구축하기 위한 포괄적인 프로토콜에 대해 설명합니다. 이 모델은 뇌종양 치료를 위한 치료제의 전달을 이해할 수 있는 가능성을 가지고 있습니다.

혈액-뇌종양 장벽 또는 BBTB 모델: 종양에 대한 치료제 전달을 평가하기 위한 혈액-뇌 장벽 또는 BBB 모델의 적응

이 비디오는 혈액뇌장벽(BBB)을 통과하는 병원체를 연구하기 위한 체외 모델을 보여줍니다. 밀접한 연접을 발현하는 미세혈관 내피 세포는 상부 챔버에서 내피층을 형성하고, 뉴런, 성상세포, 미세아교세포는 다공성 막으로 분리된 하부 챔버의 뇌 실질을 나타냅니다. BBB 모델의 바이러스 감염은 혈액에서 뇌로 전달되는 병원체를 모방합니다. 신경친화성 바이러스를 도입하면 트랜스사이토시스(transcytosis)를 통해 BBB를 교차하여 신경 세포를 감염시키고 바이러스 자손을 복제 및 방출하여 성공적인 신경 침입을 보여줍니다.

혈액-뇌 장벽과 뇌 세포 감염의 병원체 교차를 연구하기 위한 체외 모델

혈액 - 뇌 장벽 (BBB)​​의 인체 모델의 확립 BBB 장애와 관련된 뇌 상태에 대한 연구를 혜택을 누릴 수 있습니다. 우리는 여기서, 다공질 막의 양측에 인간 성상 세포와 뇌 내피 세포의 공동 배양을 허용 접촉 BBB 모델의 제조를위한 개선 된 기술을 설명한다.

방법 혈액 - 뇌 장벽의 인간 세포 기반의 연락 모델의 준비를 위해 개선

여기에서는 체외에서 중추신경계로의 림프구 전이를 조사할 수 있는 인간 혈액-뇌 장벽 모델에 대해 설명합니다.

를 사용하여 림프구 혈관 외로 유출 분석<em&gt; 체외</em&gt; 인간의 혈액 - 뇌 장벽의 모델

인간의 뇌 조직에서 분리 된 뇌 모세 혈관 장벽 기능 생리 및 병 태 생리 조건에서 공부 하는 전 임상 모델으로 사용할 수 있습니다. 여기, 우리는 신선한 인간의 뇌 조직에서 뇌 모세 혈관을 분리 하는 최적화 된 프로토콜을 제시.

신선한 인간의 뇌 조직에서 뇌 모세 혈관의 절연

인간의 혈액-뇌 장벽은 선택적으로 친수성 분자와 병원체가 뇌에 침투하는 것을 방지합니다. 수막염과 수술 후 정신 착란을 포함한 여러 가지 병리는 혈액 - 뇌 장벽의 침투성 증가와 관련이 있습니다. 여기서, 우리는 미생물 통과에 의한 장벽 투과성을 시험하기 위해 내피 세포 배양 모델을 기술한다.

미세 혈관 내피 세포를 통해 미생물 통과에 의해 혈액 - 뇌 장벽의 투과성 분석

혈액 뇌 장벽 (BBB) 단단히 뇌 항상성을 조절 하는 다세포 신경 혈관 단위. 인간 iPSCs와 오르간 온 칩 기술을 결합하여 질병 모델링 및 CNS 약물 침투성 예측에 적합한 맞춤형 BBB 칩을 생성했습니다. BBB 칩의 생성 및 작동에 대해 상세한 프로토콜이 설명된다.

인간 iPSC 기반 혈액-뇌 장벽 칩 생성

이 프로토콜은 인간 혈액-뇌 장벽(BBB) 시험관내 모델을 확립하는 방법을 설명합니다. 내피 세포와 혈관주위세포는 삽입 필터의 양쪽(혈액 구획)에 파종되고 성상세포는 하단 웰(뇌 구획)에 파종됩니다. 상기 모델 특성화는 나노입자 수송 실험에 사용되었다.

인간 혈액-뇌 장벽을 모델링하는 삼중 배양 세포 시스템

이 보고서는 혈액-뇌 장벽 모델 구축을 위한 μSiM 플랫폼의 조립, 세포 배양 및 분석을 위한 프로토콜을 제공합니다.

혈액-뇌 장벽 모델링을 위한 MicroSiM(μSiM) 장벽 조직 플랫폼 사용

혈액뇌장벽(BBB)은 안정적이고 건강한 뇌 환경을 유지하는 데 중요한 역할을 합니다. BBB 기능 장애는 많은 신경 질환과 관련이 있습니다. 우리는 뇌혈관 병리, BBB 무결성, BBB가 유전학 및 질병에 의해 어떻게 변형되는지 조사하기 위해 BBB의 3D 줄기세포 유래 모델을 개발했습니다.

신경 질환을 모델링하고 치료적으로 표적화하기 위한 체외 혈액-뇌 장벽 재건

이 프로토콜은 뇌 혈액 장벽의 신뢰할 수 있고 효율적인 시험관 내 모델을 설명합니다. 이 방법은 마우스 대뇌 혈관 내피 세포 bEnd.3를 사용하고 막관통 전기 저항을 측정합니다.

경내피 전기 저항 검출을 통한 bEnd.3 혈관 내피 세포의 장벽 기능 무결성 기록

학습하세요 인체 혈액-뇌 장벽 미니브레인 모델을 활용한 바이러스 및 생물분자의 뇌 횡단 메커니즘. 이 방법은 신경감염 및 약물 전달 연구에 활용됩니다.

병원 체 또는 의약품 및 두뇌와 그들의 상호 작용에 의해 장벽 횡단 연구를 인간의 혈액-뇌 인터페이스 모델

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