Name: 11C SNAP-7941의 자동 합성및 실시간 역학 평가의 기술적 측면 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-28T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 50 s
Description: 배우세요 [11C]SNAP-7941의 자동 방사성 표지 합성법과 실시간 PET 역학 평가 기술을. 이 방법은 P-gp 발현 세포에서 수용체 결합 동역학을 정밀 분석하여 대사 질환 연구에 활용됩니다.

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이 작품은 오스트리아 과학 기금 (FWF P26502-B24, M. Mitterhauser)에 의해 지원되었다. 우리는 T. 젠즈와 A. Krcal의 기술 지원에 감사드립니다. 또한, 우리는 전구체를 배포에 대한 AgOTf와 H. Spreitzer의 준비에 대한 K. Pallitsch 감사합니다.

<ol><li>Saito, Y., Maruyama, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+melanin-concentrating+hormone+receptor+and+its+impact+on+drug+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Zoology%22%5BJournal%5D)">Identification of melanin-concentrating hormone receptor and its impact on drug discovery.</a> Journal of Experimental Zoology. 305, 761-768 (2006).</li>
<li>Philippe, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+in+vitro+%26+in+vivo+evaluation+of+%5B11C%5DSNAP-7941+-+the+first+PET+tracer+for+the+melanin+concentrating+hormone+receptor+1%5BTitle%5D)+AND+%22Nuclear+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Preclinical in vitro & in vivo evaluation of [11C]SNAP-7941 - the first PET tracer for the melanin concentrating hormone receptor 1.</a> Nuclear Medicine and Biology. 40, 919-925 (2013).</li>
<li>Philippe, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiosynthesis+of+%5B+11C%5DSNAP-7941-the+first+PET-tracer+for+the+melanin+concentrating+hormone+receptor+1+%28MCHR1%29%5BTitle%5D)+AND+%22Applied.+Radiation+and+Isotopes%22%5BJournal%5D)">Radiosynthesis of [ 11C]SNAP-7941-the first PET-tracer for the melanin concentrating hormone receptor 1 (MCHR1).</a> Applied. Radiation and Isotopes. 70, 2287-2294 (2012).</li>
<li>Philippe, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SNAPshots+of+the+MCHR1%E2%80%AF%3A+a+Comparison+Between+the+PET-Tracers+%5B+18+F+%5D+FE+%40+SNAP+and+%5B+11+C+%5D+SNAP-7941%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging+Biology%22%5BJournal%5D)">SNAPshots of the MCHR1 : a Comparison Between the PET-Tracers [ 18 F ] FE @ SNAP and [ 11 C ] SNAP-7941.</a> Molecular Imaging Biology. , 1-12 (2018).</li>
<li>Schirmer, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Syntheses+of+precursors+and+reference+compounds+of+the+melanin-+concentrating+hormone+receptor+1+%28MCHR1%29+Tracers+%5B11C%5DSNAP-7941+and+%5B18F%5DFE%40SNAP+for+positron+emission+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Syntheses of precursors and reference compounds of the melanin- concentrating hormone receptor 1 (MCHR1) Tracers [11C]SNAP-7941 and [18F]FE@SNAP for positron emission tomography.</a> Molecules. 18, 12119-12143 (2013).</li>
<li>Miller, P. W., Long, N. J., Vilar, R., Gee, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthese+von+11C-%2C+18F-%2C+15O-+und+13N-Radiotracern+f%C3%BCr+die+Positronenemissionstomographie%5BTitle%5D)+AND+%22Angewandte+Chemie%22%5BJournal%5D)">Synthese von 11C-, 18F-, 15O- und 13N-Radiotracern für die Positronenemissionstomographie.</a> Angewandte Chemie. 120, 9136-9172 (2008).</li>
<li>Pichler, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+on+PET+radiochemistry%3A+part+1+-+covalent+labels+-+18+F%2C+11+C%2C+and+13+N%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nuclear+Medicine%22%5BJournal%5D)">An overview on PET radiochemistry: part 1 - covalent labels - 18 F, 11 C, and 13 N.</a> Journal of Nuclear Medicine. 59, 1350-1354 (2018).</li>
<li>Pichler, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molar+activity+-+The+keystone+in+11C-radiochemistry%3A+An+explorative+study+using+the+gas+phase+method%5BTitle%5D)+AND+%22Nuclear+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Molar activity - The keystone in 11C-radiochemistry: An explorative study using the gas phase method.</a> Nuclear Medicine and Biology. 67, 21-26 (2018).</li>
<li>Larsen, P., Ulin, J., Dahlstrøm, K., Jensen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+of+%5B11C%5Diodomethane+by+iodination+of+%5B11C%5Dmethane%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Radiation+and+Isotopes%22%5BJournal%5D)">Synthesis of [11C]iodomethane by iodination of [11C]methane.</a> Applied Radiation and Isotopes. 48, 153-157 (1997).</li>
<li>Dahl, K., Halldin, C., Schou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+methodologies+for+the+preparation+of+carbon-11+labeled+radiopharmaceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+Translational+Imaging%22%5BJournal%5D)">New methodologies for the preparation of carbon-11 labeled radiopharmaceuticals.</a> Clinical and Translational Imaging. 5, 275-289 (2017).</li>
<li>Raaphorst, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiopharmaceuticals+for+assessing+ABC+transporters+at+the+blood-brain+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical.+Pharmacollogy+%26+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Radiopharmaceuticals for assessing ABC transporters at the blood-brain barrier.</a> Clinical. Pharmacollogy & Therapeutics. 97, 362-371 (2015).</li>
<li>Nics, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Speed+matters+to+raise+molar+radioactivity%3A+Fast+HPLC+shortens+the+quality+control+of+C-11+PET-tracers%5BTitle%5D)+AND+%22Nuclear+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Speed matters to raise molar radioactivity: Fast HPLC shortens the quality control of C-11 PET-tracers.</a> Nuclear Medicine and Biology. 57, 28-33 (2018).</li>
<li>Zeilinger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+approaches+for+the+reliable+in+vitro+assessment+of+binding+affinity+based+on+high-resolution+real-time+data+acquisition+of+radioligand-receptor+binding+kinetics%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Nuclear+Medicine+and+Molecular+Imaging+%28Research%29%22%5BJournal%5D)">New approaches for the reliable in vitro assessment of binding affinity based on high-resolution real-time data acquisition of radioligand-receptor binding kinetics.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging (Research). 7, 22(2017).</li>
</ol>

우리는 공개 할 것이 없습니다.

[11C]SNAP-7941의 방사성 합성은 상용 합성 모듈상에 확립되었다. 준비 절차를 완전히 자동화 할 수있는 가능성으로 인해 방사성 합성이 신뢰할 수 있다는 것을 증명하고 작업자의 방사선 보호에 관한 개선이 이루어졌습니다. 신디사이저의 준비는 특히 어금니 활성의 측면에서, 방사선 추적기의 품질에 엄청난 영향을 미친다. 따라서, 불활성 조건(예를 들어, 헬륨 대기)에서 지속적으로 작업하고 반응 용기(타겟 라인,[11C]CH3 I생산 주기 및 반응기)에 앞서 위치한 모든 라인을 플러시하는 것이 필수적이다(도 2참조). 더욱이, 합성이 시작되기 전에 각각의 트랩과 오븐을 가열하여 수분과 대기 탄소를 제거하여 어금니 활성을 유리하게 증가시킨다. 특히 흑연화 탄소가 함침 된 AgOTf 컬럼은 습도에 매우 민감합니다. 임의의 수분 공급원조차도[11C]CH3I의 변환을 방해[11 C]CH3 OTf. 합성을 시작하기 전에,[11C]CO2 트랩과 [11C]CH3 I 트랩은 후속 트래핑을 가능하게 하기 위해 다시 실온으로 냉각되어야 한다. 또한 합성을 시작하기 직전에 전구체를 용해시키고 베이스를 전구체 용액에 직접 추가하는 것이 좋습니다.
카본 11 방사성 추적기의 품질 관리는 지속적이고 빠른 워크플로우를 위해 합리적으로 설계되어야 합니다. 그러나, 세포 배양 연구를 위한 가장 중요한 매개변수는 유효한 결과를 얻기 위하여 방사성 화학적 순도 및 대구치 활성입니다. 어금니 활성의 정확한 평가는 견고한 분석 HPLC 방법을 필요로 하며 교정 곡선은 최종 생성물의 농도 범위를 커버해야 한다. 방사성 추적기의 도전적인 부분은 방사성 합성 중에 생성되는 소량으로 인해 정량화(LOQ)의 한계를 초과하는 농도를 달성하는 것입니다. 따라서, 본 래치활동은 수용체 포화를 피하기 위해 높은 어금니 활동과 비방사성 신호를 정량화할 수 있을 만큼 충분히 높은 농도 사이의 균형을 찾는 것이다.
【11C 】 SNAP-7941은 급속한 유출로 인한 미처리 또는 비히클 처리된 MDCKII-hMDR1 세포에서 축적이 관찰되지 않음으로 인간 P-gp 수송기의 강력한 기질인 것으로 확인되었다. 대조적으로, 두 실험 설정(MDCKII-WT 또는 미리 차단된 MDCKII-hMDR1 세포)은유사한 결과([11 C]SNAP-7941의 축적)를 제공하여, 이러한 시험관내 분석의 다양성을 뒷받침한다. MDCKII-hMDR1 세포는 회전 하는 세포 배양 접시에 의해 발생 하는 전단 스트레스에 대 한 그들의 안정적인 형질 감염, 빠른 성장 및 지속적인 리간트 트레이서 실험에 매우 적합 하다. [11C]SNAP-7941 쥐와 쥐 두뇌에 있는 섭취의 부족은 그러므로 P-gp 수송기를 통해 유출에 기인할 수 있습니다. 인간 다중 약물 내성 단백질 1(hMDR-1, P-gp)을 이용한 개 신장 세포의 형질감염으로 인해, 인간에서 의한 유출 수송체 결합에 대한 이 방법의 예측 값은 높으며, 이는 향후 임상 적용 측면에서 유리하다. 그러나, 지금까지, 다른 유출 수송에 대한 선택성은 확인되지 않았다. 따라서, 다른 세포주들은 유방암 내성 단백질(BCRP) 또는 다중 저항 단백질-1(MRP-1)으로서 다른 저명한 유출 수송기를 발현하여, 이들 수송기를 향한 상호작용을 연구하는데 사용될 수 있다. 이 방법은 고전적인 축적 또는 수송 검사에 비해 매우 간단하고 즉시 질적 결과를 제공합니다. 더욱이, 가장 큰 장점은 이 기술이 간접 정량화(대부분 변위)를 이용한 종래의 실험과는 달리 PET 트레이서와 대상의 직접 상호 작용을 실시간으로 평가할 수 있다는 것이다. 또한 실시간 방사선 분석 소프트웨어는 실험적 유연성(예: 핵종 붕괴 보정, 측정 시간 및 위치 등)을 제공하므로 사용자에게 높은 자유도를 제공합니다. 다른 측면에서, 방법의 한계는 한 번에 하나의 셀 접시만 측정 할 수 있기 때문에 낮은 샘플 처리량을 포함한다. 또한, 몇 가지 다른 기술 및 운영 문제를 고려해야한다 : 설명 된 기술은 배경 방사선에 매우 민감하다; 따라서 방사선 원은 거리에서 유지되어야하며 실험 전에 배경 측정에 중점을 두어야합니다. 실온보다 더 높은 온도에서의 실험에 관한 또 다른 문제는 기울어진 지지체의 가열입니다: 세포 배양 배지의 증발은 검출기에 영향을 미칠 수 있습니다. 가열 대신에, 전체 장치는 바람직하게는 인큐베이터에 배치된다. 더욱이, 상기 방법은 부착 세포주로 제한된다. 세포 배양 접시의 회전을 통해, 전단 스트레스에 민감한 세포는 접시에서 분리 될 수 있습니다, 잘못된 결과를 초래할 수 있습니다.
그럼에도 불구하고, 실험자가 이러한 사소한 단점에 주의를 기울이면 이 방법은 전임상 PET-추적자의 운동 적 행동의 분석을 위한 빠르고 신뢰할 수 있는 결과를 제공한다.

【11C 】 SNAP-7941은 멜라닌 농축 호르몬 수용체 1(MCHR1)을 표적으로 하는 최초의 양전자 방출 단층 촬영(PET)-추적자로서 진화되었다- 주로 식욕및 음식 섭취량의 중앙 조절에 관여하는 수용체1. SNAP-7941의 탄소 11 라벨링, 잘 특성화 된 MCHR1 길항제, 본격적인 PET추적자 2,3,4,5를산출했다. 그러나, 완전 자동화된 방사성 합성은 20 분 6의 반감기를 제공하는 단명한 방사성 핵종 탄소 11로시간 효험 및 재현성 면에서 매우 도전적이다. 전체 합성 시간은 최소한으로 유지되어야하며, 엄지 손가락의 규칙으로 2-3 반감기 (즉, 탄소 11의 경우 약 40-60 분)를 초과해서는 안됩니다7. 특히, 낮은 발현 밀도를 가진 수용체 시스템을 표적으로 하는 방사성 추적자에 대한 합성 절차는 충분한수율및 결과적으로 높은 몰 활성을 얻기 위해 광범위하게 최적화되어야 한다 8. 합성 전략은 종종 사이클로트론 내의 방사성 핵종 생산을 따르고[11C]CO2를 신디사이저로 방출한다. [11C]CO2는 먼저 [11C]CH4로 감소되고 이어서 요오드와 반응하여[11 C]CH3 I를 기체상 방법9,10을 통해 수율로 하였다. 실버 트라이플랫 수율[11C]CH3OTf를 직접 온라인처리. 그 후, 이러한 반응성 탄소-11 표지된 중간체는 전구체 분자를 함유하는 용액내로 도입된다. 자동화된 방사성 합성은 또한 전임상 및 임상 연구에 적합한 제품의 후속 제형을 포함하여 반준비 RP-HPLC를 가진 정화 과정을 관련시킵니다.
방사성 핵종의 반감기와 방사성 합성의 시간 노력에 관계없이, 방사성 의약품의 약물 동력학은 PET-추적자 개발 중에 평가해야 할 가장 중요한 부분입니다. 신경 이미징의 관점에서, PET 추적자의 뇌 입력은 주요 전제 조건입니다. 그러나, 혈액 뇌 장벽 (BBB), 뇌의 "보안 국경", 높은 작은 분자를 언로드 할 수있는 유출 수송을 표현 (예를 들어, PET 추적자) 효율적으로 자신의 적용을 방해.
전임상 평가 동안 큰 단점은 이러한 유출 수송기를 향한 예기치 않은 상호 작용이며, 이는 시험관 내 실험에서 종종 인식되지 않으며[11C]SNAP-7941에 대해 관찰된 바와 같이 생체 내 PET-추적자의 실패로 이어진다. μPET 화상 진찰은 P-gp 억제제 tariquidar11의투여 후에 극적으로 증가한 낮은 두뇌 축적을 입증했습니다. 이러한 데이터는[11C]SNAP-7941이 중앙 MCHR1에 결합하는 리간드를 방해하는 이러한 유출 수송시스템의 기판임을 시사한다. 불행하게도, 트레이서 개발의 초기 단계에서 BBB 침투의 예측을 가능하게 하는 적절한 시험관 내 모델의 부족은 여전히 존재한다.
여기서, 우리는 탄소11메틸화를 위한 신디사이저를 사용하여 [11 C]SNAP-7941의 자동 합성을 기술한다. 이 작업의 강조는 매우 수명이 짧은 핵종 탄소 11을 사용하여 자동화 된 합성, 품질 관리뿐만 아니라 연속적인 체외 평가를 포함한 연속적인 실험 접근법을 구성하는 방법에 대한 개요를 제공하는 것입니다.
첫째, 최소한의 시간 지출과 최대 수율로 성공적인 방합성을 위한 주요 단계가 설명되어 있습니다. 이어서, 신뢰할 수 있는 품질 관리 절차는 잠재적인 임상 연구에 사용할 수 있는 방사선 추적자를 설치하고 유럽 약전12의기준을 충족합니다. 어금니 농도의 정량화 및 각 어금니 활성의 계산은 연속적인 운동 측정을 위한 필수 요건이다.
마지막으로,[11C]SNAP-7941의 유출 수송기, P-gp(hMDR1)를 향한 상호작용을 평가하는 새롭고 간단한 시험관 내 방법이 제시된다. 제안된 운동 모델은 즉각적인 데이터 해석을 허용하고 최소한의 세포 배양 노력이 필요한 다루기 쉬운 장치를 사용합니다13.

<table><tbody><tr><td>표 1: [11C]SNAP-7941</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ni 촉매</td><td>Shimadzu, Kyoto, Japan</td><td></td><td>Shimalilte Ni reduced, 80/100 mesh</td></tr><tr><td>Iodine</td><td>Merck, Darmstadt, Germany</td><td></td><td>1.04761.0100</td></tr><tr><td>Acetonitrile</td><td>Merck, Darmstadt, Germany</td><td></td><td>DNA 합성을 위해, < 10ppm H2O</td></tr><tr><td>아세토니트릴</td><td>시그마-알드리치, 세인트루이스, 미주리, 미국</td><td></td><td>HPLC 등급</td></tr><tr><td>암모늄 아세테이트</td><td>머크, 다름슈타트, 독일</td><td></td><td></td></tr><tr><td>아세트산</td><td>머크, 다름슈타트, 독일</td><td></td><td>빙하</td></tr><tr><td>에탄올</td><td>머크, 다름슈타트, 독일</td><td></td><td>96%</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>B. Braun, Melsungen, 독일</td><td></td><td>0.9% </td></tr><tr><td>테트라부틸암모늄 하이드록사이드</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>메탄올</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, 미국</td><td></td><td>HPLC 등급</td></tr><tr><td>SPE 카트리지</td><td>Waters, Milford, MA, USA</td><td></td><td>SepPak C18plus</td></tr><tr><td>Semi-preparative RP-HPLC column</td><td>Merck, Darmstadt, Germany</td><td></td><td>Chromolith SemiPrep RP-18e, 100-10 mm</td></tr><tr><td>Precolumn</td><td>Merck, Darmstadt, Germany</td><td></td><td>크로몰리스 가드 RP-18e, 5-4.6 mm</td></tr><tr><td>전구체</td><td>오스트리아 비엔나</td><td></td> 대학교 <td>SNAP-acid</td></tr><tr><td>Reference compound</td><td>오스트리아 비엔나</td><td></td> 대학교 <td>SNAP-7941</td></tr><tr><td>Silver trifluoromethanesulfonate</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Graphpa GC</td><td>Alltech, Deerfield, IL, USA</td><td></td><td>80/100 mesh</td></tr><tr><td>PET trace 860 cyclotron</td><td>GE Healthcare, 웁살라, 스웨덴</td><td></td><td></td></tr><tr><td>[11C]CO2 고압 타겟</td><td>Air Liquide, 비엔나, 오스트리아</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TRACERlabFX2 C</td><td>GE Healthcare, 웁살라, 스웨덴</td><td></td><td></td></tr><tr><td>N2 + 1% O2</td><td>Air Liquide, 오스트리아</td><td></td><td>비엔나 대상 가스</td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>카탈로그 번호</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Table 2: List of materials and instrument of quality control of [11C]SNAP-7941.</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Merck Hitachi LaChrom, L-7100</td><td>Hitachi Vantara Austria GmbH (오스트리아 비엔나)</td><td></td><td>HPLC 펌프</td></tr><tr><td>Merck Hitachi, L7400</td><td>Hitachi Vantara Austria GmbH (일본 도쿄)</td><td></td><td>UV 검출기</td></tr><tr><td>NaI-radiodetector</td><td>Raytest (Straubenhardt, 독일)</td><td></td><td>NaI-radiodetector</td></tr><tr><td>Chromolith Performance RP-18e, 100-4.6 mm</td><td>Merck (독일 다름슈타트)</td><td></td><td>HPLC 컬럼</td></tr><tr><td>430-GC</td><td>Bruker (브레멘, 독일)</td><td></td><td>가스 크로마토그래프</td></tr><tr><td>모세관 컬럼 ID-BP20; 12 mx0.22 mmx0.25 mm</td><td>SGE Ananlytical Science Pty. Ltd. (Victoria, Australia)</td><td></td><td>가스 모세관</td></tr><tr><td>Wesco, 삼투압계 Vapro 5600</td><td>Sanoya Medical Systems (Vienna, Austria)</td><td></td><td>삼투압 측정기</td></tr><tr><td>g-spectrometer g-spectrometer</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>가스 크로마토 그래피 제어 소프트웨어</td><td>VARIAN (미국 캘리포니아주 팔로알토)</td><td></td><td>Galaxie 버전 1.9.302.952</td></tr><tr><td>감마 분광계 제어 소프트웨어</td><td>ORTEC (미국 테네시 주 오크리지)</td><td></td><td>Windows용 Maestro 버전 6.06</td></tr><tr><td>감마 스펙트럼 리콜 소프트웨어</td><td>ORTEC(미국 테네시 주 오크 릿지)</td><td></td><td>Winplots 버전 3.21</td></tr><tr><td>HPLC 제어 소프트웨어</td><td>Raytest (Straubenhardt, 독일)</td><td></td><td>Gina Star 버전 5.9</td></tr><tr><td>inolab 740</td><td>WTW (Weilheim, 독일)</td><td></td><td>pH 측정기</td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>카탈로그 번호</td><td>Comments</td></tr><tr><td>표 3: [11C]SNAP-7941.</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Madin-Darby Canine Kidney cell line (MDCKII-hMDR1)</td><td>Netherlands Cancer Institute (NKI, Amsterdam, Netherlands)</td><td></td><td>Expression the human P-glycoprotein (hMDR1)</td></tr><tr><td>Madin-Darby Canine Kidney cell line (MDCKII-WT)의</td> <td>실시간 운동 거동 평가를 위한 재료 및 기기 목록Netherlands Cancer Institute (NKI, Amsterdam, Netherlands)</td><td></td><td>Wildtype (WT)</td></tr><tr><td>DMEM GlutaMAX</td><td>VWR International GmbH, Vienna, Austria</td><td></td><td>Gibco 61965-026</td></tr><tr><td>Fetal Calf Serum (FCS)</td><td>VWR International GmbH, Vienna, Austria</td><td></td><td>Gibco 10270-106</td></tr><tr><td>Penicillin/Streptomycin</td><td>VWR International GmbH, Vienna, Austria</td><td></td><td>Gibco 15140</td></tr><tr><td>Cell culture dish</td><td>Greiner Bio-One GmbH, Frickenhausen, Germany</td><td></td><td>Cellstar 100 mm x 20 mm, Mfr.No. 664160</td></tr><tr><td>In vitro 실험</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMEM GlutaMAX</td><td>VWR International GmbH, Vienna, Austria</td><td></td><td>Gibco 61965-026</td></tr><tr><td>(&plusmn;)-베라파밀 하이드로클로라이드</td><td>Sigma Aldrich (St. Louis, Missouri, USA)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Sigma Aldrich (St. Louis, Missouri, USA)</td><td></td><td>276855-100 mL</td></tr><tr><td>Cell culture dish</td><td>Greiner Bio-One GmbH, Frickenhausen, Germany</td><td></td><td>Cellstar 100 mm x 20 mm, Mfr.No. 664160</td></tr><tr><td>멸균 일회용 플라스틱 피펫</td><td>VWR International GmbH, Vienna, Austria</td><td></td><td>Sterilin, 5 mL &ndash; 25 mL</td></tr><tr><td>멸균 피펫 팁</td><td>VWR International GmbH, Vienna, Austria</td><td></td><td>Eppendorf epT.I.P.S. 바이오푸르 20 &마이크로; L &ndash; 200 &마이크로; L</td></tr><tr><td>세포 배양 플라스크</td><td>Greiner Bio-One GmbH, Frickenhausen, Germany</td><td></td><td>Cellstar 250 mL, 75 cm2 red 필터 스크류 캡, Mfr.No.658175</td></tr><tr><td>LigandTracer control Version 2.2.2</td><td>Ridgeview Instruments AB, 웁살라, 스웨덴.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>LigandTracer Yellow</td><td>Ridgeview Instruments AB, 웁살라, 스웨덴.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>LigandTracer White</td><td>Ridgeview Instruments AB, 웁살라, 스웨덴.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>GraphPad 프리즘 6.0</td><td>GraphPad 소프트웨어, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>휴대용 자동 세포 계수기,</td><td>Millipore Corporation, Billerica MA01821</td><td></td><td>Scepter (Cat.No. PHC00000)</td></tr> <tr><td>세포 계수기 센서</td><td>Millipore Corporation Billerica MA01821</td><td></td><td>Scepter Sensor 60 &micro; m (Cat.No. PHCC60050)</td></tr></tbody></table>

[11c]snap-7941의 자동 합성및 실시간 역학 평가의 기술적 측면

Technical Aspect of the Automated Synthesis and Real-Time Kinetic Evaluation of [11C]SNAP-7941

양전자 방출 단층 촬영 (PET)는 통로에 통찰력을 제공하고 생체 내 조사를 위해 특정 표적으로 한 radioligands를 사용하는 필수적인 분자 화상 진찰 기술입니다. 이 프로토콜 내에서,[11C]SNAP-7941의 강력하고 신뢰할 수 있는 원격 제어 방사성 합성, 멜라닌 집중 호르몬 수용체 1에 대한 길항제, 설명된다. 방사성 합성은 사이클로트론 생산[11C]CO2로 시작하여 이후에 [11C]CH3OTf로의 기체 상 전이를 통해 추가로 반응한다. 이어서, 이러한 반응성 중간체는 전구체 용액에 도입되고 각각의 방사성 추적자를 형성한다. 방사성 화학적 순도뿐만 아니라 방사성 의약품 품질 관리 프로세스에서 일상적으로 구현되는 RP-HPLC에 의해 결정됩니다. 추가적으로, 어금니 활동은 다음 실시간 운동 조사를 위한 필수품이기 때문에 계산됩니다. 더욱이,[11C]SNAP-7941은 세포 축적에 대한 P-당단백질(P-gp) 발현의 영향을 평가하기 위한 MDCKII-WT 및 MDCKII-hMDR1 세포에 적용된다. 이러한 이유로, P-gp 발현 세포주(MDCKII-hMDR1)는 P-gp 기질(±)-베라파밀을 이에 의해 실험 전에 차단하지 않고 또는 차단과 함께 사용되며 그 결과는 야생형 세포에 대해 관찰된 것들과 비교된다. 전반적인 실험 접근법은 탄소 11(반감기: 20분)과 같은 단기 핵종으로 표지된 PET 추적기를 사용하여 모든 전임상 및 임상 연구에 필수적인 정확한 시간 관리의 중요성을 보여줍니다.

[11C]SNAP-7941의 완전 자동화된 방사성 합성은 제형화 생성물의 [11C]CH3 OTf; n=10)에 기초하여 5.7±2.5GBq(EOB에서 4.6±2.0%, 14.9±5.9%)를 산출하였다. 전체 합성은 약 40 분 지속, 여기서 15 분 은 [11 C]CH 3 OTf의 준비를 위해 필요했다[11C]CH3OTf 가스 상 방법을 통해, 또 다른 5 분은 전구체의 방사성 라벨링에 필요했다, 반 준비의 10 분 다음 Rp-HPLC 정제 및 C18 카트리지 고체 상 추출 및 제형을 위한 10분. 이어서, 작은 aliquot(약 100-200 μL)를 품질 관리를 담당하는 사람에게 전달하였고, 반면 에 기성 사용 트레이서를 함유한 본래의 제품 바이알은 실시간 운동 분석의 실험자에게 전달되었다.
품질 관리는 합성 종료 후 10 분 이내에 완료되었습니다. 어금니 활성은 72±41 GBq/μmol(n=10)의 범위였고 방사성 화학적 순도는 항상 &gt; 95%였다. 다른 모든 파라미터(pH, 삼투압, 잔류 용매)는 방출 기준을 충족시켰다. 실시간 운동 분석의 경우, 3개의 상이한 실험 설정이 선택되었다: (A) 처리 및 비처리(비히클) MDCKII-WT 세포, (B) 비처리 또는 비기MDCKII-hMDR1 세포로 처리된 후자의 세포주 및 (C) 후자의 세포주를 사전에 차단하여 실시간 차단 (±)-베라파밀을 사용하는 수송기의 운동 분석. [11C]SNAP-7941을 야생형 세포주 MDCKII-WT(P-gp 비발현) 및 MDCKII-hMDR1(P-gp 발현)에 적용하면 야생형 세포주에 빠른 축적이 있는 반면, 축적은 관찰되지 않은 다른 운동적 거동을 나타낸다. MDCKII-hMDR1 세포에 대해 그러나, P-gp 유출 수송기(±)-verapamil을 가진 P-gp 유출 수송기(±)를 차단하는 것은 야생형 세포주에서 이미 본바와 같이 유사한 실시간 역학으로 이어졌다(도 5).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59557/59557fig1.jpg"> 그림 1: 작업 흐름의 개요입니다. [11C]SNAP-7941의 실시간 역학 측정의 방사능,품질 관리 및 성능의 작업 흐름. 검은 색 화살표는 방사능의 전송 방법을 나타냅니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59557/59557fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59557/59557fig2.jpg"> 도 2: 자동화된 신디사이저의 방사성 합성 방식. [11C]CH3 I/[11C]CH3 OTf 생산, 전구체 용액및 SPE 정제에 대한 활성의 도입을 위한 반응기용 순환 장치로 시작하여 자동 신디사이저의 스위칭 회로(SPE = 고체 상 추출; PCV = 제품 수집 바이알). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59557/59557fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59557/59557fig3.jpg"> 도 3: [11C]SNAP-7841의 완전 자동화된 방사성 합성의 대표적인 크로마토그램. 반준비 RP-HPLC 크로마토그램은 하단에 정제 된 후 상단 및 분석 하나에 예시된다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59557/59557fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59557/59557fig4.jpg"> 도 4: 실시간 실험을 위한 세포 배양 접시 준비. 1단계는 세포 유형 및 이들의 성장 속도에 따라 2.5 x 105 최대 1 x 106의 시드를 포함한다. 그 후, 배양 접시는 경사 면 (약 30-45 °)에 배치됩니다. 따라서, 제공된 금속 장치 또는 세포 배양 접시의 뚜껑은 접시의 기울어진 위치를 안정화시키기 위해 인큐베이터에 사용될 수 있다. 다음날 (24 시간) 접시를 수평으로 조정하고, 신선한 세포 배양 배지가 세포 표면을 완전히 덮도록 첨가된다. 실험 당일, 세포 생존력과 합류도 검사됩니다. 실험 프로토콜에 따르면, 세포는 DPBS로 세척되고, 배지는 무혈청 배지(2 mL)로 대체되고, 배양 접시는 실험이 시작될 때까지 경사 위치로 재배치된다. 이제부터, 세포는 억제제 또는 비차량으로 치료될 수 있다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59557/59557fig4large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59557/59557fig5.jpg"> 그림 5: [11C]SNAP-7941의 실시간 운동 측정. [11C]SNAP-7941의 대표적인 실시간 역학은 3개의 상이한 셋업으로 도시된다: MDCKII-WT 세포를 사용하여; MDCKII-hMDR1 세포는 차단 없이 P-gp 억제제 및 MDCKII-hMDR1 세포로서 (±)-verapamil으로 미리 차단하였다. y축은 치료되지 않은 MDCKII-MDR1 세포의 결과와 비교하여 미리 차단된 MDCKII-hMDR1 및 WT 세포의 증가율을 각각 나타낸다(섭취 없음, 0%). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59557/59557fig5large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>

여기서, 우리는[11C]SNAP-7941의 완전 자동화된 방사성 라벨링 및 P-gp 발현 및 비발현 세포에 대한 이 PET-추적자의 실시간 역학의 분석을 위한 프로토콜을 나타낸다.

[11C]SNAP-7941의 자동 합성및 실시간 역학 평가의 기술적 측면

Positron emission tomography (PET) is an essential molecular imaging technique providing insights into pathways and using specific targeted radioligands ...

탄소-11 방사성 라벨링은 분자를 변경하지 않고 양전자 방출 단층 촬영 또는 PET에 작은 화합물을 사용할 수 있습니다. 이것은 수용체 발현 수준을 조사하기 위해 필수적입니다. 탄소-11 방사성 라벨링의 장점은 PET를 사용하여 멜라닌 농축 호르몬 수용체를 향해 SNAP의 결합 운동학을 실시간으로 평가할 수 있다는 것입니다.멜라닌 농축 호르몬 수용체 길항제로서 SNAP는 이 수용체의 더 나은 이해와 비만과 당뇨병과 같은 대사 조건과의 연관성에 기여할 것입니다. 혈액-뇌 장벽에서 발현된 Efflux 수송기는 중앙 수용체 발현 이미징을 위한 방사성 의약품의 사용을 크게 방해할 수 있습니다. 따라서 시험관 내에서 추적을 평가하는 것이 중요합니다.SNAP의 자동화된 방사선 합성은 쉽게 평가할 수 있는 메틸 군을 가진 방사성 표지저저분자화합물에 광범위하게 적용됩니다. 일단 이 절차는 그밖 화합물에 적응될 수 있습니다 설치되면. 시연을 돕는 것은 수석 박사 과정 학생 사라 Pfaff와 테레사 발버가 될 것입니다.탄소-11 SNAP 합성을 시작하려면 적절한 시약 및 재료로 깨끗한 탄소-11 자동 합성 모듈을 설치합니다. 시스템 검사 및 컨디셔닝으로 시작하는 모듈 컴퓨터에서 SNAP 합성 프로세스를 시작합니다. 모듈이 C-11 전달을 준비하기 약 30~40분 전에 사이클로트론에서 C-11 이산화탄소 표적을 선택하고 65마이크로앰퍼에서 빔을 시작합니다.모듈이 배달준비가 되면 내부 창과 외부 도어를 닫습니다. CO2 트랩이 섭씨 40도 이상으로 냉각되었으며 메탄 트랩이 냉각되기 시작했는지 확인합니다. 사이클로트론은 C-11 CO2의 약 120기가벡렐을 생산하면 모듈 소프트웨어에서 확인을 클릭하여 CO2 트랩을 통해 대상으로부터 경로를 엽니다.사이클로트론 컴퓨터에서 모듈에 C-11 CO2를 제공하기 시작합니다. 모듈 컴퓨터에서 활동 전송을 모니터링하고 3분 후에 CO2를 메탄으로 감소시키는 지 확인합니다. 생성된 메탄이 메탄 트랩으로 플러시되고 요오드 오븐을 통해 순환하여 메틸 요오드로 변환될 때 공정을 모니터링한다.전환 시퀀스의 끝에서 byproducts가 메틸 요오드 트랩에서 배기로 플러시되는 것으로 기다린 다음 원자로가 OK를 클릭하여 활동을 받을 준비가 되어 있는지 확인합니다. 메틸 요오드가 트랩에서 방출되고 메틸 트리플랫 오븐을 통해 플러시되어 반응기에 갇히면서 시스템을 모니터링합니다. 반응기 고원의 활성이 포획이 완료된 것을 확인합니다. 반응 혼합물이 섭씨 75도에서 3분 동안 반응하는 동안 기다립니다.그런 다음 반응 혼합물이 섭씨 35도 이하로 냉각되고 1.5 밀리리터의 물로 담금질될 때 시스템을 모니터링합니다. 반응 혼합물이 HPLC 주입 루프에 로드되고 반 준비 HPLC 컬럼에 주입될 때 시스템을 모니터링한다. 크로마토그래피가 진행됨에 따라 UV 및 감마 검출기 추적을 시청하십시오.제품 피크가 수동으로 나타나기 시작하면 모듈의 원형 바닥 컬렉션 플라스크에서 제품을 수집하기 시작합니다. 감마 신호가 초당 약 400 카운트 이하로 떨어지면 수동으로 수집을 종료합니다. 제품이 헬륨 압력하에서 고체 위상 추출 카트리지에 로드될 때 원형 하단 플라스크의 유체 레벨을 시청하십시오.플라스크가 비어 있고 액체가 SPE 카트리지를 통과하면 확인을 클릭하여 카트리지에 갇힌 제품을 세척하기 시작합니다. 그런 다음 제품이 카트리지에서 유리병으로 먼저 출화한 다음 0.9% 식염수 용액으로 희석됨에 따라 제품 수집 유리병의 활동을 모니터링합니다. 제품 용액이 헬륨 압력하에서 멸균 필터를 통해 제품 바이알로 전송되는 것을 지켜보십시오.전송이 완료되면 제품 출력 밸브를 닫습니다. 방사성 추적자가 제품 유리병에 도착하면 절대 방사성 수율을 측정합니다. 그런 다음 납 차폐 주사기를 사용하여 트레이서의 100 마이크로리터를 작은 유리병으로 전송하여 품질 관리를 합니다.품질 관리 샘플을 차폐 된 품질 관리 작업 영역으로 가져옵니다. QC 샘플의 40 마이크로리터를 가스가 단단한 주사기에 넣고 분석 컬럼이 장착된 준비된 HPLC 기기에 적재하고 제품을 주입합니다. HPLC 실행 중에 다른 품질 관리 측정을 수행합니다.HPLC 실행이 완료되면 SNAP 무선 화학 순도가 95% 이상인지 여부를 결정하기 위해 방사능 검출기로부터 크로마토그램의 모든 피크를 통합하여 제품의 화학순도를 결정합니다. UV 제품 피크 아래 영역을 사용하여 특정 활동을 계산합니다. 제품이 사용 요건을 충족하는 것으로 확인되면 무선 트레이서를 실시간 운동 실험 실험실로 방출한다.실험 전에 적어도 30분 전에 준비된 야생 형 또는 DPBS로 감염된 세포를 세척하고 혈청없는 성장 배지의 2 밀리리터를 추가합니다. 전염된 세포를 차단하기 위해 디메틸 설프리산화물의 racemic verapamil 염산염의 20.4 밀리머 용액의 0.98 마이크로리터를 첨가한다. 경사 평면에서 30분 동안 셀을 배양합니다.그런 다음 실시간 분석 기기와 관련 컴퓨터를 켭니다. 제어 소프트웨어를 열고 하나의 대상을 선택합니다. 위치 수를 2초로 설정하고, 감지 시간을 3초로, 감지 지연 시간을 2초로 설정하고, 첫 번째 단계의 이름을 기준선으로 설정합니다.세포 배양 접시를 하단에 세포극을 가진 장치의 기울어진 지지대에 삽입합니다. 세포극이 세포 배양 배지로 덮여 있는지 확인합니다. 10분 배경 측정을 시작하고 파일 이름과 경로를 설정합니다.시간 규모를 분으로 설정하고 핵종 수집을 탄소-11로 설정합니다. 배경을 표시하도록 그래프를 구성, 대상 및 배경 빼기 대상 데이터. 무선 추적자가 배달되고 사용을 위해 승인되면 분석에 대한 작은 샘플을 가져 가라.필요한 무선 트레이서 솔루션 볼륨을 계산하고 파이펫을 준비합니다. 악기 소프트웨어에서 실행을 일시 중지하고 접시 회전이 중지 될 때까지 기다립니다. 장치의 뚜껑을 열고 지지도를 왼쪽으로 90도 돌리고 준비된 파이펫으로 무선 추적기를 추가하고 장치를 초기 위치로 반환합니다.장치의 뚜껑을 닫고 즉시 실험을 다시 시작합니다. 실험을 종료하기 전에 20 분 동안 실행하십시오. 데이터를 처리하고 분석하여 셀의 SNAP 섭취량을 평가합니다.이제 시술은 DMSO 처리 된 대조군 세포 배양 접시 및 야생 형 세포주에 대해 반복 될 수 있습니다. 실시간 운동 분석술은 야생형 세포를 발현하는 비PGP, PGP 발현 세포를 PGP 억제제로서 베라파밀로 미리 차단하고, 차단되지 않은 PGP 세포를 통해 수행하였다. 비처리 된 세포와 차량 처리 세포 사이에는 유의한 차이가 관찰되지 않았습니다.탄소-11 SNAP는 PGP 발현 세포에서 축적이 관찰되지 않은 상태에서 야생 형 세포에서 급속히 축적되었다. verapamil을 가진 PGP efflux 수송기를 사전 차단하는 것은 야생 형 세포의 것과 비교되는 PGP 세포에 있는 SNAP 축적 귀착되었습니다. 실시간 운동 측정과 함께 이 설정은 저분자 화합물의 약동학에 대한 폭넓은 이해를 가능하게 하며, 따라서 방사성 의약품의 전임상 개발에 매우 중요합니다.타이밍과 조직은 탄소-11의 반감기가 불과 20분이기 때문에 후속 실시간 운동 실험을 통해 성공적인 탄소-11 방사성 합성의 주요 성분입니다. 탄소 -11의 짧은 반감기로 인해이 절차의 많은 부분이 동시에 수행됩니다. 관련된 모든 사람이 자신의 역할의 범위와 시기를 이해하는 것이 중요합니다.제품 안전과 방사선 보호는 방사성 의약품의 제조를 위한 핵심입니다. 모든 실험은 작업자의 방사선 노출을 제한하기 위해 합리적으로 달성 가능한 또는 ALARA 원칙만큼 낮게 따라야 합니다.

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Chemistry

화학

Ugi 반응 빠르게 화합물의 다양한 라이브러리를 만들 수있는 편리한 방법으로 증명했다. 그것은 아민의 반응, 알데히드, 카르복실산 및 실온에서 메탄올에서 일반적으로 isonitrile을 포함한다. 이 비디오에서는, 우리는 여과 튜브와 메틀러 - 톨레도 MiniMapper 자동 액체 처리기는 시약 및 용매를 제공하기 위해 사용되었습니다 갖춘 48 슬롯 메틀러 - 톨레도 MiniBlock를 활용. 관심의 매개 변수는 농도, 용매 조성과 시약의 일부 초과되었습니다.

병렬 합성 및 자동 액체 처리를 사용하여 Ugi 반응의 최적화

광안정 시아닌 염료는 올리고뉴클레오티드에 부착되어 에너지 전달에 의한 혼성화를 모니터링합니다.

광 안정성 시아닌 염료를 사용하여 파장 변환 DNA 혼성화 프로브의 합성

우리는 [ 18 F] 3F4AP의 반자동 방사 화학 합성과 품질 관리 절차를 입증합니다.

자동 방사 화학 합성 [<sup&gt; 18</sup&gt; F] 3F4AP : 결절성 탈수 초성 질환 이미지 진단용 PET 트레이서

1, 2-dithiolane의 합성에 대 한 프로토콜 펩 티 드와 펩 티 드에서 자기 조립 결과 supramolecular 구조의 특성 수정.

합성 및 특성 1, 2-Dithiolane의 수정 자가 조립 펩 티 드

양전자 방출 단층 촬영 (PET) 이미징 사이트 여러 초기 임상 연구 실험에 관련 된 강력 하 고 다재 다능 한 radiotracer 제조 능력을 필요 합니다. Radiotracer [18F]를 사용 하 여 Clofarabine 예를 들어, 우리 자동화 radiotracer 유연한, 카세트 기반 radiosynthesizer를 사용 하 여 합성 하 고 합성 임상 사용에 대 한 유효성을 검사 하는 방법을 보여 줍니다.

양전자 방출 단층 촬영 (PET) Radiotracer 합성 프로토콜의 임상 생산을 위한 자동화

당사는 고체 상 추출 카트리지를 사용하여 양전자 방출 단층 촬영(PET)에 대한 임상적으로 관련된 추적기를 생산하기 위해 효율적인 탄소 11 방사성 라벨링 기술을 보고합니다. 11세 C-메틸화제는 전구체와 연속용출로 미리 로드된 카트리지를 통과하여 높은 방사성 화학적 수율에서 화학적 및 방사성 화학적으로 순수한 PET 트레이서를 제공합니다.

PET 트레이서 생산을 위한 고체 상 11C-메틸화, 정제 및 제형

여기에서는 이전에 합성 된 스피로 사이클릭 옥심을 테스트하기 위해 3- (4', 5'- 디메틸 티아 졸 -2'- 일) -2,5- 디 페닐 테트라 졸륨 브로마이드 (MTT)를 사용하는 생물학적 분석에 대해 설명합니다.

기능화된 스피로사이클릭 헤테로사이클 합성 및 세포독성 분석

이 방법은 시약의 나노몰 양을 사용하여 방사성 의약품의 신속하고 경제적 최적화를 위해 액적 화학 반응을 기반으로 하는 새로운 고처리량 방법론의 사용을 설명합니다.

물방울 배열을 사용하여 방사성 화학 반응의 최적화

여기에서는 단백질 시스템에 적응할 수 있는 반응성 카르보닐 종으로 변형된 아미노산 잔기의 최적화 및 매개변수화를 위한 프로토콜에 대해 설명합니다. 프로토콜 단계에는 구조 설계 및 최적화, 전하 할당, 파라미터 구성 및 단백질 시스템 준비가 포함됩니다.

분자 역학 시뮬레이션을 사용하여 구조적 효과를 평가하기 위해 in silico에서 반응성 카르보닐로 변형된 아미노산 합성 

이 프로토콜은 "루프 방법"[11C]메틸화를 통해 4개의 탄소-11 방사성 추적자를 준비하는 자세한 절차를 제시합니다. [11C]ER-176을 3개의 추가 방사성 추적자([11C]MRB, [11C]mHED 및 [11C]PiB)에 대한 데이터와 함께 합성하는 절차를 설명합니다. 루프 방법은 전통적인 반응 용기 [11C] 메틸화에 대한 증가된 방사성 화학적 수율로 효율적인 합성을 제공합니다.

Enhancing Efficiency and Radiolabeling Yields of Carbon-11 Radioligands for clinical research with the loop method(루프 방법을 사용한 임상 연구를 위한 탄소-11 방사성 리간드의 효율성 및 방사성 표지 수율 향상)

이 연구는 섬유아세포 활성화 단백질의 PET 이미징을 위해 GAIA V2 신디사이저를 사용한 [68Ga]Ga-3BP-3940 생산을 위한 자동화 프로세스를 설명합니다. 3개의 테스트 배치에 대해 수행된 품질 관리 테스트의 결과도 제공됩니다.

종양 미세환경의 PET 이미징을 위한 합성 모듈에서 [68Ga]Ga-3BP-3940의 자동 제조

배우세요 [11C]SNAP-7941의 자동 방사성 표지 합성법과 실시간 PET 역학 평가 기술을. 이 방법은 P-gp 발현 세포에서 수용체 결합 동역학을 정밀 분석하여 대사 질환 연구에 활용됩니다.

[11C]SNAP-7941의 자동 합성및 실시간 역학 평가의 기술적 측면

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