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Cancer Research
뮤린 조혈 줄기 및 선조 세포 및 MLL-AF9 구동 백혈병에서 미토콘드리아 반응성 산소 종의 유동 세포 분석
뮤린 조혈 줄기 및 선조 세포 및 MLL-AF9 구동 백혈병에서 미토콘드리아 반응성 산소 종의 유동 세포 분석
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JoVE Journal Cancer Research
Flow Cytometric Analysis of Mitochondrial Reactive Oxygen Species in Murine Hematopoietic Stem and Progenitor Cells and MLL-AF9 Driven Leukemia

뮤린 조혈 줄기 및 선조 세포 및 MLL-AF9 구동 백혈병에서 미토콘드리아 반응성 산소 종의 유동 세포 분석

Full Text
7,885 Views
09:44 min
September 5, 2019

DOI: 10.3791/59593-v

Daniela Di Marcantonio1, Stephen M. Sykes1

1Blood Cell Development and Function Program,Fox Chase Cancer Center

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a method for detecting mitochondrial reactive oxygen species (ROS) in murine hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs) and leukemia cells. The focus is on understanding ROS's role in cellular function and survival, particularly in the context of acute myeloid leukemia (AML).

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Cell Biology
  • Oncology

Background

  • Reactive oxygen species (ROS) are produced by cells and influence their behavior.
  • Excess ROS can lead to cellular damage and death.
  • Maintaining ROS homeostasis is crucial for cellular function.
  • The study focuses on mitochondrial ROS generated in hematopoietic populations.

Purpose of Study

  • To measure mitochondrial ROS in healthy and leukemia cells.
  • To evaluate the impact of genetic manipulation on mitochondrial ROS levels.
  • To provide insights into the redox state and metabolism of cells.

Methods Used

  • Multiparameter flow cytometry for ROS detection.
  • Analysis of murine healthy HSPCs and leukemia cells.
  • Evaluation of genetic manipulation effects on ROS.
  • Use of a mouse model of acute myeloid leukemia (AML).

Main Results

  • Successful detection of mitochondrial ROS in both healthy and leukemia cells.
  • Insights into the effects of genetic changes on ROS levels.
  • Understanding of ROS's role in cellular metabolism.
  • Potential implications for therapeutic strategies in AML.

Conclusions

  • The method provides a reliable way to study mitochondrial ROS.
  • Findings may inform future research on cellular metabolism in leukemia.
  • Understanding ROS dynamics can lead to better therapeutic approaches.

Frequently Asked Questions

What are reactive oxygen species (ROS)?
ROS are highly reactive molecules that can influence cellular behavior and function.
Why is ROS homeostasis important?
Maintaining ROS levels is crucial for cellular function and survival, as excess ROS can cause damage.
How does this study relate to acute myeloid leukemia (AML)?
The study investigates mitochondrial ROS in leukemia cells from a mouse model of AML.
What methods are used to detect ROS?
Multiparameter flow cytometry is utilized to measure mitochondrial ROS levels.
Can genetic manipulation affect ROS levels?
Yes, the study evaluates how gene deletion or overexpression impacts mitochondrial ROS.
What are the potential implications of this research?
The findings may provide insights into cellular metabolism and therapeutic strategies for leukemia.

우리는 급성 골수성 백혈병 (AML)의 마우스 모델에서 뮤린 건강한 조혈 줄기 및 전구 세포 (HSPC) 및 백혈병 세포에서 미토콘드리아 반응성 산소 종 (ROS)을 검출하기 위해 다매개 변수 흐름 세포측정법을 사용하는 방법을 설명합니다. MLL-AF9.

반응성 산소 종 또는 ROS는 세포에 의해 생성되는 매우 반응성 산소 종이며, 그들의 행동에 영향을 미칩니다. 과잉 ROS는 또한 광범위 한 세포 혼란을 일으킬 수 있습니다 하지만, 그리고 심한 경우에, 세포 죽음. 따라서, ROS 항상성의 유지는 세포 기능 및 생존에 근본적으로 중요합니다.

여기에 제시된 프로토콜은, 미토콘드리아에 의해 생성되는 특정 유형의 ROS를 측정하는 데 초점을 맞추고 있으며, 주로 살아있는, 정상 또는 건강한 조혈 줄기 및 전구 세포 집단뿐만 아니라 혈액암, 급성 골수성 백혈병 또는 AML의 마우스 모델에서 백혈병 세포에서 대사 부산물로 서 발생합니다. 이 프로토콜은 또한 유전자 삭제 또는 과발현과 같은 유전 조작이 몇몇 건강하고 악성 조혈 인구에 있는 미토콘드리아 ROS에 어떻게 영향을 미치는지 평가하기 위하여 이용될 수 있습니다. 그리고 결과적으로, 잠재적으로 레두 상태 와 아마도 세포의 물질 대사에 대 한 통찰력 있는 정보를 제공.

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