Name: 제브라피쉬 정자세포에서 메오틱 염색체 스프레드 의 준비 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-03-03T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 46 s
Description: 학습하세요 제브라피쉬 정자세포에서 감수분열 염색체 스프레드 준비 방법을. 초고해상도 현미경으로 염색체 구조를 시각화하고, 감수분열 과정을 연구하는 데 활용할 수 있습니다.

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우리는 제브라피쉬 meiocytes에서 염색체를 확산하고 염색하는 방법을 최적화하는 데 도움 원고와 응우옌에 대한 의견에 대한 트렌트 뉴먼과 마스다 샤리피 에게 감사드립니다. 이 작품은 NIH R01 GM079115에 의해 지원되었다 S.M.B에 수여.

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</ol>

저자는 공개 할 것이 없다.

여기에서 우리는 제브라피시 고환에서 분리된 정자 세포에서 핵 표면에 있는 텔로미어 및 염색체 관련 단백질의 위치를 탐구하는 방법을 기술합니다. 우리는 이 방법이 고환의 크기에 조정을 가진 그밖 teleost 종에 있는 정액 세포의 분석을 위해 적용될 것이라는 점을 기대합니다.
소수의 항체만이 제브라피쉬 메오틱 단백질로 제기되었지만, 우리는 인간(h) 또는 마우스(m) 단백질로 기르는 다음 항체를 사용하여 성공을 거두었습니다. 우리 실험실은 시냅톤 복합체 (SC)에 대한 신뢰할 수있는 마커역할을한 닭의 제브라피쉬 Sycp1 단백질 (zfSycp1)에 대한 항체를 제기했지만,이 단백질은 염색체가 완전히 시냅스 될 때 초기 zygotene에서 늦은 파키틴까지만 존재합니다. 토끼 항-hSYCP3 항체는 렙토틴으로부터 후기 파키텐에서 SC의 용해까지 메오틱 염색체 축을 검출하는 데 매우 신뢰할 수있다(도 1B,C).</s...

성적인 재생산은 두 개의 haploid gametes의 조합을 통해 진행, 각각 체세포세포의 염색체 보완의 절반을 들고. Meiosis는 DNA 복제의 1 개의 라운드 및 염색체 분리의 2개의 연속적인 라운드를 통해 haploid gametes를 생성하는 전문화한 세포 분열입니다. prophase I에서 상동 염색체 (homologs)는 페어링, 재조합 및 시냅시스를 거쳐야하며, 후자는 횡 필라멘트에 의해 브리지 된 두 개의 상동 축을 포함하는 시냅톤 복합체의 형성을 특징으로하는 Sycp1(그림 1A,B). 이러한 프로세스를 제대로 실행하지 못하면 인간1의유산의 주요 원인인 이수성 게임의 생산으로 이어질 수 있습니다. 페어링, 재조합 및 시냅시스 사이의 조정에 대한 우리의 지식은 효모, C. 예쁜꼬마선충,마우스 및 초파리와같은 광범위한 유기체에 대한 연구에 의해 촉진되었습니다2. 상동 염색체 쌍과 분리의 일반적인 과정은 잘 보존되는 동안, 재결합 및 시냅증에 대한 의존성과 이러한 이벤트의 순서는 다양합니다.
상동 재조합을 개시하는 Meiotic 이중 가닥 휴식 (DSB) 형성은 렙토텐 동안 꽃다발에 클러스터된 텔로미어 근처에서 발생하며 시냅스는3,4직후에 계속됩니다. 이러한 DSB 형성 및 시냅스 개시의 구성은 또한 마우스5,6,7,8에서남성 남성 남성 만기증의 특징이며, 제브라피쉬가 인간 정자 발생을 위한 모델로 작용할 수 있음을 시사한다. 또한 제브라피시 인자해를 연구하는 몇 가지 실용적인 이점이 있습니다. 남성과 여성 모두 성인기 동안 gametogenesis을 겪고, 그들의 생식선쉽게 접근 할 수 있으며, 자손의 수백은 하나의 십자가에서 생성됩니다. 부가적으로, 배아는 투명하고 외부적으로 개발되며, 이는 이수엽 게임테스3,9로인한 배아 발달에서 수차의 조기 발견을 용이하게 한다. 제브라피시를 사용하는 단점은 성숙도(~60일)에 도달하는 속도가 느리며 핵 표면 확산에 필요한 물질의 양은 크기에 따라 ~10-20마리의 성인 동물로부터 수집되어야 한다는 것입니다.
meiotic 염색체 퍼짐 준비는 meiotic 염색체 역학의 중요한 서명이 조사될 수 있기 때문에, 모든 모형 유기체에 걸쳐 염색체 역학을 공부하기 위한 중요한 공구입니다. 제브라피시에서, 메오피시 프로그램 및 핵 조직의 진행의 주요 측면은 핵 표면 스프레드를 조사하여 해부되었으며, 여기서 는 염색체 스프레드로 지칭되며, FISH3,4,9,10,11,12에의한 단백질 및/또는 핵산의 면역형광 검출을 위한 항체와 함께 있다. 실제로, 꽃다발내의 군집된 텔로미어의 편광 국소화는 스프레드 제제에서 보존될 수있다(도 1C). 최근에는 형광 검출 방법 및 초고해상도 현미경 검사법과 함께 제브라피쉬 정자 염색체 스프레드를 사용하여 제브라피쉬 텔로미어 역학, 상동성 염색체 페어링, 이중 가닥 파손 국소화 및 시냅스의 상세한 진행을 해명하여 주요 meiotic 전환에서3. 여기에서 우리는 제브라피쉬 고환의 정자 세포에서 염색체 스프레드를 준비하고 그 후에 염색체 관련 단백질의 반복된 텔로미어 서열 및 면역 형광 검출에 형광 펩티드 핵산 (PNA) 탐사기로 그(것)들을 얼룩하는 방법을 제시합니다.

<table><tbody><tr><td>1.5 mL 원심분리기 튜브</td><td>여러 상용 브랜드 사용</td><td></td><td></td></tr> 가능 <tr><td>1.5 mL 마이크로 원심분리기 튜브 랙</td><td>여러 상용 브랜드 사용</td><td></td><td></td></tr> 가능 <tr><td>16% 포름알데히드, 메탄올 무함유</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>28908</td><td></td></tr><tr><td>2 mL</td><td>여러 상용 브랜드 사용 가능</td><td></td><td></td></tr><tr><td>24 x 50 mm 유리 커버슬립</td><td>코닝</td><td>2980-245</td><td></td></tr><tr><td>24 x 60 mm 유리 커버 슬립</td><td>VWR International</td><td>16004-312</td><td></td></tr><tr><td>50 mL 원추형 원심 분리기 튜브</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>363696</td><td></td></tr><tr><td>오토 클레이브 백</td><td>여러 상업 브랜드 사용 가능</td><td></td><td>플라스틱 커버 슬립을 만드는 데 사용됩니다.</td></tr><tr><td>소 혈청 알부민(BSA)</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP1605-100</td><td>멸균 증류수에 100mg/ml 원액을 준비합니다.</td></tr><tr><td>세포 여과기, 100 & 마이크로; m</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-771-19</td><td></td></tr><tr><td>CF405M 염소 안티 닭 IgY (H + L), 고 교차 흡착 된</td><td>Biotium</td><td>203775-500uL</td><td>1:1000에서 사용</td></tr><tr><td>Burgess lab에서 생성</td> 된<td>닭 anti-zfSycp1</td><td>N / A</td><td>1:100에서 사용</td></tr><tr><td>Clostridium histolyticum</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C0130-500MG</td><td></td></tr><tr><td>Coplin jar</td><td>여러 상업용 브랜드 사용 가능</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DNase I, grade II from bovine pancreas</td><td>Roche Diagnostics</td><td>10104159001</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM)</td><td>Fisher Scientific</td><td>MT10014CV</td><td></td></tr><tr><td>Dumont No. 5 Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11252-30</td><td>고환을 해부하려면 두 가지가 필요합니다.</td></tr><tr><td>Eppendorf Tubes, 5 mL</td><td>VWR International</td><td>89429-308</td><td></td></tr><tr><td>Formamide</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP228-100</td><td></td></tr><tr><td>Goat anti-chicken IgY (H+L) 2차 항체, Alexa Fluor 488</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A-11039</td><td>1:1000에 사용</td></tr><tr><td>염소 anti-chicken IgY (H+L) 2차 항체, Alexa Fluor 594</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A-11042</td><td>1:1000에 사용</td></tr><tr><td>Goat anti-hDMC1</td><td>Santa Cruz Biotechnology</td><td>sc-8973</td><td>Does not work in our hands 염소</td></tr><tr><td>anti-rabbit IgG (H+L) cross-adsorbed secondary antibody, Alexa Fluor 488</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A-11008</td><td>Use at 1:1000</td></tr><tr><td>Goat anti-rabbit IgG (H+L) cross-adsorbed secondary antibody, Alexa Fluor 594</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A-11012</td><td>Use at 1:1000</td></tr><tr><td>Goat serum</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G9023-10mL</td><td></td></tr><tr><td>헤파린 나트륨 염</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H3393-100KU</td><td></td></tr><tr><td>습도 챔버</td><td>Fisher Scientific</td><td>50-112-3683</td><td></td></tr><tr><td>혼성화 오븐</td><td>VWR International</td><td>230401V (모델 5420)</td><td></td></tr><tr><td>인큐베이터 셰이커</td><td>뉴브런즈윅 과학</td><td>모델 클래식 C25</td><td></td></tr><tr><td>KCl</td><td>피셔 Scientific</td><td>P217-500</td><td></td></tr><tr><td>Kimwipes</td><td>Kimerbly-Clark Professional</td><td>34155</td><td>습도 챔버</td></tr><tr><td>KH2PO4</td><td>Fisher Scientific</td><td>P285-500</td><td></td></tr><tr><td>현미경</td><td>여러 상용 브랜드 사용 가능</td><td></td><td>최소 ~1.65X 배율이 가능한 모든 표준 현미경으로 충분합니다.</td></tr><tr><td>현미경 슬라이드</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-544-7</td><td></td></tr><tr><td>마우스 안티 햄스터SCP3</td><td>Abcam</td><td>ab97672</td><td>우리 손에서 작동하지 않음</td></tr><tr><td>마우스 anti-hMLH1</td><td>BD Biosciences</td><td>550838</td><td>우리 손에서 작동하지 않음</td></tr><tr><td>마우스 anti-hRPA</td><td>Sigma-Alrich</td><td>MABE285</td><td>우리 손</td></tr><tr><td>에서 작동하지 않습니다Na2HPO4 &middot; 7 H2O</td><td>Fisher Scientific</td><td>S373-500</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Fisher Scientific</td><td>S271-3</td><td></td></tr><tr><td>Photo-Flo 200 용액</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>74257</td><td></td></tr><tr><td>플라스틱 전사 피펫</td><td>여러 상용 브랜드 사용 가능</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PNA TelC-Alexa647</td><td>PNA Bio Inc</td><td>F1013</td><td>제조업체에 따라 준비 s 지침.</td></tr><tr><td>PNA TelC-Cy3</td>, <td>PNA Bio Inc</td><td>F1002</td><td>제조업체의 지침에 따라 준비하십시오.</td></tr><tr><td>ProLong 다이아몬드 안티페이드 마운트런</td>트 <td>ThermoFisher Scientific</td><td>P36970</td><td></td></tr><tr><td>DAPI가 포함된 ProLong 다이아몬드 안티페이드 마운트런</td>트 <td>ThermoFisher Scientific</td><td>P36971</td><td></td></tr><tr><td>토끼 안티-hRPA</td><td>베틸</td><td>A300-244A</td><td>1:300에 사용</td></tr><tr><td>토끼 안티-hSCP3</td><td>Abcam</td><td>ab150292</td><td>1:200에 사용</td></tr><tr><td>토끼 안티-hRad51</td><td>GeneTex</td><td>GTX100469</td><td>1:300에 사용</td></tr><tr><td>소듐 시트레이트</td><td>Fisher Scientific</td><td>S279-500</td><td></td></tr><tr><td>설탕</td><td>Fisher Scientific</td><td>S5-500</td><td></td></tr><tr><td>슈퍼컷 가위, 30도; 각도, 10 cm</td><td>Fisher Scientific</td><td>50-822-353</td><td>어떤 작은 가위도 사용할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>Sylgard 키트</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9897184</td><td>제조업체의 지침에 따라 준비합니다.</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP151-100</td><td>멸균 증류수에 희석하여 20% 작동 용액을 만듭니다. 실온에서 보관하십시오. 트리톤 X-100은 물에 희석될 때 침전물을 형성합니다. 침전물은 하룻밤 사이에 용해됩니다.</td></tr><tr><td>Trypsin</td><td>Worthington Biochemical</td><td>LS003708</td><td></td></tr> 닭 <tr><td>달걀 흰자위의 트립신 억제제</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T9253-500MG</td><td></td></tr><tr><td>Tween 20</td><td>Bio-Rad</td><td>170-6531</td><td>멸균 증류수에 희석하여 20% 작동 용액을 만듭니다. 실온에서 보관하십시오.</td></tr><tr><td>Vannas 스프링 가위 - 4mm(마이크로 가위)</td><td>Fine Science Tools</td><td>15018-10</td><td></td></tr></tbody></table>

제브라피쉬 정자세포에서 메오틱 염색체 스프레드 의 준비

Preparation of Meiotic Chromosome Spreads from Zebrafish Spermatocytes

Meiosis는 성적인 재생산을 위한 haploid gametes를 만드는 데 필요한 중요한 셀룰러 프로세스입니다. 모형 유기체는 적당한 염색체 분리를 지키는 페어링, 시냅스 및 재조합 사건을 포함하여 meiotic prophase 도중 일어나는 염색체 사건을 이해하는 중요한 역할을 했습니다. 마우스가 이 프로세스의 근본적인 분자 기계장치를 이해하기 위한 중요한 모형이 되는 동안, 이 시스템의 모든 meiotic 사건은 인간 적인 사람 막이오시스와 유사하지 않습니다. 우리는 최근에 인간 정자 발생의 모형으로 zebrafish의 흥미진진한 잠재력을 설명했습니다. 여기에서 우리는 염색체 퍼짐 준비에 있는 meiotic 염색체 그리고 관련있는 단백질을 구상하는 우리의 방법을, 상세히 기술합니다. 이러한 제제는 염색체 구조의 고분해능 분석을 허용하는 장점이 있다. 첫째, 우리는 성인 얼룩말에서 고환을 해부하는 절차를 설명하고, 그 다음에 세포 해리, 용해 및 염색체의 확산을 설명합니다. 다음으로, 우리는 마이오성 색소 단백질의 국소화, 면역 형광 검출 및 핵산 서열, 사이투 혼성화 (FISH)의 형광에 의해 국소화를 검출하는 절차를 설명합니다. 이러한 기술은 제브라피시 시스템에서 메오틱 크로마틴 아키텍처의 세포학적 분석을 위한 유용한 도구 세트를 포함한다. zebrafish 지역 사회에 있는 연구원은 이 기술을 빨리 마스터하고 생식 기능의 그들의 표준 분석에 통합할 수 있어야 합니다.

우리는 제브라피쉬 정자 세포 확산 제제를 준비하고 시각화하는 방법을 설명했습니다. 올바르게 수행하면, 우리의 절차는 잘 확산, 비 겹치는 핵을 산출한다. 이러한 핵을 회복하려면, 트립신에서 충분한 시간 동안 고환을 치료하고 적절한 수의 DNase I 처리를 개시 물질(즉, 고환)의 적절한 양을 가지는 것이 중요하다. 이러한 스프레드는 프로페이즈 I. 도 1 동안 메오틱 진행을 연구하기 위해 텔로미어 및 meiotic 단백질에 대해 염색될 수 있습니다. 
<img alt="시냅톤 복합 다이어그램, 감수 분열 세포에서 Sycp3, Sycp1 단백질의 형광 현미경." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60671/60671fig1...

핵 표면 퍼짐은 만피증 도중 염색체 사건을 공부하기 위한 필수적인 공구입니다. 여기서 우리는 제브라피쉬 정자세포로부터 의한 1단계 진행 중에 메오성 염색체를 준비하고 시각화하는 방법을 시연한다.

Meiosis is the key cellular process required to create haploid gametes for sexual reproduction. Model organisms have been instrumental in understanding ...

Zebrafish는 동종 염색체 페어링, 시냅시스 및 재결합을 포함한 메이오증의 염색체 이벤트를 연구하기위한 우수한 척추 동물 모델로 부상하고 있습니다. 이 핵 표면 확산 프로토콜은 우리가 슈퍼 해상도 현미경 을 사용하여 메이오틱 염색체 아키텍처의 주요 기능을 시각화 할 수있게했습니다. 연구원은 다른 제브라피시 퍼짐 프로토콜보다는 적은 파편으로 슬라이드 당 잘 퍼진 핵의 수백을 기대할 수 있습니다.이 절차의 가장 기술적으로 도전적인 부분은 피부에 근접하고 또한 다른 장기에 부착되기 때문에 제브라피시 고환의 해부입니다. 해부 절차를 시각화하면 연구원들이 동물의 조직에 내장 된 gonad를 볼 때 무엇을 기대해야하는지 알 수 있습니다. 수컷 얼룩말물고기를 안락사한 후, 작은 가위로 한 번에 한 마리의 물고기를 참수한 다음 마이크로 가위를 사용하여 복부 중간선을 따라 절단하여 신체 구멍을 노출시합니다.실리콘 코팅 페트리 접시에 생선을 놓고 1X PBS의 얕은 풀로 덮습니다. 1.65X 배율의 현미경하에서 집게를 사용하여 고환을 해부합니다. 가능한 한 고환에서 지방과 주변 조직을 제거합니다.gonad는 해부 범위 빛 아래 반투명 으로 표시되며 주변 지방은 약간 어두운 모양을 가질 수 있습니다. 지방의 일부 금액은 절차를 방해하지 않고 gonad에 남아있을 수 있습니다. 해부된 각 고환을 DMEM 2밀리리터가 있는 5밀리리터 튜브에 직접 넣고 얼음을 유지합니다.고환 세포를 해리하려면 고환이 있는 5개의 밀리리터 튜브에 콜라게나제 용액 200마이크로리터를 추가합니다. 용액을 여러 번 반전시켜 혼합합니다. 섭씨 32도에서 100 RPM에서 인큐베이터 셰이커에서 고환을 수평으로 흔들어 부드럽게 흔들어 줍니다.10분마다 튜브를 빠르게 반전하여 해리를 용이하게 합니다. 한 시간 후, DMEM은 흐리고 고환은 작은 덩어리에 있습니다. 고환은 콜라게나아제에서 배양되는 동안, 섭씨 37도에 0.1 어금니 자당 용액의 100 마이크로리터를 미리 떼어.콜라게나아제를 씻어내려면 DMEM을 5밀리리터의 최종 볼륨에 추가하고 튜브를 몇 번 반전시면 됩니다. 실온에서 3 분 동안 200g에서 고환을 펠렛. 2 밀리리터만 남을 수 있도록 상퍼의 밀리리터 3밀리리터를 제거합니다.DMEM 세척을 두 번 더 반복합니다. 마지막 DMEM 세척 후, 슈퍼 나티미터의 4 밀리리터를 제거하고 DMEM의 1 밀리리터, 트립신 용액 200 마이크로 리터, DNa

preparation-of-meiotic-chromosome-spreads-from-zebrafish-spermatocytes

Research

연구

JoVE Journal

Genetics

유전학

이것은 바로 자외선 - inactivated 정자와 수정 후 두 번째 meiotic 부서 차단하여 gynogenetic의 diploid의 zebrafish의 배아 (단 유전적 기여 어머니의 유래 배아)를 생성하는 방법입니다. EP의 배아는 첫 번째 meiotic 부문 중 재조합에 의해 완전히 homozygous하지 않습니다, 그러나 그들은 재조합하여 centromere에서 분리되지 않은 모든 loci에 homozygous 있습니다.

초기 압력에 의해 Gynogenetic의 Diploid의 Zebrafish 만들기

프로토콜은 단일 및 고 복제 DNA 프로브의 FISH 검출에 적합한 빠른 공기 건조 낙하 방법으로 고품질 유사 분열 식물 염색체 확산을 준비하기위한 것으로 설명됩니다.

식물에서 물고기에 적합한 빠른 공기 건조 떨어 뜨리 염색체 제조 방법

유사분열은 모든 살아있는 유기체에 매우 중요하며 결함은 종종 암과 발달 장애로 이어집니다. 이 이미징 프로토콜과 제브라피시를 모델 시스템으로 사용하여 연구원들은 살아있는 척추 동물 유기체의 유사 분열과 유사 분열 과정에 결함이 있을 때 발생하는 수많은 결함을 시각화할 수 있습니다.

라이브 Zebrafish의 배아에서 유사 분열 부문 및 역학을 관찰

배수성 조작 수정 된 프로토콜은 초기 배아 세포질 분열에 한 사이클 실속을 유도하는 열 쇼크를 사용한다. 이 프로토콜은 제브라에서 설명되지만, 다른 종에도 적용 할 수있다.

열 충격이 치료와 제브라 피쉬 배아의 배수성 조작

감수 분열은 gametes DNA 복제의 단일 라운드와 염색체 분리의 두 연속 라운드를 통해 형성 되는 발달 과정입니다. 포유류 감수 분열 meiotic 염색체 스프레드를 준비 하는 기법을 이용 하 여 시험 될 수 있다. 여기, 마우스 spermatocytes에서 표면 확산 핵을 준비 하는 방법을 설명 합니다.

Meiotic 염색체의 준비에서 마우스 Spermatocytes 확산

이 연구의 주요 목적은 바늘에 맞게 vitrification (NIV) 절차 전체 zebrafish testes cryopreserve에 몰입 했다. 또한, 5 개의 다른 zebrafish 긴장에서 방법의 반복성 시험 되었다.

Zebrafish Spermatogonia 전체 Testes 바늘의 cryopreservation 몰입 울트라-빠른 냉각

포유류에서 oogenesis 오류가, 특히 염색체 missegregation 인 것으로 알려져 있다. 이 원고 chromatin 확산 마우스 의향에 대 한 준비 방법에 설명 합니다 분열 I 및 II 준비 oocytes. 이러한 기본 기술을 chromatin-바인딩 단백질 및 포유류 oogenesis 전체 염색체 형태학 연구에 대 한 수 있습니다.

Chromatin 확산 마우스 Oocyte 진행 의향에서 분열 II의 분석에 대 한 준비

여기서 우리는 성인 마우스 고환에서 살아있는 메이오틱 및 후 메이오성 세균 세포를 격리하는 간단하고 효율적인 방법을 제시합니다. 낮은 세포 독성, 보라색 흥분 DNA 결합 염료 및 형광 활성화 세포 분류를 사용 하 여, 하나는 많은 다운 스트림 응용 프로그램에 대 한 고도로 농축 된 정자 세포 인구를 격리할 수 있습니다.

보라색 흥분 세포 투과성 DNA 결합 염료를 사용하여 뮤린 정자 세포의 격리

여기서는 제브라피시 난소 여포에 여포 세포와 난소 세포를 분리하는 간단한 방법을 제시하여 제브라피시의 난소 발달에 대한 조사를 용이하게 합니다.

얼룩말 피시의 난소 여포에서 여포 세포와 난소 세포의 분리

CRISPR-Cas 기술은 게놈 편집 분야에 혁명을 일으켰습니다. 그러나 원하는 생식계열 편집을 찾고 분리하는 것은 여전히 주요 병목 현상으로 남아 있습니다. 따라서 이 프로토콜은 표준 PCR, 제한 분해 및 겔 전기영동 기술을 사용하여 생식계열 편집을 위해 F0 CRISPR 주입 제브라피쉬 정자를 신속하게 스크리닝하는 강력한 방법을 설명합니다.

제브라피쉬에서 생식계열 편집의 신속한 분리를 위한 정자 스크리닝

시냅스와 재조합의 감수분열 오류는 포유류 난모세포에 일반적입니다. 이러한 과정에 관여하는 단백질에 대한 엄격한 분석은 난자형성이 어떻게 그리고 왜 잘못되는지를 이해하는 데 필수적입니다. 여기에 제시된 기술을 통해 재조합 및 시냅스를 종합적으로 모니터링하여 마우스의 난모세포 품질을 평가할 수 있습니다.

시냅스와 재조합 평가를 위한 마우스 난모세포에서 퍼진 감수분열 염색체 준비(Preparation of Meiotic Chromosome Spreads from Mouse Oocytes for Assessment of Synapse and Recombination)

학습하세요 제브라피쉬 정자세포에서 감수분열 염색체 스프레드 준비 방법을. 초고해상도 현미경으로 염색체 구조를 시각화하고, 감수분열 과정을 연구하는 데 활용할 수 있습니다.

제브라피쉬 정자세포에서 메오틱 염색체 스프레드 의 준비

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