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진동절단 심근슬라이스에서 인간 심실 심근세포의 분리
진동절단 심근슬라이스에서 인간 심실 심근세포의 분리
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JoVE Journal Biology
Isolation of Human Ventricular Cardiomyocytes from Vibratome-Cut Myocardial Slices

진동절단 심근슬라이스에서 인간 심실 심근세포의 분리

Full Text
11,570 Views
11:19 min
May 10, 2020

DOI: 10.3791/61167-v

Dominik J. Fiegle1, Tilmann Volk1,2, Thomas Seidel1,2

1Institute of Cellular and Molecular Physiology,Friedrich-Alexander University Erlangen-Nürnberg, 2Muscle Research Center Erlangen (MURCE),Friedrich-Alexander-Universität Erlangen-Nürnberg

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This protocol outlines the isolation of human and animal ventricular cardiomyocytes from vibratome-cut myocardial slices. It enables high yields of calcium-tolerant cells, facilitating research into cardiac disease mechanisms.

Key Study Components

Area of Science

  • Cardiomyocyte isolation
  • Cardiac physiology
  • Electrophysiological analysis

Background

  • Isolation of cardiomyocytes is crucial for studying heart function.
  • Vibratome cutting allows for precise tissue slicing.
  • Calcium-tolerant cells are essential for accurate experimental results.
  • Research can be conducted on samples exposed to cold ischemia.

Purpose of Study

  • To provide a reliable method for cardiomyocyte isolation.
  • To enhance understanding of cardiac disease mechanisms.
  • To facilitate electrophysiological and biochemical analyses.

Methods Used

  • Preparation of cold cutting solution.
  • Use of vibratome for tissue slicing.
  • Isolation of myocytes from myocardial slices.
  • Analysis of isolated cells for research purposes.

Main Results

  • Up to 200 myocytes can be isolated per milligram of tissue.
  • Protocol applicable to samples after transportation.
  • High viability of isolated cells supports further analysis.
  • Method allows for study of cardiomyocytes from ischemic conditions.

Conclusions

  • The protocol provides a robust method for cardiomyocyte isolation.
  • It supports research into cardiac diseases and their mechanisms.
  • High yields of viable cells enhance experimental outcomes.

Frequently Asked Questions

What types of samples can be used for this protocol?
Both human and animal heart samples can be utilized.
How long can tissue samples be stored before processing?
Tissue samples can be exposed to cold ischemia for up to 36 hours.
What is the significance of calcium-tolerant cells?
Calcium-tolerant cells are crucial for accurate electrophysiological studies.
What equipment is necessary for this protocol?
A vibratome and a cooled tissue culture dish are required.
Can this method be applied to ischemic tissues?
Yes, the protocol is designed for tissues exposed to ischemia.
What are the potential risks when handling human tissue samples?
Human tissue samples are potentially infectious and should be handled with care.

제시는 진동기 절단 심근 조각에서 인간과 동물 심실 심근 세포의 격리를위한 프로토콜이다. 칼슘 내성 세포의 높은 수율 (최대 200 세포/mg) 조직의 소량에서 얻을 수 있습니다 (&50 mg). 프로토콜은 감기 허혈에 노출된 심근에 최대 36시간 동안 적용됩니다.

이 프로토콜은 운송 시간 후에도 인간과 동물의 심장 샘플과 함께 작동합니다. 밀리그램당 최대 200개의 근세포가 진동편 절단 조직 조각으로부터 분리될 수 있습니다. 심근세포의 전기생리학적, 구조적 및 생화학적 분석은 심장 질환의 메커니즘을 발견하고 더 잘 이해하는 데 도움이 됩니다.

100밀리미터 의 조직 배양 접시를 채운 후, 20 밀리리터의 냉삭한 용액을 사용하여 조직 샘플을 배양 접시에 놓습니다. 접시에 문화 접시를 섭씨 4도까지 식힙니다. 동물과 특히 인간에게서 살아있는 조직 견본이 잠재적으로 전염성이 있다는 것을 명심하십시오.

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