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从脂质绑定蛋白和过敏原中去除和替换内源性利根
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Removal and Replacement of Endogenous Ligands from Lipid-Bound Proteins and Allergens
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从脂质绑定蛋白和过敏原中去除和替换内源性利根
DOI:
10.3791/61780-v
•
09:09 min
•
February 24, 2021
•
Alexander C. Y. Foo
,
Peter M. Thompson
,
Geoffrey A. Mueller
1
Nuclear Magnetic Resonance Group
,
National Institute of Environmental Health Sciences
Chapters
00:04
Introduciton
01:13
Endogenous Lipid Removal
02:42
Reconstitution of Apo- and Cargo-loaded Bla g 1
05:07
Phospholipid Cargo Removal/Loading Confirmation
06:22
Results: Representative Bla g 1 Purification, Lipid Removal Verification, and Recovery
08:18
Conclusion
Summary
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该协议描述了从过敏原中去除内源性脂质,并通过逆相HPLC与热退化用用户指定的配体替换它们。
31
P-NMR 和圆形二分法允许快速确认配体去除/装载,并恢复原生过敏原结构。
Tags
Endogenous Ligands
Lipid-bound Proteins
Allergens
Reverse-phase HPLC
Thermal Annealing
Solubilization
Bla G 1
De-lipidation
Lyophilization
Protein Yield
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