Name: 길들여진 돼지 뇌의 추출 및 해부 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-04-25T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 16 s
Description: 배우세요 돼지 뇌 추출 및 해부 기법을 통해 신경해부학 연구를 수행하는 방법을. 정확한 도구 사용과 뇌 영역 분리법을 익혀 비교신경과학 연구에 활용할 수 있습니다.

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저자는 짐 노블라우치와 마틴 부스 호지스 농업, 소비자 및 환경 과학 정보 기술 및 통신 서비스 대학의 촬영, 녹음 및 오디오 및 비디오 편집에 대한 전문 지식을 인정하고 싶습니다.

어바나 샴페인 일리노이 대학의 기관 동물 관리 및 사용 위원회(IACUC)에 의해 동물 과목과 관련된 절차가 승인되었습니다.
참고 : 안락사 전에, 돼지는 텔라졸 : 케타민 : 자일라진의 조합과 근육 주사를 통해 마취되었다 (50.0 타일 타민 HCl 플러스 졸라제팜 H의 50.0 mg Cl은 케타민 HCl (100 g/L)의 2.50 mL및 자일라진 (100 g /L)의 2.50 mL로 재구성하고 0.06 mg / kg BW로 투여됩니다. 일단 마취되면, 돼지는 나트륨 pentobarbital의 심내 투여를 통해 안락사되었다 (390 mg / mL에서 투여 1 mL/ 5 kg BW). 뇌 해부에 대 한, 안락사의 방법은 조직의 원하는 분석 절차에 따라 선택 하는 것이 좋습니다. 안락사의 방법은 가능한 한 뇌에 작은 손상을 야기한다.
1. 돼지 뇌의 추출
<ol><li>인도적 안락사에 따라, 목의 목덜미 위에 절단하여 돼지를 참수, 첫 번째와 두 번째 척추 사이 (아틀라스와 축, 각각).</li>
	<li>스파이크를 포함하도록 수정된 고정된 벤치 바이스로 머리를 고정합니다. 진행 하기 전에 머리가 완전히 고정 되어 있는지 확인 합니다.<ol>
<li>메스를 사용하여 두개골의 중간선을 따라 처질절단을 하여 머리 뒤쪽으로 계속 자른다.</li>
		<li>머리 뒤쪽에서 두 번째(횡방향)를 잘라내십시오.</li>
		<li>주둥이의 후방 끝에 세 번째(횡방향)를 자르고 눈과 함께 합니다. 두개골에 쉽게 접근할 수 있도록 가능한 한 멀리 두개골에서 피부를 잘라냅니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>뼈 톱을 사용하여, 두 개의 전방 후방 컷중간으로 잘라, 두개골 곡률의 정점에 눈에서 확장. 톱을 미드라인쪽으로 베벨을 하고 두개골을 관통할 수 있을 만큼 깊이 잘라냅니다.<ol>
<li>수직 측면에 위의 프로세스를 반복하여 두개골에 직사각형 "창"을 만듭니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>고기 갈고리를 사용하여 두개골의 직사각형 부분을 벗겨내시다. 먼저 후크를 섹션의 모서리 중 하나에 넣고 위쪽으로 압력을 가하여 두개골 조각을 풀어줍니다. 실수로 뇌 조직을 관통하는 것을 방지하기 위해 두개골의 수준에 만 고기 후크를 배치하는 주의하십시오.</li>
	<li>뇌에 수막 층이 남아 있는 경우, 집게와 무딘 가위(또는 메스)를 사용하여 뇌로 절단하지 않고 층을 부드럽게 제거하십시오.</li>
	<li>메스를 사용하여 머리의 뒤쪽 부분에서 근육과 지방을 잘라 두개골의 후위 부분을 노출시하십시오.<ol>
<li>두개골 의 후방을 따라 두 개의 횡방향 컷을 확인합니다. 뇌 조직으로 잘라하지 않도록해야합니다.</li>
		<li>주전자에 단단한 손을 얹고 뒤로 압력을 가하여 두개골의 후방 부분을 당겨 소뇌를 노출시켜 머리를 고정하십시오.</li>
	</ol>
</li>
	<li>벤치 부사장에서 머리를 제거하고 수술 매트에 배치합니다.</li>
	<li>메스의 무딘 끝과 같은 긴 날씬한 도구를 사용하여 뇌를 제거하십시오. 머리를 반전하고 뇌의 표면을 손상시키지 않고 두개골 구멍에서 뇌를 동축부드러운 스쿱 모션을 사용합니다. 참고 : 뇌를 제거하기 위해 두개골 신경을 끊어야합니다. 부드럽게 그렇게하고 강제로 뇌를 당겨하려고하지 않습니다. 뇌가 두개골과 척추에서 제대로 완전히 분리되면 스스로 떨어질 것입니다.</li>
</ol>2. 돼지 뇌의 해부
참고: 해부 시 뇌 아틀라스 또는 섬유 해부가이드(14)를 시각적 표현으로 사용하는 것이 유용할 수 있습니다. 해부된 조직 샘플은 각 샘플을 제거할 때 프로젝트별 필요에 따라 제대로 저장되는지 확인하십시오(아래 자세히 설명됨). 또한,이 비디오의 목적을 위해, 표시된 모든 뇌 영역은 오른쪽 반구에서 해부되었다, 그러나 이것은 실험 목표에 따라 실험실마다 다를 수 있습니다.
<ol><li>뇌간 (주로 수질)을 제거하려면 소뇌에 관상 절단 된 코달을 만듭니다.</li>
	<li>소뇌를 제거하려면 피질에 관상 절단 후방을 만듭니다. 이 샘플에서 소뇌의 원하는 영역(예: vermis, flocculus 등)을 분리합니다. 이 샘플에 뇌 줄기의 어떤 부분을 포함 하지 않도록 해야 합니다.</li>
	<li>세로 균열을 따라 중간 처검 컷을 만들어 뇌의 두 반구를 분리합니다. 피질에 손상을 일으키는 것을 방지하기 위해 연속 동작으로이 절단을합니다.</li>
	<li>중뇌를 제거하려면 원하는 양의 조직을 우수하고 열등한 콜리큘리에 해부하십시오.</li>
	<li>해마를 제거하기 위해, 코퍼스 캘로섬의 후부에 메스의 무딘 끝을 놓고 부드럽게 해마를 굴려, 코퍼스 캘로섬의 후방 부분에서 시작하는 "J"모션을 사용하여; 전체 해마 뿔은 '콩 모양'입니다.</li>
	<li>striatum (caudate 핵은 주로 표시됩니다)는 해마에 코퍼스 캘로섬과 전방 바로 아래 회색과 흰색 물질 줄무늬 영역입니다. 메스를 베벨과 제거시 수축 된 조직을 드러내며이 부위를 제거하십시오.</li>
	<li>내측 전두엽 피질을 제거하려면 전두엽 자이루스에서 코퍼스 캘로섬으로 조직을 해부하여 해당 섹션의 가장 내측 부분을 제거합니다. 오른쪽 피질은 내측 전두엽 피질을 제거 한 후에도 남아 있어야합니다.</li>
	<li>시동을 제거하려면 뇌의 중증 표면의 중앙에 전구와 같은 구조를 제거하고 중뇌로 장밋빛으로 제거하십시오. 시상은 구형 모양을 가지고 있으며 주변 조직보다 약간 어둡게 보입니다.</li>
</ol>3. 해부 후
<ol><li>해부가 완료되면 후속 분석을 위해 조직 샘플을 적절하게 보존하십시오. 이 단계를 생략하면 20분 이내에 상당한 자동 분해와 저하가 발생합니다.</li>
	<li>구조 분석이 수행될 경우 해부 시에 각 뇌 영역을 그대로 두거나 보존 전에 균질성 조직 샘플을 만들기 위해 조직을 다진다. 뇌 조직을 위한 일반적인 견본 보존 방법은 교차 연결 에이전트를 사용하여 냉동 보존 및 화학 고정을 포함합니다(15).</li>
	<li>표준 실험실 연구제(예를 들어, 유전자 또는 단백질 발현)의 경우-80°C에서 장기 저장하기 전에 유전 물질을 안정화시키는 액체 질소 또는 용액에 몰입하여 편리하고 비용 효율적인 보존 방법을 제공합니다.</li>
	<li>조직 구조를 유지하는 것이 우선 순위인 경우, 전통적인 고정 방법(예: 알데히드 기반 고정제를 사용하여 단백질을 교차링크하는) 조직 해부 이전에 동물 또는 관심 기관의 관류없이 또는 관류로 뇌 조직을 보존하십시오.</li>
</ol>

<ol><li>Hughes, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Swine+in+cardiovascular+research%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Swine in cardiovascular research.</a> Laboratory Animal Science. 36 (4), 348-350 (1986).</li>
<li>Yen, J. Anatomy of the Digestive System and Nutritional Physiology. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aYen%2C+J+%22Biology+of+the+Domestic+Pig%22">Biology of the Domestic Pig</a>. , 31-63 (2001).</li>
<li>Pond, W. G. Of Pigs and People. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPond%2C+WG+%22Swine+Nutrition%22">Swine Nutrition</a>. , 3-24 (2001).</li>
<li>Odle, J., Lin, X., Jacobi, S. K., Kim, S. W., Stahl, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Suckling+Piglet+as+an+Agrimedical+Model+for+the+Study+of+Pediatric+Nutrition+and+Metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Animal+Biosciences%22%5BJournal%5D)">The Suckling Piglet as an Agrimedical Model for the Study of Pediatric Nutrition and Metabolism.</a> Annual Review of Animal Biosciences. 2 (1), 419-444 (2014).</li>
<li>Larsen, M. O., Rolin, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+G%C3%B6ttingen+minipig+as+a+model+of+diabetes%2C+with+special+focus+on+type+1+diabetes+research%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Use of the Göttingen minipig as a model of diabetes, with special focus on type 1 diabetes research.</a> ILAR Journal. 45 (3), 303-313 (2004).</li>
<li>Lehmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+minipig+in+general+toxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Scandinavian+Journal+of+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">The minipig in general toxicology.</a> Scandinavian Journal of Laboratory Animal Science. 25, 59-62 (1998).</li>
<li>Richer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sacrococcygeal+and+transsacral+epidural+anesthesia+in+the+laboratory+pig%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+Radiologic+Anatomy%22%5BJournal%5D)">Sacrococcygeal and transsacral epidural anesthesia in the laboratory pig.</a> Surgical Radiologic Anatomy. 20, 431-435 (1998).</li>
<li>Lind, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+pigs+in+neuroscience%3A+Modeling+brain+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+and+Biobehavioral+Reviews%22%5BJournal%5D)">The use of pigs in neuroscience: Modeling brain disorders.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 31 (5), 728-751 (2007).</li>
<li>Sauleau, P., Lapouble, E., Val-Laillet, D., Malbert, C. -H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pig+model+in+brain+imaging+and+neurosurgery%5BTitle%5D)+AND+%22Animal%22%5BJournal%5D)">The pig model in brain imaging and neurosurgery.</a> Animal. 3 (8), 1138-1151 (2009).</li>
<li>Dobbing, J., Sands, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+aspects+of+the+brain+growth+spurt%5BTitle%5D)+AND+%22Early+Human+Development%22%5BJournal%5D)">Comparative aspects of the brain growth spurt.</a> Early Human Development. 311, 79-83 (1979).</li>
<li>Aurich, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microsurgical+training+model+with+nonliving+swine+head.+Alternative+for+neurosurgical+education%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Cirurgica+Brasileira%22%5BJournal%5D)">Microsurgical training model with nonliving swine head. Alternative for neurosurgical education.</a> Acta Cirurgica Brasileira. 29 (6), 405-409 (2014).</li>
<li>Bassi, T., Rohrs, E., Fernandez, K., Ornowska, M., Reynolds, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+brain+excision%3A+An+easier+method+to+harvest+the+pig%27s+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Interdisciplinary+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Direct brain excision: An easier method to harvest the pig's brain.</a> Interdisciplinary Neurosurgery. 14, 37-38 (2018).</li>
<li>Bjarkam, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+of+the+pig+CNS+for+histological+analysis%3A+A+manual+for+decapitation%2C+skull+opening%2C+and+brain+removal%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Exposure of the pig CNS for histological analysis: A manual for decapitation, skull opening, and brain removal.</a> Journal of Visualized Experiments. 122, e55511(2017).</li>
<li>Pascalau, R., Szabo, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibre+dissection+and+sectional+study+of+the+major+porcine+cerebral+white+matter+tracts%5BTitle%5D)+AND+%22Anatomia%2C+Histologia%2C+Embryologia%22%5BJournal%5D)">Fibre dissection and sectional study of the major porcine cerebral white matter tracts.</a> Anatomia, Histologia, Embryologia. 46, 378-390 (2017).</li>
<li>McFadden, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perfusion+fixation+in+brain+banking%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica+Communications%22%5BJournal%5D)">Perfusion fixation in brain banking: a systematic review.</a> Acta Neuropathologica Communications. 7, 146(2019).</li>
<li>Félix, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stereotaxic+atlas+of+the+pig+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Stereotaxic atlas of the pig brain.</a> Brain Research Bulletin. 49, 1(1999).</li>
</ol>

저자는 경쟁적인 재정적 이익이 없다고 선언합니다.

본 명세서에 기술된 기술은 약 4주 의 돼지를 위해 디자인되었다. 돼지가 뇌 조직 구조의 무결성을 유지하기 위해 인도적으로 안락사 된 직후이러한 단계를 수행하는 것이 중요합니다, 특히 후속 생화학 적 분석을 고려할 때. 처음 기술을 배울 때 아틀라스 또는 섬유16 해부 가이드를 사용하는 것이 도움이됩니다. 실험자는 데이터 수집을 위한 샘플을 얻기 전에 여러 뇌 추출 및 해부를 연습하는 것이 좋습니다. 가장 어려운 단계는 두개골을 제거하는 것입니다. 이 단계는 주로 두개골에서 볼 수있는 곳과 두개골이 잘려졌을 때를 알 수있는 직접적인 연습이 필요하기 때문에 경험이 더 쉬워질 것입니다. 이 절차는 Bassi 외12에의해 설명된 것과 유사하지만 육각형 두개골 창을 만들 필요가 없으며 기술을 수행하는 방법에 대한 시각적 자습서를 제공합니다.
이 기술의 한계는 오래된 돼지와 함께 작업 할 때 나이가 들면...

돼지는 잘 문서화되어 심혈 관계 시스템1,위장 시스템2,영양3,4,당뇨병5,독성학6및 수술 기술7에서연구를위한 번역 가능한 동물 모델로 받아들여졌습니다. PubMed가 "돼지 뇌 동물 모델"이라는 키워드를 검색하여 1996-2005년 보다 4배 더 많은 결과를 초래함에 따라 신경 과학에서 돼지의 사용이 증가하기시작했으며,현재는 더 많은 결과가 나타나고 있습니다. 돼지 모델의 인기가 확대되는 주된 이유는 인간과 비교할 때 뇌의 성장, 구조 및 기능의 유사성 때문입니다. 인간의 뇌에 비해 돼지 뇌는 회색과 백색 물질의 유사한 자랄 패터닝, 혈관화 및 분포를 나타낸다9. 더욱이, 돼지 뇌는 신경 이미징 절차에 사용되어, 잠재적인 기록을 불러 일으켰으며, 신경외과 기술수립8,9. 다른 동물 모델과는 달리, 그러나, 돼지와 인간의 경험 주산기 뇌 성장 분출, 산전 또는 산후 성장 분출 반대로. 출생 시, 인간과 돼지 뇌는 성인 뇌 체중의 약 27%와 25%의 무게를 가지고 있으며, 성인 뇌 체중의 12%와 성인 체중10%의rhesus 원숭이 뇌의 무게가 있는 쥐 뇌에 비해 각각 무게를 측정합니다.
돼지가 신경 과학을 위한 동물 모형으로 서게 채택된 한 가지 이유는 많은 연구원이 이 맥락에서 동물에 익숙하지 하기 때문입니다. 연구원은 필드에 있는 그것의 잠재적인 사용을 인식하지 않을 수 있습니다 또는 그 같은 모형을 사용하는 데 필요한 적당한 기술을 모르는 수 있습니다. 생물 의학 및 전임상 모델로 돼지를 사용하면 신경 과학에 대한 관심과 사용이 증가함에 따라 연구 전반에 걸친 데이터의 정확한 비교를 보장하기 위해 조직 제거의 표준화 된 절차를 수립해야합니다. 돼지 뇌와 관련된 해부 및 외과 기술은 다른 곳에서 출판되었지만11,12,13,돼지 뇌 조직을 수집하는 간단하고 표준화 된 프로토콜에 대한 필요성이있다, 특히 생화학 적 분석에 사용하기 위해. 따라서 이 비디오의 목적은 연구원이 표준화된 뇌 추출 및 해부를 수행할 수 있도록 하는 데 필요한 지식을 제공하는 것입니다. 이 비디오는 피질과 뇌간을 그대로 유지하면서 돼지 뇌를 제거하는 하나의 적절한 기술을 설명하고, 그 후 여러 주요 뇌 영역을 해부하는 방법을 검토합니다.

<table><tbody><tr><td>#22 메스 블레이드 #4 핸들</td><td>Ted Pella, inc.</td><td>549-4S-22</td><td></td></tr><tr><td>11 1/2" Satterlee 뼈 톱</td><td>Leica Biosystems</td><td>38DI13425</td><td></td></tr><tr><td>5 1/2" 두개골 브레이커와 끌 끝 (고기 후크)</td><td>Leica Biosystems</td><td>38DI37636</td><td></td></tr><tr><td>5인치 헤비 듀티 워크샵 벤치 바이스</td><td>포니</td><td>29050</td><td></td></tr><tr><td>정육점 칼 25cm</td><td>Victorinox</td><td>5.7403.25</td><td>사용 전 날카롭게</td></tr> 하기 <tr><td>CM40 라이트 듀티 드롭 단조 C 클램프</td><td>Bessey</td><td>00655BC3120</td><td></td></tr><tr><td>다이아몬드 혼 나이프 셰</td><td>이퍼 셰프 ' s Choice</td><td>436-3</td><td></td></tr><tr><td>Shandon 스테인리스 스틸 메스 블레이드 핸들 #4</td><td>ThermoScientific</td><td>5334</td><td></td></tr><tr><td>조직 집게 Henry</td><td>Schein</td><td>101-5132</td><td></td></tr><tr><td>비닐 해부 패드</td><td>Carolina</td><td>629006</td><td></td></tr></tbody></table>

길들여진 돼지 뇌의 추출 및 해부

Extraction and Dissection of the Domesticated Pig Brain

돼지를 전임상 및 전염성 동물 모델로 사용하는 것은 심혈관 시스템, 위장 시스템 및 영양을 조사하는 연구 분야에서 잘 문서화되고 받아들여졌으며 돼지는 점점 더 신경 과학의 큰 동물 모델로 사용되고 있습니다. 또한, 돼지는 인간에서 일어나는 것과 유사한 두뇌 성장 및 발달 패턴을 표시하기 때문에 신경 발달을 공부하는 허용된 모형입니다. 신경 과학에서 덜 일반적인 동물 모델로, 돼지에 외과 및 해부 절차는 연구원 중 친숙 하거나 잘 연습 되지 않을 수 있습니다. 따라서 일관된 추출 및 해부 방법을 자세히 설명하는 표준화된 시각적 프로토콜은 돼지와 함께 일하는 연구자에게 가치가 있음을 증명할 수 있습니다. 다음 비디오는 피질과 뇌간을 그대로 유지하면서 돼지 뇌를 제거하는 기술을 보여주고 뇌간, 소뇌, 중뇌, 해마, 줄무늬, 시상 및 내측 전두엽 피질을 포함하여 여러 일반적으로 조사되는 뇌 영역을 해부하는 방법을 검토합니다. 이 비디오의 목적은 연구원에게 4주 된 돼지의 뇌 추출 및 해부를 일관되게 수행하는 데 필요한 도구와 지식을 제공하는 것입니다.

이 섹션에서는 4주 된 돼지 뇌의 정확한 추출 및 해부 후 얻은 결과의 예를 설명합니다. 그림 1은 해부 동안 가이드로 사용하기 위해 각 뇌 영역의 모양을 간략하게 설명합니다. 뇌의 일부는 소뇌의 제거 후 두개골에 남아있을 수 있습니다(도 1B). 이것은 소뇌의 원하는 영역을 격리하는 동안 제거 될 수있다. 표 1은 해부된 각 뇌 영역(n=5)에 대한 평균 중량(평균 ± 표준 오차)을 표시합니다.
<img alt="뇌 해부학도; 소뇌, 해마를 포함한 라벨이 붙은 뇌 영역; 신경과학 연구." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62030/62030fig01.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure...

이 프로토콜은 일반적으로 신경 과학에서 공부 여러 뇌 영역의 전체 및 해부에 돼지 뇌의 제거를위한 기술을 자세히 설명합니다.

Use of the pig as a preclinical and translatable animal model has been well-documented and accepted by research fields investigating cardiovascular ...

다음 비디오는 돼지 뇌의 제거 및 해부를 시연하는 것입니다. 절차 전이나 시술 중에 아틀라스 또는 섬유 해부 가이드를 참조하는 것이 유용할 수 있습니다. 큰 정육점 칼은 아틀라스와 축 사이의 하나의 깨끗한 절단을 허용하기 때문에 참수에 가장 적합합니다.새 피사체로 시작하기 전에 칼이 날카롭지 않도록 하십시오. 고기 갈고리가 두개골을 제거하는 데 사용됩니다. 메스 손잡이와 같은 긴 날씬한 도구는 두개골에서 뇌를 제거하는 데 사용됩니다.두개골을 자르는 동안 머리를 고정하기 위해 나사 또는 돌출이있는 악이 필요합니다. 일단 동물이 확립된 프로토콜에 따라 인간적으로 안락사되면 다음과 같이 진행됩니다. 어깨와 머리 의 상단 사이에 목의 목덜미 바로 위에 잘라.돼지를 확보하고 참수 하는 동안 길에서 년을 이동 합니다. 메스를 사용하여 절개를 만들어 피부를 두개골과 분리하십시오. 머리의 후방까지 계속되는 두개골 의 중간에 초기 절단을 합니다.두 번째 횡방향 컷은 머리 의 후방에 있어야합니다. 세 번째 컷은 또한 이 주둥이의 후방에서 시작하여 두개골에 쉽게 접근할 수 있도록 눈과 인라인으로 표시됩니다. 뼈 톱을 사용하여 앞쪽으로 절단하여 중간선으로 측면 절단합니다.톱으로 잘라내기 위해 가볍게 표시한 다음 두개골에서 저항이 적을 때까지 톱을 시작합니다. 이 두개골의 가장 얇은 부분을 절단하는 것을 보장합니다으로 절단하는 동안 약간 중간선쪽으로 톱을 베비. 절단이 귀에 너무 가까우면 두개골을 제거하기가 어려울 것입니다.그러나 컷이 미드 라인에 너무 가까우면 개구부가 뇌를 제거하기에는 너무 작습니다. 수직 측면에서 이 프로세스를 반복하여 직사각형 창을 만듭니다. 창의 각 모서리가 완전히 절단되어 두개골의 일부를 제거하여 아래 뇌를 드러낼 수 있는지 확인하십시오.다음으로, 고기 후크 또는 곡선 악기를 사용하여 직사각형 두개골 부분을 위치에서 제거합니다. 먼저 후크를 코너 중 하나에 넣고 압력을 가하여 두개골을 벗는 것으로 시작합니다. 어떤 경우에는 수막이 뇌에 남아 있을 것입니다.그리고 이 경우 조심스럽게 집게와 무딘 가위를 사용, 또는 또는 뇌를 절단하지 않고 수막을 제거하기 위해 메스. 참고로 뇌는 수막 층이 제거되기 전과 후에 다음과 같이 보아야합니다. 소뇌의 노출을 준비하기 위해 머리의 후방에 근육과 지방을 잘라.소뇌를 드러내기 위해 두개골의 후방을 따라 두 개의 횡방향 컷을 만듭니다. 이 상처를 만들 때 노출 된 뇌로 절단하지 주의. 상처가 만들어지면 주부에 한 손, 두개골에 한 손을 놓고 뒤로 압력을 가하여 두개골의 뒤쪽 부분을 머리의 나머지 부분에서 멀리 끌어당깁니다.여기서 강조표시된 바와 같이, 소뇌는 나머지 수막 층 뒤에 자리 잡고 있습니다. 메스 손잡이와 같은 무딘 악기의 끝을 사용하여 뇌를 두개골에서 조심스럽게 분리하여 그 과정에서 뇌를 손상시키지 않도록주의하십시오. 머리를 약간 뒤집어 두개골에서 뇌를 동축시키고 부드러운 스쿱 동작을 사용하여 두개골 신경을 끊고 뇌를 제거하십시오.이 과정은 두뇌와 두개골 구멍 사이 모든 남아 있는 연결을 제거 하는 인내심과 연습을 필요. 돼지의 머리를 반전하는 것은이 과정에서 도움이 될 수 있습니다. 뇌를 해방하기 위해 무딘 악기와 함께 전면적인 움직임을 계속 사용하십시오.여기에서 강조한 바와 같이, 소뇌와 뇌간은 두개골 구멍에 자리 잡고 있기 때문에 제거하기 어려울 수 있습니다. 소뇌와 수질, 또는 뇌간을 제거 할 때주의하십시오. 두개골에서 완전히 분리될 때 뇌는 스스로 떨어져야 합니다.두개골 구멍은 뇌를 제거 한 후 표시된 것처럼 보아야합니다. 뇌 영역 해부에 대비하여 미리 표지된 용기가 구성되고 가까운 거리에 있는지 확인합니다. 예 보존 방법에는 액체 질소로 샘플을 스냅 동결하거나 방부제 용액에 침수하는 것이 포함됩니다.일단 두개골 구멍에서 추출되면 전체 뇌는 다음과 같이 보일 것입니다. 수질 또는 뇌간을 제거하려면 소뇌에 관상 절단 된 소달을 만듭니다. 소뇌를 제거하려면 피질에 관상 절단 후방을 만듭니다.반구를 분리하려면 손상을 방지하기 위해 연속 모션을 사용하여 세로 균열을 따라 미드 자간탈을 절단합니다. 이 비디오의 목적을 위해 우리는 올바른 반구에서 해부만 표시됩니다. 중뇌를 제거하려면 뇌의 후방 부분에 두 개의 범프인 우수한, 열등한 콜리큘리를 찾습니다.이 지역에 단지 복부 뇌 조직의 원하는 양을 제거합니다. 해마를 제거하려면 메스 손잡이를 코퍼스 캘로섬의 후방에 배치하고 해마를 부드럽게 굴려냅니다. 전체 해마 뿔은 콩 모양이 될 것입니다.해마는 후방 코퍼스 캘로섬에서 시작하여 j 모션으로 손가락을 떠올릴 때 쉽게 굴러나야합니다. striatum 또는 caudate 핵을 제거하려면 코퍼스 캘로섬의 전방 부분을 제거합니다. 카우다테 핵은 회색과 흰색으로 칠해진 줄무늬 영역이며 코퍼스 캘로섬 바로 아래에 있습니다.메스 손잡이가 각진되어 주로 카우다테 핵을 포함하는이 영역을 제거합니다. 이 조직을 제거 한 후 뇌 영역이 있던 줄무늬 패턴을 볼 수 있어야합니다. 내측 전두엽 피질을 제거하려면 전두엽 자이루스에서 그 단면의 가장 내측 부분을 복용하는 코퍼스 캘로섬까지 조직을 해부한다.오른쪽 피질은 내측 전두엽 피질을 제거 한 후에도 남아 있어야합니다. 시동을 제거하려면 중도면의 중앙에 구조와 같은 전구를 제거합니다. 시상은 명백한 구형 모양을 가지고 있으며 주변 조직보다 약간 어둡게 보입니다.해부 조직 샘플의 완료 시 특정 실험 결과에 따라 제대로 보존되어야 합니다. 여기에 해부 된 뇌 영역, 젊은 돼지와 함께 작업 할 때 예상 하는 상대적인 크기와 모양을 포함 하 여. 이러한 기술을 마스터하면 전체 뇌 추출 및 해부 절차는 피사체 당 15 분 미만이 소요되며 일관된 결과를 생성합니다.

extraction-and-dissection-of-the-domesticated-pig-brain

Research

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