Name: 고주파 두개골 이중 초음파를 가진 수브라크누이드 출혈의 뮤린 모형에 있는 뇌 혈관경련의 분석 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-06-03T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 41 s
Description: 배우세요 고주파 색상 이중 초음파를 이용하여 생쥐 뇌혈관경련을 비침습적으로 모니터링하는 방법을. C57BL/6N 마우스의 경동맥 혈류 속도를 측정하여 지주막하출혈 후 혈관 경련을 평가합니다.

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저자는 비디오에서 일러스트의 준비스테판 킨델에게 감사드립니다. PW, MM 및 SHK는 독일 연방 교육 연구부(BMBF 01EO1503)의 지원을 받았습니다. 이 작품은 독일 연구 재단 (DFG INST 371/47-1 FUGG)의 대규모 계측 보조금에 의해 지원되었다. MM은 엘스 크뢰너-프레세니우스-스티퉁(2020_EKEA.144)의 보조금으로 지원되었다.

동물 실험은 책임있는 동물 관리위원회 (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz)에 의해 승인되고 독일 동물 복지법 (TierSchG)에 따라 실시되었습니다. 동물의 치료와 사용에 대한 모든 해당 국제, 국가 및 제도적 지침이 준수되었습니다. 이 연구에서는 19-21 g 사이의 체중으로 11-12 주 세 여성 C57BL/6N 마우스에서 두개 내 및 두개골 동맥의 혈류 속도의 측정을 수행했습니다. 마우스는 SAH 유도 또는 가짜 수술을 받았으며, 이는 다른 곳에서 자세히 설명된10,12,13.
1. 재료 의 준비
<ol><li>초음파 기계를 켜고 동물 ID를 입력합니다.</li>
	<li>초음파 시스템의 가열 판을 37 °C로 데우습니다. 직장 온도 프로브를 사용할 준비가 되었는지 확인합니다.</li>
	<li>수조를 사용하여 초음파 젤을 37 °C로 가열하십시오. 제모 크림, 전극에 대한 접촉 크림, 눈 연고를 준비합니다.</li>
</ol>2. 마취
<ol><li>마우스를 챔버에 넣고 4% 이소플루란과 40% O2로 1분 동안 세척하여 마취를 유도한다. 눈 연고로 눈을 보호합니다. 충분히 깊은 마취에 도달 한 후에만 계속 (통증 자극에 대한 반응의 부재).</li>
	<li>전체 절차 전반에 걸쳐 마취 마스크를 사용하여 1.5 % 이소플루란과 40 % O2로 마취를 유지하십시오.</li>
</ol>3. 두개 내 내 경동맥의 혈류 속도 의 결정 및 경두개 고주파 이중 음조
<ol><li>37°C의 체온을 유지하기 위해 초음파 시스템의 가열 판에 마우스를 놓습니다.</li>
	<li>전도성 페이스트로 동물의 네 가지 사지를 코팅하고 보드에 내장 된 심전도 전극에 테이프로 고정합니다. 생리학적 파라미터(ECG, 호흡 신호)가 이미징 시스템의 화면에 올바르게 표시되는지 확인합니다(예: Vevo3100). 필요한 경우 마취 수준을 조정하여 분당 400-500 비트 (bpm)의 목표 심박수를 얻습니다.</li>
	<li>직장 온도 프로브에 윤활유를 놓고 조심스럽게 삽입하여 체온을 모니터링합니다. 필요한 경우 추가 온난화 램프를 사용합니다.</li>
	<li>첫 번째 시험 전에, 제모 크림을 사용하여 화학적으로 occiput에서 모피를 제거합니다. 면봉을 사용하여 머리카락이 빠지기 시작할 때까지 크림을 2 분 동안 펴고 문지릅니다.<ol>
<li>추가 로 2 분 후, 주걱으로 크림과 머리카락을 제거하고 알코올 피부 방부제로 피부를 소독하십시오. 37°C로 따뜻하게 데운 초음파 젤로 코팅하십시오.</li>
	</ol>
</li>
	<li>38MHz 선형 어레이 트랜스듀서와 200프레임/s 이상의 프레임 속도를 사용하여 초음파 이미지를 획득하고 기계암의 프로브를 고정합니다. 트랜스듀서를 30°로 기울어진 occiput에 놓습니다.</li>
	<li>밝기(B)모드와 컬러 웨이브(CW) 도플러 모드를 사용하여 오른쪽 두개 내 내부 경동맥을 시각화하고 동맥의 최대 흐름이 발견될 때까지 제어 장치로 트랜스듀서를 앞뒤로 이동합니다.</li>
	<li>해부학 정보를 수집하려면 기존의 B 모드 및 CW-도플러 모드를 사용하고 획득 버튼을 클릭하여 수집을 시작합니다.<ol>
<li>두개내 선박의 유동 특성에 대한 정보를 기록하려면 펄스웨이브(PW) 도플러 버튼을 클릭하고, 시료 부피를 용기 중앙에 배치하고, 3s보다 긴 시네 루프를 획득한다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>왼쪽과 동일하게 진행합니다.</li>
	<li>두개골 경동맥을 진행합니다.</li>
</ol>4. 고주파 이중 음극을 가진 초두개 내경 동맥의 혈류 속도 의 결정
<ol><li>37°C의 체온을 유지하기 위해 초음파 시스템의 가열 판상에 마우스를 배치합니다.</li>
	<li>전도성 페이스트로 동물의 네 가지 사지를 코팅하고 보드에 내장 된 심전도 전극에 테이프로 고정합니다. 화면에 생리 적 매개 변수의 올바른 디스플레이를 다시 확인합니다.</li>
	<li>첫 번째 시험 전에, 위에서 설명한 바와 같이 제모 크림을 사용하여 전두부목에서 모발을 화학적으로 제거하십시오. 37°C로 따뜻하게 데워진 초음파 젤로 앞목을 코팅합니다.</li>
	<li>38MHz 선형 어레이 트랜스듀서와 200프레임/s 이상의 프레임 속도를 사용하여 초음파 이미지를 획득합니다. 트랜스듀서를 동물과 평행하게 배치하고 올바른 경동맥의 세로 이미지를 얻기 위해 위치를 조정한다.</li>
	<li>밝기-(B) 모드와 컬러 웨이브(CW) 도플러 모드를 사용하여 올바른 경동맥을 시각화합니다. 이미지에는 올바른 일반적인 경동맥(RCC), 올바른 내부 경동맥(RICA) 및 오른쪽 외부 경동맥(RECA)이 포함되어야 합니다.</li>
	<li>해부학 정보를 수집하려면 기존의 B 모드 및 CW-도플러 모드를 사용하고 획득 버튼을 클릭하여 수집을 시작합니다.<ol>
<li>맥박파(PW) 도플러 버튼을 클릭하면 초두개 동맥의 흐름 특성에 대한 정보를 기록하려면, 일반적인 경동맥, 내부 경동맥 및 외부 경동맥의 중앙에 샘플 볼륨을 배치하고 3s 보다 긴 시네 루프를 획득한다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>왼쪽과 동일하게 진행합니다.</li>
	<li>마취를 종료하고 온난화 플레이트에서 동물을 제거합니다. 저체온증을 방지하고 완전한 회복을 확인하기 위해 1 시간 동안 37 °C로 가열 된 인큐베이터에 배치 된 케이지로 동물을 반환하십시오.</li>
</ol>5. 초음파 검사 데이터 처리
<ol><li>고주파 초음파 데이터의 후처리를 위해 외부 워크스테이션을 사용합니다. B 모드, CW-도플러 모드 및 PW-도플러 모드 이미지와 시네 루프를 내보냅니다.</li>
	<li>수출 된 초음파 연구를 엽니 다. 한 동물을 선택하고 두개 내 경동맥의 PW-도플러 시네 루프를 엽니다. 이 프로토콜에서는 일반적으로 7~8개의 하트비트와 해당 유량 속도 곡선이 기록됩니다.</li>
	<li>시네 루프를 일시 중지하고 측정 버튼을 클릭합니다. 혈관 패키지를 선택하고 RICA PSV를 클릭하여 최대 수축기 압력(PSV)을 측정합니다. 이제 속도 곡선의 피크를 왼쪽으로 클릭하고 직선을 0 선으로 당깁니다. 오른쪽 마우스 버튼을 클릭하여 측정을 결정합니다.</li>
	<li>이제 RICA EDV를 선택하여 종말 속도(EDV)를 측정합니다. 디아스톨 끝에 속도 곡선의 최소한의 발진을 왼쪽으로 클릭합니다. 선을 0선으로 바로 당기고 오른쪽 마우스 버튼을 클릭하여 측정을 결정합니다.</li>
	<li>RICA VTI를 선택하여 속도 시간 일체형(VTI)을 측정합니다. 속도 곡선의 시작 부분에 왼쪽을 클릭하고 확장기 고원의 끝까지 마우스와 곡선을 따릅니다. 그런 다음 마우스를 다시 클릭하여 측정을 결정합니다.</li>
	<li>보고서 버튼을 사용하여 인트레이스 내경 동맥의 데이터를 내보냅니다. 내보내기를 누르고 데이터를 VSI 보고서 파일로 저장합니다.</li>
	<li>동일한 접근 방식을 사용하여 오른쪽 두개골 내부 경동맥의 PSV, EDV 및 VTI를 측정하고 그에 따라 데이터를 내보냅니다.</li>
	<li>왼쪽과 동일하게 진행합니다.</li>
</ol>

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</ol>

저자는 경쟁 이익을 선언하지 않습니다.

우리의 지식의 최고에, 이 연구는 고주파 경두개 색 으로 코딩 된 듀플렉스 초음파와 SAH의 뮤린 모델에서 뇌 혈관 경련의 모니터링을위한 프로토콜을 제시하는 첫번째입니다. 우리는 이 방법이 마우스에 있는 SAH 유도 후에 두개 내 혈류 속도의 증가를 측정할 수 있다는 것을 보여줍니다. 인간 의학에서 이 현상은 잘 알려져있다3,15. 몇몇 임상 연구는 큰 두개 내 동맥의 높은 혈류 속도와 자궁 내 및 외두개 혈류 속도의 높은 몫이 혈관 협개및 혈관 질화증과 상관 관계가 있는 기능적인 결과이다는 것을 보여주었습니다(15에서검토됨). 임상적 관행에서, 따라서 SAH3,15이후 뇌 혈관 경련의 비침습적 침대 측 모니터링을 위해 TCD 또는 TCCD를 사용하는 것이 일반적이다.
<...

자발적인 지주막 출혈 (SAH)은 주로 두개 내 동맥류1의파열로 인한 출혈성 뇌졸중의 한 형태이다. 신경학적 결과는 주로 출혈의 효과와 관련된 과도 글로벌 뇌 허혈의 영향으로 인한 조기 뇌 손상(EBI)과 출혈2,3다음 주 동안 발생하는 지연된 대뇌 허혈(DCI)의 두 가지 요인에 의해 좌우된다. DCI는 SAH 환자의 최대 30%에 영향을 미치는 것으로 보고되었다2. DCI의 병리학은 혈관 신생 뇌 혈관 경련, 미세 혈관 경련 및 미세 혈전증으로 인한 방해 된 미세 순환, 피질 확산 우울증 및 염증4에의해 유발되는 효과를 포함한다. 불행하게도, 정확한 병리 생리학은 불분명남아 효과적으로 DCI3을방지하는 가능한 치료가 없습니다. 따라서 DCI는 많은 임상 및 실험 연구에서 조사됩니다.
요즘, SAH에 대한 대부분의 실험 연구는 특히 마우스5,6,7,8,9,10,11,12,13에서작은 동물 모델을 사용합니다. 이러한 연구에서, 대뇌 혈관 경련은 자주 끝점으로 조사. 혈관 경련 ex vivo의 정도를 결정하는 것이 일반적입니다. 이것은 짧은 마취 시간을 요구하고 동물에 작은 고민만 부과하는 뇌 혈관 경련의 생체 내 검사에 대한 비침습적 방법이 부족하기 때문이다. 그러나 생체 내에서 뇌 혈관 경련을 검사하는 것이 유리할 것입니다. 이것은 마우스에 있는 혈관 경련에 생체 내 연구 결과에 있는 세로 연구를 허용할 것이기 때문입니다 (즉, SAH의 유도 후에 일 도중 다른 시점에서 뇌 혈관 경련의 화상 진찰). 이렇게 하면 다른 시점에서 획득한 데이터의 비교도가 향상됩니다. 또한, 세로 학습 설계를 사용하는 것은 동물 수를 줄이는 전략입니다.
여기서 우리는 마우스에 있는 대뇌 동맥에 있는 혈류를 결정하기 위하여 고주파 경두개 초음파의 사용을 보여줍니다. 우리는 두개골 도플러 소노그래피 (TCD) 또는 경두개 색으로 구분된 이중 소노그래피 (TCCD)와 유사한 임상 실습14,15,16,17,18,이 방법은 자궁 내 의 혈류 속도를 측정하여 뇌 혈관 경련을 모니터링하는 데 사용될 수 있음을 보여줍니다.

<table><tbody><tr><td>Balea 제모 크림</td><td>Balea; 독일</td><td>ASIN B0759XM39V</td><td>제모 크림</td></tr><tr><td>C57BL/6N 마우스</td><td>Janvier; Saint-Berthevin Cedex, 프랑스</td><td>n.a.mice</td><td></td></tr> <tr><td>Corneregel</td><td>Bausch& 롬; 미국 뉴욕주 로체스터</td><td>REF 81552983</td><td>안연고, 윤활</td></tr><tr><td>면봉</td><td>Hecht Assistent; Sondenheim vor der R&ouml; hn, 독일</td><td>REF 44302010</td><td>면봉</td></tr><tr><td>Ecco-XS 면도기</td><td>Tondeo; Soligen, 독일</td><td>DE 28693396</td><td>면도기</td></tr><tr><td>전극 크림</td><td>GE; 보스턴, 매사추세츠, 미국</td><td>REF 21708318</td><td>전도성 페이스트</td></tr><tr><td>가열판</td><td>Medax; Kiel, 독일</td><td>2005-205-01</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Abvie; 독일 비스바덴</td><td>n.a.</td><td>휘발성 마취제</td></tr><tr><td>Leukofix</td><td>BSN medical; 독일 함부르크</td><td>REF 02137-00</td><td>테이프</td></tr><tr><td>기계 팔 + 미세 조작기</td><td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td><td>P/N 11277</td><td></td></tr><tr><td>마이크로백 티슈</td><td>Paul Hartmann AG; 독일 함부르크</td><td>REF 981387</td><td>항균 조직</td></tr><tr><td>MZ400, 38MHz 선형 어레이 변환기</td><td>VisualSonics; FujiFilm, 토론토, CA</td><td>REF 51068-30</td><td>초음파 변환기</td></tr><tr><td>Sonosid</td><td>ASID Bonz GmbH; Herrenberg, 독일</td><td>REF 782010</td><td>초음파 검사 젤</td></tr><tr><td>초음파 플랫폼(가열판 및 ECG 기록</td><td>VisualSonics 포함); FujiFilm, 토론토, CA</td><td>P/N 11179</td><td></td></tr><tr><td>UniVet-Porta</td><td>Groppler; 독일 Oberperasberg,</td><td>S/N BKGM0437</td><td>이소플루란 기화기</td></tr><tr><td>Vevo3100</td><td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td><td>REF 51073-45</td><td>초음파 검사 장치</td></tr><tr><td>VevoLab 소프트웨어</td><td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td><td>n.a.</td><td>평가 소프트웨어</td></tr></tbody></table>

고주파 두개골 이중 초음파를 가진 수브라크누이드 출혈의 뮤린 모형에 있는 뇌 혈관경련의 분석

Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound

치피 뇌졸중의 일종인 체해 출혈 후 몇 주 후에 발생하는 뇌 혈관질은 뇌허혈지연에 기여합니다. SAH의 뮤린 모델을 사용하여 실험 연구에서 발생하는 문제는 마우스에서 뇌 혈관 경련의 생체 내 모니터링방법이 부족하다는 것입니다. 여기서, 우리는 마우스에 대한 경두개 이중 초음파 검사를 수행하기 위해 고주파 초음파의 적용을 보여줍니다. 이 방법을 사용하여 내부 경동맥(ICA)을 식별할 수 있습니다. 두개내 IcA의 혈류 속도는 SAH의 유도 후 크게 가속화되었으며, 두개골 ICA의 혈류 속도는 뇌 혈관 경련을 나타내는 낮은 상태를 유지했습니다. 결론적으로, 여기서 입증된 방법은 뮤린 SAH 모델에서 뇌 혈관경련의 기능적 비침습적 생체 내 모니터링을 허용한다.

6마리의 마우스에서, 3마리가 샴 수술을 받는 동안 내측 경동맥(ICA)과 자궁내경동맥(ICA)의 혈류 속도가 수술 1일 전에 결정되었고, 수술 후 1일, 3, 7일 동안 내혈관 필라멘트 천공 모델을 사용하여 SAH를 유도하였다. 측정은 37°C19에서체온을 유지하면서 이소플루란을 가진 마취하에 다른 연구의 에코카르디그래피 검사의 일환으로 수행되었다.
수술 전, 초두개 및 두개 내 혈류 속도뿐만 아니라 내외 혈액 흐름의 수분은 SAH와 가짜 동물 사이에 유사했습니다. SAH 유도 후 첫날에는 두개 내 혈류 속도 또는 두개 내 및 외두개 혈류의 비율에 큰 변화가 없었습니다.
3일과 7일에 ICA의 두개 내 혈류 속도는 SAH 동물의 2에서 현저하게 증가하여 SAH 후 뇌 혈관 경련을 나타냅니다. 두개골 혈류 속도가 거의 변하지 않았기 때문에, 대뇌 혈관 경련을 나타내는 SAH 동물의 7 일...

이 원고의 목적은 마우스의 대뇌 동맥에서 혈류의 생체 내 이미징을 허용하는 초음파 기반 방법을 제시하는 것입니다. 우리는 지주 막 증 출혈의 뮤린 모델에서 혈관 경련과 관련 된 혈액 흐름 속도의 변화를 결정 하기 위해 그것의 응용 프로그램을 보여줍니다 (SAH).

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A ...

이 절차의 전반적인 목표는 생체 내 마우스에서 지주 막 증 후 뇌 혈관 경련을 모니터링 하는 것입니다. 이것은 이소플루란과 마취 하에 고주파 색으로 구분된 이중 음모의 적용에 의해 달성된다. 이미징 데이터는 내외 및 외두개 내 경동맥의 혈류 속도를 결정하기 위해 처리됩니다.가속화된 두개내 혈류 속도는 뇌혈관경련을 나타낸다. 이 연구에서는, 우리는 11에서 12 주 세 여성, C57BL/6N 마우스에 있는 두개 내 및 외두개 동맥의 혈류 속도의 측정을 능력을 발휘했습니다. 마우스는 다른 곳에서 상세히 기술된 SAH 유도 또는 가짜 수술을 실시하였다.초음파 기계에 초음파 검사 스위치를 준비하고 동물 ID를 입력하려면 초음파 시스템의 가열 판을 섭씨 37도로 따뜻하게하십시오. 직장 온도 프로브를 사용할 준비가 되었는지 확인합니다. 따뜻한 수조를 사용하여 초음파 젤을 섭씨 37도까지 가열하십시오.제모 크림, 전극과 눈 연고에 대한 접촉 크림을 준비합니다. 트랜스듀서가 기계식 팔에 제대로 장착되어 있는지 확인하고 마취 유도챔버가 4%이소플루란과 40%의 산소로 플러시되도록 하십시오. 1 분 동안 챔버에 마우스를 넣어 마취를 유도.연고로 눈을 보호하십시오. 충분히 깊은 마취에 도달 한 후에만 계속하십시오. 전체 절차 전반에 걸쳐 마취 마스크를 사용하여 1.5 %의 이소플루란과 40 %의 산소로 마취를 유지하십시오.첫 번째 단계에서, 두개 내 내 경동맥의 혈류 속도는 경두개 고주파 이중 음모로 결정된다. 체온 37도를 유지하기 위해 초음파 시스템의 가열 판에 마우스를 놓습니다. 양쪽에 눈 연고를 바르습니다.첫 번째 시험 전에 전기 면도기로 occiput의 털을 줄입니다. 그런 다음 제모 크림을 사용하여 화학적으로 남은 모발을 제거합니다. 면봉을 사용하여 모발이 빠지기 시작할 때까지 크림을 2분 간 문질러 보냅니다.추가 2 분 후 주걱으로 크림과 머리를 제거하고 알코올 피부 방부제로 피부를 소독. 전도성 페이스트로 동물의 네 가지 사지를 코팅하고 보드에 내장 된 심전도 전극에 테이프로 고정합니다. 직장 온도 프로브에 윤활유를 놓고 필요한 경우 추가 온난화 램프를 사용하여 체온을 모니터링하기 위해 조심스럽게 삽입하십시오.생리학적 매개 변수, 심전도 및 호흡 신호가 초음파 시스템의 화면에 올바르게 표시되는지 확인하십시오. 필요한 경우, 마취의 수준은 분당 4 ~ 500 비트의 목표 심박수를 얻기 위해 조정 될 수있다. 초음파 젤로 코팅하십시오.선형 어레이 트랜스듀서와 초당 200프레임 이상의 프레임 속도를 사용하여 초음파 이미지를 획득하고 기계식 암에 장착합니다. 트랜스듀서를 30도 뒤로 기울인 occiput에 놓습니다. B 모드와 CW-도플러 모드를 사용하여 오른쪽 두개 내 내부 경동맥을 시각화하고 동맥의 최대 흐름을 찾을 때까지 제어 장치로 트랜스듀서를 앞뒤로 이동합니다.해부학 정보를 수집하려면 기존의 B 모드 와 CW-도플러 모드를 사용하고 획득 버튼을 클릭하여 수집을 시작합니다. 두개내 선박의 유동 특성에 대한 정보를 기록하려면 펄스 파 도플러 버튼을 클릭하고, 시료 부피를 용기 중앙에 놓고 3초 이상 시네 루프를 획득한다. 왼쪽과 동일하게 진행합니다.다음 단계에서 초두개 내부 경동맥의 혈류 속도는 고주파 이중 음모로 결정된다. 37°C의 체온을 유지하기 위해 초음파 시스템의 가열 판에 마우스를 배치합니다. 첫 번째 시험 전에 전기 면도기와 목 앞의 머리카락을 제거합니다.그런 다음 이전에 설명한 바와 같이 제모 크림을 사용하여 화학적으로 남은 모발을 제거하십시오. 전도성 페이스트로 동물의 네 가지 사지를 코팅하고 보드에 내장 된 심전도 전극에 테이프로 고정합니다. 직장 온도 프로브에 윤활유를 놓고 조심스럽게 삽입하여 체온을 모니터링합니다.필요한 경우 추가 온난화 램프를 사용하십시오. 화면에 생리 적 매개 변수의 올바른 디스플레이를 다시 확인합니다. 37°C까지 따뜻하게 데운 초음파 젤로 목 앞쪽을 코팅합니다.트랜스듀서를 동물과 평행하게 배치하고 올바른 경동맥의 세로 이미지를 얻기 위해 위치를 조정한다. B 모드 CW-도플러 모드를 사용하여 올바른 경동맥을 시각화합니다. 이미지에는 올바른 일반적인 경동맥, 올바른 내부 경동맥 및 올바른 외부 경동맥이 포함되어야 합니다.해부학 정보를 수집하려면 기존의 B 모드 와 CW-도플러 모드를 사용하고 획득 버튼을 클릭하여 수집을 시작합니다. 초두개 동맥의 흐름 특성에 대한 정보를 기록하려면 맥박파 도플러 버튼을 클릭하고, 내부 경동맥 과 외부 경동맥을 공통 경동맥의 중앙에 시료 부피를 놓고 3초 이상 시네 루프를 획득한다. 왼쪽과 동일하게 진행합니다.마취를 종료하고 온난화 플레이트에서 동물을 제거하고 저체온증을 방지하고 완전한 회복을 확인하기 위해 1 시간 동안 섭씨 36도로 가열 된 인큐베이터에 넣은 케이지에 넣습니다. 다음 단계는 초음파 데이터를 처리하는 것입니다. 고주파 초음파 데이터의 후처리를 위해 외부 워크스테이션을 사용하는 경우.B 모드, CW-도플러 모드 및 PW-도플러 모드 이미지와 시네 루프를 베보 LAB 소프트웨어로 내보세요. 수출 된 초음파 연구를 엽니 다. 한 동물을 선택하고 두개 내 경동맥의 PW-도플러 시네 루프를 엽니다.이 프로토콜에서는 일반적으로 해당 흐름 속도 곡선에서 7~8개의 하트비트가 기록됩니다. 시네 루프를 일시 중지하고 측정 버튼을 클릭합니다. 혈관 패키지를 선택하고 RICA PSV를 클릭하여 오른쪽 두개내 경동맥의 피크 수축기 압력을 측정합니다.이제 속도 곡선의 피크를 왼쪽으로 클릭하고 직선을 0 선으로 당깁니다. 오른쪽 마우스 버튼을 클릭하여 측정을 결정합니다. 이제 RICA EDV를 선택하여 최종 확장기 속도를 측정합니다.디아스톨 끝에 있는 속도 곡선의 최소한의 발진을 왼쪽으로 클릭합니다. 선을 0선으로 바로 당기고 오른쪽 마우스 버튼을 클릭하여 측정을 결정합니다. RICA VTI를 선택하여 속도 시간을 일체측정합니다.속도 곡선의 시작 부분에 왼쪽을 클릭하고 확장기 고원의 끝까지 마우스와 곡선을 따릅니다. 그런 다음 마우스를 다시 클릭하여 측정을 결정합니다. 보고서 버튼을 사용하여 인트레이스 내경 동맥의 데이터를 내보냅니다.내보내기를 누르고 데이터를 VSI 보고서 파일로 저장합니다. 오른쪽 두개골 내부 경동맥의 PSV, EDV 및 VTI를 측정하고 그에 따라 데이터를 내보낼 수 있는 동일한 접근 방식을 사용합니다. 왼쪽과 동일하게 진행하고 LICA PSV, EDV 및 VTI를 사용합니다.5마리의 마우스와 3마리의 마우스에서 2마리가 가짜 수술을 받는 동안 유도되었고, 두개내 내동맥의 혈류 속도와 자궁 내경동맥의 혈류 속도는 수술 1일 전, 수술 후 1일, 3일, 7일 후에 결정되었다. 수술 전, 추가 및 두개 내 혈류 속도뿐만 아니라 내외 및 외두개 혈류의 비율은 SAH와 가짜 동물 사이에 유사했습니다. SAH 유도 후 첫날에는 내외 또는 두개 폐혈 속도 또는 인트라 및 외두개 혈류 사이의 비율에 큰 변화가 없었습니다.3일과 7일에 내부 경동맥의 두개내 혈류 속도가 현저하게 증가했으며 SAH 후 뇌 혈관 경련을 나타내는 SAH 동물 중 두 마리가 현저하게 증가했습니다. 두개골 혈류 속도가 거의 변하지 않았기 때문에 뇌 혈관 경련을 나타내는 SAH 동물의 7 일째에 내장 및 두개골 혈류 속도의 비율도 크게 증가했습니다. 결론적으로 고주파 색으로 구분된 경두개 이중 초음파 초음파 초음파 는 마우스에서 두개 내 혈류의 속도의 생체 측정을 수행하는 데 사용될 수 있다.혈관 경련을 나타내는 SAH 후 마우스에서 두개 내 혈류 속도가 가속화되는 인간 환자의 상황과 유사합니다. 여기에 표시된 매우 초음파 학적 방법은 빠르고 침략성이 거의 없습니다. 그것은 뮤린 SAH 모델에서 혈관 경련의 세로 연구를 허용합니다.

analysis-cerebral-vasospasm-murine-model-subarachnoid-hemorrhage-with

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

Aneurysmal subarachnoid 출혈 (SAH)은 때 동맥 파열 subarachnoid 공간에 발생합니다 출혈이 있습니다. subarachnoid의 출혈이 몇 년 전 예전처럼 될 수 계속 한 후이 행사의 병적 상태와 사망률이 개선 치료 방법으로 인해 감소, vasospasm의 위험에 왔지만. 뇌성 vasospasm의 시작 이벤트를 식별하기 위해 포괄적이고 재현 동물 모델을 확립의 중요성은 배리의 1979 년 실험 vasospasm 모델 쥐의 첫 번째 사용하기 때문에 연구의...

실험 Subarachnoid의 출혈 후 뇌 지연 Vasospasm을 평가하기 위해 낮은 사망 쥐 모델

윌리스 천공의 관내 서클 지주막 하 출혈의 표준화 된 마우스 모델을 설명한다. 선박 천공 및 지주막 하 출혈은 두개 내 압력 모니터링에 의해 모니터링된다. 또 각종 중요한 파라미터는 기록 및 생리적 조건을 유지하도록 제어된다.

지주막 하 출혈의 생쥐 모델

이 기사의 목적은 마이크로 계산 된 단층 촬영 및 전체 선박 세그먼트에 대뇌 vasospasm을 계량 하는 데 사용할 수 있는 볼륨의 결정 후 마우스에서 뇌혈관 나무의 3 차원 재구성을 허용 하는 방법을 제시 하는 것입니다. 거미 막 밑 출혈의 murine 모델입니다.

거미 막 밑 출혈의 Murine 모델에 대뇌 Vasospasm의 정량화에 대 한 체적 메서드

우리는 이 프로토콜에서 시스테나 마그나에 자가 전혈을 이중 으로 주입하여 표준화된 지주막 출혈(SAH) 마우스 모델을 기술하였다. 이중 주사 절차의 높은 수준의 표준화는 사망률에 관한 상대적 안전과 SAH의 중간-급성 모델을 나타낸다.

수브라크누드 출혈의 모델로 시스테나 마그나에 혈액을 이중 직접 주입

기능성 경두개 도플러 초음파는 기저 대뇌 동맥 내의 대뇌 혈류의 자극 유발 변화에 대한 높은 시간적 분해능 측정으로 다른 기능성 이미징 모달을 보완합니다. 이 방법 논문은 기능성 경두개 도플러 초음파를 사용하여 기능적 이미징 실험을 수행하기위한 단계별 지침을 제공합니다.

대뇌 혈류 를 모니터링하기위한 기능성 경두개 도플러 초음파

여기서 우리는 정확한 출혈 부위를 보장하고 다른 관련 두개내 병리를 배제하기 위해 수술 후 24 시간 동안 자기 공명 영상 (MRI)과 결합 된 혈관 내 필라멘트 천공에 의해 유도 된 표준화 된 SAH 마우스 모델을 제시합니다.

자기 공명 영상(MRI)과 결합된 Subarachnoid 출혈에 대한 혈관 내 천공 모델

경두개 초음파는 다양한 신경 질환을 가진 환자를 모니터링하는 데 필수적인 도구입니다. 뇌는 자문 연구에서 프로토콜화된 방식으로 일반적으로 사용되지만, 현장 진료 초음파(PoCUS)를 사용하는 많은 프로토콜에서 간과되어 왔습니다. 본 연구는 PoCUS 이미지 획득 프로토콜을 제안한다.

Point of Care 경두개 색상으로 구분된 이중 초음파 중뇌동맥 초음파

본 연구는 실크 봉합법과 레이저 반점 조영 영상 및 고해상도 초음파를 결합하여 평가를 위해 실크 봉합법과 레이저 반점 조영 영상 및 고해상도 초음파를 결합하여 상시상동 혈전증을 재현 가능하고 최소 침습 모델로 확립하는 프로토콜을 제시합니다.

수정된 염화철 유도 상시상동 혈전증 형성

기능성 transcranial 도플러 sonography (fTCD)는인지 기능, 특히 언어의 lateralization을 파악하기 위해 사용될 수있는 간단하고 비침습 초음파 기술이며, 아이들과 함께 사용하기에 적합합니다.

기능 Transcranial 도플러 초음파를 사용하여 어린이의 대뇌 Lateralization 평가 (fTCD)

이 프로토콜에서 설명하는 생쥐에서 했습니다만 출혈의 autologous 혈액 주입 모델은 바늘 트랙까지 혈액 역류, 펌핑 시스템에서 anticoagulants의 위험을 최소화하기 위해 이중 사출 기술을 사용하고, 시스템의 모든 죽은 공간 및 확장 튜브를 제거합니다.

마우스에서 자연 했습니다만 출혈을 모델로 Autologous 혈액 주입

배우세요 고주파 색상 이중 초음파를 이용하여 생쥐 뇌혈관경련을 비침습적으로 모니터링하는 방법을. C57BL/6N 마우스의 경동맥 혈류 속도를 측정하여 지주막하출혈 후 혈관 경련을 평가합니다.

고주파 두개골 이중 초음파를 가진 수브라크누이드 출혈의 뮤린 모형에 있는 뇌 혈관경련의 분석

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