쿼드러플-체커보드: 약물 조합을 연구하기 위한 3차원 체커보드 수정

4중 바둑판은 4가지 약물을 조합하여 얻을 수 있는 가능한 모든 조합을 연구하는 기술로, 주로 MDR 또는 다제내성 미생물이라고도 하는 내성 미생물에 대한 치료법을 찾는 것이 중요합니다. 이 기술은 노동 집약적이지 않으며 다음 날 또는 잠복기가 끝난 후에 결과를 얻을 수 있습니다. 이 외에도 가능한 모든 조합을 연구할 수 있으며 하나의 실험에서 이 4가지 약물과 모두를 결합하여 얻을 수 있는 특정 및 매우 제한된 조합뿐만 아니라 모든 가능한 조합을 연구할 수 있습니다.

이 외에도 이 기술은 미생물학 및 미생물학뿐만 아니라 여러 학문 분야에서 사용할 수 있습니다. 항균제뿐만 아니라 다양한 항균제 간의 가능한 모든 조합을 연구할 수 있습니다. 미생물학 부분 외에도 항암제, 식물 추출물과 약물 간의 조합, 심지어 분자 효과적인 분자 치료 패널 간의 조합을 연구하는 데 사용할 수 있습니다.

준비 장소 4 96, 테이프를 사용하여 정사각형을 형성하기 위해 우물 플레이트를 서로 옆에 놓고 바닥을 함께 테이프로 붙입니다. 이 단계를 반복하여 각각 4개의 플레이트가 포함된 4개의 패널을 얻고 1, A 2, A 3 및 4로 이름을 지정합니다. 50마이크로리터 뮐러를 추가합니다.

1696 년에 2 열과 11 열 사이의 우물에 힌트와 국물, 4 개의 패널의 우물 플레이트는 200 마이크로 리터 Mueller Hinton 국물을 우물 H 12에 추가하여 음성 대조군 역할을합니다. 1696 년 4 개의 패널의 우물 플레이트에서 1 개의 50 마이크로 리터 Mueller Hinton 국물을 우물 A에 추가하고 1 개의 H를 1696 개의 패널 판에서 양성 대조군 우물로 사용하며, 15ml의 원뿔형 튜브에 1 개의 cefotaxime 직렬 희석을 약물로 추가합니다. 멸균 증류수.

공식 C, 1, V, 1, C, 2, V, 2에 따라 약물의 원액에서 제거할 부피를 계산합니다. 15ml 멸균 증류수에서 계산된 부피를 제거하고 동일한 부피의 약물 원료 용액을 원뿔형 튜브 피펫에 50마이크로리터의 제조된 약물 용액을 웰 H(12)를 제외한 열 11 및 열 12의 각 웰에 첨가하고, 열 11에서 50마이크로리터를 제거하고 열 10의 해당 웰에 넣어 연속 희석을 시작합니다. 그런 다음 10부터 2 열까지 2 열에서 가져온 50 마이크로 리터가 폐기됩니다. 4개 패널의 1696 웰 플레이트 각각에 대해 직렬 희석을 반복합니다.

약물 2 amika 직렬 희석을 10 ml의 원뿔형 튜브에 희석합니다. 멸균 증류수. 약물의 원액에서 제거할 부피를 계산합니다.

10ml 멸균 증류수에서 계산된 부피를 제거하고 동일한 부피의 의약품 원료 용액을 원뿔형 튜브에 추가합니다. 별도의 96 웰 플레이트를 가져 와서 100 마이크로 리터의 멸균 Mueller Hinton 국물을 로즈 G 사이의 웰에 추가하고이 플레이트를 B.In 미리 준비된 약물 100 마이크로 리터를 추가합니다. 둘째, RO G.Dôle의 각 우물에서 100 마이크로 리터를 복용하여 행 G에서 B 행으로 직렬로 묽게 하고 마지막으로 행 B.의 우물에서 100 마이크로 리터를 버리는 행 B.의 우물에서 100 마이크로 리터를 버리기 위해이 단계를 반복하십시오. 4 개의 패널에서 각 플레이트에 해당 웰, 1 개의 준비된 96 웰 플레이트에는 100 마이크로 리터의 약물 2가 포함되어 있습니다.

그것은 1개의 패널 약품에 있는 2개의 판을 위해 이젠 그만입니다. 14ml 멸균 증류수에 4 개의 다른 원추형 튜브 외에도 3 개의 등심이 살아있습니다. 약물의 원액에서 제거할 부피를 계산합니다.

각 튜브에서 14ml의 멸균 증류수에서 계산된 부피를 제거하고 해당 부피의 약물을 추가합니다. 세 번째 약물의 필요한 농도를 준비한 후 50마이크로리터를 취하여 해당 플레이트의 B와 G열, 2열과 12열 사이의 해당 웰에 첨가합니다. 각 패널에서, C 1은 4개의 P, 1개의 플레이트에 해당하고, 4개의 패널, C 2개는 4개의 P, 2개의 플레이트, 4개의 패널, C3은 4개의 P, 3개의 플레이트, 4개의 패널, C 4개는 4개의 P, 4개의 플레이트에 해당하고, 4개의 패널은 4개의 약물, 4개의 트리메토프림 설파메톡사졸, 원뿔형 튜브에 14ml를 첨가한다.

증류수를 사용하십시오. 약물의 원액에서 제거할 부피를 계산합니다. 각 튜브의 14ml 멸균 증류수에서 계산된 부피를 제거하고 필요한 양의 약물을 추가합니다.

네 번째 약물의 필요한 농도를 준비한 후 50 마이크로 리터를 가져 와서 B 행과 G 행, 2 열과 12 열 사이의 해당 웰에 첨가하십시오. 해당 패널에 있는 4개의 플레이트에서, C 1은 패널 1에 해당하고, C 2는 패널 2에 해당하고, C3은 패널 3에 해당하고, C 4는 패널 4에 해당한다. 박테리아 접종물의 준비 및 추가는 멸균 루프 전달을 사용하여 I-E-S-B-L과 동일합니다.

박테리아 분리물의 한 군체는 이전에 플레이트에서 배양한 것과 같습니다. 2ml의 멸균 Mueller Hinton 국물과 와류가 있어야 하는 탁도를 확인하고, 밀도를 사용하여 0.5 McFarland여야 하는 탁도를 확인하고, 밀도를 사용하여 TML 멸균 Mueller Hinton 국물을 멸균 소변 컵에 추가하고, 0.5 McFarland 접종에서 소변 컵에 박테리아 접종물을 추가합니다. 공식 C에 따라 1, V, 1, C, 2, V, 2, 여기서 V, 1은 800마이크로리터와 같습니다. 파이프 피펫 50 마이크로 리터의 접종 용액과 멸균 제어 인 H 12를 제외한 각 우물에 패널을 하룻밤 동안 섭씨 37도에서 배양합니다. 이 그림은 패널 A 1을 나타냅니다. 색깔 거주지는 박테리아 성장을 포함하는 우물이고 검은색 화살표는 성장에 있는 우물을 나타냅니다.

플레이트 1, 플레이트 2 및 플레이트 3에 성장 인터페이스가 없습니다. 플레이트 4에 Trimethoprim sulfamethoxazole의 8 이상의 MIC 외에 cefotaxime 및 Levofloxacin의 여러 MIC 외에 Amikacin의 8개 이상의 MIC를 포함하는 D행에 억제가 있음을 알 수 있습니다. 우리는 조합을 포함하는 사분면에서 박테리아 성장이 보이지 않는다는 것을 알 수 있습니다.

이 플레이트에는 성장을 완전히 억제하는 Levofloxacin의 MIC가 있기 때문입니다. 그림 1 B는 패널 2를 나타냅니다. 이 패널에서는 RD에서도 박테리아 성장 억제가 관찰되는 것을 볼 수 있으며, RD에서는 Amikasin의 8개 이상의 MIC 및 트리메토프림 설파메톡사졸의 4개 이상의 MIC 외에도 1개의 MIC가 포함되어 있습니다. 그림 1 C는 패널 A 3을 나타냅니다.

이 그림에서 박테리아 성장의 억제가 세포탁심 및 레보플록사신의 여러 서브 마이크를 포함하는 C행과 D행에서 볼 수 있으며, 트리메토프림 설파메톡사졸의 절반 MIC, C행의 Amikacine의 4개 이상의 MIC와 D행의 Amikacin의 2개 이상의 MIC가 1개 이상 그림 1D는 패널 A 4를 나타냅니다. 이 패널에는 Trimethoprim 설파메톡사졸 MIC 1개와 여러 농도의 Cefotaxime, amikacin 및 Levofloxacin이 있습니다. 이 그림에서 우리는 박테리아 성장이 조합을 포함하는 사분면에서 완전히 억제되는 것을 볼 수 있으며, 이 억제는 모두 Excel 파일에서 시트 FIC에 있는 Trimethoprim sulfamethoxazole의 MIC 1개의 효과입니다.

표에는 얻은 값의 해석과 함께 최종 사운드 FIC가 표시됩니다. 결론적으로, Q 바둑판 기법은 단일 실험에서 4가지 약물 간의 가능한 모든 조합을 연구합니다. 결과는 다음 날 얻을 수 있으며 Excel 템플릿을 사용하여 쉽고 빠른 방식으로 해석됩니다.