Name: 세포 성숙을 개선하고 강성과 감금의 영향을 연구하기 위해 3D 메틸셀룰로오스 기반 하이드로겔의 메가카요세포 배양 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-08-26T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 53 s
Description: 배우세요 3D 메틸셀룰로오스 하이드로겔에서 마우스 메가카요세포 배양법을 통해 뼈골수 환경의 강성과 감금이 세포 성숙 및 전혈소판 형성에 미치는 영향을 연구하는 방법을.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

저자는 처음에 실험실에서이 기술을 개발 파비엔 퍼투이와 알리시아 아길라르뿐만 아니라 메틸 셀룰로오스 하이드로 겔의 점탄성 특성을 특징으로 도미니크 콜린 (연구소 찰스 사드론 - 스트라스부르)에게 감사드립니다. 이 작품은 ARMESA (협회 드 레체 에 데벨로페멘트 en Médecine et Santé Publique)와 ARN 보조금 (ANR-18-CE14-0037 PlatForMechanics)에 의해 지원되었다. 줄리 보셔는 퐁디션 부어 라 레체쉬 메디칼 (FRM 교부번호 FDT202012010422)에서 받는 사람입니다.

<ol><li>Doolin, M. T., Moriarty, R. A., Stroka, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanosensing+of+Mechanical+Confinement+by+Mesenchymal-Like+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Mechanosensing of Mechanical Confinement by Mesenchymal-Like Cells.</a> Frontiers in Physiology. 11, (2020).</li>
<li>Wang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrix+Stiffness+Modulates+Patient-Derived+Glioblastoma+Cell+Fates+in+Three-Dimensional+Hydrogels%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Part+A%22%5BJournal%5D)">Matrix Stiffness Modulates Patient-Derived Glioblastoma Cell Fates in Three-Dimensional Hydrogels.</a> Tissue Engineering Part A. , (2020).</li>
<li>Doyle, A. D., Yamada, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanosensing+via+cell-matrix+adhesions+in+3D+microenvironments%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Cell+Research%22%5BJournal%5D)">Mechanosensing via cell-matrix adhesions in 3D microenvironments.</a> Experimental Cell Research. 343 (1), 60-66 (2016).</li>
<li>Engler, A. J., Sen, S., Sweeney, H. L., Discher, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrix+Elasticity+Directs+Stem+Cell+Lineage+Specification%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Matrix Elasticity Directs Stem Cell Lineage Specification.</a> Cell. 126 (4), 677-689 (2006).</li>
<li>Choi, J. S., Harley, B. A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+combined+influence+of+substrate+elasticity+and+ligand+density+on+the+viability+and+biophysical+properties+of+hematopoietic+stem+and+progenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">The combined influence of substrate elasticity and ligand density on the viability and biophysical properties of hematopoietic stem and progenitor cells.</a> Biomaterials. 33 (18), 4460-4468 (2012).</li>
<li>Shin, J. -W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contractile+forces+sustain+and+polarize+hematopoiesis+from+stem+and+progenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+stem+cell%22%5BJournal%5D)">Contractile forces sustain and polarize hematopoiesis from stem and progenitor cells.</a> Cell stem cell. 14 (1), 81-93 (2014).</li>
<li>Boscher, J., Guinard, I., Eckly, A., Lanza, F., Léon, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+platelet+formation+at+a+glance%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+cell+science%22%5BJournal%5D)">Blood platelet formation at a glance.</a> Journal of cell science. 133 (20), (2020).</li>
<li>Aguilar, A., Boscher, J., Pertuy, F., Gachet, C., Léon, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+culture+in+a+methylcellulose-based+hydrogel+to+study+the+impact+of+stiffness+on+megakaryocyte+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional culture in a methylcellulose-based hydrogel to study the impact of stiffness on megakaryocyte differentiation.</a> Methods in Molecular Biology. 1812, 139-153 (2018).</li>
<li>Aguilar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Importance+of+environmental+stiffness+for+megakaryocyte+differentiation+and+proplatelet+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Importance of environmental stiffness for megakaryocyte differentiation and proplatelet formation.</a> Blood. 128, 2022-2032 (2016).</li>
<li>Hitchcock, I. S., Kaushansky, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombopoietin+from+beginning+to+end%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Haematology%22%5BJournal%5D)">Thrombopoietin from beginning to end.</a> British Journal of Haematology. 165 (2), 259-268 (2014).</li>
<li>Leiva, O., Leon, C., Kah Ng, S., Mangin, P., Gachet, C., Ravid, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+extracellular+matrix+stiffness+in+megakaryocyte+and+platelet+development+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Hematology%22%5BJournal%5D)">The role of extracellular matrix stiffness in megakaryocyte and platelet development and function.</a> American Journal of Hematology. 93 (3), 430-441 (2018).</li>
<li>Jansen, L. E., Birch, N. P., Schiffman, J. D., Crosby, A. J., Peyton, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanics+of+intact+bone+marrow%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Mechanical+Behavior+of+Biomedical+Materials%22%5BJournal%5D)">Mechanics of intact bone marrow.</a> Journal of the Mechanical Behavior of Biomedical Materials. 50, 299-307 (2015).</li>
<li>Eckly, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abnormal+megakaryocyte+morphology+and+proplatelet+formation+in+mice+with+megakaryocyte-restricted+MYH9+inactivation%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Abnormal megakaryocyte morphology and proplatelet formation in mice with megakaryocyte-restricted MYH9 inactivation.</a> Blood. 113 (14), 3182-3189 (2009).</li>
<li>Eckly, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proplatelet+formation+deficit+and+megakaryocyte+death+contribute+to+thrombocytopenia+in+Myh9+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thrombosis+and+Haemostasis%22%5BJournal%5D)">Proplatelet formation deficit and megakaryocyte death contribute to thrombocytopenia in Myh9 knockout mice.</a> Journal of Thrombosis and Haemostasis. 8 (10), 2243-2251 (2010).</li>
</ol>

저자는 공개 할 것이 없습니다.

지난 10 년 동안, mechanobiology생물학은 생물학의 많은 지역에 점점 더 많은 관심을 제기했습니다. 이제 세포를 둘러싼 기계적 환경이 그들의 행동에 중요한 역할을 한다는 것을 일반적으로 인정하며, 메가카르요세포가 세포외 기계적 단서를 감지하고 반응하는 방법을 연구하는 것이 중요하다는 것을 강조합니다. 특히 대형 포유류의 궤적 뼈 내부에 위치하고 있는 조혈적 붉은 골수를 고려하는 경우, 특히 치석에서 골수 조직의강성을 정확하게 측정하는 것은 어려운 일이며, 당뇨병으로부터 더 쉽게 접근할 수 있는 골수는 본질적으로 지방분(yellow marrow)12로구성된다. 당뇨병이 본질적으로 빨간 골수를 포함하는 마우스에서 고립된 골수의 경우, 또 다른 문제는 일단 뼈에서 추출되면 조직이 응집력을 유지하지 않는다는 것입니다. 그러나, 신과 협력자는 원자력 현미경을 사용하여 마우스 diaphysis 골수 강성을 측정하고 e...

본체내 세포는 복잡한 3D 마이크로환경을 경험하고, 인접한 세포와 주변 매트릭스 1,2,3로인한 조직 및 감금으로부터의 강성을 포함하는 화학적 및 메카노물리적 단서 간의 상호작용을 받는다. 세포 행동에 대한 강성과 감금의 중요성은 지난 수십 년 동안만 인식되었습니다. 2006년, Engler 외 4의 정액 작업은 세포 분화를 위한 기계적 환경의 중요성을 강조했습니다. 저자는 세포 기질 강성의 변이가 다양한 분화 혈통을 향해 줄기 세포의 방향을 초래한다는 것을 보여주었습니다. 그 이후로, 세포 운명과 행동에 기계 단서의 영향은 점점 인식되고공부되고있다. 그것은 유기체의 가장 부드러운 조직 중 하나임에도 불구하고, 골수는 뼈 안에 갇혀 있는 3D 구조 조직을 가지고 있습니다. 골수 강성은 기술적으로 정확하게 측정하기 어렵지만 15 ~300 Pa 5,6사이에 있는 것으로 추정됩니다. 스트로마 내에서 세포는 서로 단단히 제한됩니다. 또한, 그들 대부분은 혈액 순환을 입력 하는 부비 동 성 혈관쪽으로 마이그레이션. 이러한 조건은 인접 한 셀에 추가 기계적 제약 조건을 만듭니다., 이러한 힘에 적응 해야. 기계적 단서는 메가카요세포 분화 및 프로플라틀 형성에 대한 결과가 최근에 탐구된 중요한 매개 변수를 나타냅니다. 메가카요세포는 전통적인 액체 배양에서 시험관내에서 분화할 수 있지만, 3D환경으로부터의 기계적 단서가 없기 때문에 부분적으로 생체 내에서 관찰되는 성숙도에 도달하지 못하고 있다 7. 하이드로겔에 내장된 성장하는 선조는 액체 밀리우가 부족한 3D 기계적 단서를 제공합니다.
하이드로겔은 혈액학적 분야에서 수십 년 동안 널리 사용되어 왔으며, 특히 조혈 선조를 정량화하기 위해 식민지 형성 분석에서 세포를 성장시키는 데 사용되어 왔습니다. 그러나, 이러한 하이드로겔은 3D 기계적 환경이 조혈 세포의 성숙과 분화에 미치는 생물학적 영향을 탐구하는 데 거의 사용되지 않았습니다. 지난 몇 년 동안 우리의 실험실은 메틸 셀룰로오스 기반 하이드로겔 8을 사용하여 3D 배양 모델을 개발했습니다. 이 비반응성 물리적 젤은 네이티브 거대 카르요세포 환경의 물리적 제약을 모방하는 유용한 도구입니다. 그것은 메탈옥사이드 군(-OCH3)에의해 하이드록실 잔류물(-OH)의 대체에 의해 셀룰로오스로부터 유래된다. 메틸 대체정도와 메틸셀룰로오스 농도모두 젤화되면 하이드로겔 강성을 결정한다. 이 기술의 개발 단계에서, 30~60Pa 범위의 영의 계수는 메가카요세포 성장에 가장 적합한 겔 강성임을 입증했다 9.
다음 프로토콜은 3D 메틸셀룰로오스 하이드로겔에서 마우스 거대 촉매 선조를 성장시키는 방법을 설명합니다. 이전에는 표준 액체 배양과 비교하여, 이러한 하이드로겔 배양은 메가카요퀴트 폴리플로이이드화의 정도를 증가시키고, 성숙및 세포내 조직을 향상시키고, 액체 배지 9에서다시 중단된 프로플라틀을 연장하기 위해 메가카르요사이클의 용량을 증가시킨다는 것을 이전에 보여주었다. 이 원고는 마우스 골수 Lin−세포의 분리와 3D 배양을 위한 메틸셀룰로오스 하이드로겔에 포함시키는 프로토콜과 추가 분석을 위한 프로플라틀을 생성하는 능력의 정량화를 자세히 설명합니다.

<table><tbody><tr><td>18 게이지 바늘</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1001735825</td><td></td></tr><tr><td>21 게이지 바늘</td><td>BD Microlance</td><td>301155</td><td></td></tr><tr><td>23 게이지 바늘</td><td>Terumo</td><td>AN*2332R1</td><td></td></tr><tr><td>25 게이지 neeldes</td><td>BD Microlance</td><td>300400</td><td></td></tr><tr><td>4웰 배양 접시</td><td>Thermo Scientific</td><td>144444</td><td></td></tr><tr><td>5 mL 주사기</td><td>Terumo</td><td>SS+05S1</td><td></td></tr><tr><td>Cytoclips</td><td>Microm Microtech</td><td>F/CLIPSH</td><td></td></tr><tr><td>필터 카드가 장착된 Cytofunnels</td><td>Microm Microtech</td><td>F/JC304</td><td></td></tr><tr><td>Cytospin 원심분리기</td><td>Thermo Scientific</td><td></td><td>Cytospin 4</td></tr><tr><td>Dakopen</td><td>Dako</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMEM 1x</td><td>Gibco, Life Technologies</td><td>41 966-029</td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>라이프 테크놀로지</td>스 <td>14190-094</td><td>멸균 둘베코' s 인산염 완충 식염</td></tr>수 <tr><td>EasySep 자석</td><td>줄기세포 기술</td><td>18000</td><td></td></tr><tr><td>EasySep 마우스 조혈전구세포 분리 키트</td><td>줄기세포 기술</td><td>19856A</td><td>바이오틴화 항체 (CD5,CD11b, CD19, CD45R/B220, Ly6G/C(Gr-1), TER119,7&ndash; 4) 및 streptavidin-coated magnetic beads</td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Invitrogen</td><td>15575-020</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum</td><td>Healthcare Life Science</td><td>SH30071.01</td><td></td></tr><tr><td>Luer lock 1 mL 주사기</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z551546-100EA</td><td>또는 BD MEDICAL의 309628 주사기</td></tr><tr><td>Luer lock 주사기 커넥터</td><td>Fisher Scientific</td><td>11891120</td><td></td></tr><tr><td>MC 3%</td><td>R& 앰프; D 시스템</td><td>HSC001</td><td></td></tr><tr><td>폴리리신 코팅 슬라이드</td><td>Thermo Scientific</td><td>J2800AMNZ</td><td></td></tr><tr><td>PSG 100x</td><td>Gibco, Life Technologies</td><td>1037-016</td><td>10,000 units/mL 페니실린, 10,000 &mu; g/mL 스트렙토마이신 및 29.2mg/mL 글루타민</td></tr><tr><td>쥐 혈청</td><td>줄기 세포 기술</td><td>13551</td><td></td></tr><tr><td>재조합 히루딘</td><td>트랜스지&에그레이브; ne</td><td>rHV2-Lys47</td><td></td></tr><tr><td>재조합 인간 트롬보포이에틴(rhTPO)</td><td>줄기세포 기술</td><td>2822</td><td>10,000 units/mL</td></tr><tr><td>둥근 바닥 10mL 플라스티크 튜브</td><td>Falcon</td><td>352054</td><td></td></tr><tr><td>둥근 바닥 5mL 폴리스티렌 튜브</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

세포 성숙을 개선하고 강성과 감금의 영향을 연구하기 위해 3d 메틸셀룰로오스 기반 하이드로겔의 메가카요세포 배양

Megakaryocyte Culture in 3D Methylcellulose-Based Hydrogel to Improve Cell Maturation and Study the Impact of Stiffness and Confinement

감금과 기계적 제약으로 이어지는 3D 환경은 세포 행동의 중요한 결정요인으로 점점 더 인식되고 있습니다. 따라서 3D 배양은 생체 내 상황에 더 잘 접근하기 위해 개발되었습니다. 메가카요세포는 골수(BM)에서 조혈 줄기 및 전구 세포(HSPC)와 분화한다. BM은 뼈 안에 갇혀 있는 신체의 가장 부드러운 조직 중 하나입니다. 뼈는 세포 규모에서 제대로 확장되지 않으며, 메가카요세포는 약한 강성과 높은 감금을 수반한다. 이 프로토콜은 면역 자기 분류에 의한 마우스 계보 음성(Lin-) HSPC의 회수 방법을 제시하고 메틸셀룰로오스로 구성된 3D 배지에서 성숙한 메가카요사이클로 분화한다. 메틸셀룰로오스는 메가카요세포로 반응하지 않으며 그 강성은 정상적인 골수에 맞게 조정되거나 병리학적인 섬유질 골수를 모방하기 위해 증가될 수 있다. 추가 세포 분석을 위해 메가카요세포를 복구하는 프로세스는 또한 프로토콜에 상세합니다. 프로플라츠판 확장은 3D 밀리유 내에서 방지되지만, 액체 배지에서 거대 카르요퀴트를 재중단하고 프로플라츠를 확장하는 능력을 정량화하는 방법에 대해 설명합니다. 3D 하이드로겔에서 자란 메가카요세포는 액체 밀리우에서 자란 것과 비교하여 프로플라츠를 형성하는 더 높은 용량을 가지고 있습니다. 이러한 3D 배양은 i)가 더 높은 성숙 상태에 도달하는 메가카르요세포쪽으로 선조들을 구별할 수 있게 하고, ii) 생체내에서 관찰될 수 있지만 고전 액체 배양에서 주목받지 못하는 표현형을 회수하고, iii) 3D 환경에 의해 제공되는 기계적 단서에 의해 유도된 변환 경로를 연구할 수 있다.

이 프로토콜을 사용하여 얻은 데이터는 원래 2016 년9에혈액에 게시되었습니다.
프로토콜에 따르면, 세포는 액체 또는 메틸셀룰로오스 하이드로겔 배지에서 시드되었다. 액체 매체의 세포는 모두 딱딱한 플라스틱 표면과 접촉하고 다른 세포와 언젠가 접촉하여 우물 의 바닥에 퇴적되어 있습니다. 대조적으로, 메틸셀룰로오스 하이드로겔에 내장된 세포는 겔에 균질하게 분포되고 이웃 세포로부터 분리된다(도3A). 메틸셀룰로오스 겔은 최종 농도에서 2%의 매우 약간 증가하여 액체 배양(도3B)에비해 평균 메가카요사이클지름을 매우 약간증가시킨다고보고된 9. 대조적으로, 메틸셀룰로오스 농도를 0.5% 증가시킴으로써 더 작은 평균직경(도 3B)에도시된 바와 같이...

이제 세포의 3차원 환경이 행동, 성숙 및/또는 분화에서 중요한 역할을 할 수 있음을 인정합니다. 이 프로토콜은 거대 카르요세포에 대한 물리적 봉쇄 및 기계적 제약의 영향을 연구하도록 설계된 3차원 세포 배양 모델을 설명합니다.

세포 성숙을 개선하고 강성과 감금의 영향을 연구하기 위해 3D 메틸셀룰로오스 기반 하이드로겔의 메가카요세포 배양

The 3D environment leading to both confinement and mechanical constraints is increasingly recognized as an important determinant of cell behavior. 3D ...

이 프로토콜은 네이티브 거대 카르요세포가 골수에서 그들의 행동과 성숙에 노출된 감금 및 중간 강성의 영향의 체외 평가를 허용합니다. 이 기술의 주요 장점은 세포 세포 및 세포 매트릭스 상호 작용을 제거하고 기계적 측면에 초점을 맞춘 단순화 된 모델입니다. 좋은 실험실 실습 및 멸균 작업 조건은 엄격하게 관찰되어야 합니다.실제로, 하이드로겔의 약간의 오염조차도 메가카요세포 분화에 극적인 영향을 미칠 수 있습니다. 하이드로겔 세포 배양의 단일 우물을 얻으려면 실온에서 3 % 메틸 셀룰로오스의 1 밀리리터 알리쿼트 2 개를 해동한 다음 먼저 1 밀리리터를 끌어서 메틸 셀룰로오스로 1 밀리리터 루어 잠금 주사기를 코팅한 다음 모든 것을 추방합니다. 다음으로, 동일한 주사기와 바늘을 사용하여 신선한 알리쿼트에서 메틸셀룰로오스 333 마이크로리터를 그립니다.바늘을 조심스럽게 제거 한 후, 살균 된 집게를 사용하여 주사기 의 끝에 Luer 잠금 커넥터를 나사로 고정 한 다음 두 번째 비 코팅 된 1 밀리리터 Luer 잠금 주사기를 커넥터에 부착하십시오. 마찬가지로 두 주사기 사이에 메틸 셀룰로오스를 분배하고 따로 둡니다. 다음으로, 167마이크로리터당 6개의 세포에 10배의 밀도로 집중배양배지에서 이전에 격리된 마우스 계보 음성 조혈 줄기 및 전구세포를 재중단한다.셀 서스펜션의 커넥터 및 파이펫 167 마이크로리터에서 주사기 중 하나를 커넥터에 직접 분리하는 동시에 주사기 플런저를 천천히 그리는 동시에 셀 서스펜션을 위한 공간을 마련합니다. 커넥터에 모든 셀 서스펜션을 추가한 후 플런저를 더 끌어내어 커넥터에서 서스펜션을 철회하고 두 번째 주사기를 조심스럽게 다시 연결하여 나사 스레드에서 서스펜션을 잃지 않도록 주의하십시오. 세포 현탁액으로 메틸셀룰로오스 배지를 균질화하려면 두 주사기 사이에 플런저를 10번 앞뒤로 천천히 이동한 다음 총 부피를 하나의 주사기로 끌어들이고 두 주사기를 분리하여 커넥터를 빈 상태로 둡시합니다.주사기의 내용물들을 4웰 플레이트 한 웰에 비우고 이산화탄소 5% 미만의 37도에서 플레이트를 배양합니다. 프로플라슬을 분석하기 위해, 문화의 셋째 날에, 신중하게 1 %의 PSGDMEM의 10 밀리리터를 포함하는 15 밀리리터 튜브로 모든 세포를 잘 전송합니다. 메틸셀룰로오스를 완전히 희석시키기 위해 부드럽게 파이펫팅하여 세포를 다시 중단한 다음 실온에서 300배 G에서 5분간 튜브를 원심분리합니다.상체

megakaryocyte-culture-3d-methylcellulose-based-hydrogel-to-improve

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

우리는 고분자 crowders (MMC)를 이용하여 세포 외 기질 단백질이 풍부한 세포 - 유래 매트릭스를 획득하기 위해 프로토콜을 제시한다. 또, 구조의 성숙을 유지하면서 배양 시간을 단축 차원의 Organotypic 피부 공동 배양 세대에서 MMC를 포함하는 프로토콜을 제시한다.

개선 2D 및 3D 스킨<em&gt; 체외</em거대 분자의 크라우 딩 사용&gt; 모델

이 폐 세포 외 기질에서 3 차원 세포 배양 지지체를 제작하는 방법이다. 그대로 폐 세 차원 세포의 성장을 지원할 수있는 하이드로 겔로 처리된다.

3 차원 세포 배양을위한 폐 세포 외 매트릭스에서 조정 히드로 겔

이 프로토콜 cryogelation 기술로 제작을 통합 하 여 탄력 있는 3D macroporous microcryogels의 제작을 설명 합니다. 재생 치료를 촉진 하기 위하여 쉽게 주입된 비보 수 또는 생체 외에서 높은 처리량 마약 검사에 대 한 배열로 조립 셀 로딩 시 3D microtissues 생성 됩니다.

주 사용 재생 치료와 높은 처리량 마약 검사에 대 한 3D Microtissues

여기, 우리는 쥐의 3D 문화에 대 한 프로토콜 이다, microglia, 및 oligodendrocytes를 포함 하 여 두뇌 파생 명과 셀을 제시. 1 차 세포 배양, methacrylated 히 알루 론 산 (하 마) 하이드로 겔 합성, HAMAphoto 중 합 및 셀 캡슐화 및 샘플 공초점 레이저 스캐닝 전자 현미경 이미징 처리 설명 합니다.

생체 외에서 Neuroinflammation의 모델링에 대 한 기본 Glial 세포의 3 차원 하이드로 겔 문화 개선

여기, 우리 자기 연골 같은 조직으로 dedifferentiated 인간의 관절 chondrocytes의 분화를 촉진 하는 펩 티 드 건설 기계 조립에 3D 문화 시스템을 얻기 위해 프로토콜을 제시.

3 차원 펩 티 드 건설 기계에 포유류 세포 배양

프로토콜은 차별화에 생체 재료의 강성 효과 확산의 조사와 펩타이드, 없이 투입 했다 다양 한 뻣 뻣 함과 폴 리 비닐 알코올-co-itaconic 산 hydrogels를 준비 하 여 줄기 세포입니다. hydrogels 강성 가교에 의해 통제 되었다.

폴 리 비닐 알코올-Co-Itaconic 산 Hydrogels 이종 없는 조건 하에서 다양 한 강성에 인간의 Pluripotent 줄기 세포 문화

그들은 완전 한 tunability 폴리머 백본 및 따라서 셀 microenvironment의 허용으로 재조합 단백질 엔지니어링 hydrogels는 3D 세포 배양에 대 한 유리한 있습니다. 여기, 우리 재조합 엘라 스 틴 같은 단백질 정화의 과정 및 3 차원 하이드로 겔 셀 캡슐화에의 응용을 설명합니다.

캡슐화 및 3d에서 셀의 Immunostaining에 대 한 엘라 스 틴 같은 단백질 Hydrogels의 생산

이 논문에서는 새로 설계된 3D 프린팅 인서트를 공동 배양 모델로 제시하고 내피 세포와 각질 세포 사이의 측분비 세포 간 통신 연구를 통해 검증합니다.

간단한 2D 및 3D 세포 배양이 가능하도록 설계된 혁신적인 3D 프린팅 인서트

골수 혈관 틈새의 시험관 내 모델은 중간엽 및 내피 세포를 프리캐스트 3D PEG 하이드로겔에 파종하여 설정됩니다. 틈새의 내피 네트워크, ECM 성분 및 ALP 활성은 사용된 성장 인자에 따라 다릅니다. 이 플랫폼은 진행된 암 모델에 사용할 수 있습니다.

이미징 마이크로플레이트에서 프리캐스트 폴리(에틸렌 글리콜)(PEG) 하이드로겔을 사용하여 혈관화된 골수 틈새의 간단한 설정

세포외 기질(ECM) 강성은 세포 행동의 핵심 조절 요인이지만, 근본적인 감지 및 전도 메커니즘은 여전히 명확하지 않습니다. 이를 해결하기 위해, 세포-ECM 교차 대화에 대한 이해를 진전시키기 위해 강성을 조절할 수 있는 폴리아크릴아마이드 및 실리콘 기반 기판을 생성하는 프로토콜을 제공합니다.

세포 생물학 응용을 위한 명확한 강성을 가진 폴리아크릴아마이드 및 실리콘 세포외기질 기질 생성

이 프로토콜은 메타크릴화 젤라틴(GelMA) 하이드로겔에 박힌 인간 골세포를 이용해 탈세포화된 세포외기질을 보충하여 3D 골 구조물을 제작하는 과정을 설명합니다. 이 방법은 저비용, 확장 가능, 기본 실험실 장비와 호환되어 근골격계 질환 과정을 연구할 수 있는 번역 플랫폼을 제공합니다.

인간 골격계와 탈세포화된 세포외기질을 이용한 근골격계 질환 모델링을 위한 3D 골배양 플랫폼

배우세요 3D 메틸셀룰로오스 하이드로겔에서 마우스 메가카요세포 배양법을 통해 뼈골수 환경의 강성과 감금이 세포 성숙 및 전혈소판 형성에 미치는 영향을 연구하는 방법을.

세포 성숙을 개선하고 강성과 감금의 영향을 연구하기 위해 3D 메틸셀룰로오스 기반 하이드로겔의 메가카요세포 배양

더 많은 동영상 탐색