Name: CD1d에 의해 Glycolipid의 항원 프레 젠 테이션 및 NKT 세포 활성화의 치료 가능성 : 인터뷰 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-12-31T19:27:00.000+00:00
Duration: 18 min 8 s
Description: 학습하세요 CD1D 테트라머 기술을 이용한 NKT 세포 활성화 메커니즘과 당지질 항원 인식 원리. 이 연구는 암과 자가면역질환 치료 전략 수립에 중요한 통찰을 제공합니다.

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<ol><li>Khurana, A., Kronenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Method+for+Production+of+Recombinant+CD1d+Protein+in+Insect+Cells%5BTitle%5D)+AND+%2212%2F10%2F2007%29+Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A Method for Production of Recombinant CD1d Protein in Insect Cells.</a> 12/10/2007) Journal of Visualized Experiments. , Forthcoming.</li>
</ol>

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cd1d에 의해 glycolipid의 항원 프레 젠 테이션 및 nkt 세포 활성화의 치료 가능성 : 인터뷰

Interview: Glycolipid Antigen Presentation by CD1d and the Therapeutic Potential of NKT cell Activation

자연 킬러 T 세포 (NKT)는 암, autioimmune 질병의 조절, 전염성 대리인의 통관 및 artheriosclerotic의 plaques의 발전에 면역 반응의 중요한 determinants 있습니다. 이 인터뷰에서, 미치 Kronenberg는 NKT 세포가 glycolipid 항원 활성화되는 메커니즘을 통해 이해하기 위해 그의 연구실의 노력에 대해 설명합니다. 이러한 연구의 중심은 CD1d입니다 - NKT 세포에 glycolipids를 제공 항원 분자를 발표. CD1d tetramer 기술 Kronenberg 연구실에서 개발한 기술의 출현은 특정 glycolipid 반응 T 세포의 하위 집합의 분류 및 식별을 위해 중요합니다. 미치 glycolipid agonists가 암 환자에서 NKT 세포를 활성화하는 치료 대리인으로 사용되고있는 방법과 CD1d tetramers가 glycolipid 작용제 치료 다음과 같은 생체내에서 NKT 세포 인구의 상태를 평가하는 데 사용할 수 방법을 설명합니다. 이러한 agonists를 사용하여 지속적인 임상 시험의 현재 상태가 가까운 장래에 중요성을 신흥됩니다 면역학 분야의 영역에 대한 미치의 예측뿐만 아니라 설명합니다.

자연 킬러 T 세포 (NKT)는 암, autioimmunity 규제, 감염의 통관 및 artheriosclerotic plaques의 개발에 대한 면역 반응의 중요한 determinants 있습니다. 이 인터뷰에서, 미치 Kronenberg는 NKT 세포가 glycolipid 항원 활성화되는 메커니즘을 통해 이해하기 위해 그의 연구실의 노력에 대해 설명합니다.

CD1d에 의해 Glycolipid의 항원 프레 젠 테이션 및 NKT 세포 활성화의 치료 가능성 : 인터뷰

자연살해 T 세포(Natural Killer T cells, NKT)는 암에 대한 면역 반응, 자가면역 질환의 조절, 감염성 질환의 제거를 결정짓는 핵심적인 요소입니다.

안녕하세요, 저는 La Jolla Institute for Allergy and Immunology의 Mitchell Cronenberg입니다. 저는 현재 회장이자 과학 책임자로 재직 중이지만, 매우 활발하게 연구실을 운영하고 있습니다. 오늘 저희가 다룰 내용은 저희가 보유한 기술 중 하나인 CD 1D tetramer에 관한 것입니다. 저희 연구실의 대부분의 연구는 CD 1D 반응성 T 세포와 관련되어 있습니다.이 세포들은 펩타이드가 아닌 당지질을 인식한다는 점에서 독특합니다. 또한 제 연구실의 또 다른 분과는 완전히 다른 주제인 점막 면역 체계와 그 조절에 관심을 두고 있습니다. CD1 분자는 항원 제시 분자로, 이는 항원이나 단백질 조각 또는 기타 분자에 결합하여 T 세포가 인식할 수 있도록 유지하는 역할을 함을 의미합니다.항원 제시 분자는 크게 두 가지 종류로 나뉩니다. 펩타이드를 유지하거나 제시하는 분자가 있으며, 지질 및 당지질을 유지하는 분자가 있습니다. 그리고 CD1 분자가 바로 지질과 당지질을 유지하는 역할을 합니다.그것이 이들의 기능이며, 이들은 이러한 지질 및 당지질을 T 세포에게 제시합니다. CD1 분자에는 사실 CD1A, B, C, D의 네 가지 종류가 있습니다. 여기서 우리는 특히 CD1D에 집중하는데, CD1D는 마우스 모델이 존재한다는 점 등의 이유로 아마도 가장 잘 연구되었을 것입니다. CD1D는 천연 킬러 T 세포라고 불리는 특정 종류의 T 세포에 당지질을 제시하며, 이 세포는 선천성 및 적응성 면역 반응의 특징을 모두 가진 특이한 백혈구입니다.제시된 당지질은 자가 당지질일 수 있으나 현재로서는 그 특성이 명확히 밝혀지지 않았으며, 혹은 미생물 당지질일 수도 있습니다. 또한, 우리가 알고 있는 제시된 당지질은 두 가지 공급원에서 유래합니다. 그중 하나는 FMS 박테리아라고 불리는 것으로, 아마도 생물권에서 가장 풍부한 박테리아일 것입니다.이들은 바다에 살기도 하고, 식물이나 토양 속에 살기도 합니다. 하지만 이들이 많은 사람을 병들게 하지는 않습니다. 우리는 이러한 박테리아와 함께 살아가는 것에 매우 익숙해져 있다고 생각합니다.우리가 알고 있는 두 번째 범주는 다이글리세롤(diglycerol)을 포함하는 당지질이라는 다른 유형의 당지질입니다. 이러한 당지질은 라임병을 일으키는 Borrelia burgdorferi와 아마도 다른 많은 병원균에서 발견됩니다. 우리는 현재 이러한 당지질

interview-glycolipid-antigen-presentation-cd1d-therapeutic-potential

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

곤충 세포를 준비하고 mCD1d tetramers를 생성하는 재조합 mCD1d의 proteinand의 생산의 목적으로 baculovirus으로 그들을 감염하는 방법.

곤충 세포에서 재조합 단백질의 생산 mCD1d하는 방법.

여기 인공 항원 제시 세포 (aAPC)를 사용하여 대량 T 세포 인구에서 인간의 NKT 세포를 활성화하고 확장하는 방법을 설명합니다. CD1d 기반 aAPC의 사용은 기능 NKT 세포의 높은 숫자를 생성하기위한 표준화 된 방법을 제공한다.

인공 항원은 세포 (aAPC) 중재의 활성화와 자연 킬러 T 세포의 확장을 제시

뚜렷한 수지상 세포 부분 집합은 림프 기관에서 드문 집단으로 존재하므로 면역학 실험을 위한 충분한 수와 순도로 분리하기가 어렵습니다. 여기에서는 현재 알려진 마우스 비장 수지상 세포의 모든 주요 부분 집합을 분리하기 위한 고효율, 고수율 방법에 대해 설명합니다.

마우스 수지상 세포 하위 집합의 분리를위한 효율적이고 높은 수율 방법

간단하고 신뢰할 수있는 방법은 상이한 NK 세포의 서브 세트 내의 탈과립, 사이토 카인 및 케모카인 생산 등의 NK 세포의 기능 세트를 분석하기 위해 여기에 설명된다.

흐름 NK 세포의 기능을 모니터링 분석을 기반 세포 계측법

암세포에 의한 자연살해(NK) 세포 매개 박멸의 회피는 암 개시 및 진행에 중요하다. 여기에서, 우리는 간 종양 세포를 향해 NK 세포 매개 세포 독성을 평가하기 위하여 2개의 비 방사능 기지를 둔 프로토콜을 제시합니다. 또한 NK 세포 마이그레이션을 분석하기 위해 세 번째 프로토콜이 제시됩니다.

간 종양 세포의 맥락에서 자연 킬러 세포 매개 세포 독성 및 이동의 측정

인간 자연 킬러 세포에서 치료 항체에 의한 FcγRIIIa 구동 이벤트를 연구하기 위한 프로토콜이 여기에 설명되어 있다. 이 인공 자극 플랫폼은 결합에 관여하는 항체의 FcγRIIa 및 Fc 부분에 의해 매개되는 디그라니션, 케모킨/사이토카인 생성, 시그널링 경로 와 같은 다운스트림 이펙터 기능의 심문을 허용합니다.

치료 항체의 존재에 FcγRIIIa 참여에 의해 구동 인간 자연 킬러 세포 이벤트의 평가

우리는 인간 1 차급성 골수성 백혈병 (AML) 견본에 있는 NKG2D 리간드 (NKG2DL) 검출을 위한 2개의 다른 염색 프로토콜을 제시합니다. 첫 번째 접근법은 융합 단백질을 기반으로 하며, 알려진 모든 잠재적으로 알려지지 않은 리간드를 인식할 수 있으며, 두 번째 프로토콜은 다중 항 NKG2DL 항체의 첨가에 의존한다.

급성 골수성 백혈병의 대량 하위 집단으로부터 줄기 세포를 구별하기 위해 NKG2D 리간드 표면 검출의 두 개의 흐름 세포 측정 접근법

우리는 마우스 비장에서 불변 자연 킬러 T (iNKT) 세포를 풍부하게하고 체외 및 생체 내 연구에 적합한 숫자로 시험관 내에서 확장하기 위해 신속하고 강력한 프로토콜을 설명합니다.

체외 및 생체 내 연구를 위한 마우스 불변 천연 킬러 T 세포의 정화 및 확장

이 프로토콜은 전사 인자 PU.1, IRF8 및 BATF3의 강제 발현을 통해 마우스 암세포를 종양 미세 환경 내에서 유형 1 수지상 유사 세포로 생 체 내 재프로그래밍하는 것을 설명합니다.

종양 세포를 제1형 기존의 수지상 세포 유사 세포로 다루기 쉬운 생체 내 재프로그래밍

이 프로토콜은 생세포 영상과 유세포분석을 사용하여 인간 자연 살해 세포의 자연 키메라 항원 매개 매개 항체 의존성 세포독성을 일관되게 측정하기 위한 표준화된 시험 관 내 워크플로우를 제공합니다.

키메라 항원 수용체와 치료용 항체에 의해 증강되는 NK 세포 독성을 생세포 영상 및 유동 세포분석을 이용해 정량화합니다

학습하세요 CD1D 테트라머 기술을 이용한 NKT 세포 활성화 메커니즘과 당지질 항원 인식 원리. 이 연구는 암과 자가면역질환 치료 전략 수립에 중요한 통찰을 제공합니다.

CD1d에 의해 Glycolipid의 항원 프레 젠 테이션 및 NKT 세포 활성화의 치료 가능성 : 인터뷰

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