Production of High-Titer Recombinant Newcastle Disease Virus from Allantoic Fluid

Jacob G. E. Yates; Alexander Leacy; Phuc H. Pham; Nicole Zielinska; Emily A. Tusnadi; Leonardo Susta; Sarah K. Wootton

doi:10.3791/63817

Allantoic Fluid로부터의 고역가 재조합 뉴캐슬병 바이러스의 생산

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Cancer Research

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Production of High-Titer Recombinant Newcastle Disease Virus from Allantoic Fluid

Allantoic Fluid로부터의 고역가 재조합 뉴캐슬병 바이러스의 생산

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07:24 min

May 25, 2022

DOI: 10.3791/63817-v

Jacob G. E. Yates¹, Alexander Leacy¹, Phuc H. Pham¹, Nicole Zielinska¹, Emily A. Tusnadi¹, Leonardo Susta¹, Sarah K. Wootton¹

¹Department of Pathobiology,University of Guelph

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

여기에서 우리는 고역가 재조합 뉴캐슬병 바이러스의 생산, 정제 및 정량화를 위한 상세한 절차를 제공한다. 이 프로토콜은 지속적으로 > 6 × 10,9 플라크 형성 단위 / mL를 산출하여 생체 내 동물 연구에 적합한 바이러스 양을 제공합니다. 생체내 안전성을 보장하기 위한 추가의 품질 관리 분석법이 기재되어 있다.

이 프로토콜은 뉴캐슬병 바이러스를 생산하는 데 사용되는 기술을 간략하게 설명하여 쥐 및 햄스터 및 양과 같은 다른 동물에게 안전하게 투여 할 수 있도록합니다. 접선 유동 여과를 사용하면 원심분리 공정만 사용하는 기존 절차에 비해 대량의 시작 부피를 보다 효율적으로 처리할 수 있습니다. 이는 몇 가지 복잡한 단계가 포함된 긴 절차로, 시간 관리가 문제가 될 수 있습니다.

모든 잠재적 인 일시 중지 단계를 식별하여 기술을 적절하게 분할하여 스트레스를 최소화 할 수 있도록하는 것이 좋습니다. 이 절차를 시연하는 것은 내 실험실의 연구 조교 인 알렉스 (Alex)가 될 것입니다. 뉴캐슬병 바이러스 또는 NDV의 정제를 위해, 먼저, 이를 통해 50 밀리리터의 PBS를 실행함으로써 이전에 설정된 실험 시스템을 프라임화한다.

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