Name: 알레르기 성 접촉 피부염의 뮤린 모델로서의 접촉 과민증 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-09-26T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 25 s
Description: 배우세요 생쥐 접촉 과민증 실험 방법으로 알레르기 접촉 피부염 면역 메커니즘을 연구하세요. 이 기법은 귀 부종 측정과 세포 분석을 통해 T세포 의존 면역 반응을 평가하여 새로운 치료법 개발에 활용됩니다.

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<ol><li>Nosbaum, A., Vocanson, M., Rozieres, A., Hennino, A., Nicolas, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allergic+and+irritant+contact+dermatitis%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Allergic and irritant contact dermatitis.</a> European Journal of Dermatology. 19 (4), 325-332 (2009).</li>
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<li>Takeyoshi, M., Iida, K., Suzuki, K., Yamazaki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skin+sensitization+potency+of+isoeugenol+and+its+dimers+evaluated+by+a+non-radioisotopic+modification+of+the+local+lymph+node+assay+and+guinea+pig+maximization+test%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Skin sensitization potency of isoeugenol and its dimers evaluated by a non-radioisotopic modification of the local lymph node assay and guinea pig maximization test.</a> Journal of Applied Toxicology. 28 (4), 530-534 (2008).</li>
<li>Nakamura, K., Aizawa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+the+genetic+control+of+picryl+chloride+contact+hypersensitivity+reaction+in+inbred+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">Studies on the genetic control of picryl chloride contact hypersensitivity reaction in inbred rats.</a> Transplantation Proceedings. 13 (2), 1400-1403 (1981).</li>
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<li>Wang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Langerin+expressing+cells+promote+skin+immune+responses+under+defined+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Langerin expressing cells promote skin immune responses under defined conditions.</a> Journal of Immunology. 180 (7), 4722-4727 (2008).</li>
<li>Wang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD4%2B+Th1+and+CD8%2B+type+1+cytotoxic+T+cells+both+play+a+crucial+role+in+the+full+development+of+contact+hypersensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">CD4+ Th1 and CD8+ type 1 cytotoxic T cells both play a crucial role in the full development of contact hypersensitivity.</a> Journal of Immunology. 165 (12), 6783-6790 (2000).</li>
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<li>Peszkowski, M. J., Warfvinge, G., Larsson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allergic+and+irritant+contact+responses+to+DNFB+in+BN+and+LEW+rat+strains+with+different+TH1%2FTH2+profiles%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Dermato-Venereologica%22%5BJournal%5D)">Allergic and irritant contact responses to DNFB in BN and LEW rat strains with different TH1/TH2 profiles.</a> Acta Dermato-Venereologica. 74 (5), 371-374 (1994).</li>
<li>Henningsen, S. J., Mickell, J., Zachariae, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+kinins+in+dinitrochlorobenzene+contact+dermatitis+of+guinea-pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Allergologica%22%5BJournal%5D)">Plasma kinins in dinitrochlorobenzene contact dermatitis of guinea-pigs.</a> Acta Allergologica. 25 (5), 327-331 (1970).</li>
<li>Maibach, H. I., Maguire, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elicitation+of+delayed+hypersensitivity+%28DNCB+contact+dermatitis%29+in+markedly+panleukopenic+guinea+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Investigative+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Elicitation of delayed hypersensitivity (DNCB contact dermatitis) in markedly panleukopenic guinea pigs.</a> The Journal of Investigative Dermatology. 41, 123-127 (1963).</li>
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<li>Jin, H., He, R., Oyoshi, M., Geha, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+atopic+dermatitis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Investigative+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Animal models of atopic dermatitis.</a> The Journal of Investigative Dermatology. 129 (1), 31-40 (2009).</li>
<li>Li, Y. Z., Lu, X. Y., Jiang, W., Li, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-inflammatory+effect+of+qingpeng+ointment+in+atopic+dermatitis-like+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative%22%5BJournal%5D)">Anti-inflammatory effect of qingpeng ointment in atopic dermatitis-like murine model.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative. 2013, 907016(2013).</li>
<li>Hoggatt, J., Hoggatt, A. F., Tate, T. A., Fortman, J., Pelus, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bleeding+the+laboratory+mouse%3A+Not+all+methods+are+equal%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Hematology%22%5BJournal%5D)">Bleeding the laboratory mouse: Not all methods are equal.</a> Experimental Hematology. 44 (2), 132-137 (2016).</li>
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<li>Vlab, A. Hemocytometer - Counting of Cells. Amrita University. , Available from: 
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<li>Majewska-Szczepanik, M., Strzepa, A., Marcińska, K., Wen, L., Szczepanik, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epicutaneous+immunization+with+TNP-Ig+and+Zymosan+induces+TCR%CE%B1%CE%B2%2B+CD4%2B+contrasuppressor+cells+that+reverse+skin-induced+suppression+via+IL-17A%5BTitle%5D)+AND+%22International+Archives+of+Allergy+and+Immunology%22%5BJournal%5D)">Epicutaneous immunization with TNP-Ig and Zymosan induces TCRαβ+ CD4+ contrasuppressor cells that reverse skin-induced suppression via IL-17A.</a> International Archives of Allergy and Immunology. 164 (2), 122-136 (2014).</li>
<li>Majewska-Szczepanik, M., Zemelka-Wiącek, M., Ptak, W., Wen, L., Szczepanik, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epicutaneous+immunization+with+DNP-BSA+induces+CD4%2B+CD25%2B+Treg+cells+that+inhibit+Tc1-mediated+CS%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology+and+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Epicutaneous immunization with DNP-BSA induces CD4+ CD25+ Treg cells that inhibit Tc1-mediated CS.</a> Immunology and Cell Biology. 90 (8), 784-795 (2012).</li>
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<li>Colvin, R. B., Dvorak, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+clotting+system+in+cell-mediated+hypersensitivity.+II.+Kinetics+of+fibrinogen%2Ffibrin+accumulation+and+vascular+permeability+changes+in+tuberculin+and+cutaneous+basophil+hypersensitivity+reactions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Role of the clotting system in cell-mediated hypersensitivity. II. Kinetics of fibrinogen/fibrin accumulation and vascular permeability changes in tuberculin and cutaneous basophil hypersensitivity reactions.</a> Journal of Immunology. 114, 377-387 (1975).</li>
<li>Szczepanik, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+contact+sensitivity+in+non-obese+diabetic+%28NOD%29+mice+by+innate+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Contact+Dermatitis%22%5BJournal%5D)">Regulation of contact sensitivity in non-obese diabetic (NOD) mice by innate immunity.</a> Contact Dermatitis. 79 (4), 197-207 (2018).</li>
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<li>Tsuji, R. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((B+cell-dependent+T+cell+responses%3A+IgM+antibodies+are+required+to+elicit+contact+sensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">B cell-dependent T cell responses: IgM antibodies are required to elicit contact sensitivity.</a> The Journal of Experimental Medicine. 196 (10), 1277-1290 (2002).</li>
<li>Campos, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cutaneous+immunization+rapidly+activates+liver+invariant+Valpha14+NKT+cells+stimulating+B-1+B+cells+to+initiate+T+cell+recruitment+for+elicitation+of+contact+sensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">Cutaneous immunization rapidly activates liver invariant Valpha14 NKT cells stimulating B-1 B cells to initiate T cell recruitment for elicitation of contact sensitivity.</a> The Journal of Experimental Medicine. 198 (12), 1785-1796 (2003).</li>
<li>Rühl-Muth, A. C., Maler, M. D., Esser, P. R., Martin, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Feeding+of+a+fat-enriched+diet+causes+the+loss+of+resistance+to+contact+hypersensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22Contact+Dermatitis%22%5BJournal%5D)">Feeding of a fat-enriched diet causes the loss of resistance to contact hypersensitivity.</a> Contact Dermatitis. 85 (4), 398-406 (2021).</li>
<li>Bour, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((histocompatibility+complex+class+I-restricted+CD8%2B+T+cells+and+class+II-restricted+CD4%2B+T+cells%2C+respectively%2C+mediate+and+regulate+contact+sensitivity+to+dinitrofluorobenzene%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">histocompatibility complex class I-restricted CD8+ T cells and class II-restricted CD4+ T cells, respectively, mediate and regulate contact sensitivity to dinitrofluorobenzene.</a> European Journal of Immunology. 25 (11), 3006-3010 (1995).</li>
<li>Majewska-Szczepanik, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obesity+aggravates+contact+hypersensitivity+reaction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Contact+Dermatitis%22%5BJournal%5D)">Obesity aggravates contact hypersensitivity reaction in mice.</a> Contact Dermatitis. 87 (1), 28-39 (2022).</li>
<li>Katagiri, K., Arakawa, S., Kurahashi, R., Hatano, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+contact+hypersensitivity+in+diet-induced+obese+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dermatological+Science%22%5BJournal%5D)">Impaired contact hypersensitivity in diet-induced obese mice.</a> Journal of Dermatological Science. 46 (2), 117-126 (2007).</li>
<li>Bouloc, A., Cavani, A., Katz, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contact+hypersensitivity+in+MHC+class+II-deficient+mice+depends+on+CD8+T+lymphocytes+primed+by+immunostimulating+Langerhans+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Investigative+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Contact hypersensitivity in MHC class II-deficient mice depends on CD8 T lymphocytes primed by immunostimulating Langerhans cells.</a> The Journal of Investigative Dermatology. 111 (1), 44-49 (1998).</li>
<li>Martin, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peptide+immunization+indicates+that+CD8%2B+T+cells+are+the+dominant+effector+cells+in+trinitrophenyl-specific+contact+hypersensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Investigative+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Peptide immunization indicates that CD8+ T cells are the dominant effector cells in trinitrophenyl-specific contact hypersensitivity.</a> The Journal of Investigative Dermatology. 115 (2), 260-266 (2000).</li>
<li>Vennegaard, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epicutaneous+exposure+to+nickel+induces+nickel+allergy+in+mice+via+a+MyD88-dependent+and+interleukin-1-dependent+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Contact+Dermatitis%22%5BJournal%5D)">Epicutaneous exposure to nickel induces nickel allergy in mice via a MyD88-dependent and interleukin-1-dependent pathway.</a> Contact Dermatitis. 71 (4), 224-232 (2014).</li>
</ol>

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CHS는 합텐을 통해 유도되며, 이는 피부의 자체 단백질 항원에 결합하여 신 항원을 생성합니다. CHS는 순환 항원 특이적 CHS-이펙터 T 세포의 국소 혈관외 모집에 의해 매개되며, 이는 도전된 조직에서 팽윤을 초래하고, 동일한 합텐6에 이차 피부의 노출 후 24 h를 피크로 한다. 조직의 팽윤은 주로 백혈구 및 백혈구 의존성 피브린 침착(24)의 침윤에 의해 야기된다. 이러한 변화는 마이크로미터로 감지할 수 있으며, 얕텐 감작 및 도전 마우스와 가짜 감작 및 도전 마우스의 귀 붓기를 측정할 수 있습니다.
CHS는 또한 귀 무게의 비교에 의해 결정될 수 있다. 그런 다음, 귀 중량 결정에 사용되는 귀 펀치가 추가 테스트에 사용될 수 있습니다. 염증이있는 귀에 침윤 된 세포는 사이토 카인 생성 T 림프구와 MPO 양성 호중구로 구성됩니다. 귀 조직 균질액에서, 다양한 파라미터, ...

An erratum was issued for: <a href="https://www.jove.com/t/64329">Contact Hypersensitivity as a Murine Model of Allergic Contact Dermatitis</a>. The Protocol and Representative Results sections were updated.
Step 3.2.1 of the Protocol has been updated from:
On day "4", prepare 0.4% hapten: TNCB in an acetone-ethanol mixture (ratio 1:1). Prepare the solution just before use in a glass vial and protect it from light by covering the vial with aluminum foil.
to:
On day "4", prepare 0.4% hapten: TNCB in an acetone: olive oil mixture (ratio 1:1). Prepare the solution just before use in a glass vial and protect it from light by covering the vial with aluminum foil.
Figure 1 of the Representative Results has been updated from:
<img alt="Mouse ear thickness measurement experiment diagram; TNCB-induced dermatitis comparison." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64329/64329fig01.jpg" data-altupdatedat="1761830439000" data-alt="Figure 1"> 
Figure 1: Induction of CHS. Sensitization, challenge, and ear measurement. Abbreviations: CHS = contact hypersensitivity reaction; TNCB = 2,4,6-trinitrochlorobenzene. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64329/64329fig01large.jpg" target="_blank">Please click here to view a larger version of this figure.</a>
to:
<img alt="Mice sensitization process; diagram of control/test groups, TNCB application, ear thickness measurement." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64329/64329fig1v2.jpg" data-altupdatedat="1761830439000" data-alt="Figure 1"> 
Figure 1: Induction of CHS. Sensitization, challenge, and ear measurement. Abbreviations: CHS = contact hypersensitivity reaction; TNCB = 2,4,6-trinitrochlorobenzene. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64329/64329fig1v2large.jpg" target="_blank">Please click here to view a larger version of this figure.</a>
Figure 2 of the Representative Results has been updated from:
<img alt="CHS induction in mice using TNCB, diagram showing sensitization, i.v. cell transfer, ear measurement." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64329/64329fig02.jpg" data-altupdatedat="1761830439000" data-alt="Figure 2"> 
Figure 2: Adoptive transfer of the CHS-effector cells. Abbreviations: ALNs =axillary and inguinal lymph nodes; CHS = contact hypersensitivity reaction; i.v. = intravenously; SPLs = spleens; TNCB = 2,4,6-trinitrochlorobenzene. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64329/64329fig02large.jpg" target="_blank">Please click here to view a larger version of this figure.</a>
to:
<img alt="Mouse sensitization and TNCB application diagram; CHS study setup with control and test groups." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64329/64329fig2v2.jpg" data-altupdatedat="1761830439000" data-alt="Figure 2"> 
Figure 2: Adoptive transfer of the CHS-effector cells. Abbreviations: ALNs =axillary and inguinal lymph nodes; CHS = contact hypersensitivity reaction; i.v. = intravenously; SPLs = spleens; TNCB = 2,4,6-trinitrochlorobenzene. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64329/64329fig2v2large.jpg" target="_blank">Please click here to view a larger version of this figure.</a>

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/64329">Contact Hypersensitivity as a Murine Model of Allergic Contact Dermatitis</a>. The Protocol&#160;and Representative Results sections were updated.

Erratum: Contact Hypersensitivity as a Murine Model of Allergic Contact Dermatitis

알러지성 접촉성 피부염(ACD)은 합텐(haptens)이라고 불리는 저분자량 화학물질에 노출되어 발생하는 IV형 과민반응으로 인한 선진국에서 흔히 나타나는 피부 염증성 질환이다. 인간에서 접촉 감작을 일으키는 물질에는 화장품에 존재하는 중금속 이온 (크롬, 니켈, 철, 코발트), 테레빈 유, 향료, 염료 및 방부제 (예 : 파라페닐렌디아민), 일부 약물 (예 : 네오 마이신, 벤조카인), β-락탐 항생제 (즉, 페니실린), 식물에 의해 생성 된 화학 물질 (펜타 데카카테콜, 옻 아이비에 존재하는 물질) 및 사진 산업에서 사용되는 하이드로 퀴논 1,2 . ACD 병인학은 산업에서만 100,000 개 이상의 화학 물질이 사용되고 매년 2,000 개의 새로운 화학 물질이 합성되므로 매우 높습니다. 현재까지 접촉 합텐 / 알레르겐 일 수있는 3,700 개 이상의 분자가 확인되었습니다3. 접촉 과민 반응 (CHS)은 마우스, 기니아 피그 및 래트에서 연구 할 수있는 ACD의 실험 모델이며 유기 용매 4,5,6에 용해 된 반응성 화학 합텐의 국소 피부 적용에 의해 유도 될 수 있습니다. 이 연구는 다양한 테스트로 측정하고 정량화 할 수있는 마우스의 CHS 반응을 연구하는 데 도움이되는 객관적인 실험실 방법을 설명하는 것을 목표로합니다.
CHS는 감작(유도) 및 이펙터(챌린지) 단계로 구성됩니다. 동물 모델에서 합텐은 먼저 신체의 단백질에 공유적으로 결합하여 신 항원을 만듭니다. 감작 단계 동안, 활성화된 각질세포는 전염증성 사이토카인-종양 괴사 인자 α(TNF-α) 및 인터루킨 1β(IL-1β)7을 생성함으로써 피부 수지상 세포(sDCs)의 이동 및 성숙을 촉진한다. 표피 랑게르한스 세포 (LCs)는 CHS 유도 및 이펙터 단계8 동안 항원을 존재한다. 감작 동안 합텐에 노출된 LCs는 조절 및 이펙터 세포 둘 다의 유도를 촉진한다(9). 여러 연구로부터의 증가하는 증거는 CHS 반응이 CD4+ MHC 클래스 II 제한 Th1 세포 중 어느 하나에 의해 매개될 수 있고, 특징적인 염증 침윤물을 채용하기 위해 인터페론 γ(IFN-γ)을 국부적으로 방출할 수 있고, IFN-γ을 방출할 수 있지만 대부분 각질세포에 대한 세포독성 손상을 매개할 수 있는 CD8+ MHC 클래스 I-제한 Tc1 림프구, 그리고 현재 또한 인터루킨 17(IL-17)-생산 Th17 세포(10), 11.
다양한 종 12,13,14 및 합텐을 채용하는 몇몇 상이한 CHS 모델이 개발되었다 (상이한 합텐, 용매 및 적용 시간의 상세한 비교는 표 1에 요약된다). 자주 사용되는 실험실 종 인 마우스는 CHS를 연구 할 때 몇 가지 이점을 제공합니다. 다른 종에 비해 마우스들 사이에서 더 많은 균주, 녹아웃 (KO) 및 트랜스제닉 동물이 있으며, 이는 이들을 매우 매력적인 동물로 만든다15. 또한, CHS 모델은 많은 동물을 필요로하며, 마우스는 여기에서 더 경제적입니다. 동물 모델은 모든 측면에서 ACD를 모방하지 않으며; 특히, 그들은 인간에게 흔하지 않은 딱딱함과 절망을 보여줍니다16,17. 만성 질환의 특징은 주로 기술된 모델이 장기간 동안 합텐의 적용을 가정하지 않기 때문에 재현하기가 어렵다. 그러나, ACD의 많은 중요한 측면들이 재현된다는 것이 여기에서 확인되었다. 또한 인간과 마찬가지로 이러한 특징은 국소 알레르기 반응과 관련이 있음이 밝혀졌습니다. 이 프로토콜에 설명 된 합텐, 용매 및 그 적용의 선택은 결과가 수많은 시험관 내 테스트에 의해 확인되었으며 현재 버전이 확립 될 때까지 수년 동안 실험실에서 테스트되고 수정되었다는 사실에 의해 결정되었습니다. 뮤린 모델은 ACD의 발달에 관여하는 세포 서브셋 또는 사이토카인의 분석을 허용하며 새로운 치료법의 전임상 평가에 필수적이다.

<table><tbody><tr><td>70% 에탄올</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>65350-M</td><td>표면 소독용</td></tr><tr><td>96-웰 플랫 바닥 플레이트, 폴리프로필렌</td><td>Greiner Bio-One GmbH, 크렘스뮌스터, 오스트리아</td><td>MPO</td><td>및 Evans 파란색 측정 655101 - 플레이트는 결합 용량이 낮은 폴리프로필렌으로 만들어져야 하므로 단백질이나 DNA가</td></tr><tr><td>아세톤(ACS 시약, &ge; 99.5%)</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>179124</td><td></td></tr><tr><td>알루미늄 호일</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>Z185140</td><td></td></tr><tr><td>분석 저울</td><td>Sartorius Weighing Technology GmbH, Goettingen, Germany</td><td>PRACTUM224-1S, 29105177</td><td></td></tr><tr><td>Automated</td><td>Tissue Processor MediMeas Instruments, Sarsehri, Haryana, India</td><td>MTP-E-212</td><td>파라핀</td></tr><tr><td>BD Vacutainer SST II Advance (혈청 채취를 위한 젤이 있는 튜브)</td><td>Becton Dickinson (BD), Franklin Lakes, NJ, USA</td><td>BD</td><td></td></tr> 366882 <tr><td>단백질 측정을 위한 Bicinchoninic acid kit</td><td>Merck KGaA, Darmstadt, Germany</td><td>BCA1-1KT</td><td></td></tr><tr><td>비오틴 쥐 안티 마우스 IgG1</td><td>Becton Dickinson (BD Biosciences), Franklin Lakes, NJ, USA</td><td>553441</td><td></td></tr><tr><td>BSA (소 혈청 알부민)</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>A9418</td><td>단백질 분석 및 분석, 2 mg / mL</td></tr><tr><td>세포 여과기, 공극 크기 70 &mu; m</td><td>BIOLOGIX, 중국</td><td>15-1070</td><td>50 mL 튜브에 적합</td></tr><tr><td>Coverslip</td><td>VWR, Radnor, Pennsylvania, United States</td><td>631-1583</td><td>24 mm, 그러나 다른 크기의</td></tr><tr><td>일회용 피펫 사용 가능 용량 : 5 mL, 10 mL, 25 mL</td><td>Merck KGaA, Darmstadt, Germany</td><td>Z740301, Z740302, Z740303</td><td></td></tr><tr><td>DPBS (Dulbecco & prime; s 인산염 완충 식염수)</td><td>ThermoFisher Scientific,&nbsp; Waltham, Massachusetts, USA</td><td>14190144</td><td>칼슘 없음, 마그네슘 없음, 포유류 세포 배양</td></tr><tr><td>DPX Mountant for histology</td><td>Merck KGaA, Darmstadt, Germany</td><td>6522</td><td>H-E용 마운팅 미디어, 다른 용도로도 사용할 수 있습니다. 예를 들어, Canada balsam</td></tr><tr><td>Dumont 5 tweezers - straight</td><td>Animalab, Poznan, Poland</td><td>11251-10FST</td><td>마우스 시술을 위한 수술 기구(멸균되어야 함)</td></tr><tr><td>Dumont 7 핀셋 - 구부러짐</td><td>Animalab, 포즈난, 폴란드</td><td>11272-50FST</td><td>마우스 시술용 수술 기구(멸균해야 함)</td></tr><tr><td>Eosin Y solution, alcoholic</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>HT110116</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf Safe-Lock Tubes 1.5 mL</td><td>Eppenforf, 독일</td><td>3,01,20,086</td><td>폴리프로필렌</td></tr><tr><td>Eppendorf Safe-Lock Tubes, 2.0 mL</td><td>Eppenforf, 독일</td><td>3,01,20,094</td><td>폴리프로필렌, 둥근 바닥(균질화 비드가 쉽게 움직일 수 있음)</td></tr><tr><td>에탄올 100%(절대 알코홀)</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>1.07017</td><td></td></tr><tr><td>에탄올 96%</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>1.59010</td><td></td></tr><tr><td>Evans blue</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>E2129</td><td></td></tr><tr><td>FBS(소 태아 혈청)</td><td>ThermoFisher Scientific, Waltham, Massachusetts, USA</td><td></td><td></td>A3160802</tr><tr><td>포르말린 용액, 중성 완충, 10%</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>HT501128</td><td></td></tr><tr><td>포름아미드 99.5% (GC)</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>F7503</td><td></td></tr><tr><td>냉동고 -20 &deg; C</td><td>Bosch, 독일</td><td>GSN54AW30</td><td></td></tr><tr><td>냉장고 +4 &deg; C / 냉동고 -20 &deg; C</td><td>Bosch, 독일</td><td>KGV36V10</td><td>포유류 세포 배양, 인증, 브라질, 10 x 50 mL</td></tr><tr><td>Glass microskope slides, SuperFrost Plus</td><td>VWR, Radnor, Pennsylvania, United States</td><td>631-0108, 631-0446, 631-0447, 631-0448, 631-0449</td><td>염색 중 조직 단면 손실을 방지하기 위해 접착 재료나 단백질 코팅을 적용할 필요가 없는 슬라이드.</td></tr><tr><td>그래프 패드 프리즘</td><td>GraphPad Software Inc.</td><td>v. 9.4.0</td><td></td></tr><tr><td>회색 비누</td><td>Pollena Ostrzesz&oacute; w, Producent Chemii Gospodarczej Sp. Z.o.o. , Sp. K., 폴란드</td><td>Bialy jelen 비누 바</td><td>회색 비누 바 천연 저자 극성. 일반적으로 사용 가능한 제품</td></tr><tr><td>H2SO4(황산) 1 mol/l (1 M)</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>1.60313</td><td></td></tr><tr><td>Harris hematoxylin 용액</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>HHS16</td><td></td></tr><tr><td>혈구계</td><td>VWR, Avantor, US A</td><td>612-5719</td><td>수동 계수 챔버를 권장하며 더 정확</td></tr><tr><td>합니다.Hexadecyltrimethylammonium bromide</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>H5882</td><td></td></tr><tr><td>균질화 기</td><td>QIAGEN Hilden, Germany</td><td>Tissue Lyser LT, SN 23.1001/05234</td><td>2mL 원심 분리기 튜브 용 스테인리스 스틸 비드 (직경 5mm)가있는 균질화 기</td></tr><tr><td>양 고추 냉이 과산화 효소 스트렙타비딘 (HRP 스트렙타비딘)</td><td>Vector Laboratories, Inc., Burlingame, CA, USA</td><td>SA-5004-1</td><td></td></tr><tr><td>과산화수소 용액 (H202)</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>H1009</td><td></td></tr><tr><td>인큐베이터 Heracell 150i</td><td>Thermo Electron LED Gmbh, 독일</td><td>41071068</td><td>37 oC 5 % CO2 및 65 0C 조직학</td></tr><tr><td>케타민 100 mg/mL, 주입용 솔루션</td><td>Biowet Pulawy Sp. z o.o., Pulawy, Poland</td><td>cat.# 사용할 수</td><td></td>없음</tr><tr><td>KH2PO4 (인산이수소칼륨) 99.995% 무수 기준</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>1.05108</td><td></td></tr><tr><td>실험실용 원심분리기</td><td>Heraeus Megafuge 1.0R, Thermo Scientific, 독일</td><td>B00013899</td><td>속도 300 x g, 냉각 4 0C</td></tr><tr><td>실험실 원심 분리기</td><td>Heraeus Fresco 21, Thermo Scientific, 독일</td><td>75002425</td><td>속도 3,000 x g, 4 0C</td></tr><tr><td>Mask (FFP2)</td><td>VWR, Radnor, Pennsylvania, United States</td><td>111-0917</td> Jagiellonian University Medical College 의과 대학 의학부 의생명 과학 의장 직종 부서<td>의 오르토 다이아니신 이염산염</td></tr><tr><td>마우스 육</td><td>종 단위 작업, Krakow, Poland</td><td>CBA/J, C57BL/6</td><td></td></tr><tr><td>마이크로미터</td><td>Mitutoyo, Tokyo, Japan</td><td>193-111</td><td>digit 외부 마이크로미터, 래칫 스톱, 0-25mm 범위, 0.001mm 눈금, +/- 0.002mm 정확도, https://shop.mitutoyo.pl/web/mitutoyo/pl_PL/all/all/Mikrometr%20analogowy%20/PR/193-111/index.xhtml&nbsp;&nbsp;</td></tr><tr><td>microplate, 96 well, microlon, 높은 결합력(ELISA 테스트용)</td><td>Greiner Bio-One GmbH, Kremsmunster, Austria</td><td>655061</td><td>비색 분석에서 신뢰할 수 있고 재현성 있는 결과를 위한 maxi-sorp 결합 표면</td></tr> 대<tr><td>물렌즈 현미경</td><td>Leica Microsystems CMS GmbH, 독일</td><td>DM1000, 294011-082007</td><td>논문에 제시된 조직학은 ThermoFisher Scientific EVOS M5000 이미징 시스템에서 다음과 같은 목적으로 수행되었습니다: FL 20X LWDPH, 0.40NA/3.1WD 및 FL 40X LWDPH 0.65NA/1.79WD</td></tr><tr><td>Myeloperoxidase from human leukocytes (MPO standard)Merck</td> <td>KGaA, Darmstadt, Germany</td><td>M6908</td><td></td></tr><tr><td>Na2HPO4 x 7 H2O (인산이염기성 소듐 이염기성 헵타하이드레이트)</td><td>Merck KGaA, 독일 다름슈타트</td><td>S9390</td><td></td></tr><tr><td>올리브 오일</td><td>Merck KGaA, 독일 다름슈타트</td><td>75343</td><td>순수, 천연</td></tr><tr><td>OptEIA 마우스 IFN-&감마; ELISA Set</td><td>Becton Dickinson (BD Biosciences), Franklin Lakes, NJ, USA</td><td>555138</td><td></td></tr><tr><td>Ortho-dianisine dihydrochloride</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>D3252</td><td></td></tr><tr><td>파라핀 왁스</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>76242</td><td>비드, 왁스 고체</td></tr><tr><td>PBS (인산염 완충 식염수)</td><td>ThermoFisher Scientific,&nbsp; 미국 매사추세츠주 월섬</td><td>20012027</td><td>pH 7.2, 포유류 세포 배양</td></tr><tr><td>pH 측정기</td><td>Elmetron, 폴란드</td><td>CP-401</td><td></td></tr><tr><td>피펫, 팁 포함 가변 용량</td><td>Merck KGaA, 독일 다름슈타트</td><td>EP3123000900-1EA</td><td>3팩, 옵션 1, 0.5-10 uL/10-100 uL/100-1000 uL, epT.I.P.S 포함</td></tr><tr><td>면도날</td><td>VWR, Radnor, Pennsylvania, United States</td><td>PERS94-0462</td><td>스크레이퍼 및 커터 블레이드, 단일 모서리, 알루미늄 척추, 상자당 100개의 블레이드, 개별 포장</td></tr><tr><td>된 로터리 마이크로톰</td><td>MRC Laboratory-Instruments, Essex, CM20 2HU UK</td><td>HIS-202A</td><td></td></tr><tr><td>가위 - 스트레이트, 샤프/샤프</td><td>Animalab, 포즈난, 폴란드</td><td>14060-10FST</td><td>마우스 시술용 수술 기구(멸균해야 함)</td></tr><tr><td>스크류 캡 (오픈 탑)</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>27056</td><td>블랙 폴리프로필렌 홀 캡, 22&nbsp; 20-400 스레드</td></tr><tr><td>분광 광도계</td>가 있는 mL 바이알 <td>BioTek Instruments, 미국 201446</td><td></td><td>범용 마이크로플레이트 분광 광도계: &lambda; 범위: 200 - 999 nm, 흡광도 측정 범위: 0.000 - 4.000 Abs</td></tr><tr><td>염색 접시 랙이 있는 슬라이드 20</td>개 <td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>S6141</td><td>예: 커버, 슬라이드 랙 및 손잡이가 있는 20개의 슬라이드 염색 접시</td></tr><tr><td>멸균 일회용 생검 펀치 6mm</td><td>Integra LifeSciences, Princeton, NJ, USA</td><td>33-36</td><td></td></tr><tr><td>외과용 가위</td><td>Animalab, 포즈난, 폴란드</td><td>52138-46</td><td>생쥐 시술용 수술 기구(멸균해야 함)</td></tr><tr><td>조직 처리 카세트</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>Z672122</td><td>뚜껑이 있는 조직 처리/임베딩 카세트</td></tr><tr><td>TMB 기질 시약 세트</td><td>Becton Dickinson(BD Biosciences), 프랭클린 레이크스, NJ, 미국</td><td>555214</td><td></td></tr><tr><td>TNCB (2,4,6-트리니트로클로로벤젠)</td><td>Tokyo Chemical Industry CO., LTD, 일본</td><td>C0307</td><td></td></tr><tr><td>TNP-BSA (2,4,6-트리니트로페닐과 접합된 소 혈청 알부민)</td><td>Biosearch Technologies LGC, Petaluma, CA, USA</td><td>T-5050</td><td></td></tr><tr><td>T-PER (tissue protein extration reagent)</td><td>ThermoFisher Scientific, Waltham, Massachusetts, USA</td><td>78510</td><td></td></tr><tr><td>튜브 15 mL sterile</td><td>Merck KGaA, Darmstadt, Germany</td><td>CLS430055 (Corning)</td><td>폴리프로필렌, 원뿔형 바닥</td></tr><tr><td>튜브 50 mL, sterile</td><td>Merck KGaA, Darmstadt, Germany</td><td>CLS430290 (Corning)</td><td>폴리프로필렌, 원뿔형 바닥</td></tr><tr><td>Tween 20</td><td>Merck KGaA, Darmstadt, Germany</td><td>P1379</td><td></td></tr><tr><td>바이알, 나사 상단, 투명 유리(바이알만 해당) 22 mL</td><td>Merck KGaA, Darmstadt, Germany</td><td>27173</td><td>hapten의 준비를 위해 증발하지 않도록 나사로 조임</td></tr><tr><td>수조</td><td>AJL Electronic, Poland</td><td>LW102</td><td></td></tr><tr><td>왁스(파라핀) 디스펜서</td><td>VWR, Radnor, Pennsylvania, United States</td><td>114-8737</td><td></td></tr><tr><td>주사용 자일라진(자일라판 20mg/mL) 용액</td><td>Vetoquinol Biowet Sp. z oo., Gorzow Wielkopolski, Poland</td><td>cat.# 사용할 수</td><td></td>없음</tr><tr><td>크실렌(조직학적 등급)</td><td>Merck KGaA, 다름슈타트, 독일</td><td>534056</td><td></td></tr></tbody></table>

알레르기 성 접촉 피부염의 뮤린 모델로서의 접촉 과민증

Contact Hypersensitivity as a Murine Model of Allergic Contact Dermatitis

접촉 과민증 (CHS)은 마우스에서 연구 할 수있는 알레르기 성 접촉 피부염 (ACD)의 실험 모델입니다. 이 연구는 다양한 테스트로 측정하고 정량화 할 수있는 마우스의 CHS 반응을 연구하는 데 도움이되는 객관적인 실험실 방법을 제시하는 것을 목표로합니다. CHS를 유도하기 위해, "0"일째에, 마우스는 아세톤-에탄올 혼합물 중의 합텐 2,4,6-트리니트로클로로벤젠(TNCB)으로 복 도장에 의해 이전에 면도된 반점에 감작시킨 반면, 음성 대조군 마우스는 비히클 단독-아세톤-에탄올 혼합물로 가짜 감작되었다. "4"일째에, 기준선 귀 두께를 CHS(챌린지)의 도출 전에 시험군 및 대조군 둘 다에서 희석된 TNCB로 양쪽 귀를 페인팅함으로써 마이크로미터로 측정하였다. 24시간 후, 귀 팽윤을 마이크로미터로 측정하였다. CHS는 염증이 있는 조직에서 팽윤을 일으키는 T 세포 매개 면역 반응의 예이며, 동일한 합텐으로 피부 챌린지 후 24시간 후에 최고조에 달한다. 귀 부종의 증가는 증강 된 귀 무게, 골수퍼옥시다제 (MPO) 활성, 귀 추출물의 전염증성 사이토카인 농도, 조직 학적 검사에서 부종 진피의 두꺼움 증가 및 귀 혈관 투과성과 관련이 있습니다. 또한 대조군 마우스와 비교했을 때 시험군의 혈청에서 TNP 특이적 IgG1 항체의 농도가 증가하였다. 추가적으로, CHS는 이전에 TNCB로 감작된 공여자로부터 수득된 CHS-이펙터 세포와 함께 성공적으로 전달될 수 있다. CHS-이펙터 세포를 순진한 수용자 마우스에 정맥내 투여하였고, 이는 후속적으로 동일한 희석된 합텐으로 도전되었다. 귀 부종은 24시간 후에 마이크로미터로 측정하였다.

CHS 유도를 위해, 동물을 150 μL의 5% TNCB 또는 비히클 단독의 가짜 감작으로 피부 페인팅(복부)을 통해 감작시켰다. "4"일째에, 양쪽 귀의 귀 부종 반응은 이전에 TNCB로 감작된 마우스(시험 그룹) 및 대조군 마우스(가짜 감작)에서 0.4% TNCB의 10 μL와 접촉페인팅(challenge)에 의해 유도되었다. 제시된 데이터는 TNCB로 감작되고 도전 4일 후에 샴페인팅된 마우스가 유사하게 도전된 샴-감작된 것들과 비교하여 유의하게 증가된 귀 부종을 발달시켰다는 것을 묘사한다(도 3, 표 2, 시험 대 대조군). 귀 부종 결과는 추가 연구에서 완전히 검증되었으며, 귀 무게 증가에 동의한 마이크로미터로 결정된 귀 부종의 증가(그림 4), MPO 활성(그림 5), 귀 추출물의 IFN-γ 농도(그림 6), 조직...

접촉 과민증 (CHS)은 알레르기 성 접촉 피부염 (ACD)의 뮤린 실험 모델입니다. CHS는 가슴과 복부의 면도 된 피부를 페인팅하여 반응성 합텐으로 감작을 기반으로하며, 희석 된 합텐으로 후속 귀 피부 챌린지를 통해 다양한 방법으로 평가되는 붓기 반응을 일으 킵니다.

Contact hypersensitivity (CHS) is an experimental model of allergic contact dermatitis (ACD) that can be studied in mice. This study aims to present an ...

여기에 제시된 객관적인 실험실 방법은 인간의 알레르기 성 접촉 피부염을 모방 한 생쥐의 접촉 과민 반응을 연구하는 데 도움이 될 수 있습니다. 접촉 과민 반응은 귀 부종뿐만 아니라이 반응과 관련된 세포 메커니즘을 연구 할 수있는 다양한 실험실 검사에 의해 측정 될 수 있습니다. 보다 접촉성 과민성 모델은 다양한 환경 요인과 새로운 물질을 테스트하여 테스트 된 요인이 새로운 치료법을 구현하는 데 사용할 수있는 T 세포 의존성 면역 반응을 조절하는지 여부를 보여줄 수 있습니다.면도날로 마우스 피부를 면도하고 발에 라벨을 붙이는 것으로 시작하십시오. 접촉 과민증 (CHS)이 유도되기 6 시간 전에 회색 비누를 물로 바르고 마우스의 가슴과 복부에 2cm 정사각형 영역을 면도하십시오. 같은 날, 이전에 면도한 부위에 갓 준비한 5%합텐 150마이크로리터를 적용하여 생쥐를 민감하게 만듭니다.제어 마우스에서는 차량만 적용합니다. 동물을 새장에 다시 넣기 전에 합텐 지점을 30초 동안 건조시킵니다. 4일째에는 실험군을 알지 못하는 관찰자에 의해 0시간에 마이크로미터를 사용하여 마취된 마우스의 귀 두께를 측정합니다.그런 다음 시험군과 대조군의 귀 양쪽에 갓 준비한 04%합텐 10마이크로리터를 바르고 30초 동안 건조시킵니다. 5일째, 이전 0.4% 합텐 적용 후 24시간 후에 24시간 측정을 위해 귀 두께 측정을 반복합니다. 귀 두께 측정 후 24 시간이 지난 후 마우스가 여전히 깊은 마취 상태에있을 때 가위를 사용하여 가능한 한 두개골에 가깝게 귀를 잘라냅니다.귀의 말단부에서 생검 펀치를 사용하여 직경 6mm의 펀치를 만듭니다. 분석 저울에서 각 귀 생검의 무게를 측정하고 밀리그램으로 표현합니다. myeloperoxidase 또는 MPO 분석을 위해 귀 생검을 스테인리스 스틸 비드가 있는 2밀리리터 미세 원심분리기 튜브에 넣고 준비된 완충액 500마이크로리터를 추가합니다.균질화기에서 10분 동안 생검을 균질화한 다음 샘플을 섭씨 4도에서 15분 동안 냉각한 후 10분 동안 다시 균질화합니다. 생검이 균질화되면 비드를 꺼냅니다. 균질액을 섭씨 영하 20도에서 30분 동안 동결합니다.샘플을 해동 및 소용돌이치고 균질화 및 동결 절차를 세 번 반복합니다. 완료되면 균질액을 섭씨 4도에서 30분 동안 3, 000G에서 원심분리합니다. MPO 활성을 측정하기 위해 피펫으로 상청액을 수확하고 단백질 1밀리그램당 단위로 발현합니다.혈관 투과성 테스트를 수행하려면 0 일째에 마우스를 민감하게하고 4 일째에는 앞서 언급 한 절차를 사용하여 귀에 합텐을 적용하여 직접 도전하십시오. 23시간 후, 마취된 마우스에 Dulbecco의 인산염 완충 식염수(DPBS)에 1%Evans blue 염료를 체중 g당 8.3마이크로리터를 정맥 주사합니다. 1시간 후, 마우스를 다시 마취시켜 앞서 설명한 바와 같이 귀 생검을 수집한다.조직에서 염료를 추출하려면 섭씨 37도에서 5 % 이산화탄소 대기에서 18 시간 동안 1 밀리리터의 포름 아미드가 들어있는 튜브에서 생검을 배양합니다. 귀 생검을 수집 한 후, 마우스가 여전히 깊은 마취 상태에있을 때 핀셋으로 안구를 제거하십시오. 마우스에 부드러운 압력을 가하고 혈청 수집을 위해 안와후동에서 튜브로 혈액을 수집합니다.튜브를 6번 뒤집고 혈액이 응고될 때까지 30분 동안 기다립니다. 그 후, 튜브를 1, 300 내지 2, 000 G에서 실온에서 10분 동안 원심분리한다. 앞서 언급한 절차를 사용하여 0일에 TNCB 합텐으로 기증자 마우스를 감작시킵니다. 4일째에는 피부를 소독한 후 겸자를 사용하여 마취된 마우스에서 겨드랑이 및 사타구니 림프절 또는 ALN을 분리한 다음 비장을 분리합니다.두 현미경 슬라이드의 젖빛 끝 사이에 조직을 으깨고 기공 크기가 70마이크로미터인 세포 여과기를 통해 세포 현탁액을 통과시킵니다. 그런 다음 1% 소 태아 혈청이 보충된 DPBS로 세포를 세척하고 섭씨 4도에서 10분 동안 300G에서 원심분리합니다. 상청액을 경사 조절하고 나머지 세포 펠릿을 1 내지 5 밀리리터의 DPBS에 재현탁시킨다.마취된 마우스에 CHS-이펙터 세포 혼합물을 정맥 주사하기 전에 200마이크로리터의 DBPS에서 최대 7.0배 10에서 7번째 세포에 ALN과 비장의 1:1 혼합물을 준비합니다. 0시와 챌린지 24시간 후에 귀 두께를 측정합니다. 데이터에 따르면 TNCB에 감작되고 4일 후 귀에 도전한 마우스는 가짜 감작 및 유사하게 도전한 대조군 마우스에 비해 귀 부종이 크게 증가한 것으로 나타났습니다.시험군에서 귀 부종의 증가는 귀 무게, MPO 활성, 귀 추출물의 인터페론 감마 농도, 조직학적 검사에서 부종성 진피의 변화 및 귀 혈관 투과성의 증가를 초래하였으며, 대조군 동물과 비교하였을 때 시험마우스의 혈청에서 TNP 특이적 IgG1 항체가 상승하였다. 이전에 TNCB로 감작된 기증자로부터 CHS-이펙터 세포를 받은 동물은 세포를 받지 않은 동물에 비해 귀 부종이 유의하게 증가한 것으로 나타났습니다. 가장 중요한 순간은 접촉 과민증을 유발하는 것입니다.합텐 용액은 휘발성이 매우 강하고 빛에 민감하므로 동물의 피부에 신속하게 적용해야합니다. 단리된 이펙터 세포에 대해 추가의 시험을 수행할 수 있다. 예를 들어, 세포 배양은 항원의 존재 하에서 증식하는 능력을 평가하기 위해 확립될 수 있다.

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Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

알레르기 천식의 실험 마우스 모델은 질병 pathogenesis를 공부하고 새로운 치료제 개발에 새로운 가능성을 제공합니다. 이러한 모델은 잘 알레르기 면역 반응,기도 염증과 폐의 pathophysiology을 규제하는 측정 요소에 적합합니다.

알레르기 항원 유도 천식의 Murine 모델

이 비디오는 인간의 피부를 모방한 마우스 모델인 인간화 마우스 모델에서 UV 감도를 측정하는 방법을 설명합니다. 우리는 피부에 홍반 또는 부종을 유발할 수 있는 UV 방사선의 최소 홍반량(MED)을 결정합니다. 이 방법은 자외선 민감성을 줄이는 데 사용되는 약물의 효능을 알아내는 데 도움이 될 수 있습니다.

최소 홍반성 선량 분석: 마우스 모델에서 UV 감도를 측정하는 방법

이 비디오는 쥐 모델에서 안구 표면 염증 및 마이봄샘 기능 장애를 유도하는 방법을 보여줍니다. 면역원을 사용하여 마우스의 면역 체계를 자극한 후 동일한 면역원으로 재자극하면 안구 표면 염증이 촉진되어 호중구에서 생성된 응집체를 통한 마이봄샘 분비물이 막히고 안구건조증을 유발합니다.

쥐 모델에서 안구 표면 염증을 유도하는 방법

이 동영상은 쥐 모델에서 피부 염증을 유발하여 테스트 항원을 평가하는 생체 내 기술을 보여줍니다. 오일/아세톤 용액에 함유된 합텐(hapten)인 테스트 항원을 마우스 귀 피부에 국소적으로 적용하고 적절한 기간 후에 피부의 염증을 평가합니다.

피부 염증을 유발하여 항원에 대한 면역 반응을 평가하는 기법

비만 세포와 호염기구의 활성화를 특징으로 알레르기 반응은, IgE 항체의 가교 및 염증 매개 물질의 방출에 의해 구동된다. 알레르기 반응의 정량적 인 평가는 알레르겐 공격 후 혈관 투과성의 변화를 모니터하는 에반스 블루 염료를 사용함으로써 달성 될 수있다.

마우스에 현지 아나필락시스 측정

이 프로토콜은 영양이 풍부한 배지에서 마우스 피부의 효소 분해 후 백혈구를 분리하기 위한 구배 분리를 설명합니다.  이렇게 파생된 세포는 다양한 다운스트림 응용 분야에 사용할 수 있습니다. 이것은 조직 해리 기계와 더 가혹한 트립신 및 디스파제 기반 조직 소화 프로토콜에 대한 효과적이고 경제적이며 개선된 대안입니다.

효소 다이제스트 및 그라데이션 분리를 사용하여 마우스 피부에서 침투 백혈구의 분리

여기에서는 1-플루오로-2,4-디니트로벤젠(DNFB)에 의해 마우스 귀에 알레르기성 접촉성 피부염을 유도하는 방법과 알레르기성 접촉성 피부염의 중증도를 평가하는 방법을 설명합니다.

알레르기성 접촉성 피부염 평가를 위한 마우스 귀 모델

이 연구는 표피(EC) 면역을 통해 생쥐의 면역 반응을 조절하는 피부의 역할을 보여줍니다. 단백질 항원을 사용한 EC 면역은 병원체 관련 분자 패턴과 결합할 때 접촉 과민증 또는 피부 유도 억제에서 면역 반응을 억제할 수 있습니다. EC 면역은 면역 요법에 대한 효과적이고 주사 바늘이 없는 접근 방식으로서 가능성을 보여줍니다.

표피 유도 면역조절의 쥐 모델(Murine Model of Epicutanely-Induced Immunomodulation)

피부염의 herpetiformis (DH)는 이가와 표피 transglutaminase (eTG) 사이의 면역 반응을 특징으로 만성 염증성 조건입니다. DH는 글루텐에 민감한 및 / 또는 복강 환자의 아주 작은 부분에 개발하고 있습니다. 본 연구의 결과는 DH도 idiopatic 피부염의 증상으로 붉은 털원숭이 원숭이 호스트에서 개발할 수 있음을 나타냅니다.

의 드문 경우에 이가와 조직 Transglutaminase이 항체에 의해 표피 Transglutaminase의 인식 붉은 털원숭이 피부염

감염 과정에서 핵심적인 단계는 호스트 세포로 병원균의 접착합니다. 대부분의 경우에서는이 유착 단계는 액체를 흐르는 의해 생성된 기계적 응력의 존재에 발생합니다. 우리는 세균 유착의 연구에 중요한 매개 변수로 전단 응력을 소개하는 기술을 설명합니다.

세균성 접착 연구에 전단 응력을 소개합니다

배우세요 생쥐 접촉 과민증 실험 방법으로 알레르기 접촉 피부염 면역 메커니즘을 연구하세요. 이 기법은 귀 부종 측정과 세포 분석을 통해 T세포 의존 면역 반응을 평가하여 새로운 치료법 개발에 활용됩니다.

알레르기 성 접촉 피부염의 뮤린 모델로서의 접촉 과민증

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