Name: 허혈 및 소생술 중 뇌 영상 및 뇌 생리학 모니터링을 위한 마우스 심정지 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-04-14T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 18 s
Description: 배우세요 마우스 심정지 모델을 통해 뇌 영상 및 생리학을 모니터링하는 방법을. 이 프로토콜은 흉부 압박 없이 재소생이 가능하여 심정지 및 소생술 중 뇌 순환과 산소화의 동적 변화를 연구하는 데 이상적입니다.

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저자들은 Kathy Gage의 편집 지원에 감사를 표합니다. 이 연구는 마취과(듀크 대학 의료 센터), 미국 심장 협회 보조금(18CSA34080277) 및 미국 국립보건원(NIH) 보조금(NS099590, HL157354, NS117973 및 NS127163)의 자금으로 지원되었습니다.

여기에 설명된 모든 절차는 연구에서 동물의 관리 및 사용에 대한 NIH(National Institutes of Health) 지침에 따라 수행되었으며 프로토콜은 Duke Institute of Animal Care and Use Committee(IACUC)의 승인을 받았습니다. 본 연구에는 생후 8-10주 된 C57BL/6마리의 수컷 및 암컷 마우스가 사용되었습니다.
1. 수술 준비
<ol><li>디지털 저울에서 마우스의 무게를 측정하고 4인치 x 4인치 x 7인치 플렉시글라스 마취 유도 상자에 넣습니다.</li>
	<li>마취 기화기를 5% 이소플루란으로, 산소 유량계를 30으로, 질소 유량계를 70으로 조정합니다( 재료 표 참조).</li>
	<li>인덕션 박스에서 동물을 꺼내 호흡수가 분당 30-40회로 감소하면 수술대에 누운 자세로 눕힙니다.</li>
	<li>뭉툭한 집게로 혀를 빼내고 자주 사용하지 않는 손으로 잡습니다. 주로 사용하는 손을 사용하여 후두경( 재료 표 참조)을 쥐의 입에 삽입하고 성대를 시각화합니다.</li>
	<li>자주 사용하지 않는 손을 사용하여 가이드 와이어와 20G 정맥 카테터를 입에 삽입합니다. 가이드 와이어를 기관에 부드럽게 삽입합니다.</li>
	<li>카테터의 날개 부분이 코끝과 평평해질 때까지 카테터를 기관으로 밀어 넣습니다. 알림: 완전히 마취되지 않은 쥐는 기관을 손상시키고 기도 출혈을 유발할 수 있으므로 삽관하지 마십시오.</li>
	<li>삽관된 쥐를 작은 동물 인공호흡기에 연결하고( 재료 표 참조) 이소플루란을 1.5%로 줄입니다.</li>
	<li>인공호흡기의 제어판에 마우스의 체중을 입력하여 일회 호흡량과 호흡수를 결정합니다.</li>
	<li>열 램프 아래에서 마우스를 누운 자세로 유지하고 온도 조절기로 직장 온도를 37°C로 유지합니다.</li>
	<li>사타구니 부위를 면도하고 수술 부위를 요오드와 알코올로 최소 3회 소독하고( 재료 표 참조) 멸균 수술용 드레이프로 해당 부위를 덮습니다.</li>
	<li>양쪽 눈에 안연고를 바르고 수술 전에 5mg/kg의 카프로펜을 피하 투여합니다.</li>
	<li>수술을 위해 멸균 기구 포장을 엽니다. 수술용 가위로 1cm의 피부를 절개하여 양쪽 대퇴동맥에 접근합니다. 원위 대퇴 동맥을 4-0 실크 봉합사 한 가닥으로 절개하고 결찰하고(재료 표 참조) 리도카인 한 방울을 바릅니다.</li>
	<li>근위 대퇴 동맥에 동맥류 클립을 붙이고 클립 원위 동맥을 작게 절개합니다. 폴리에틸렌 10(PE-10, 재료 표 참조) 카테터를 왼쪽 및 오른쪽 대퇴 동맥에 삽입합니다. 알림: 왼쪽 동맥선은 혈압 모니터링에 사용되고 오른쪽 동맥선은 혈액 인출 및 소생 혼합물 주입에 사용됩니다.</li>
	<li>50μL의 1:10 헤파린 식염수를 각 동맥 라인에 주입하여 라인의 응고를 방지합니다.</li>
	<li>마우스를 엎드린 위치로 돌리고 입체 헤드 프레임에 장착합니다.</li>
	<li>3개의 바늘 전극(빨간색, 녹색 및 검은색)을 왼쪽 팔, 왼쪽 다리 및 오른쪽 팔에 연결하여 심전도(ECG, 재료 표 참조) 모니터링을 수행합니다.</li>
	<li>뇌 혈류 모니터링을 위해 0.5cm의 피부 절개를 통해 온전한 측두엽 두개골에 유연한 플라스틱 섬유 프로브를 붙입니다. 이 단계는 선택 사항입니다.</li>
	<li>정수리를 면도하고, 수술 부위를 요오드와 알코올로 최소 3회 소독하고, 멸균 수술용 드레이펠로 해당 부위를 덮습니다.</li>
	<li>2.5cm의 정중선 피부 절개를 자르고 4개의 작은 견인기를 사용하여 뇌 영상을 위해 전체 두개골 표면을 노출시킵니다.</li>
	<li>모니터링 이미저(예: 레이저 스페클 콘트라스트 이미저, 재료 표 참조)를 머리 위에 놓습니다. 참고: 두개골 표면에 식염수 몇 방울을 추가하여 레이저 스페클 콘트라스트 이미징을 용이하게 할 수 있습니다.</li>
</ol>2. 심정지 유도
<ol><li>1mL 플라스틱 주사기에 26μL의 소생술 칵테일 스톡 용액을 채웁니다. 참고: 이 용액의 각 밀리리터에는 400μL의 1mg/mL 에피네프린, 500μL의 8.4% 중탄산나트륨, 50μL의 1,000U/mL 헤파린 및 50μL의 0.9% 염화나트륨이 포함되어 있습니다( 재료 표 참조).</li>
	<li>체온이 37°C에 도달할 때까지 기다리십시오. 산소 측정기를 100%로 조정하여 2분 동안 혈액에 산소를 공급합니다.</li>
	<li>우측 대퇴 동맥을 통해 최대 200μL의 산소가 공급된 동맥혈을 26μL의 소생술 칵테일 스톡 용액이 들어 있는 준비된 플라스틱 주사기로 빼냅니다.</li>
	<li>산소를 끄고 질소를 100%로 증가시켜 산소 결핍을 유도합니다. 알림: 약 45초 후에 심장이 작동하지 않고 심박수가 급격히 감소하여 CA의 시작을 나타냅니다. 약 2분 동안 산소가 부족하면 ECG 모니터링은 수축기를 나타내며 측정 가능한 전신 혈압과 무시할 수 있는 뇌 혈류가 없습니다.</li>
	<li>환풍기, 이소플루란 기화기, 온도 조절기, 질소 유량계를 끕니다. 소생을 준비하기 위해 산소를 100%로 조정하십시오.</li>
</ol>3. 소생술 절차
<ol><li>CA 발병 후 8분에 인공호흡기를 켭니다.</li>
	<li>즉시 소생술 칵테일과 혼합된 회수된 산소 혈액을 1분 안에 오른쪽 대퇴 동맥을 통해 혈액 순환에 주입하기 시작합니다. 알림: 주입은 심박수의 점진적인 증가와 혈액 관류의 회복으로 이어집니다. 결국 자발적 순환(ROSC)의 복귀가 달성됩니다.</li>
</ol>4. CA 후 복구
<ol><li>마우스를 입체 프레임에서 제거한 후 앙와위 위치에 놓고 대퇴 동맥에서 PE-10 카테터를 제거합니다.</li>
	<li>0.25% 부피바카인을 피부 절개부에 바르고 6-0 나일론 봉합사를 사용하여 피부 절개 부위를 봉합합니다( 재료 표 참조). 피부 절개 부위에 항생제 연고를 바릅니다.</li>
	<li>자발적 호흡이 회복되면 마우스 인공호흡기를 분리하십시오.</li>
	<li>마우스를 온도가 32°C로 조절된 회수 챔버로 옮깁니다.</li>
	<li>회복 2시간 후 마우스를 발관하고 홈 케이지로 돌아갑니다. 탈수를 방지하기 위해 0.5mL의 생리식염수를 피하에 주사합니다.</li>
</ol>

심정지 시 뇌 생리학을 연구하기 위한 마우스 모델

<ol><li>Smith, A., Masters, S., Ball, S., Finn, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+incidence+and+outcomes+of+out-of-hospital+cardiac+arrest+in+metropolitan+versus+rural+locations%3A+A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Resuscitation%22%5BJournal%5D)">The incidence and outcomes of out-of-hospital cardiac arrest in metropolitan versus rural locations: A systematic review and meta-analysis.</a> Resuscitation. 185, 109655(2022).</li>
<li>Amacher, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predicting+neurological+outcome+in+adult+patients+with+cardiac+arrest%3A+systematic+review+and+meta-analysis+of+prediction+model+performance%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care%22%5BJournal%5D)">Predicting neurological outcome in adult patients with cardiac arrest: systematic review and meta-analysis of prediction model performance.</a> Critical Care. 26 (1), 382(2022).</li>
<li>Matsuyama, T., Ohta, B., Kiyohara, K., Kitamura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intra-arrest+partial+carbon+dioxide+level+and+favorable+neurological+outcome+after+out-of-hospital+cardiac+arrest%3A+A+nationwide+multicenter+observational+study+in+Japan+%28the+JAAM-OHCA+registry%29%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal+of+Acute+Cardiovascular+Care%22%5BJournal%5D)">Intra-arrest partial carbon dioxide level and favorable neurological outcome after out-of-hospital cardiac arrest: A nationwide multicenter observational study in Japan (the JAAM-OHCA registry).</a> European Heart Journal of Acute Cardiovascular Care. 12 (1), 14-21 (2023).</li>
<li>Takahagi, M., Sawano, H., Moriyama, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+neurological+outcome+of+extracorporeal+cardiopulmonary+resuscitation+for+out-of-hospital+cardiac+arrest+patients+with+nonshockable+rhythms%3A+A+single-center%2C+consecutive%2C+retrospective+observational+study%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Emergency+Medicine%22%5BJournal%5D)">Long-term neurological outcome of extracorporeal cardiopulmonary resuscitation for out-of-hospital cardiac arrest patients with nonshockable rhythms: A single-center, consecutive, retrospective observational study.</a> The Journal of Emergency Medicine. 63 (3), 367-375 (2022).</li>
<li>Mork, S. R., Botker, M. T., Christensen, S., Tang, M., Terkelsen, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+and+neurological+outcome+after+out-of-hospital+cardiac+arrest+treated+with+and+without+mechanical+circulatory+support%5BTitle%5D)+AND+%22Resuscition+Plus%22%5BJournal%5D)">Survival and neurological outcome after out-of-hospital cardiac arrest treated with and without mechanical circulatory support.</a> Resuscition Plus. 10, 100230(2022).</li>
<li>Koenig, M. A., Kaplan, P. W., Thakor, N. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+neurophysiologic+monitoring+and+brain+injury+from+cardiac+arrest%5BTitle%5D)+AND+%22Neurologic+Clinics%22%5BJournal%5D)">Clinical neurophysiologic monitoring and brain injury from cardiac arrest.</a> Neurologic Clinics. 24 (1), 89-106 (2006).</li>
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<li>Sinha, N., Parnia, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+the+brain+after+cardiac+arrest%3A+A+new+era%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Neurology+Neuroscience+Report%22%5BJournal%5D)">Monitoring the brain after cardiac arrest: A new era.</a> Current Neurology Neuroscience Report. 17 (8), 62(2017).</li>
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<li>Zhang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Invasion+of+peripheral+immune+cells+into+brain+parenchyma+after+cardiac+arrest+and+resuscitation%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+and+Disease%22%5BJournal%5D)">Invasion of peripheral immune cells into brain parenchyma after cardiac arrest and resuscitation.</a> Aging and Disease. 9 (3), 412-425 (2018).</li>
<li>Duan, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cervical+vagus+nerve+stimulation+improves+neurologic+outcome+after+cardiac+arrest+in+mice+by+attenuating+oxidative+stress+and+excessive+autophagy%5BTitle%5D)+AND+%22Neuromodulation%22%5BJournal%5D)">Cervical vagus nerve stimulation improves neurologic outcome after cardiac arrest in mice by attenuating oxidative stress and excessive autophagy.</a> Neuromodulation. 25 (3), 414-423 (2022).</li>
<li>Liu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+modification+of+potassium+chloride+induced+cardiac+arrest+model+for+aged+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+and+Disease%22%5BJournal%5D)">Novel modification of potassium chloride induced cardiac arrest model for aged mice.</a> Aging and Disease. 9 (1), 31-39 (2018).</li>
<li>Shen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+is+associated+with+impaired+activation+of+protein+homeostasis-related+pathways+after+cardiac+arrest+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Aging is associated with impaired activation of protein homeostasis-related pathways after cardiac arrest in mice.</a> Journal of American Heart Association. 7 (17), e009634(2018).</li>
<li>Wang, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Manganese+porphyrin+promotes+post+cardiac+arrest+recovery+in+mice+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Biology%22%5BJournal%5D)">Manganese porphyrin promotes post cardiac arrest recovery in mice and rats.</a> Biology. 11 (7), 957(2022).</li>
<li>Wang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+evaluation+of+a+novel+mouse+model+of+asphyxial+cardiac+arrest+revealed+severely+impaired+lymphopoiesis+after+resuscitation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Development and evaluation of a novel mouse model of asphyxial cardiac arrest revealed severely impaired lymphopoiesis after resuscitation.</a> Journal of American Heart Association. 10 (11), e019142(2021).</li>
<li>Li, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+the+XBP1s%2FO-GlcNAcylation+pathway+improves+functional+outcome+after+cardiac+arrest+and+resuscitation+in+young+and+aged+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Activation of the XBP1s/O-GlcNAcylation pathway improves functional outcome after cardiac arrest and resuscitation in young and aged mice.</a> Shock. 56 (5), 755-761 (2021).</li>
<li>Shen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+the+ATF6+%28activating+transcription+factor+6%29+signaling+pathway+in+neurons+improves+outcome+after+cardiac+arrest+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Activation of the ATF6 (activating transcription factor 6) signaling pathway in neurons improves outcome after cardiac arrest in mice.</a> Journal American Heart Association. 10 (12), e020216(2021).</li>
<li>Jiang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MCC950%2C+a+selective+NLPR3+inflammasome+inhibitor%2C+improves+neurologic+function+and+survival+after+cardiac+arrest+and+resuscitation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroinflammation%22%5BJournal%5D)">MCC950, a selective NLPR3 inflammasome inhibitor, improves neurologic function and survival after cardiac arrest and resuscitation.</a> Journal of Neuroinflammation. 17 (1), 256(2020).</li>
<li>Zhao, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+arrest+and+resuscitation+activates+the+hypothalamic-pituitary-adrenal+axis+and+results+in+severe+immunosuppression%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Cardiac arrest and resuscitation activates the hypothalamic-pituitary-adrenal axis and results in severe immunosuppression.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 41 (5), 1091-1102 (2021).</li>
</ol>

저자는 이해 상충이 없습니다.

실험적 CA 연구에서는 질식, 염화칼륨 주사 또는 전류 유래 심실세동을 사용하여 CA 16,17,18,19,20,21,22,23을 유도했습니다. 일반적으로 CPR은 이러한 CA 모델, 특히 마우스에서 소생술에 필요합니다. 우리는 생쥐에서 질식 CA 후 자연 소생을 가능하게 하는 소생 혼합물을 공식화했습니다. 심폐소생술(CPR) 단계를 없애면 CA 중 뇌 생리학을 모니터링하고 현재 영상 기법을 사용하여 소생술을 할 수 있는 더 많은 기회가 열립니다.
...

심정지(CA)는 여전히 글로벌 공중보건 위기1. 미국에서만 매년 356,000건 이상의 병원 밖 CA 사례와 290,000건의 병원 내 CA 사례가 보고되고 있으며, 대부분의 CA 피해자는 60세 이상입니다. 특히, CA 후 신경학적 손상은 생존자들 사이에서 흔하며, 이는 CA 관리의 주요 과제입니다 2,3,4,5. CA 이후 뇌 병리학적 변화와 신경학적 결과에 미치는 영향을 이해하기 위해 다양한 신경생리학적 모니터링 및 뇌 조직 모니터링 기법이 환자 6,7,8,9,10,11,12에 적용되었다. 근적외선 분광법을 사용하여 신경학적 결과를 예측하기 위해 CA 쥐에서 실시간 뇌 모니터링도 수행되었습니다13.
그러나 쥐 CA 모델에서 이러한 이미징 접근 방식은 항상 상당한 물리적 움직임을 수반하여 섬세한 이미징 절차를 방해하는 자발적 순환을 회복하기 위한 흉부 압박의 필요성으로 인해 복잡해졌습니다. 더욱이, CA 모델은 일반적으로 누운 자세의 마우스로 수행되는 반면, 많은 뇌 영상 양식의 경우 마우스는 엎드린 자세로 돌려야 합니다. 따라서 수술 전 CA에서 소생술 후까지 전체 CA 절차 동안 뇌의 실시간 이미징/모니터링을 수행하기 위해 수술 중 신체 움직임을 최소화하는 마우스 모델이 많은 경우에 필요합니다.
이전에 Zhang 등은 뇌 영상에 유용할 수 있는 마우스 CA 모델을 보고했습니다14. 그들의 모델에서, CA는 베쿠로늄(vecuronium)과 에스몰롤(esmolol)의 볼루스 주사에 의해 유도된 후 기계적 환기의 중단에 의해 유도되었다. 그들은 CA의 5분 후에 소생 혼합물을 주입하여 소생을 달성할 수 있음을 보여주었습니다. 주목할 만한 것은, 그러나, 그들의 모형에 있는 순환 정지는 esmolol 주입 후에 단지 대략 10 초 후에 일어났다. 따라서, 이 모델은 체포 전 기간 동안 고탄산혈증 및 조직 저산소증을 포함하여 환자에서 질식 유발 CA의 진행을 요약하지 않습니다.
현재 수술 절차의 전반적인 목표는 마우스에서 임상 질식 CA를 모델링한 후 흉부 압박 없이 소생술을 수행하는 것입니다. 따라서, 이 CA 모델은 마우스(15)에서 뇌 생리학을 연구하기 위해 복잡한 이미징 기법의 사용을 허용한다.

<table><tbody><tr><td>아드레날린</td><td>파 제약</td><td>NDC 42023-159-01</td><td></td></tr><tr><td>알코올 면봉</td><td>BD</td><td>326895</td><td></td></tr><tr><td>동물 바이오 앰프</td><td>ADInstruments</td><td>FE232</td><td></td></tr><tr><td>BP 변환기</td><td>ADInstruments</td><td>MLT0699</td><td></td></tr><tr><td>Bridge Amp</td><td>ADInstruments</td><td>FE117</td><td></td></tr><tr><td>헤파린 나트륨 주입, USP</td><td>Fresenius Kabi</td><td>NDC 63323-540-05</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Covetrus,</td><td>NDC 11695-6777-2</td><td></td></tr><tr><td>레이저 도플러 관류 모니터</td><td>무어 악기</td><td>moorVMS-LDF1</td><td></td></tr><tr><td>레이저 스페클 이미징 시스템</td><td>RWD</td><td>RFLSI III</td><td></td></tr><tr><td>윤활제 눈 연고</td><td>Bausch + Lomb</td><td>339081</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 클립</td><td>Roboz</td><td>RS-5431</td><td></td></tr><tr><td>마우스 직장 프로브</td><td>Physitemp</td><td>RET-3</td><td></td></tr><tr><td>바늘 전극</td><td>ADInstruments</td><td>MLA1213</td><td>29 Ga, 1.5 mm 소켓</td></tr><tr><td>질소</td><td>Airgas</td><td>UN1066</td><td></td></tr><tr><td>광섬유</td><td>무어 악기</td><td>POF500</td><td></td></tr><tr><td>검이경</td><td>Welchallyn</td><td>728</td><td>2.5 mm 검경</td></tr><tr><td>산소</td><td>Airgas</td><td>UN1072</td><td></td></tr><tr><td>PE-10 튜빙</td><td>BD</td><td>427401</td><td>폴리에틸렌 튜빙</td></tr><tr><td>포비돈-요오드</td><td>CVS</td><td>955338</td><td></td></tr><tr><td>PowerLab 8/35</td><td>AD소개</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rimadyl (carprofen)</td><td>Zoetis</td><td>6100701</td><td>주사 가능한 50 mg/ml</td></tr><tr><td>소동물 인공호흡기</td><td>Kent Scientific</td><td>RoVent Jr.</td><td></td></tr><tr><td>온도 조절기</td><td>Physitemp</td><td>TCAT-2DF</td><td></td></tr><tr><td>트리플 항생제 및 통증 완화</td><td>CVS</td><td>NDC 59770-823-56</td><td></td></tr><tr><td>기화기</td><td>RWD</td><td>R583S</td><td></td></tr><tr><td>0.25% 부피바카인</td><td>호스피라</td><td>NDC 0409-1159-18</td><td></td></tr><tr><td>0.9% 크로라이드</td>나트륨 <td>ICU 의료</td><td>NDC 0990-7983-03</td><td></td></tr><tr><td>1mL 플라스틱 주사기</td><td>BD</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>4-0 실크 봉합</td>사 <td>Look</td><td>SP116</td><td>블랙 꼰 실크</td></tr><tr><td>6-0 나일론 봉합</td>사 <td>Ethilon</td><td>1698G</td><td></td></tr><tr><td>8.4% 중탄산나트륨 Inj., USP</td><td>Hospira</td><td>NDC 0409-6625-02</td><td></td></tr><tr><td>20G IV 카테터</td><td>BD</td><td>381534</td><td>20GA 1.6IN</td></tr><tr><td>30G PrecisionGlide 바늘</td><td>BD</td><td>305106</td><td>30G X 1/2</td></tr></tbody></table>

허혈 및 소생술 중 뇌 영상 및 뇌 생리학 모니터링을 위한 마우스 심정지 모델

Mouse Cardiac Arrest Model for Brain Imaging and Brain Physiology Monitoring During Ischemia and Resuscitation

대부분의 심정지(CA) 생존자는 다양한 정도의 신경학적 결함을 경험합니다. CA로 인한 뇌 손상을 뒷받침하는 메커니즘을 이해하고 효과적인 치료법을 개발하기 위해서는 실험적 CA 연구가 필수적입니다. 이를 위해 몇 가지 마우스 CA 모델이 설정되었습니다. 이러한 모델의 대부분에서 마우스는 심폐 소생술(CPR)을 위한 흉부 압박을 수행하기 위해 앙와위 자세에 배치됩니다. 그러나 이 소생술 절차는 CA 및 소생술 중 뇌 생리학의 실시간 영상/모니터링을 어렵게 만듭니다. 이러한 중요한 지식을 얻기 위해, 본 프로토콜은 흉부 압박 CPR 단계를 필요로 하지 않는 마우스 질식 CA 모델을 제시한다. 이 모델을 사용하면 CA 이전 기준선에서 초기 CA 후 재관류까지 혈류, 혈관 구조, 전위 및 뇌 조직 산소의 동적 변화를 연구할 수 있습니다. 중요한 것은 이 모델이 늙은 쥐에 적용된다는 것입니다. 따라서 이 마우스 CA 모델은 CA가 뇌 생리학에 미치는 영향을 해독하는 데 중요한 도구가 될 것으로 기대됩니다.

CA를 유도하기 위해, 마우스를 1.5% 이소플루란으로 마취하고 100% 질소로 환기시켰다. 이 상태는 45초 만에 심한 서맥으로 이어졌습니다(그림 1). 2분간의 무산소증 후 심박수가 급격히 감소하고(그림 2), 혈압이 20mmHg 미만으로 감소했으며, 뇌 혈류가 완전히 멈췄습니다(그림 1). 이소플루란이 꺼지자 체온이 더 이상 관리되지 않았고 CA가 끝날 무렵 약 32°C로 서서히 떨어졌습니다(그림 1).
CA의 8분 직후, 인공호흡기를 켰고 마우스에 100% 산소를 공급했습니다. 혈액 소생 혼합물은 동맥 카테터를 통해 순환계에 주입되었습니다. 혈액 소생 혼합물을 주사한 지 얼마 지나지 않아 심장 기능이 회복되기 시작했습니다. 짧은 시간 후 전신 및...

이 프로토콜은 소생을 위해 흉부 압박이 필요하지 않은 질식 심정지의 고유한 마우스 모델을 보여줍니다. 이 모델은 심정지 및 소생술 중 뇌 생리학의 역학을 모니터링하고 이미징하는 데 유용합니다.

Most cardiac arrest (CA) survivors experience varying degrees of neurologic deficits. To understand the mechanisms that underpin CA-induced brain injury ...

심정지는 미국에서 매년 50만 명 이상의 사람들에게 영향을 미치며, 주로 저산소성 허혈성 뇌 손상으로 인한 신경 기능 손상으로 이어집니다. 더 나은 치료법을 개발하기 위해 실험 연구를 통해 심정지가 미세 순환 혈류 및 산소 사용을 포함한 뇌 생리학에 어떤 영향을 미치는지 이해하는 것을 목표로 합니다. 심정지 후 뇌혈류를 조사하기 위해 첨단 영상 및 모니터링 방법이 확립되었습니다.그러나 심정지 및 조기 소생술 중 뇌 순환의 전체 이미지를 얻는 것은 여전히 어려운 과제입니다. 우리의 프로토콜은 생쥐에서 임상적 질식 유발 심장 마비를 시뮬레이션한 후 흉부 압박 없이 암송하는 것을 포함합니다. 이 모델을 사용하면 고급 이미징 방법을 사용하여 심정지 과정 전반에 걸쳐 쥐의 뇌 생리학을 연구할 수 있습니다.이 모델은 복잡한 외과적 개입이 필요하지 않으며 비교적 쉽게 수행할 수 있습니다. 더 중요한 것은 심정지 및 소생술 중에 동물의 움직임을 최소화하면서 동물을 엎드린 자세로 유지할 수 있어 다양한 영상 양식의 사용을 크게 용이하게 한다는 것입니다. 심정지의 영향과 에피네프린 투여, 뇌 혈류역학 및 신경 기능과 같은 치료 전략은 아직 완전히 이해되지 않았습니다.당사의 마우스 모델은 심장 마비 및 소생술 중에 발생하는 뇌 순환, 혈관 반응 및 뇌 조직 산소화의 동적 변화를 조사하는 데 이상적입니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

perioperative 그리고 중요한 치료 관련 급성 신장 손상에 대한 강력한 모델이 제공됩니다. 그것이 거의 임상 아키의 histologic 및 기능 변경 내용을 복제할 수 있습니다 심장 마비에 의해 유도 온 몸이 hypoperfusion을 사용합니다.

Normothermic 심장 마비와 심폐 소생술의 : 국소 빈혈 - Reperfusion 상해의 마우스 모델

외과 외상은 염증 반응을 유도합니다. 크린 시토킨 및 내생 리간드는 국소 빈혈과 reperfusion에 따라 심근 경색 크기를 조절하는 것으로 알려져 있습니다. 우리는 thoracotomy의 영향을 최소화하기 위해 매달려 가중치를 사용하여 murine 국소 빈혈과 reperfusion의 수정된 폐쇄 가슴 모델을 제시.

심근 국소 빈혈 및 Reperfusion의 Murine 폐쇄 가슴 모델

출처: Ouyang, Y., et al. 마우스 뇌 저산소증-허혈 중 동시 PET/MRI 영상. J. Vis. Exp. (2015)이 비디오는 동시 양전자 방출 단층 촬영(PET) 및 자기 공명 영상(MRI)을 통해 뇌 저산소증 손상을 평가하는 기술을 보여줍니다. 마취된 쥐는 총경동맥(CCA) 결찰술을 받아 한쪽 뇌 반구로 가는 혈류를 감소시키고 저산소증으로 인한 손상에 걸리기 쉽습니다. PET 및 MRI 영상은 저산소증 중 포도당 대사 및 구조적 변화를 평가합니다. MRI는 제한된 수분 확산을 감지하는 반면, PET는 포도당 흡수 감소를 나타내어 저산소증으로 인한 세포 스트레스 및 대사 장애를 나타냅니다.

마우스 모델에서 뇌 저산소증-허혈에 의해 유도된 뇌 손상 이미징

전신 저혈압과 함께 양측 경동맥 폐색 재현 심각도 해마에 손​​상 쥐 세계적인 뇌 허혈을 생산하고 있습니다. 동물의 주제는 뇌 손상의 예측 패턴 장애인, 그들은 적당하게 복구하고, 사망률은 상대적으로 낮다.

2 혈관 폐색 / 저혈압 : 세계적인 두뇌 국소 빈혈의 쥐 모델

뇌 관류 모니터링은 허혈성 뇌졸중 모델의 정확성을 향상시키기 위해 입증되었습니다. 기술적 인 문제는 종종 뇌 혈관 연구에 대해이 필수적 도구의 사용을 제한 할 수 있습니다. 이 비디오에서는 최적화 된 시스템은 쥐의 intraluminal 중간 대뇌 동맥 폐색 동안 단일 또는 다중 사이트 hemodynamic 모니터링을 얻기 위해 표시됩니다.

Intraluminal 중간 대뇌 동맥 폐색의 쥐 뇌졸중 모델에서 뇌 관류 모니터링에 최적화 된 시스템

쥐 심장의 MRI 및 PET 이미징을 수행하는 방법을 설명합니다. 이 프로토콜은 심근경색 및 심부전 모델에서 치료 효능을 평가하기 위해 맞춤화되었습니다.

심근경색의 마우스 모델에서의 MRI 및 PET

설치류의 허혈성 심정지 정지 후 심근 기절을 평가하는 이 프로토콜의 목표입니다.

심정지 체포와 심근 놀라운 연합의 쥐 절연 심장 모델

여기에 제시된 방법은 동시 양전자 방출 단층 촬영 및 자기 공명 영상 법을 사용한다. 대뇌 저산소증 - 허혈 모델에서, 확산 및 당 대사에 역동적 인 변화는 동안과 손상 후 발생합니다. 의미있는 멀티 모달 촬상 데이터를 취득 할 경우에이 모델 진화 재생 불가능한 손상 동시 획득을 필요.

마우스 대뇌 저산소증 - 허혈 동안 동시 PET / MRI 영상

대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion의 마우스 모델 선의 이상 조사를 설립 하다. 우리는 distally 오른쪽 중간 대뇌 동맥과 바로 일반적인 경 동맥 선 하 고 국 소 빈 혈의 10 또는 40 분 후 혈액 흐름을 복원.

대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion의 2 배 폐색 마우스 모델

이 프로토콜은 중뇌동맥의 내강 내 폐색을 통한 마우스의 일시적인 국소 대뇌 허혈 모델을 설명합니다. 또한 자기 공명 영상 및 행동 테스트를 사용하여 결과 평가의 예를 보여줍니다.

뇌졸중의 일시적인 중뇌동맥 폐색 모델

배우세요 마우스 심정지 모델을 통해 뇌 영상 및 생리학을 모니터링하는 방법을. 이 프로토콜은 흉부 압박 없이 재소생이 가능하여 심정지 및 소생술 중 뇌 순환과 산소화의 동적 변화를 연구하는 데 이상적입니다.

허혈 및 소생술 중 뇌 영상 및 뇌 생리학 모니터링을 위한 마우스 심정지 모델

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