Name: 스페로이드-매트릭스 상호 작용 연구를 위한 폴리에틸렌 글리콜 하이드로겔의 종양 스페로이드 제조 및 캡슐화 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-09-22T14:55:00.000+00:00
Duration: 10 min 44 s
Description: 학습하세요 종양 스페로이드 제조 및 폴리에틸렌 글리콜 하이드로겔 캡슐화 방법을 통해 종양 미세환경을 모방하는 생리학적 관련성 높은 시험관 내 모델을 구축하는 기술을. 이 프로토콜은 저비용으로 특수 장비 없이 신속하게 스페로이드-매트릭스 상호 작용을 연구할 수 있습니다.

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이 연구는 세인트루이스 대학교가 실비야 P 주스티악 박사에게 제공한 창업 자금과 세인트루이스 대학교의 헨리 앤 아멜리아 나스랄라 신경과학 센터(Henry and Amelia Nasrallah Center for Neuroscience)가 실비야 P 주스티악 박사에게 수여한 시드 그랜트로 자금을 지원받았습니다.

PEG 하이드로겔에서 종양 스페로이드의 3D 캡슐화 후

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하이드로겔 기반 다세포 종양 스페로이드 모델은 암 치료 발견을 발전시키기 위해 점점 더 많이 개발되고 있습니다 11,13,29. 이 모델은 통제된 방식으로 종양 미세환경의 주요 파라미터를 모방하고, 복잡성에도 불구하고 in vivo 모델보다 사용이 간단하고 저렴하며, 많은 모델이 고처리량 스크리닝 기술과 호환되기 때문에 유용합니다. 하이드로겔 생체 재료는 종양 세포외 기질을 모방하고 세포-기질 상호작용을 촉진하도록 조정할 수 있으며, 스페로이드(해리된 세포와 반대)는 본래 종양의 세포-세포 상호작용을 모방합니다. 합성 하이드로겔은, 여기에서 입증된 바와 같이, 하이드로겔이 원하는 구조적 지지체와 물리적 및 기계적 특성을 제공하는 반면, 접착 리간드 또는 분해성 서열을 사용하여 생화학적 물질 특성을 독립적으로 조정할 수 있기 때문에 특히 유리합니다. 합성 하이드로겔...

종양 스페로이드는 암 병인학, 병리학 및 약물 반응성을 연구하는 데 유용한 시험관 내 도구로 부상했습니다1. 전통적으로 스페로이드는 저접착 플레이트 또는 바이오리액터와 같은 조건에서 배양되어 왔으며, 세포 표면 접착보다 세포간 접착이 선호됩니다2. 그러나 이제 종양 미세환경을 보다 충실하게 재현하기 위해 시험관 내 스페로이드 모델은 세포-세포 및 세포-기질 상호 작용을 모두 캡처해야 한다는 것이 인식되었습니다. 이로 인해 여러 그룹이 스페로이드를 캡슐화할 수 있는 하이드로겔과 같은 스캐폴드를 설계하게 되었습니다 3,4. 이러한 하이드로겔 기반 스페로이드 모델은 생존율, 증식, 줄기성 또는 치료 반응성과 같은 다양한 세포 거동에 대한 세포-세포 및 세포-매트릭스 상호 작용을 규명할 수 있습니다3.
여기서는 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 하이드로겔에서 교모세포종 스페로이드를 캡슐화하기 위한 프로토콜을 설명합니다. 하이드로겔의 교모세포종 세포 스페로이드 캡슐화에 대한 여러 문헌 보고가 있습니다. 예를 들어, RGDS 접착 리간드로 장식된 PEG 하이드로겔에 U87 세포를 캡슐화하고 효소로 절단할 수 있는 펩타이드로 가교하여 세포 거동에 대한 하이드로겔 강성의 효과를 측정함으로써 스페로이드를 형성했습니다5. U87 세포는 암 줄기세포 집단을 확장하기 위해 다른 PEG 기반 또는 히알루론산 기반 하이드로겔에서도 형성되었으며,6 화학요법 내성의 매트릭스 매개 메커니즘을 탐색하기 위해형성되었습니다 7,8,9. 교모세포종 스페로이드는 또한 미세아교세포와 암세포 사이의 누화와 세포 침습에 미치는 영향을 연구하기 위해 젤라틴 하이드로겔에 캡슐화되었습니다10. 전반적으로, 이러한 연구는 교모세포종 병리를 이해하고 치료법을 고안하는 데 하이드로겔 기반 시험관 내 모델의 유용성을 입증했습니다.
또한, 종양 스페로이드 제조 및 하이드로겔 캡슐화를 위한 다양한 방법이 있다11. 예를 들어, 분산된 세포는 하이드로겔에 파종될 수 있고 시간이 지남에 따라 스페로이드를 형성할 수 있습니다 5,12. 이러한 방법의 한 가지 단점은 형성된 스페로이드의 다분산성으로, 이는 세포 반응 차이를 유발할 수 있습니다. 균일한 스페로이드를 생산하기 위해, 세포를 마이크로겔에 캡슐화하고 겔13에 침입하여 리모델링할 때까지 장기간 배양하거나, 세포를 구형 '구멍'이 있는 템플릿 겔에 증착하고 응집시키도록 허용할 수 있다14. 이러한 방법의 단점은 상대적인 복잡성, 마이크로겔 또는 겔의 '구멍'을 형성하기 위한 액적 발생기 또는 기타 수단의 필요성, 스페로이드가 성장하고 성숙하는 데 걸리는 시간입니다. 대안적으로, 스페로이드는 마이크로웰(9,15,16) 또는 행잉-드롭 플레이트(17,18)에서 예비-형성될 수 있고, 이어서 여기에 설명된 기술과 유사하게 하이드로겔에 캡슐화될 수 있다. 이러한 방법은 더 간단하며 더 높은 처리량 방식으로 수행할 수 있습니다. 흥미롭게도, 스페로이드 형성 방법은 유전자 발현, 세포 증식 또는 약물 반응성과 같은 스페로이드 세포 거동에 영향을 미칠 수 있음이 밝혀졌다19,20.
여기서 우리는 교모세포종에 초점을 맞추는데, 교모세포종은 부드러운 나노다공성 하이드로겔로 모방할 수 있는 부드러운 나노다공성 뇌 기질21을 본래 환경에 있는 고형 종양이기 때문입니다. 교모세포종은 또한 치료법이 없는 가장 치명적인 뇌종양이다22. 그러나, 여기에 기술된 프로토콜은 임의의 고형 종양을 나타내는 스페로이드의 캡슐화에 사용될 수 있다. 우리는 마이클 형 첨가 반응23을 통해 형성되는 PEG 하이드로 겔을 사용하기로 결정했습니다. PEG는 불활성이고 스캐폴딩 및 물리적 세포 지지체 역할을 하지만 세포 부착을 지지하지 않는 합성, 비분해성 및 생체 적합성 하이드로겔입니다(23). 세포 접착성은 전체 단백질 또는 접착 리간드(24)의 테더링을 통해 별도로 첨가될 수 있고, 분해성은 PEG 중합체 사슬 또는 가수분해 또는 효소적으로 분해되는 가교결합제(25,26)의 화학적 변형을 통해 첨가될 수 있다. 이를 통해 기계적 또는 물리적 하이드로겔 특성과 독립적으로 생화학적 특성을 조정할 수 있으며, 이는 세포-매트릭스 상호 작용을 연구하는 데 유리할 수 있습니다. 마이클 유형 겔화 화학은 선택적이며 생리적 조건에서 발생합니다. 따라서 스페로이드를 하이드로겔 전구체 용액과 혼합하기만 하면 스페로이드 캡슐화가 가능합니다.
전반적으로 여기에 제시된 방법론에는 몇 가지 주목할 만한 특징이 있습니다. 첫째, 멀티웰 어셈블리에서 종양 스페로이드를 제조하는 것이 효율적이고 빠르며 필요한 재료의 비용이 저렴합니다. 둘째, 스페로이드는 다분산성이 낮은 다양한 크기의 대량 생산됩니다. 마지막으로, 상업적으로 이용 가능한 재료만 필요합니다. 이 방법론의 유용성은 스페로이드 세포 생존율, 순환성 및 세포 줄기에 대한 기질 특성의 효과를 탐구함으로써 설명됩니다.

<table><tbody><tr><td>70% 에탄올</td><td>피셔 사이언티픽&nbsp;</td><td>LC22210-4</td><td></td></tr><tr><td>15mL 원뿔</td>형 <td>FALCON</td><td>352097</td><td></td></tr><tr><td>24웰 플레이트 초저 부착 플레이트</td><td>Fisher Scientific</td><td>07-200-602</td><td></td></tr><tr><td>35mm 페트리 접시</td><td>아마존</td><td>706011</td><td></td></tr><tr><td>4-암 폴리(에틸렌 글리콜)-아크릴레이트(4-암 PEG-Ac, 10kDa)</td><td>Laysan Bio</td><td>ACRL-PEG-ACRL-10K-5g</td><td></td></tr><tr><td>50mL 원뿔형</td><td>Fisher Scinetific</td><td></td><td></td>3181345107</tr><tr><td>6-웰 AggreWell 400&nbsp;</td><td>StemCell Technologies, 밴쿠버, 캐나다</td><td>34421</td><td>정사각형 피라미드 형 마이크로 웰&nbsp;</td></tr><tr><td>접착 방지 헹굼 솔루션</td><td>StemCell Technologies, 밴쿠버, 캐나다</td><td>Cat #: 07010</td><td></td></tr><tr><td>아스파르트산-아르기닌-시스테인-글리신-발린-프롤린-메티오닌-세린-메티오닌-아르기닌-글리신-시스테인-아르기닌-아스파르트산(DRCG-VPMSMR-GCRD) 펩타이드</td><td>Genic Bio, 상하이, 중국</td><td>n/a</td><td>맞춤형 합성</td></tr><tr><td>화학 흄 후드</td><td>KEWAUNEE</td><td>99151</td><td></td></tr><tr><td>코닝 마트리겔 베이스먼트 멤브레인 매트릭스, LDEV Free&nbsp;</td><td>Corning</td><td>356234</td><td>기저막 매트릭스</td></tr><tr><td>세제 - Triton-X</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T8787</td><td>비이온성 계면활성제</td></tr><tr><td>디메틸설폭시드 (DMSO)</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>BP231-100</td><td></td></tr><tr><td>일회용 피펫 (1 mL, 2 mL, 5 mL, 10 mL, 25 mL, 50 mL)</td><td>Fisher Scinetific</td><td>1 mL: 13-678-11B, 2mL: 05214038, 5mL(FALCON): 357529, 10mL: 13-678-11E, 25mL: 13-678-11, 50mL: 13-678-11F</td><td></td></tr><tr><td>소 태아 혈청</td><td>HyClone</td><td>SH30073-03</td><td></td></tr><tr><td>포름알데히드 37% 용액</td><td>Sigma Aldrich</td><td>F1635</td><td></td></tr><tr><td>유리판</td><td>슬럼피</td><td>GBS4100SFSL</td><td></td></tr><tr><td>유리 전사 피펫</td><td>Fisher Scinetific</td><td>5 3/4": 1367820A, 9":136786B</td><td></td></tr><tr><td>글리신-아르기닌-시스테인-아스파르트산-아르기닌-글리신-아스파르트산-세린(GRCD-RGDS) 펩타이드</td><td>Genic Bio, 상하이, 중국</td><td>n/a</td><td>맞춤형 합성</td></tr><tr><td>혈구계</td><td>Bright-Line</td><td>383684</td><td></td></tr><tr><td>소수성 솔루션 - Repel Silane&nbsp;</td><td>GE Healthcare Bio-Sciences</td><td>17-1332-01</td><td></td></tr><tr><td>인큐베이터</td><td>NUAIRE</td><td>NU-8500</td><td></td></tr><tr><td>도립 현미경 (Axiovert 25)</td><td>Zeiss</td><td>663526</td><td></td></tr><tr><td>Invitrogen DiOC16(3) (3,3'-Dihexadecyloxacarbocyanine Perchlorate)</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>D1125</td><td></td></tr><tr><td>라이카 컨포칼 SP8</td><td>라이카 마이크로시스템즈 Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>빛 및 형광 현미경 (Axiovert 200M)</td><td>Zeiss</td><td>3820005619</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 원심분리기 튜브</td><td>Fisher Scientific</td><td>2 mL: 02681258</td><td></td></tr><tr><td>현미경 소프트웨어</td><td>Zeiss</td><td>AxioVision Rel. 4.8.2</td><td></td></tr><tr><td>Nestin Alexa Fluor 594&nbsp;</td><td>산타 크루즈 생명 공학</td><td>sc-23927</td><td></td></tr><tr><td>파라 필름</td><td>파라 필름&nbsp;</td><td>PM992</td><td></td></tr><tr><td>PBS(1x), pH 7.4</td><td>HyClone</td><td>SH30256.01</td><td></td></tr><tr><td>페니실린 스트렙토마이신</td><td>MP Biomedicals</td><td>1670046</td><td></td></tr><tr><td>피펫 에이드</td><td>Drummond Scientific Co.</td><td>P-76864</td><td></td></tr><tr><td>피펫 팁 (1&ndash; 200 &마이크로; L, 101&ndash; 1000 &마이크로; L)</td><td>Fisher Scinetific</td><td>2707509</td><td></td></tr><tr><td>플라스틱 표준 일회용 전송 피펫</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-711-9D</td><td></td></tr><tr><td>플라스틱 무게 보트 (100 mL)</td><td>아마존&nbsp;</td><td>MDO-AZOC-1030</td><td></td></tr><tr><td>폴리(에틸렌 글리콜)-디티올(PEG-DISH; 3.4 kDa)</td><td>Laysan Bio</td><td>SH-PEG-SH-3400-5g</td><td></td></tr><tr><td>폴리디메힐실록산(PDMS) [Slygard 182 엘라스토머 키트]</td><td>Elsworth 접착제</td><td>3097358-1004</td><td>폴리디메틸실록산</td></tr><tr><td>분말 무료 검사 장갑</td><td>Quest</td><td>92897</td><td></td></tr><tr><td>Propidium iodide, 1 mg/mL 수용액.&nbsp;</td><td>피셔 사이언티픽&nbsp;</td><td></td><td></td>AAJ66584AB</tr><tr><td>RPMI-1640 중간 (1x)</td><td>HyClone</td><td>SH30027-02</td><td></td></tr><tr><td>실리콘 스페이서 - 실리콘 시트, 0.5 mm 두께/13 cm x 18 cm</td><td>Grace Bio-Labs</td><td>JTR-S-0.5</td><td></td></tr><tr><td>SOX2 Alexa Fluor 488&nbsp;</td><td>Santa Cruz Biotechnology</td><td>sc-365823</td><td></td></tr><tr><td>조직 배양 후드</td><td>NUAIRE</td><td>NU-425-600</td><td></td></tr><tr><td>트리에탄올아민, &ge; 99.0%(GC)&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>90279</td><td></td></tr><tr><td>U-87 MG 인간 교모세포종 세포</td><td>미국형 배양 컬렉션&nbsp;</td><td>증권 시세 표시기 - 14</td><td></td></tr></tbody></table>

스페로이드-매트릭스 상호 작용 연구를 위한 폴리에틸렌 글리콜 하이드로겔의 종양 스페로이드 제조 및 캡슐화

Tumor Spheroid Fabrication and Encapsulation in Polyethylene Glycol Hydrogels for Studying Spheroid-Matrix Interactions

스페로이드의 3차원(3D) 캡슐화는 최적의 세포 성장을 위해 종양 미세환경을 적절하게 복제하는 데 매우 중요합니다. 여기에서 우리는 종양 세포외 미세환경을 모방하기 위해 스페로이드 캡슐화를 위한 시험관 내 3D 교모세포종 모델을 설계했습니다. 먼저, 폴리디메틸실록산을 사용하여 정사각형 피라미드형 마이크로웰 몰드를 형성했습니다. 그런 다음 이 마이크로웰 몰드를 사용하여 50-500μm의 엄격하게 제어된 크기의 종양 스페로이드를 제작했습니다. 스페로이드가 형성되면 수거하여 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 기반 하이드로겔에 캡슐화했습니다. PEG 하이드로겔은 스페로이드 캡슐화를 위한 다목적 플랫폼으로, 강성, 분해성 및 세포 접착성과 같은 하이드로겔 특성을 독립적으로 조정할 수 있습니다. 여기서는 대표적인 연화(~8kPa) 하이드로겔을 사용하여 교모세포종 스페로이드를 캡슐화했습니다. 마지막으로, 스페로이드를 염색하고 이미지화하는 방법이 개발되어 컨포칼 현미경을 통해 고품질 이미지를 얻을 수 있습니다. 조밀한 스페로이드 코어와 상대적으로 희박한 주변부로 인해 이미징이 어려울 수 있지만 투명화 용액과 공초점 광학 절편을 사용하면 이러한 이미징 어려움을 완화하는 데 도움이 됩니다. 요약하면, 균일한 스페로이드를 제조하고, PEG 하이드로겔에 캡슐화하고, 캡슐화된 스페로이드에 대해 공초점 현미경을 수행하여 스페로이드 성장 및 다양한 세포-기질 상호 작용을 연구하는 방법을 보여줍니다.

화학 요법 효과를 연구하기 위한 스페로이드 기반 약물 스크리닝 플랫폼은 자연 조직을 복제하는 생체 재료에서 스페로이드 캡슐화 시 종양 미세환경을 조절하는 데 중점을 두기 때문에 점점 더 많은 수요가 증가하고 있습니다. 여기에서 우리는 다세포 종양 스페로이드 제제와 3D 하이드로겔에서의 후속 캡슐화 및 이미징을 위한 방법을 개발했습니다. 스페로이드는 마이크로웰 몰드(그림 3A,B)에서 준비되며, 그 결과 구형과 엄격하게 제어된 다분산성을 가진 스페로이드가 생성됩니다. 예를 들어, 마이크로웰당 3,300개의 세포가 있는 스페로이드의 경우 평균 스페로이드 크기는 ~250μm이고 원형도는 &gt;0.8이며, 여기서 1은 완벽한 구입니다(그림 3C,D). 스페로이드 직경에 대한 백분율 분산 계수(%CV)는 19.3%이고 원형도에 대한 %CV는 4.5%였습니다. 스페로이드 ...

여기에서는 종양 스페로이드를 빠르고 강력하며 저렴하게 제조한 후 하이드로겔 캡슐화를 수행할 수 있는 프로토콜을 제시합니다. 특수 장비가 필요하지 않기 때문에 널리 적용 가능합니다. 스페로이드 매트릭스 상호 작용을 탐색하고 체외 조직 생리학 또는 병리학 모델을 구축하는 데 특히 유용할 것입니다.

Three-dimensional (3D) encapsulation of spheroids is crucial to adequately replicate the tumor microenvironment for optimal cell growth.  Here, we ...

우리 연구실은 종양 세포외 미세환경을 모방하기 위해 교모세포종 스테로이드 캡슐화를 위한 시험관 내 하이드로겔 모델을 설계하는 데 중점을 둡니다. 스테로이드 세포 생존력, 원형도, 줄기 및 확산에 대한 효과적인 기질, 기계적 및 생화학적 특성은 이러한 모델로 조사됩니다. 종양 모듈 개발의 현재 실험 과제는 생리학적 관련성을 위해 종양 미세환경의 모든 측면을 모방하려는 복잡성에 대한 욕구와 모델을 접근 가능하고 견고하며 저렴하고 사용하기 쉽고 다중 스크리닝 접근 방식과 호환되도록 하는 단순성에 대한 욕구와 관련이 있습니다.당사는 종양 스테로이드를 빠르고 강력하며 저렴하게 제조하고 종양 미세환경을 모방하도록 만들어진 하이드로겔에 캡슐화할 수 있는 프로토콜을 제시합니다. 이 모델에는 특수 장비가 필요하지 않습니다. 체외 조직 생리학 또는 병리학 모델을 구축할 때 스테로이드 매트릭스 상호 작용을 탐색하는 데 특히 유용할 것입니다.교모세포종 암세포와 미세환경 간의 상호작용을 이해하면 이 암을 더 잘 치료할 수 있는 새로운 치료법 개발을 장려할 수 있습니다. 또한, 교모세포종 암에 대한 시험관 내 모델의 개발은 다른 암 질환에 대한 이 모델의 개발을 향상시킬 수 있습니다.

tumor-spheroid-fabrication-encapsulation-polyethylene-glycol

Research

연구

JoVE Journal

Bioengineering

생명공학

출처: Guyon, J., et al. 교모세포종에 대한 3D 스페로이드 모델. J. Vis. Exp. (2020)이 비디오는 종양 세포 침입의 3차원 스페로이드 모델의 생성을 보여줍니다. 스페로이드는 인간의 뇌종양 세포에서 형성되며 콜라겐 매트릭스에 내장되어 있습니다. 스페로이드 말초의 종양 세포는 침습적 표현형을 채택하여 프로테아제를 분비하여 콜라겐을 분해하고 전진하여 주변 기질을 침범합니다.

종양세포 침입의 3차원 스페로이드 모델 생성

입자 추적 microrheology은 비파괴 정량 및 공간적 차원 종양 모델에서 세포 외 기질 (extracellular matrix) 기계적 성질의 변화를 매핑하는 데 사용할 수 있습니다.

입자 추적 microrheology은을 사용하여 3D 종양 모델에서 세포 외 매트릭스 강성의 경도 측정

주변 정상 조직의 침입은 악성 종양을 정의하는 특징입니다. 우리는 여기에서 여러 진행성 인간 암 모델로 예시된 자연 3D 바이오매트릭스로의 침입에 대한 간단한 반자동 마이크로 플레이트 분석을 제공합니다.

3 차원 (3D) 종양 회전 타원체 침공 분석

여기에서는 세포 응집을 통해 3D 세포 스페로이드를 형성하기 위한 빠르고 유연한 프로토콜에 대해 설명합니다. 이는 여러 세포 유형에 쉽게 적용할 수 있으며 세포 이동, 침습 또는 아노이키스 분석을 포함한 다양한 응용 분야와 세포-매트릭스 상호 작용의 이미징 및 정량화에 적합합니다.

3D 회전 타원체 생산을위한 효율적이고 유연한 셀 집계 방법

종양 미세 환경은 암 성장과 침략의 필수적인 부분입니다. 암의 진행을 모방 하기 위해 생물학적으로 관련 된 인간 매트릭스가 필요 합니다. 이 프로토콜은 인간 평활 근 종 기반 매트릭스를 적용 하 여 시험관 내 3 차원 세 포스 페 로이드 침입 검정에 대 한 개선을 도입 한다. 이 프로토콜은 또한 컴퓨터 기반 세포 침입 분석을 소개 합니다.

3 차원 세 포스 페 로이드 침입 분석에서 완전 한 인간 종양 기반 매트릭스

여기에서는 교모세포종에 대한 사용하기 쉬운 침략 분석방법을 설명합니다. 이 분석은 교모세포종 줄기 와 같은 세포에 적합합니다. 침략, 마이그레이션 및 확산의 쉬운 정량화를 위한 피지 매크로도 설명되어 있습니다.

교모세포종을 위한 3D 스페로이드 모형

제시된 접근은 3D 스페로이드 ascy 및 T 세포 세포 독성에 있는 암 세포 침략을 동시에 평가합니다. 스페로이드는 비계가 없는 아가로즈 멀티 마이크로웰 캐스트에서 생성됩니다. I형 콜라겐 매트릭스에 공동 배양 및 포함은 암세포 침입 및 T세포 중재 세포 독성을 모니터링할 수 있는 동일한 장치 내에서 수행된다.

3D 배양에서 암 세포 침략 및 T 세포 세포 독성 을 감시

관련 인간 질병을 충실하게 재구성하는 포괄적인 체외 모델은 부족합니다. 현재 연구는 인간 간세포 암에서 종양 기질 상호 작용을 연구하는 신뢰할 수있는 체외 도구인 3차원 (3D) 종양 스페로이드 생성 및 문화를 제시합니다.

간세포 암에서 종양-기질 상호 작용을 조사하는 3차원 스페로이드 모델

본 연구는 다양한 현미경으로 전체 스페로이드 및 오가노이드를 배양, 냉동, 해동, 가공, 염색, 라벨링 및 검사하는 방법론을 설명하지만 다목적 장치 내의 하이드로겔에 그대로 유지됩니다.

배양, 냉동, 처리 및 전체 오가노이드 및 스페로이드의 이미징 상태를 하이드로겔에 있는 동안

이 글에서는 3차원 종양 스페로이드를 구성하기 위한 표준화된 방법을 보여줍니다. 자동화된 이미징 시스템을 사용한 스페로이드 관찰 및 이미지 기반 딥러닝 분석을 위한 전략도 설명합니다.

약물 평가 연구를 위한 3D 종양 스페로이드 생성

암 전이를 연구하기 위해 이세포성 누화를 캡처하는 3D 암 모델이 매우 필요합니다. 우리의 연구는 침입 및 세포 공간 분포를 연구하는 데 사용할 수 있는 골격 및 골격이 없는 환경에서 이종 다세포 기질-상피의 생성을 제시합니다.

상피암 세포의 스캐폴드가 없는 3D 배양에서 이종다세포 기질 세포(Heteromulticellular Stromal Cells in Scaffold-free 3D Cultures of Epithelial Cancer Cells to Drive Invasion)

학습하세요 종양 스페로이드 제조 및 폴리에틸렌 글리콜 하이드로겔 캡슐화 방법을 통해 종양 미세환경을 모방하는 생리학적 관련성 높은 시험관 내 모델을 구축하는 기술을. 이 프로토콜은 저비용으로 특수 장비 없이 신속하게 스페로이드-매트릭스 상호 작용을 연구할 수 있습니다.

스페로이드-매트릭스 상호 작용 연구를 위한 폴리에틸렌 글리콜 하이드로겔의 종양 스페로이드 제조 및 캡슐화

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