Name: 구조 및 생화학 연구를 위한 Human Solute Carriers의 High-Throughput Expression and Purification of Human Solute Carriers for Structural and Biochemical Studies(구조 및 생화학 연구를 위한 인간 용질 담체의 고처리량 발현 및 정제) (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-09-29T12:40:00.000+00:00
Duration: 7 min 10 s
Description: 배우세요 인간 용질 담체(SLC)의 고처리량 발현 및 정제 방법을 통해 구조 생물학 및 약물 발견 연구를 수행하는 기술을. 이 프로토콜은 순수 단백질 생산을 가능하게 하여 질병 치료 표적 연구에 활용됩니다.

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이 작업은 RESOLUTE 프로젝트의 일환으로 수행되었습니다. RESOLUTE는 보조금 계약 No 777372에 따라 Innovative Medicines Initiative 2 Joint Undertaking으로부터 자금을 지원받았습니다. 이 공동 사업은 유럽 연합의 Horizon 2020 연구 및 혁신 프로그램과 EFPIA의 지원을 받습니다. 이 기사는 저자의 견해만을 반영하며, IMI나 유럽연합 및 EFPIA는 이 글에 포함된 정보의 사용에 대해 책임을 지지 않습니다. pHTBV 플라스미드는 Frederick Boyce 교수(하버드)가 친절하게 제공하였습니다.

Strategies for Expressing and Purifying Solute Carrier Transporters

저자는 재정적 이익이 상충되지 않는다고 선언합니다.

SLC 표적 치료제의 개발은 수송체 기능의 체계적인 특성 분석의 부재로 인해 방해를 받고 있습니다. 이로 인해 정상 및 병태생리학적 과정에서의 수많은 역할에도 불구하고 GPCR 및 이온 채널63에 비해 이 단백질 클래스를 표적으로 하는 약물이 불균형적으로 적어졌습니다. RESOLUTE는 현재 SLC 연구를 가속화하고 개선하기 위한 최첨단 연구 기법과 도구를 개발하는 것을 목표로 하는 국제 컨소시엄입니다. RESOLUTE의 일환으로 인간 SLC의 효율적인 클로닝, 구성 스크리닝, 대규모 발현 및 정제를 위해 이러한 프로토콜을 개발했습니다.
여기서는 추정 및 고아 SLC를 포함하여 인간 SLC 수송체를 체계적으로 탐색하는 데 성공적으로 사용된 확장 가능한 SLC 클로닝 및 발현 방법에 대해 설명합니다. 특히, 이러한 방식으로 정제된 SLC는 수송체 구조, 생화학, 기능, 결합제 생성 및 저분자 결합에 대한 후속 연구에서 성공적으로 사용되었습...

막 단백질은 오랫동안 연구자와 제약 산업 모두의 표적이 되어 왔습니다. 이 중 용질 운반체(SLC)는 인간 게놈1 내에 암호화된 400개 이상의 2차 수송체 유전자 계열입니다. 이러한 수송체는 이온2, 신경 전달 물질3, 지질 4,5,6,7, 아미노산8, 영양소 9,10,11 및 의약품 12을 포함한 수많은 분자의 수입 및 수출에 관여합니다. 이러한 광범위한 기질로 인해, 이들 단백질은 독소의 수송(13), 남용 약물(14,15)에 의한 운반 및 억제, 또는 해로운 돌연변이(16)의 운반을 통해 다양한 병태생리학에 관여한다. 박테리아 상동체는 여러 SLC 계열(17,18,19,20,21,22,23,24,25)의 기본 수송 메커니즘의 프로토타입 역할을 해왔다. 인간 단백질과는 대조적으로, 원핵생물 ortholog는 종종 잘 이해된 대장균 발현 시스템(26,27)에서 더 잘 발현되며, X선 결정학(28)을 위해 잘 정돈된 결정을 생성하는 더 작은 세제에서 더 안정적이다. 그러나, 순서와 기능적인 다름은 약 발견을 위한 이 먼 관련된 단백질의 사용을 복잡하게 한다29,30. 결과적으로, 인간 단백질의 직접적인 연구는 종종 SLC 31,32,33,34,35를 표적으로 하는 약물의 작용 메커니즘을 해독하는 데 필요합니다. 최근 Cryo-electron Microscopy(Cryo-EM)의 발전으로 보다 네이티브와 유사한 조건에서 SLC의 구조적 특성 분석이 가능해졌지만(36,37), 이러한 단백질을 발현하고 정제하는 데 어려움이 있어 표적 치료제 및 진단 개발에 있어 여전히 어려운 과제로 남아 있습니다.
이러한 문제를 완화하기 위해 RESOLUTE 컨소시엄(re-solute.eu)은 인간 SLC 계열 단백질의 대규모 발현 및 정제를 위한 리소스와 프로토콜을 개발했습니다38. 코돈에 최적화된 유전자를 시작으로 SLC 구조체의 고처리량 클로닝 및 스크리닝을 위한 방법을 개발했습니다. 이러한 방법은 SLC의 전체 패밀리에 체계적으로 적용되었고, 유전자는 BacMam 바이러스 발현 시스템으로 클로닝되었으며, 단백질 발현은 고처리량 클로닝 및 발현 테스트(40)를 위해 이전에 기술된 방법에 기초하여 인간 세포주(39)에서 테스트되었습니다. 요약하면, SLC 유전자는 pDONR221 플라스미드에서 pHTBV1.1 벡터로 클로닝됩니다. 이 작제물은 이어서 관심 유전자를 곤충 세포를 형질주입하기 위한 bacmid 벡터로 전치하는데 사용되며, 이는 포유류 세포에서의 발현을 위한 거대세포바이러스 프로모터 및 인핸서 요소를 포함한다. 생성된 바큘로바이러스는 표적 SLC 단백질의 발현을 위해 포유류 세포를 형질도입하는 데 사용할 수 있습니다.
또한 선별된 SLC의 대규모 발현 및 안정적인 정제를 위한 표준화된 분석법을 개발했습니다(그림 1). 이 프로토콜에는 효과적인 문제 해결을 촉진하고 실험 간의 변동성을 최소화하기 위한 여러 체크포인트가 포함되어 있습니다. 특히, 단백질 발현 및 국소화의 일상적인 모니터링과 개별 표적에 대한 정제 조건의 소규모 최적화는 Strep 및 Green Fluorescent Protein(GFP) 태그41,42의 도움을 받았습니다.
궁극적으로, 화학적으로 순수하고 구조적으로 균질한 이러한 단백질 샘플은 X선 결정학 또는 초저온 전자 현미경(Cryo-EM)을 통한 구조 측정, 생화학적 표적 결합 분석, 바인더 생성을 위한 면역 및 화학적으로 정의된 리포좀으로의 재구성을 통한 무세포 기능 연구에 사용할 수 있습니다.

<table><tbody><tr><td>3C 프로테아제</td><td>: 자체</td><td></td><td></td>생산</tr>, <tr><td>50 또는 100 kDa 컷오프 원심 농축기</td><td>, Sartorius</td><td>VS0242</td><td></td></tr>, <tr><td>5-Cyclohexyl-1-Pentyl-&beta;-D-Maltoside</td><td>, Anatrace</td><td>C325</td>, <td>CYMAL-5</td></tr>, <tr><td>96-well bacmid purification kit</td>, <td>Millipore</td><td>LSKP09604</td><td>Montage, Plasmid, Miniprep</td></tr><tr><td>, 96-well block (2 mL)</td><td>Greiner Bio-One</td><td>780271</td><td></td></tr><tr><td>접착 플라스틱 씰</td><td>Qiagen</td><td>19570</td><td>테이프 패드</td></tr><tr><td>아가로스 크기 배제 크로마토그래피 컬럼</td><td>Cytiva</td><td>29091596</td><td>Superose 6 증가 10/300 GL</td></tr><tr><td>벤조나제 DNAse</td><td>자체</td><td></td><td></td>생산</tr><tr><td>BisTris</td><td>Sigma Aldrich</td><td>B9754</td><td></td></tr><tr><td>콜레스테릴 헤미숙시네이트 트리스 염 Anatrace</td><td></td><td>CH210</td><td>CHS</td></tr><tr><td>코발트 금속 친화력 수지</td><td>Takara Bio</td><td>635653</td><td>TALON 금속 친화성 수지</td></tr><tr><td>D(+)-비오틴</td><td>시그마 알드리치</td><td>851209</td><td></td></tr><tr><td>덱스트란-아가로스 크기 배제 크로마토그래피 컬럼</td><td>Cytiva</td><td>28990944</td><td>Superdex 200 증가 10/300 GL</td></tr><tr><td>디지토닌</td><td>아폴로 사이언티픽</td><td>BID3301</td><td></td></tr><tr><td>Dounce 조직 그라인더(40mL)</td><td>DWK Life Sciences</td><td>357546</td><td></td></tr><tr><td>EDTA 무함유 프로테아제 억제제 칵테일</td><td>Sigma Aldrich</td><td>4693132001</td><td>cOmplete, EDTA 무함유 프로테아제 억제제 칵테일</td></tr><tr><td>태아 소 혈청</td><td>Thermo Fisher</td><td>10500064</td><td></td></tr><tr><td>Fos-Choline-12</td><td>Anatrace</td><td>F308S</td><td>FS-12</td></tr><tr><td>글리세롤</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G5516</td><td></td></tr><tr><td>Glyco-diosgenin</td><td>Anatrace</td><td>GDN101</td><td>GDN</td></tr><tr><td>중력 흐름 컬럼</td><td>Cole-Parmer</td><td>WZ-06479-25</td><td></td></tr><tr><td>HEK293 매체</td><td>Thermo Fisher</td><td>12338018</td><td>FreeStyle 293 매체</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Apollo Scientific</td><td>BI8181</td><td></td></tr><tr><td>친수성, 중성 실리카 UHPLC 컬럼</td><td>Sepax</td><td>231300-4615</td><td>Unix-C SEC-300 4.6 x 150</td></tr><tr><td>이미다졸</td><td>시그마 알드리치</td><td>56750</td><td></td></tr><tr><td>곤충 트랜스펙션 시약</td><td>시그마 알드리치</td><td>71259</td><td>시약</td></tr><tr><td>라우릴 맥아당 네오펜틸 글리콜</td><td>아나트레이스</td><td>NG310</td><td>LMNG</td></tr><tr><td>염화마그네슘 육수화물</td><td>시그마 알드리치</td><td>M2670</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 발현 셰이커</td><td>Glas-Col</td><td>107A DPMINC24CE</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>시그마 Aldrich</td><td>S9888</td><td></td></tr><tr><td>n-Decyl-&beta;-D-Maltoside</td><td>Anatrace</td><td>D322</td><td>DM</td></tr><tr><td>n-Dodecyl-b-D-Maltopyranoside</td><td>Anatrace</td><td>D310</td><td>DDM</td></tr><tr><td>n-Dodecyl-N,N-Dimethylamine-N-Oxide</td><td>Anatrace</td><td>D360</td><td>LDAO</td></tr><tr><td>n-Nonyl-&beta;-D-Glucopyranoside</td><td>Anatrace</td><td>N324S</td><td>NG</td></tr><tr><td>n-Octyl-d17-&beta;- D-글루코피라노시드</td><td>, 아나트레이스</td>, <td>O311D</td>, <td>OGNG</td></tr>, <tr><td>옥타에틸렌 글리콜, 모노도데실 에테르</td>, <td>아나트레이스</td>, <td>O330</td><td>C12E8</td></tr>, <tr><td>옥틸 글루코스, 네오펜틸 글리콜</td><td>, 아나트레이스</td><td>NG311</td>, <td>OGNG</td></tr><tr><td>인산염 완충 식염</td>수<td>, 시그마 알드리치</td><td>, D8537</td>, <td>DPBS,</td></tr><tr><td>폴리옥시에틸렌(10)도데실 에테르</td>, <td>아나트레이스</td><td>, AP1210</td>, <td>C12E10</td></tr> 조직 배양 플레이트용 <tr><td>폴리옥시에틸렌(9)도데실 에테르</td><td>Anatrace</td><td>APO129</td><td>C12E9</td></tr><tr><td>다공성 밀봉</td><td>VWR</td><td>60941-084</td><td>생물학적 배양용 레이온 필름</td></tr><tr><td>Proteinase K</td><td>New England Biolabs</td><td>P8107S</td><td></td></tr><tr><td>재조합 효소 혼합물</td><td>Thermo Fisher</td><td>11791020</td><td>Gateway LR Clonase II</td></tr><tr><td>무혈청 곤충 매체</td><td>Gibco</td><td>10902088</td><td>Sf-900 II 무혈청 매체</td></tr><tr><td>부티르산나트륨</td><td>시그마 Aldrich</td><td>303410</td><td></td></tr><tr><td>Sonicator 24헤드 프로브</td><td>Sonics</td><td>630-0579</td><td></td></tr><tr><td>Sonicator 전원 장치</td><td>Sonics</td><td>VCX 750</td><td></td></tr><tr><td>Strep-Tactin 수지</td><td>IBA Life Sciences</td><td>2-5030-025</td><td>Strep-TactinXT 4Flow 대용량 수지</td></tr><tr><td>설탕</td> 시<td>그마 Aldrich</td><td>S7903</td><td></td></tr><tr><td>Sucrose Monododecanoate</td><td>Anatrace</td><td>S350</td><td>DDS</td></tr><tr><td>현탁액 적응 HEK293 세포</td><td>Thermo Fisher</td><td>A14527</td><td>Expi293F</td></tr><tr><td>Transfection 시약</td><td>Sigma Aldrich</td><td>70967</td><td>GeneJuice Transfection 시약</td></tr></tbody></table>

구조 및 생화학 연구를 위한 human solute carriers의 high-throughput expression and purification of human solute carriers for structural and biochemical studies(구조 및 생화학 연구를 위한 인간 용질 담체의 고처리량 발현 및 정제)

High-Throughput Expression and Purification of Human Solute Carriers for Structural and Biochemical Studies

용질 담체(SLC)는 이온, 영양소, 대사 산물, 신경 전달 물질 및 의약품을 포함한 다양한 내인성 및 외인성 기질을 수입 및 수출하는 막 수송체입니다. 매력적인 치료 표적 및 질병 표지자로 부상했음에도 불구하고 이 단백질 그룹은 여전히 현재 의약품에 비해 상대적으로 약이 부족합니다. 이러한 수송체에 대한 약물 발견 프로젝트는 제한된 구조적, 기능적, 생리학적 지식으로 인해 방해를 받으며, 궁극적으로 이러한 종류의 막에 내장된 단백질의 발현 및 정제의 어려움으로 인해 방해를 받습니다. 여기서는 코돈에 최적화된 유전자 염기서열을 사용하여 고순도 밀리그램 양의 인간 SLC 수송체 단백질을 얻는 방법을 보여줍니다. 구조 설계 및 고처리량 발현에 대한 체계적인 탐색과 함께 이러한 프로토콜은 표적 단백질의 구조적 무결성 및 생화학적 활성의 보존을 보장합니다. 또한 진핵생물 세포 발현, 친화성 정제 및 이러한 단백질의 크기 배제 크로마토그래피에서 중요한 단계를 강조합니다. 궁극적으로 이 워크플로우는 고분해능 구조 측정, 수송 연구, 저분자 관여 분석 및 고처리량 in vitro 스크리닝에 적합한 순수하고 기능적으로 활성화되며 안정적인 단백질 제제를 제공합니다.

포유류 발현을 위해 SLC 유전자를 RESOLUTE pDONR 플라스미드에서 BacMam 벡터로 클로닝할 수 있습니다. 클로닝, 발현 및 정제를 위해 설명된 프로토콜은 여러 단백질 접힘에 걸쳐 많은 SLC 수송체에 대해 성공적인 것으로 입증되었습니다. 그럼에도 불구하고 이 절차에는 진행 상황을 모니터링하기 위한 몇 가지 체크포인트가 포함되어 있어 발현, 단백질 접힘, 지질 및 세제 의존적 안정성, 완충액 조건에 대한 민감도의 차이를 설명하기 위한 최적화가 가능합니다.
SLC 클로닝 및 소규모 발현 중 체크포인트 클로닝 단계에서는, 아가로스 젤 전기영동은 PCR와 분해 산물의 정확한 크기를 지키기 위하여 이용되어야 합니다. 마찬가지로, Gateway 및 transposition 반응은 colony PCR 반응으로 검증할 수 있습니다(그림 2A,B<strong...

인간 막 수송체의 구조 및 생화학적 연구에는 밀리그램 단위의 안정적이고 온전하며 균질한 단백질이 필요합니다. 여기서는 코돈 최적화 유전자를 사용하여 인간 용질 운반체 수송체를 스크리닝, 발현 및 정제하는 확장 가능한 방법을 설명합니다.

구조 및 생화학 연구를 위한 Human Solute Carriers의 High-Throughput Expression and Purification of Human Solute Carriers for Structural and Biochemical Studies(구조 및 생화학 연구를 위한 인간 용질 담체의 고처리량 발현 및 정제)

Solute carriers (SLCs) are membrane transporters that import and export a range of endogenous and exogenous substrates, including ions, nutrients, ...

용질 운반체(SLC)는 영양소 흡수를 담당하며 인체 질병에 관여합니다. 그러나 SLC를 표적으로 하는 약물은 연구가 제대로 이루어지지 않았기 때문에 거의 없습니다. 당사는 SLC를 복제, 발현 및 정제하기 위한 효율적인 접근법을 개발했습니다.당사의 워크플로우는 순수한 단백질을 생산하여 생화학 및 구조 연구를 가능하게 하고 궁극적으로 약물 발견 캠페인에 대한 통찰력을 제공합니다. 생물학적 과정, 질병 및 약물 전달에서 수많은 역할을 하는 SLC는 점점 더 주목을 받고 있으며 매력적인 치료 표적이 되고 있습니다. 민간 공공 ReSOLUTE IMI 프로젝트는 SLC 기능, 생리학, 병리학 및 치료 표적화에 대한 새로운 발견을 가능하게 하는 오픈 액세스 리소스 및 데이터를 생성했습니다.전통적으로 SLC는 다양한 기질과 다양한 수송 메커니즘을 가진 필수 막 단백질이기 때문에 연구가 어려웠습니다. 최근 Cryo-EM, BacMam 발현 시스템 및 새로운 가용화 시약으로 인해 특성 분석이 단계적으로 변화하고 있습니다. 순수 단백질 샘플은 생화학 및 구조 연구에 필요합니다.인체에서 용질 담체는 종종 과도하게 발현될 때 수율이 좋지 않고 정제될 때 불안정합니다. 따라서 과거에는 각 표적이 다운스트림 응용 분야를 위한 단백질 샘플을 생산하기 위해 개별 구조를 개발하는 데 수년이 걸렸습니다. 우리의 방법은 여러 표적 또는 단일 표적의 구성에 대한 병렬적이고 비용 효율적인 연구에 최적화되어 있습니다.따라서 실험 유연성, 비용, 시간 및 실험실 리소스의 균형을 신중하게 유지합니다. 또한 이 문서와 ReSOLUTE 웹 포털의 모든 프로토콜과 리소스에 대한 개방형 액세스를 제공합니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Biochemistry

생화학

이후 인간 게놈 시대에 원시 conformations에서 재조합 단백질의 가용성은 구조적 기능적 및 치료 연구와 개발에 매우​​ 중요합니다. 여기서는 테스트 및 재조합 단백질의 다양한 생산하는 데 사용할 수있는 인간의 배아 신장 293T 세포에 대규모 단백질 발현 시스템을 설명합니다.

인간의 세포에서 분비 단백질의 생산을위한 편리하고 일반적인 표현 플랫폼

우리는 액체 처리 로봇을 사용하여 재조합 단백질의 친 화성 태그 정화하는 방법을 설명합니다. 이 방법은 일반적으로 높은 처리량 형식에 용해 그의 태그 단백질의 작은 규모의 정화에 적용됩니다.

선호도 태그 재조합 단백질의 높은 처리량 정화

심사 양적, 높은 처리량의 표현과 소규모 대장균 문화의 융합 단백질의 분석 정화하기위한 프로토콜을 설명하고 이황화 풍부한 동물 독의 표적 단백질의 발현에 적용됩니다.

에서 생산 재조합 이황화 풍부한 독 단백질에 적용되는 높은 처리량 정량 식 검사 및 정화<em&gt; E. 대장균</em

포유류 시스템에 의한 재조합 단백질의 발현은 구조 생물학을 위한 단백질 복합체를 생산하는 매력적인 방법이 되고 있습니다. 여기에서 우리는 구조 연구를 위해 단백질 복합체를 정제하기 위해 현탁액 성장 포유류 세포를 사용하는 간단하면서도 매우 효율적인 발현 시스템을 제시합니다.

소설 및 액세스 접근 : 구조 HEK 293F 서스펜션 세포의 생물학에 대한 재조합 단백질 발현

이것은 분비된 당화(glycosylated mammalian protein)의 생산 및 X선 결정학 및 기타 생물물리학 연구를 위한 균질한 단백질의 충분한 수율을 가진 후속 1단계 정제를 위한 빠르고 비용 효율적인 프로토콜입니다.

효율적인 포유 동물 세포 발현 및 결정화에 대한 세포 외 당 단백질의 단일 단계 정화

적절한 번역 후 변형을 통한 진핵 단백질의 실험실 규모 생산은 상당한 장벽을 나타냅니다. 다음은 포유류 발현 시스템을 사용하여 단백질 발현을 위한 신속한 확립 및 전환을 제공하는 강력한 프로토콜입니다. 이 시스템은 선택적 아미노산, 단백질의 선택적 표지 및 글라이칸 조성의 저분자 조절제를 지원합니다.

서스펜션의 HEK293 세포의 과도 형질와 재조합 인간 단백질의 높은 수율 식

이 원고는 돌연변이를 thermostabilizing을 선별 인간의 세로토닌 수송을 정화, 높은 친 화성 항체를 생성하고, 항우울제 약물 S의 시탈 로프 람 바인딩 세로토닌 수송 - 항체 복합체를 결정화하는 방법에 대해 설명합니다. 이 프로토콜은 다른 도전 막 수송 수용체와 채널들의 연구에 적용 할 수있다.

항온, 발현, 정제, 인간 세로토닌 전달체 결정화 바운드<em&gt; S</em&gt; 시탈 로프 람

에스 케리 치아 (Escherichia )로부터의 비 변성 조건 하에서 코돈 최적화 된 인간 시스 - 프레 닐 전이 효소의 과발현 및 정제를위한 간단한 프로토콜   콜라이 (coli )는 효소 활성 분석과 함께 기술된다. 이 프로토콜은 기계적 연구에 적합한 양 및 품질의 다른 시스 플 닐 트랜스퍼 라제 단백질의 생산을 위해 일반화 될 수 있습니다.

인간의 과발현과 정제 시스 - 프레 닐 트랜스퍼 라제 대장균

이온 채널의 정화는 종종 도전, 하지만 일단 달성, 그것은 잠재적으로 수 체 외에서 조사 기능 및 채널의 구조. 여기, 표현과 포유류 bestrophin 단백질, 캘리포니아2 +의 가족의 정화에 대 한 단계적 절차 설명-Cl- 채널을 활성화.

표현과 포유류 Bestrophin 이온 채널의 정화

이 프로토콜 cryo 전자 현미경 검사 법, 효율적으로 최소한의 노력 및 독성, 단백질 추출, 정화, 포유류 세포에 있는 유전자를 표현 하는 데 사용 되는 잠재 시스템을 포함 하 여 이온 채널 구조를 결정 하는 데 사용 하는 기법을 설명 합니다. 그리고 품질 검사, 샘플 그리드 준비 및 심사, 뿐만 아니라 데이터 수집 및 처리.

식 및 단일 입자 Cryo 전자 현미경 검사 법에 의하여 구조 결심에 대 한 인간의 지질 민감한 양이온 채널 TRPC3의 정화

여기 우리가 제시 익스프레스, solubilize, 누 룩을 사용 하 여 SLC4 운송업 자 가족에 상 동으로 여러 진 핵 borate 전송기를 정화 하는 프로토콜. 우리는 또한 multimeric 어셈블리에 대 한 정화 homomeric 단백질을 평가 하기 위해 화학 가교 분석 결과 설명 합니다. 이러한 프로토콜은 다른 도전 막 단백질에 대 한 적용할 수 있습니다.

표현, 가용 화, 그리고 진 핵 Borate 전송기의 정화

배우세요 인간 용질 담체(SLC)의 고처리량 발현 및 정제 방법을 통해 구조 생물학 및 약물 발견 연구를 수행하는 기술을. 이 프로토콜은 순수 단백질 생산을 가능하게 하여 질병 치료 표적 연구에 활용됩니다.

구조 및 생화학 연구를 위한 Human Solute Carriers의 High-Throughput Expression and Purification of Human Solute Carriers for Structural and Biochemical Studies(구조 및 생화학 연구를 위한 인간 용질 담체의 고처리량 발현 및 정제) (동영상) | JoVE Journal

구조 및 생화학 연구를 위한 Human Solute Carriers의 High-Throughput Expression and Purification of Human Solute Carriers for Structural and Biochemical Studies(구조 및 생화학 연구를 위한 인간 용질 담체의 고처리량 발현 및 정제)

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