Multiplex Cyclic Fluorescent Immunohistochemistry

Yun Chen; Hui Zhang; Yaodong Fan; Liu Yang; Yan Dong

doi:10.3791/66136

Multiplex Cyclic Fluorescent Immunohistochemistry(다중 순환 형광 면역조직화학)

JoVE Journal
Cancer Research
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Multiplex Cyclic Fluorescent Immunohistochemistry

Multiplex Cyclic Fluorescent Immunohistochemistry(다중 순환 형광 면역조직화학)

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04:21 min

January 26, 2024

DOI: 10.3791/66136-v

Yun Chen*¹, Hui Zhang*², Yaodong Fan³, Liu Yang^4,5, Yan Dong*¹

¹Department of Pathology,The Third Affiliated Hospital of Kunming Medical University & Yunnan Cancer Hospital, ²Department of Gastroenterology,Wu Han NO.1 Hospital, ³Department of Neurosurgery,The Third Affiliated Hospital of Kunming Medical University & Yunnan Cancer Hospital, ⁴Departments of Biomedical Research Center,The Affiliated Calmette Hospital of Kunming Medical University & The First Hospital of Kunming, ⁵School of Medical,Yunnan University

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다중 순환 면역조직화학은 반복적인 항원-항체 배양, 이미지 스캐닝, 이미지 정렬 및 통합을 사용하여 여러 마커를 동시에 현장에서 검출할 수 있습니다. 여기에서는 폐암과 쌍을 이루는 뇌 전이 샘플에서 이 기술로 면역 세포 기질을 식별하기 위한 운영 프로토콜을 제시합니다.

면역조직화학의 과제는 교차 반응을 피하고 더 나은 특이성과 반복성을 얻기 위해 1차 및 2차 단클론 항체 종을 선택하는 것입니다. 항체 희석 비율을 최적화하기 위해 성별 결정이 필요합니다. 한편, 또 다른 과제는 하위 구조의 현지화를 조정하는 것입니다.

이 프로토콜의 사용은 세포 수 및 보존 조직의 단백질 발현을 기반으로 CT 3, 양성 CT 3 및 CT 8 양성 및 CT 20 양성과 같은 3 개의 림프구 하위 집단 분포의 기술적 진화를 충족하며 침투 수준도 관찰 할 수 있습니다. 프로토콜에서 매개변수 항체와 Fluor 2차 항체는 iso 혼합물에서 서로 다른 종에서 파생되어 효율적입니다. 이 측정은 또한 항체와 항원 사이의 특정 측정을 보여줍니다.

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