Name: 일차 해마 뉴런의 축삭 수송에 대한 병리학적 단백질의 효과를 측정하기 위해 Live-Cell Imaging 사용 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-12-22T14:20:00.000+00:00
Duration: 10 min 38 s
Description: 배우세요 일차 해마 뉴런의 축삭 수송을 라이브 셀 공초점 현미경으로 분석하는 방법을. 병리학적 tau 단백질 수정이 수송을 방해하는 신호 경로를 규명하여 신경퇴행성 질환의 메커니즘을 이해할 수 있습니다.

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<meta charset="utf8"></head><body>Live-Cell Imaging을 통한 Primary Hippocampal Neurons의 단백질 시각화

<ol><li>Kneynsberg, A., Combs, B., Christensen, K., Morfini, G., Kanaan, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Axonal+degeneration+in+tauopathies%3A+disease+relevance+and+underlying+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Axonal degeneration in tauopathies: disease relevance and underlying mechanisms.</a> Front Neurosci. 11, 572(2017).</li>
<li>Combs, B., Mueller, R. L., Morfini, G., Brady, S. T., Kanaan, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tau+and+axonal+transport+misregulation+in+tauopathies%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Exp+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Tau and axonal transport misregulation in tauopathies.</a> Adv Exp Med Biol. 1184, 81-95 (2019).</li>
<li>Brady, S. T., Morfini, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+motor+proteins%2C+axonal+transport+deficits+and+adult-onset+neurodegenerative+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">Regulation of motor proteins, axonal transport deficits and adult-onset neurodegenerative diseases.</a> Neurobiol Dis. 105, 273-282 (2017).</li>
<li>Morfini, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Axonal+transport+defects+in+neurodegenerative+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Axonal transport defects in neurodegenerative diseases.</a> J Neurosci. 29 (41), 12776-12786 (2009).</li>
<li>Brady, S. T., Lasek, R. J., Allen, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fast+axonal+transport+in+extruded+axoplasm+from+squid+giant+axon%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Fast axonal transport in extruded axoplasm from squid giant axon.</a> Science. 218 (4577), 1129-1131 (1982).</li>
<li>LaPointe, N. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+amino+terminus+of+tau+inhibits+kinesin-dependent+axonal+transport%3A+implications+for+filament+toxicity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">The amino terminus of tau inhibits kinesin-dependent axonal transport: implications for filament toxicity.</a> J Neurosci Res. 87 (2), 440-451 (2009).</li>
<li>Kanaan, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenic+forms+of+tau+inhibit+kinesin-dependent+axonal+transport+through+a+mechanism+involving+activation+of+axonal+phosphotransferases%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Pathogenic forms of tau inhibit kinesin-dependent axonal transport through a mechanism involving activation of axonal phosphotransferases.</a> J Neurosci. 31 (27), 9858-9868 (2011).</li>
<li>Kanaan, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphorylation+in+the+amino+terminus+of+tau+prevents+inhibition+of+anterograde+axonal+transport%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Phosphorylation in the amino terminus of tau prevents inhibition of anterograde axonal transport.</a> Neurobiol Aging. 33 (4), 826.e15-826.e30 (2012).</li>
<li>Pigino, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disruption+of+fast+axonal+transport+is+a+pathogenic+mechanism+for+intraneuronal+amyloid+beta%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Disruption of fast axonal transport is a pathogenic mechanism for intraneuronal amyloid beta.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106 (14), 5907-5912 (2009).</li>
<li>Morfini, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenic+huntingtin+inhibits+fast+axonal+transport+by+activating+JNK3+and+phosphorylating+kinesin%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Pathogenic huntingtin inhibits fast axonal transport by activating JNK3 and phosphorylating kinesin.</a> Nat Neurosci. 12 (7), 864-871 (2009).</li>
<li>Morfini, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+fast+axonal+transport+by+pathogenic+SOD1+involves+activation+of+p38+MAP+kinase%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Inhibition of fast axonal transport by pathogenic SOD1 involves activation of p38 MAP kinase.</a> PLoS One. 8 (6), e65235(2013).</li>
<li>Combs, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Frontotemporal+lobar+dementia+mutant+tau+impairs+axonal+transport+through+a+protein+phosphatase+1gamma-dependent+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Frontotemporal lobar dementia mutant tau impairs axonal transport through a protein phosphatase 1gamma-dependent mechanism.</a> J Neurosci. 41 (45), 9431-9451 (2021).</li>
<li>Christensen, K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphomimetics+at+Ser199%2FSer202%2FThr205+in+tau+impairs+axonal+transport+in+rat+hippocampal+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Phosphomimetics at Ser199/Ser202/Thr205 in tau impairs axonal transport in rat hippocampal neurons.</a> Mol Neurobiol. 60 (6), 3423-3438 (2023).</li>
<li>Kaech, S., Banker, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Culturing+hippocampal+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Culturing hippocampal neurons.</a> Nat Protoc. 1 (5), 2406-2415 (2006).</li>
<li>Seibenhener, M. L., Wooten, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+culture+of+hippocampal+neurons+from+prenatal+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation and culture of hippocampal neurons from prenatal mice.</a> J Vis Exp. (65), 3634(2012).</li>
<li>Neumann, S., Chassefeyre, R., Campbell, G. E., Encalada, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((KymoAnalyzer%3A+a+software+tool+for+the+quantitative+analysis+of+intracellular+transport+in+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Traffic%22%5BJournal%5D)">KymoAnalyzer: a software tool for the quantitative analysis of intracellular transport in neurons.</a> Traffic. 18 (1), 71-88 (2017).</li>
<li>Cox, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+isoform-specific+tau+aggregates+suggests+a+common+toxic+mechanism+involving+similar+pathological+conformations+and+axonal+transport+inhibition%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Analysis of isoform-specific tau aggregates suggests a common toxic mechanism involving similar pathological conformations and axonal transport inhibition.</a> Neurobiol Aging. 47, 113-126 (2016).</li>
<li>Tiernan, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pseudophosphorylation+of+tau+at+S422+enhances+SDS-stable+dimer+formation+and+impairs+both+anterograde+and+retrograde+fast+axonal+transport%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Pseudophosphorylation of tau at S422 enhances SDS-stable dimer formation and impairs both anterograde and retrograde fast axonal transport.</a> Exp Neurol. 283 (Pt A), 318-329 (2016).</li>
<li>Mueller, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tau%3A+a+signaling+hub+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Tau: a signaling hub protein.</a> Front Mol Neurosci. 14, 647054(2021).</li>
<li>Hedstrom, K. L., Ogawa, Y., Rasband, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AnkyrinG+is+required+for+maintenance+of+the+axon+initial+segment+and+neuronal+polarity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">AnkyrinG is required for maintenance of the axon initial segment and neuronal polarity.</a> J Cell Biol. 183 (4), 635-640 (2008).</li>
<li>Basu, H., Schwarz, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((QuoVadoPro%2C+an+autonomous+tool+for+measuring+intracellular+dynamics+using+temporal+variance%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">QuoVadoPro, an autonomous tool for measuring intracellular dynamics using temporal variance.</a> Curr Protoc Cell Biol. 87 (1), e108(2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.4% Trypan blue</td><td>Gibco</td><td>15250-061</td><td></td></tr><tr><td>1.7mL 마이크로 원심분리기 튜브</td><td>DOT</td><td>RN1700-GMT</td><td></td></tr><tr><td>2.5% 트립신</td><td>Gibco</td><td>15090-046</td><td></td></tr><tr><td>3mL 주사기(21G 바늘 포함</td><td>) Fisher</td><td>14-826-84</td><td></td></tr><tr><td>10mL 플라스틱 주사기</td><td>Fisher</td><td>14-823-2A</td><td></td></tr><tr><td>14G 니들</td><td>Fisher</td><td>14-817-203</td><td></td></tr><tr><td>15G 바늘</td><td>Medline</td><td>SWD200029Z</td><td></td></tr><tr><td>16G 바늘</td><td>Fisher</td><td>14-817-104</td><td></td></tr><tr><td>18G 바늘</td><td>Fisher</td><td>14-840-97</td><td></td></tr><tr><td>22G 바늘</td><td>Fisher</td><td>14-840-90</td><td></td></tr><tr><td>32% 파라포름알데히드</td><td>Fisher</td><td>50-980-495</td><td></td></tr><tr><td>AlexaFluor 647 염소 안티 토끼 IgG (H+L)</td><td>Invitrogen</td><td>A21244</td><td>RRID:AB_2535813</td></tr><tr><td>Amphotericin B</td><td>Gibco</td><td>15290-026</td><td></td></tr><tr><td>Arruga 마이크로 배아 캡슐 포셉스, 곡선형; 4"&nbsp;</td><td>Roboz</td><td>RS-5163</td><td>오토클레이브</td></tr><tr><td>B-27 보충제 (50개), 무혈청</td><td>Gibco</td><td>A3582801</td><td></td></tr><tr><td>BioCoat 24-웰 폴리 D 라이신 플레이트&nbsp;</td><td>Fisher</td><td>08-774-124</td><td></td></tr><tr><td>붕산</td><td>Sigma</td><td>B6768-1KG</td><td></td></tr><tr><td>염화칼슘</td><td>Sigma</td><td>C7902</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo 3 1/2" 길이 8 x 0.15mm 각도 날카로운 가위</td><td>Roboz</td><td>RS-5658</td><td>오토클레이브</td></tr><tr><td>세포 계수 장치</td><td></td><td></td><td>자동 또는 수동</td></tr><tr><td>라이브 셀 챔버 부착</td><td>이 있는 컨포칼 현미경</td><td></td><td></td></tr><tr><td>컨 포칼 이미징 소프트웨어</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>D - (+) - 포도</td>당 <td>시그마</td><td>G7528</td><td></td></tr><tr><td>DNase I (Worthington)</td> <td>피셔</td><td>NC9185812</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco의 인산염 완충 식염수</td><td>Gibco</td><td>14200-075</td><td></td></tr><tr><td>EGTA</td><td>피셔</td><td>O2783-100</td><td></td></tr><tr><td>치명적 플러스 솔루션</td><td>Vortech Pharmaceuticals, LTD</td><td>NDC 0298-9373-68</td><td>소듐 펜토바르비탈; 다른 승인된 안락사 방법을 사용할 수 있습니다&nbsp;</td></tr><tr><td>소 태아 혈청</td><td>Invitrogen</td><td>16000044</td><td></td></tr><tr><td>Gentamicin 시약 용액</td><td>Gibco</td><td>15710-072</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMAX</td><td>Gibco</td><td>35050-061</td><td>글루타민 대체체</td></tr><tr><td>Hanks' Balanced Salt Solution</td><td>Gibco</td><td>24020-117</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ 버전 1.51n</td><td>ImageJ</td><td></td><td>Life-Line 버전 2017 5월 30일: </td></tr><tr><td>https://imagej.net/software/fiji/downloads KymoAnalyzer (버전 1.01)</td><td>Encalada Lab</td><td></td><td>Package에는 6가지 매크로가 모두 포함되어 있습니다: https://www.encalada.scripps.edu/kymoanalyzer</td></tr><tr><td>Lipofectamine 3000</td><td>Invitrogen</td><td>100022050</td><td>P3000 transfection enhancer 시약과 함께 사용</td></tr><tr><td>염화마그네슘</td><td>Fisher AC223211000</td><td></td><td></td></tr><tr><td>MES 수화물</td><td>Sigma</td><td>M8250</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 해부 가위 3.5" 스트레이트 샤프/샤프</td><td>Roboz</td><td>RS-5910</td><td>오토클레이브</td></tr><tr><td>Neurobasal Plus 매체</td><td>Gibco</td><td>A3582901</td><td></td></tr><tr><td>Neurofascin (A12/18) 마우스 IgG2a</td><td>UC Davis/NIH NeuroMab</td><td>75-172</td><td>RRID:AB_2282826; 250 ng/mL; 쥐 뉴런이 아닌 쥐 뉴런에서 작용</td></tr><tr><td>Neurofascin 186 (D6G60) 토끼 IgG</td><td>세포 신호</td><td>15034</td><td>RRID:AB_2773024; 500 ng/mL; 마우스 뉴런에서 작동, 우리는 쥐 뉴런에서 테스트하지 않았습니다</td></tr>. <tr><td>신생아 송아지 혈청</td><td>Gibco</td><td>16010-167</td><td></td></tr><tr><td>Opti-MEM</td><td>Gibco</td><td>31985-062</td><td></td></tr><tr><td>P3000</td><td>Invitrogen</td><td>100022057</td><td></td></tr><tr><td>페트리 접시, 100 x 10 mm 유리</td><td>Fisher</td><td>08-748B</td><td>해부용; 오토클레이브</td></tr><tr><td>페트리 접시, 100 x 20 mm 유리</td><td>Fisher</td><td>08-748D</td><td>자궁 뿔을 넣기 위해; 오토클레이</td></tr>브 <tr><td>Poly-D-lysine</td><td>Sigma</td><td>P7886-100MG</td><td></td></tr><tr><td>폴리프로필렌 원추형 원심분리기 튜브(15mL)</td><td>Fisher</td><td>14-955-238</td><td></td></tr><tr><td>폴리프로필렌 원추형 원심분리기 튜브(50mL)</td><td>Fisher</td><td>14-955-238</td><td></td></tr><tr><td>염화칼</td>륨 <td>Fisher</td><td>P217-500</td><td></td></tr><tr><td>아세트산나트륨</td><td>Sigma</td><td>S5636</td><td></td></tr><tr><td>나트륨 붕산염 10 수화물</td><td>VWR</td><td>MK745706</td><td></td></tr><tr><td>직선 블레이드 작동 가위 무딘 / 날카로운</td><td>Fisher</td><td>13-810-2</td><td>오토 클레이브</td></tr><tr><td>주사기 필터, 0.22 &micro; m</td><td>VWR</td><td>514-1263</td><td></td></tr><tr><td>엄지 드레싱 펜치, 톱니, 4.5"</td><td>Roboz</td><td>RS-8100</td><td>오토클레이브</td></tr><tr><td>&마이크로; 슬라이드 4 웰 유리 바닥</td><td>Ibidi</td><td>80427</td><td></td></tr></tbody></table>

일차 해마 뉴런의 축삭 수송에 대한 병리학적 단백질의 효과를 측정하기 위해 live-cell imaging 사용

Using Live&#45;Cell Imaging to Measure the Effects of Pathological Proteins on Axonal Transport in Primary Hippocampal Neurons

이러한 방법을 사용하여 질병12,13에서 병리학적 타우 유발 신경독성의 잠재적 메커니즘을 조사하기 위해 야생형 또는 질병 관련 형태의 타우 단백질이 있는 상태에서 축삭 수송을 특성화했습니다. KymoAnalyzer 소프트웨어는 주어진 폴더 내의 모든 카이모그래프에서 다양한 파라미터를 계산하고 풀링합니다. 운송 요금은 화물이 이동 중일 때(세그먼트 속도)와 일시 중지(순 속도)를 포함한 전체 속도만 계산됩니다. 화물의 양은 총밀도(#tracks/μm) 또는 플럭스(#tracks∙μm-1∙s-1)로 계산됩니다. 런 길이는 개별적으로 계산되거나 결합되어 일시 정지 사이에 이동한 평균 거리를 결정합니다. 화물 일시 중지는 화물이 움직이지 않는 시간(즉, 0.1mm/s&lt; 이동)뿐만 아니라 지속 시간과 빈도로 특징지어집니다. 대부분의 측정값은 전방 및 역행 방향과 합계(양방향 결합)로 계산됩...

일차 해마 뉴런의 축삭 수송에 대한 병리학적 단백질의 효과를 측정하기 위해 Live-Cell Imaging 사용

Bidirectional transport of cargos along the axon is critical for maintaining functional synapses, neural connectivity, and healthy neurons. Axonal ...

using-live-cell-imaging-to-measure-effects-pathological-proteins-on

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

organelle 밀매의 역학을 공부하면 라이브 셀 이미징 특정 유틸리티입니다. 여기 우리는 넓은 필드 형광 현미경을 사용하여 교양 뉴런의 밀도 코어 vesicles의 라이브 영상을위한 프로토콜을 설명합니다. 이 프로토콜은 유연 및 mitochondria와 같은 이미지를 다른 organelles 적응 수 endosomes, 그리고 peroxisomes.

기본 교양 Hippocampal 신경에 덴스 코어 Vesicles의 라이브 영상

우리는 오랜 기간이 이상의 형광 현미경을 통해 뉴런을 생활에서 mitochondria의 이미징 수있는 프로토콜을 설명합니다. 연장 기간 동안 이미지가 mitochondrially 대상으로 형광 단백질과 설계 및 우리 연구실에 지어진 저렴한 무대 위로 보육의 이용 lentivirus - 중재 표현을 통해 수행됩니다.

Neuromodulation 및 Mitochondrial 교통 : 긴 기간이 이상 Hippocampal 뉴런의 라이브 영상

이 보고서 표면 표현, 운송 경로 및 exogenously 표현, 산도에 민감한 GFP-태그를 뉴런의 플라즈마 막에 단백질의 인신 매매 속도론을 결정하는 라이브 세포 이미징 및 photobleach 기법의 사용을 설명합니다.

교양 뉴런의 막 단백질의 측면 보급과 Exocytosis은 형광 복구 및 형광 손실 Photobleaching를 사용하여 평가

BDNF, 신경 영양 인자의 축삭 수송은 여러 신경 인구의 생존과 기능을 위해 중요하다. 일부 퇴행성 질환은 축삭 구조와 기능의 장애로 표시됩니다. 우리는 차 신경 세포를 사용하여 미세 유체 챔버에서 QD-BDNF의 라이브 인신 매매를 검사하는 데 사용되는 기술을 보여 주었다.

양자의 축삭 교통 수단의 실시간 이미징 차 뉴런에서 BDNF를 도트 표지

시 냅 스 소포 endocytosis pHluorin 시 냅 스 소포 단백질 융합의 가벼운 현미경에 의해 및 소포 통풍 관의 전자 현미경 검사 법에 의해 검출 된다.

교양된 Hippocampal 신경에 시 냅 스 소포 Endocytosis를 측정

여기 아 밀 로이드 β (Aβ)는 뇌에서의 초기 효과 조사 하기 위해 프로토콜 제공 됩니다.  이것은 clathrin 중재 된 endocytosis 및 axonal 성장 콘의 붕괴 유도 하는 Aβ 보여준다. 프로토콜 axonal 성장 콘에 Aβ의 초기 효과 공부에 유용 하 고 알 츠 하이 머 병의 예방을 촉진 수 있습니다.

시각화 Axonal 성장 콘 붕괴 교양된 마우스 신경에 있는 초기 아 밀 로이드 β 효과

여기서, 우리는 거대한 ankyrin-G의 부재로 인해 사전 조립된 AIS가 부족한 해마 뉴런의 축삭 초기 세그먼트(AIS)의 조립 및 구조를 정량적으로 연구하는 프로토콜을 기술하였다.

축 사 초기 세그먼트의 조립을 공부 하는 기본 배양 된 해마 뉴런의 사용

시냅스 전달에 필요한 세포하 이벤트를 시각화하기 위해 두 가지 관련 방법이 설명된다. 이들 프로토콜은 시험관내 배양된 뉴런의 라이브 세포 이미징을 사용하여 시냅스 전 칼슘 유입 및 시냅스 소포막 융합의 역학의 실시간 모니터링을 가능하게 한다.

근위축성 측삭 경화증 모델에서 시냅스 기능의 실시간 형광 측정

트랜스제닉 형광 마우스를 사용하여, 살아있는 동물에서 무손상 좌골 신경의 운동 및 감각 축삭 내 엔도솜 및 미토콘드리아의 신호전달의 생체내 축삭 수송을 평가하기 위해 상세한 프로토콜이 기술된다.

축삭 수송의 생체 내 이미징을위한 툴킷 확장

우리는 hSOD1G93A 쥐 모델에서 근 위축성 측삭 경화증의 병태 생리학에 대한 연구를 위해 세포 내Ca 2+의 타임 랩스 비디오 이미징을 위해 쥐 피질에서 신경교 세포, 성상 세포 및 미세 아교 세포의 1 차 배양을 준비하는 방법에 대한 프로토콜을 제시합니다.

쥐 성상 세포와 미세 아교 세포의 1 차 배양과 근 위축성 측삭 경화증 연구에서의 사용

배우세요 일차 해마 뉴런의 축삭 수송을 라이브 셀 공초점 현미경으로 분석하는 방법을. 병리학적 tau 단백질 수정이 수송을 방해하는 신호 경로를 규명하여 신경퇴행성 질환의 메커니즘을 이해할 수 있습니다.

일차 해마 뉴런의 축삭 수송에 대한 병리학적 단백질의 효과를 측정하기 위해 Live-Cell Imaging 사용

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