Name: 임신부터 수유기까지 생쥐의 심전도 및 행동 분석 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-04-05T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 40 s
Description: 배우세요 임신부터 수유기까지 생쥐의 심전도 및 행동을 동시 기록하는 텔레메트리 방법을. 이 기술은 어미의 자율신경 활동 변화와 모성 행동 간의 관계를 자연스러운 환경에서 장기간 관찰하여 새끼 발달에 미치는 영향을 이해하는 데 활용됩니다.

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<meta charset="utf8"></head><body>임신에서 새끼 양육까지 생쥐의 모성 자율신경 변화

<ol><li>Bowlby, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBowlby%2C+J+%22Attachment+and+loss.+Vol.+1%22">Attachment and loss. Vol. 1</a>. 1, Basic Books. New York. (1969).</li>
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<li>Khandoker, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigating+the+effect+of+cholinergic+and+adrenergic+blocking+agents+on+maternal-fetal+heart+rates+and+their+interactions+in+mice+fetuses%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Open%22%5BJournal%5D)">Investigating the effect of cholinergic and adrenergic blocking agents on maternal-fetal heart rates and their interactions in mice fetuses.</a> Biol Open. 11 (4), (2022).</li>
<li>Widatalla, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+between+maternal+and+fetal+heart+rate+increases+with+fetal+mouse+age+in+typical+development+and+is+disturbed+in+autism+mouse+model+treated+with+valproic+acid%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Correlation between maternal and fetal heart rate increases with fetal mouse age in typical development and is disturbed in autism mouse model treated with valproic acid.</a> Front Psychiatry. 13, 998695(2022).</li>
<li>Mezzacappa, E. S., Tu, A. Y., Myers, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactation+and+weaning+effects+on+physiological+and+behavioral+responses+to+stressors%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Lactation and weaning effects on physiological and behavioral responses to stressors.</a> Physiol Behav. 78 (1), 1-9 (2003).</li>
<li>Slangen, B. F., Out, I. C., Janssen, B. J., Peeters, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+pressure+and+heart+rate+variability+in+early+pregnancy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Blood pressure and heart rate variability in early pregnancy in rats.</a> Am J Physiol. 273 (4), 1794-1799 (1997).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>24시간 반복 타이머</td><td>파나소닉</td><td>WH3311BP</td><td></td></tr><tr><td>5-0 나일론 봉합사</td><td>나츠메 제작소</td> <td>Co-23s-N2</td><td></td></tr><tr><td>마취 상자</td><td>나츠메 제작소</td><td>KN-1010</td><td>W110&times; D110&times; H110mm</td></tr><tr><td>마취 마스크</td><td>나츠메 제작소</td><td>KN-1019-1</td><td></td></tr><tr><td>마취기</td><td>나츠메 제작소</td><td>KN-1071-E</td><td></td></tr><tr><td>C57BL6/J 마우스</td> 클<td>레아 재팬 주식회사</td><td></td> 임<td>신 마우스 14일</td></tr> 클립 <tr><td>라이트</td><td>야자와 주식회사 CLX60X02WH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Configurator System</td><td>Adinstuments</td><td>TR190</td><td></td></tr><tr><td>드라이브 레코더</td><td>Transcend</td><td>TS-DP250A-32G</td><td></td></tr><tr><td>식품 홀더</td><td>Clea Japan, Inc</td><td>CL-2802</td><td></td></tr><tr><td>이소플루란</td><td>FujiFilM</td><td>099-06571</td><td></td></tr><tr><td>LabChart Pro V8</td><td>Adinstuments</td><td>MLU260/8</td><td></td></tr><tr><td>LabChart8</td><td>Adinstuments</td><td>MLS060/8</td><td></td></tr><tr><td>마우스 생체 전위 원격 측정</td><td>기 Adinstuments</td><td>MT10B</td><td></td></tr><tr><td>바늘 18 G 1 1/2</td><td>Terumo</td><td>NN-1838 R</td><td></td></tr><tr><td>패널 히터</td><td>SANKO</td><td>4976285145407</td><td></td></tr><tr><td>PowerLab 4/26</td><td>Adinstuments</td><td>PL2604</td><td></td></tr><tr><td>기록 가능한 컴퓨터</td><td>마우스 컴퓨터</td><td>마우스 K7-H</td><td></td></tr><tr><td>빨강 전구</td><td>ELPA</td><td>LDG1R-G-GWP254</td><td></td></tr><tr><td>고무 마스크</td><td>나츠메 제작소</td><td>KN-1019-M</td><td></td></tr><tr><td>SD 카드 (256GB)</td> <td>트랜센드</td><td>TS256GUSD350V</td><td>약 24 시간 봉</td></tr><tr><td>합 바늘 13 mm</td><td>나츠메 제작소</td><td>C-24-540-NO.0</td><td></td></tr> 봉<tr><td>합 바늘 7 mm</td><td>나츠메 제작소</td><td>C-24-540-NO.0000</td><td></td></tr><tr><td>tBase</td><td>Adinstuments</td><td>MT110</td><td></td></tr></tbody></table>

임신부터 수유기까지 생쥐의 심전도 및 행동 분석

Analysis of Electrocardiograms and Behavior in Mice from Pregnancy to Lactation Period

임신한 쥐에게 망원계를 이식한 후, 가정용 케이지에서 임신부터 수유까지의 ECG를 기록했습니다. 샘플링 속도는 1k/s로 설정되었습니다. 일주기 리듬의 영향을 피하면서 어미 마우스의 각 생리적 상태의 ECG를 비교하기 위해 2시간 데이터 파일(그림 3, 표 1)에서 GD 17, 분만, PD 0 및 PD 21에 대한 23:32부터 23:42까지의 10분 데이터를 분석했습니다. 23:32부터 23:42까지의 시간은 분만 중 첫 새끼가 태어나기 10분 전을 나타내기 때문에 선택되었습니다. 이 특정 기간은 근육 수축이 존재하는 분만 중 데이터 분석을 수행하는 타당성을 입증하기 위해 선택되었습니다. 모든 분석 단계에서 쥐는 표 2에 나열된 16개의 에토그램 중 6개에서 관찰된 바와 같이 일반적인 행동(마시기, 파기, 먹이, 자기 그루밍)과 모성 행동(둥지 짓기, 핥기/그루밍)을 모두 보였습니다.
산모의 ECG는 태아가 몸 안에 있을 때(그림 3A) GD17에서 간섭 없이 기록되었으며, 근육 수축과 같은 신체적 변화가 발생했을 때 분만 중에 기록되었습니다(그림 3B). 또한, ECG는 다양한 수유 행동에도 불구하고 새끼 출산(PD 0)부터 PD 21(그림 3C, D)까지 안정적으로 기록되었습니다. ECG 분석은 RR 간격이 GD 17에서 PD 21로 점진적으로 증가하는 동안 심박수가 점진적으로 감소하는 것으로 나타났습니다(표 1). HRV 분석은 LF/HF 비율이 PD 0에서 PD 21로 급격히 증가했음을 보여주었습니다(표 1).
ECG와 함께 기록된 산모 및 일반 행동의 에토그램은 표 2와 같이 세분화되었습니다. 또한 산모가 수유(그림 4A,C) 및 웅크리기(그림 4B,D)와 같은 표 2에 정의된 행동을 보일 때 파형 교란 없이 ECG를 측정할 수 있음을 확인했습니다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66498/66498fig01.jpg"> 
그림 1: 생쥐에 임신 14일째에 이식된 원격 측정. (A) 두 개의 리드가 텔레미터에 연결되었습니다. 검은색은 음의 납을 나타내고 흰색은 양의 납을 나타냅니다. (B) 음극 및 양극 리드를 묶어서 목에 넣었습니다. 텔레미터는 복부 쪽에 배치되었습니다. (C) 목에서 리드를 제거하고 SCM을 노출시켰습니다. (D) 원격 측정은 복부 쪽에 위치했습니다. SCM은 분홍색으로 표시됩니다. 쇄골 돌기와 xiphoid 돌기는 회색으로 표시됩니다. 검은색 선은 음극 리드를 나타냅니다. 주황색 선은 양극 리드를 나타냅니다. 파란색 선은 봉합사 위치를 나타냅니다. (E) 음극 리드가 SCM에 연결되었습니다. 양극 리드는 xiphoid 근육 주위에 연결되었습니다. (F) 모든 절개 부위(빨간색 원으로 표시)는 20cm 봉합사를 사용하여 봉합했습니다. (G) 드라이브 레코더를 사용한 비디오 캡처 설정. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/66498fig01large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66498/66498fig02.jpg"> 
그림 2: 데이터 분석 소프트웨어를 사용하여 기록된 ECG. (A) ECG는 3초 동안 기록되었습니다. (B) 각 심장 박동에 대한 ECG. (C) 빨간색 점선은 ECG가 기록되지 않은 영역을 나타냅니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/66498fig02large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66498/66498fig03.jpg"> 
그림 3: 임신, 분만 및 수유 중 ECG. 동시에 동일한 마우스의 ECG 결과입니다. (A) GD 17의 ECG. (B) 분만 중 ECG. (C) PD 0에서 ECG. (D) PD 21의 ECG. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/66498fig03large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66498/66498fig04.jpg"> 
그림 4: 행동 관찰 중 ECG 기록. ECG는 PD 6에서 동일한 마우스의 에토그램 구성 중에 기록되었습니다. (A) 단단한 음식을 먹는 엄마의 이미지. (B) 새끼 위에 웅크리고 있는 어미의 이미지. (C) 음식을 먹는 동안 산모의 ECG. (D) 새끼 위에 웅크리고 있는 어미의 ECG. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/66498fig04large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
표 1: 임신부터 수유까지 ECG를 기반으로 한 심박수 변동성 분석. 심박 변이도(HRV) 분석은 그림 3에 표시된 ECG 데이터를 기반으로 수행되었습니다. 모든 분석은 동일한 마우스에 대해 동시에 표시되었습니다(23:32-23:42). 평균 RR, 비트 간격의 평균; Average Rate, 비트의 평균 속도; SDSD, 연속적인 비트 간격 간의 차이의 표준 편차; RMSSD, 연속적인 RR 간격 차이의 제곱 평균 제곱근; pRR50, 고정 기간보다 큰 박동 간격 차이의 백분율; 총계, 전체 주파수 범위 내에 포함된 전력; VLF, 매우 낮은 주파수; LF, 저주파; HF, 고주파; SD1 참조; Poincare 분포의 단축을 따른 표준 편차; SD2, 푸앵카레 분포의 장축을 따른 표준 편차. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/Table_1_Heart_rate_variability_analysis_V2.xlsx" target="_blank">이 표를 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.</a>
표 2: 정의된 에토그램. 모든 에토그램은 자세, 소요 시간, 방문한 장소와 같은 매개변수를 기반으로 정의되었습니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/Table%202%20Defined%20ethograms%20V2.xlsx" target="_blank">이 표를 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.</a>

Changes in the mother-offspring relationship are presumably accompanied by dynamic changes in the autonomic nervous system. Although temporal measurements ...

analysis-electrocardiograms-behavior-mice-from-pregnancy-to-lactation

Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

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고해상도 초음파는 임신 상태, 임신 연령 및 임신 손실을 결정하여 임신 시간 임신 마우스를 요구하는 실험을 간소화하는 데 도움이 될 수 있습니다. 여기에 제시된 것은 임신을 모방할 수 있는 잠재적인 함정 (이미지 아티팩트)뿐만 아니라 마우스 임신을 평가하는 방법을 설명하는 프로토콜입니다.

내 마우스가 임신? 고주파 초음파 평가

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마우스의 부정맥을 감지하기 위한 장기 심전도 기록 분석

만성 심리사회적 스트레스(CGS) 패러다임은 임신 중 임상적으로 관련된 스트레스요인들을 고용하여 산모와 유아의 정신장애를 모델링합니다. 여기서는 CGS 패러다임 및 다운스트림 평가를 적용하여 이 모델의 유효성을 검사하는 단계별 절차를 제공합니다.

어머니와 유아에 있는 정신 장애에 대한 번역 관련 패러다임으로 임신에 있는 심리사회적 긴장의 Murine 모형을 이용하

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마우스에서 비디오 분석 시스템을 사용하여 콘텐츠 및 시작됨 공포 컨디셔닝 테스트

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