2024년 4월 5일
임신부터 수유까지 어미 마우스의 자율신경 활동과 상세한 모성 행동을 동시에 기록하는 것은 원격 측정 시스템을 사용하여 달성되었습니다. 이 방법은 임신에서 이유식까지 산모의 생리적, 행동적 특성의 역학을 이해하는 데 도움이 됩니다.
우리의 연구는 임신부터 수유까지 산모의 생리적 변화와 이것이 산모의 행동과 새끼의 발달에 어떤 영향을 미치는지에 중점을 두고 있습니다. 우리는 어미의 생리학이 자손의 건강한 성장과 발달을 지원하기 위해 어떻게 적응하는지 확인하려고 합니다. 임신한 마우스에 영역을 구현하면 임신부터 수유까지 지속적인 ECG 추적이 가능하여 생식 사건 중 자동 활동에 대한 통찰력을 얻을 수 있습니다. 이 방법을 사용하면 보다 자연스러운 행동 관찰이 가능하며 동시 ECG 기록은 변화하는 산모의 생리학에 대한 명확한 이해를 제공합니다.
우리의 연구는 수술 방법과 마우스 관찰 방법을 개선하여 마우스를 장기간 모니터링할 수 있게 되었습니다.
우리의 연구는 자동 활동 측면에서 임신과 수유 중 산모의 신체 반응을 이해하는 데 도움이 됩니다. 우리의 연구는 산모 관리 및 강아지 발달 지원의 개선으로 이어질 수 있으며 동물뿐만 아니라 인간의 번식을 연구하는 새로운 접근 방식에 영감을 줄 수 있습니다.
향후, 자연환경에서 영아 살해나 방치를 저지른 산모가 정상 산모와 비교하여 임신부터 수유까지의 자율신경 활동과 산모의 행동에 차이가 있는 부분을 조사할 계획이다. 우리는 이 프로토콜이 방치와 영아 살해의 요인을 이해하는 데에도 도움이 될 것이라고 믿습니다.
[강사] 시작하려면 마취된 마우스를 패널 히터에 엎드린 자세로 놓습니다. 가위를 사용하여 귀 사이에 피부를 절개한 다음 절개 부위에 집게를 삽입하여 목 주변의 피부와 근육과 복부 쪽을 분리하여 원격 측정기 배치를 위한 공간을 만듭니다. 이제 귀 사이의 절개 부위를 통해 텔레미터를 삽입하고 복부 쪽의 생성된 공간에 놓습니다. 집게를 사용하여 텔레미터의 양극 및 음극 리드를 굴리고 묶고 이러한 리드를 목 공간에 배치합니다. 절개 부위를 봉합하려면 13mm 바늘과 20cm 봉합사를 사용하십시오. 그런 다음 마우스를 바로 누운 자세로 놓습니다. 가위를 사용하여 쇄골 피부 주위를 작은 절개를 하고 근육과 목 피부를 분리합니다. 집게를 사용하여 목 뒤쪽에서 양극 및 음극 리드를 추출합니다. 그런 다음 침샘을 부드럽게 분리하여 흉쇄유돌근의 V자형 모양을 드러냅니다. 그런 다음 쇄골 근처의 흉쇄유돌근에 도달하도록 음극 리드의 길이를 조정하고 음극 리드에서 리드 튜브를 조심스럽게 제거합니다. 이제 10cm 봉합사로 바느질 바늘을 흉쇄유돌근의 V자형 굴곡을 통과시켜 고리를 만듭니다. 이 루프를 통해 음극 리드의 스테인리스 스틸 전극을 끼우고 쇄골 근처의 근육 아래에 배치합니다. 고리를 가볍게 묶어 흉쇄유돌근을 손상시키지 않고 스테인리스 스틸 전극을 고정합니다. 또한 근육의 두개골 쪽에 두 번째 봉합사를 배치하고 음극 리드의 튜브 주위에 묶어 고정합니다. 그 후, 검상돌기 주위를 절편하고 검상돌기에서 쇄골 사이의 근육에서 피부를 조심스럽게 분리합니다. 그런 다음 양극 리드를 확장하여 xiphoid process에 도달합니다. 양극 리드에서 리드 튜브를 제거하고 내부의 코일형 스테인리스 스틸 전극이 가는 핀셋을 사용하여 늘어나도록 합니다. 다음으로, 18게이지 바늘을 사용하여 검상돌기 주변의 근육 아래에 터널을 만듭니다. 그런 다음 스테인리스 스틸 전극을 바늘에 넣고 검상돌기 주변의 근육을 통과시킵니다. 바늘을 제거한 후 10cm 봉합사가 있는 바느질 바늘을 사용하여 코일형 스테인리스 스틸 전극을 검상돌기 주변의 근육에 가볍게 봉합합니다. 양극 리드를 더욱 고정하려면 검상돌기의 두개골 쪽에 두 번째 봉합사를 배치하고 양극 리드의 튜브 주위에 묶습니다. 20cm 봉합사가 있는 바느질 바늘을 사용하여 모든 절개 부위를 닫습니다. 이식 후 마우스를 깨끗한 케이지에 넣으십시오. 시작하려면 텔레미터가 있는 마우스를 케이지에 놓고 마우스 텔레메트리를 위한 수신기 역할을 하는 T-Base에 케이지를 배치합니다. 기록 가능한 컴퓨터를 켜고 설치된 데이터 분석 소프트웨어 응용 프로그램을 사용하여 마우스에서 심전도 데이터를 수집합니다. 그런 다음 기록 가능한 컴퓨터의 실험실 차트 응용 프로그램을 사용하여 심전도를 기록합니다. 심전도 데이터를 분석하려면 LabChart를 시작하고 기록 기간 동안 데이터 파일을 엽니다. HRV 버튼을 클릭하고 그에 따라 박동 감지 설정을 조정하여 심박 변동성을 분석합니다. 그런 다음 HRV 버튼을 클릭하고 비트 분류기 보기를 선택합니다. Beat Classifier 보기에서 모든 비트를 선택하고 HRV 버튼에서 Report View를 선택합니다. 보고서 보기에서 데이터를 복사하여 Excel에 붙여넣어 추가 분석을 수행합니다. 심전도 분석 결과 심박수는 점차 감소하는 반면 호흡수 간격은 GD 17에서 PD 21까지 점진적으로 증가하는 것으로 나타났습니다. HRV 분석에 따르면 저주파 대 고주파 비율이 PD 0에서 PD 21로 급격히 증가했습니다.
본 연구는 임신부터 수유기까지 어미 쥐의 생리학적 변화와 이것이 모성 행동 및 새끼의 발달에 미치는 영향을 조사합니다. 연속적인 ECG 추적을 위한 텔레메트리 시스템을 활용함으로써, 본 연구는 이 중요한 시기 동안의 모체 생리학적 역학에 대한 통찰을 제공합니다.
임신부터 수유기까지 생쥐의 ECG 및 행동을 지속적으로 모니터링하면 모성 전환기 동안의 자율 신경 및 생리적 적응을 정밀하게 매핑할 수 있습니다. 이러한 접근 방식은 모성 행동 및 신경 생리학의 전임상 모델에서 기전적 위험 요소를 제거하고 예측 신뢰도를 높이는 데 도움이 됩니다. 이 방법은 모체 및 자손의 건강과 관련된 신경 발달 및 자율 신경 경로를 대상으로 하는 연구의 중개 연속성을 향상시킵니다.
이 텔레메트리 기반 워크플로우는 초기 기전 연구부터 모체 및 신경발달 표적의 전임상 검증에 이르기까지의 발견 연속체에 통합됩니다.