Name: 설치류 하부 정맥 Cava 정맥 성형술 풍선 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-05-24T14:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 44 s
Description: 배우세요 설치류 하부 정맥 Cava 정맥 성형술 풍선 모델을 통해 정맥 혈전증 및 면역 반응을 연구하는 방법을. 이 생존 동물 모델은 인간의 복잡한 면역 상호작용을 재현하여 새로운 치료 전략 개발에 기여합니다.

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이 연구는 AVF(American Venous Forum) 2023 기초 과학 연구 보조금 및 Surmodics, Inc.의 지원을 받습니다.

다음 프로토콜은 University of Michigan (UMICH) Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) 정책 및 지침, 테스트, 연구 및 교육에 사용되는 척추 동물의 활용 및 관리에 대한 미국 정부 원칙 및 ARRIVE 지침 2.0을 따릅니다. UMICH 동물 복지 보증 계약은 OLAW 및 USDA를 준수하며 AAALAC International의 완전한 인증을 받았습니다. 이 프로토콜은 ID 번호 PRO00010841로 승인되었습니다. 찰스 리버 연구소(Charles River Laboratories)의 수컷 외래종 스프라그 돌리(Sprague Dawley) 쥐를 사용했는데, 체중은 450g이고 생후 15주령이었다.
1. 쥐 마취
<ol><li>동물을 케이지에서 꺼내 5% 이소플루란과 100% 산소로 0.8-1L/min(기화기 제어)의 유속으로 마취 수술 전 유도 가스실에 넣어 전신 마취를 유도합니다.</li>
	<li>마취 유도 챔버에서 쥐를 진정시키고 챔버에서 제거하고 무게를 측정하고 멸균 안과 연고로 눈을 윤활한 다음 따뜻한 물 순환 가열 장치에 등쪽 누운 곳에 놓습니다. 페달 반사(확고한 발가락 꼬집기)를 사용하여 적절한 마취 깊이를 확인합니다.</li>
	<li>전기 가위로 복부 부분을 면도하십시오. 전신 마취를 2.5% 이소플루란, 100% 산소를 0.8-1L/min으로 유지하고 노즈콘을 통한 비재호흡 회로를 사용합니다.</li>
</ol>2. 쥐 초음파 검사
<ol><li>이미징 중에 호흡수, 심박수 및 온도를 포함한 생리학적 평가를 모니터링합니다.</li>
	<li>IVC(Inferior Vena Cava)의 복부 이미징을 위해 전도성 젤을 바르고 변환기를 가로 위치로 향하게 합니다. 말초 혈관을 사전 설정하는 동안 2차원 이미징 모드 또는 B 모드를 사용하고 복부 중앙의 선형 프로브(10MHz)를 낮추고 복부 혈관이 보일 때까지 압력으로 깊이를 조정합니다.</li>
	<li>압축률을 평가하고 고주파 선형 프로브(10mHz)와 함께 컬러 및 펄스파 도플러 모드를 사용하여 흐름을 평가하여 IVC를 복부 대동맥과 구별합니다.<ol><li>초음파 프로브로 압박을 가할 때 IVC는 압축성이 있는 반면 대동맥은 모양과 개통성을 유지하므로 두 가지를 구별하십시오.</li>
	</ol></li>
	<li>컬러 도플러와 펄스파 도플러를 사용하여 혈류의 방향과 속도를 평가합니다. 컬러 도플러 창은 프로브를 향한 흐름을 빨간색으로 나타내고 프로브에서 멀어지는 흐름을 파란색으로 나타냅니다. 기기를 맥파 도플러 모드(듀플렉스 모드)로 전환하여 시간 경과에 따른 혈류 방향과 속도를 평가합니다. 초음파 기계의 자동 이미지 캡처 도구를 사용하여 필요한 유동 이미지를 획득합니다(이미지 획득을 위한 정확한 사양은 초음파 시스템마다 다를 수 있음).<ol><li>다음과 같은 평가 방법을 사용하십시오: 대동맥은 프로브를 향한 혈류와 삼중 파형을 갖는 반면, IVC는 훨씬 더 낮은 진폭으로 프로브에서 자발적으로 흐르는 흐름을 가지고 있습니다.</li>
		<li>근위 IVC가 정상 파형을 표시하지만 비위상 파형 또는 부재(평면) 파형이 원위부에서 감지되는 경우 이러한 검사 지점 사이에 정맥 폐쇄가 있을 가능성을 탐색합니다.</li>
	</ol></li>
	<li>IVC가 발견되면 중간 세 번째 부분에 있는 중간 부분을 식별하며, 이는 신장 정맥보다 열등하고 IVC 분기보다 우월하며, 요추 정맥이 위치한 위치일 가능성이 높습니다.</li>
	<li>중간 섹션 IVC에서 단면 B-모드 이미지를 사용하여 횡면도에서 벽에서 벽까지의 직경을 측정하고 용기의 가장 넓은 직경을 기록합니다. 이미징 획득은 초음파 기계에 따라 다를 수 있습니다. 컴팩트 디스크(CD)를 사용하여 데이터를 DICOM 파일에 저장합니다.</li>
</ol>3. 쥐 미세 수술 및 회복
<ol><li>거즈에 적신 클로르헥시딘 스크럽과 클로르헥시딘 용액으로 복부를 3회 세척하여 무균 수술 상태를 보장합니다.</li>
	<li>멸균된 접착 필름을 쥐의 흉부와 복부 영역, 현미경 손잡이(확대 및 초점) 및 접안렌즈를 덮는 수술용 랩으로 놓습니다.</li>
	<li>아이리스 가위로 피부와 복벽을 통해 복부 내용물이 노출되도록 시푸스 돌기에서 약 2cm 아래에 복부 정중선(3cm)을 절개합니다. 멸균 식염수에 적신 2인치 x 2인치 거즈를 사용하여 장을 동물의 오른쪽으로 반사시킵니다.</li>
	<li>IVC 노출의 경우 멸균 면 팁 애플리케이터를 사용하여 둔기 절개를 수행합니다. 절개 부위에 와이어 검경을 배치하여 IVC 시각화를 가능하게 합니다.</li>
	<li>저온의 미세한 팁 소작을 사용하여 신장 정맥에서 장골 분기까지 모든 IVC 요추 가지를 소작하고 7-0 비흡수성 폴리프로필렌 봉합사로 곁가지를 결찰합니다.</li>
	<li>IVC에 근위 곡선 혈관 마이크로 클립을 삽입하며, IVC는 대동맥에서 분리되어 신장 정맥 바로 아래에 있습니다. 대동맥에서 분리되어 IVC 분기보다 우수한 원위 IVC에 직선 마이크로클립을 놓습니다.</li>
	<li>8-0 플레이스 나일론 U 스티치는 IVC의 전방 표면을 중심으로 왼쪽 신장 정맥까지 꼬리를 봉합합니다.</li>
	<li>정맥 성형술 풍선이 백로드된 상태에서 0.014mm의 날카로운 가이드와이어를 삽입하고 구부러진 마이크로 클립의 꼬리 부분인 infraarenal IVC로 혈류를 역행합니다.</li>
	<li>Seldinger 기술을 사용하여 풍선을 IVC 중반으로 전진시킵니다. 날카로운 가이드와이어를 제거하고 20mL 팽창 주사기를 사용하여 10%에서 15% IVC 오버스트레치로 정맥 성형 풍선을 3분 동안 팽창시켜 0-30atm 범위에서 양압을 생성합니다. 공기 색전증을 방지하기 위해 IVC 캐뉼레이션 전에 모든 시스템을 멸균 식염수로 세척합니다. 참고: 2.8mm IVC는 3.22mm(15% 과신전)로 정맥 성형술을 받습니다. 원하는 오버스트레치에 도달하는 데 필요한 팽창 압력은 풍선의 특성에 따라 결정되며 제조업체의 포장에서 사용할 수 있습니다.</li>
	<li>정맥 성형술 풍선 수축 및 제거 시 U 스티치를 조입니다. 마이크로 클립을 제거합니다.</li>
	<li>개복술 부위를 2층으로 닫습니다. 5-0 폴리글락틴 흡수성 합성 봉합사를 연속적인 패턴으로 사용하여 복벽과 피부를 모두 닫습니다.</li>
	<li>단백질 분석을 위한 염증성 분자의 바이오마커 패널을 방해하지 않기 때문에 수술 후 부프레노르핀 서방형 주사 가능한 현탁액인 0.65mg/kg 피하(SC)를 쥐용 진통제로 투여합니다.</li>
	<li>개별 케이지에서 쥐를 회수하고 가열 램프 아래에서 수술 후(30분) 관찰한 다음(케이지에서 최소 거리 - 24인치) 원래 주택 유닛으로 돌아갑니다.</li>
	<li>각 실험 그룹의 가짜 동물의 경우 IVC 가지 결찰, 소작 및 캐뉼레이션 없이 해부만 수행합니다.</li>
	<li>혈전 후 상태의 경우, 신장 정맥 바로 아래쪽에 있는 대동맥에서 분리된 IVC에 근위 직선 혈관 마이크로 클립을 24시간 동안 놓습니다. 동일한 해부 및 폐쇄 기술을 사용합니다.<ol><li>IVC 클립의 시각화, 흐름이 없는 원위 IVC 확인, 총회장맥 팽창을 포함하는 IVC 폐색의 초음파 징후를 확인합니다. 후속 시점은 연구 사양에 맞게 사용자 지정할 수 있습니다.</li>
		<li>모델링되는 생리적 변화를 관찰하려면 초기 혈전 형성을 위해 처음 72시간 동안의 시점을 선택하고 나중에 혈전 해결을 위해 시술 후 3일에서 7일 사이의 시점을 선택합니다. 이 모델에서 테스트된 나중 시점에는 7일에서 28일(5,13)이 포함됩니다.</li>
	</ol></li>
	<li>혈전 후 풍선 정맥 성형술을 위해 3.5-3.9단계의 기술을 다음 주의 사항과 함께 사용하십시오: 혈전 후 조건에서 IVC 직경이 증가하기 때문에 원하는 과신전을 달성하기 위해 더 높은 인서플리터 압력이 필요할 수 있습니다.</li>
	<li>설치류에 대한 안락사에 대한 미국 수의학 협회 지침(American Veterinary Medical Association Guidelines on Euthanasia)에 명시된 권장 사항에 따라 동물이 소생하지 않도록 두 가지 확인 방법(혈액 제거 및 필수 장기 제거)을 수행하여 안락사를 수행합니다.</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig01.jpg"> 그림 1: 횡방향 IVC(mid-infrarenal section) 직경의 경복부 이중체 측정 분포. 측정은 동물의 무게로 수행되었습니다. 무게와 IVC 직경 사이에는 유의미한 상관관계가 발견되지 않았습니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig01large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
4. 시료 전처리
<ol><li>고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 분석 기법을 사용하여 약물 코팅 정맥 성형술 풍선의 확인 조직 이식을 수행합니다.</li>
	<li>IVC와 대동맥을 절제하고 포르말린 고정 파라핀 매립 및 조직학적 분석을 위해 en bloc 을 제거합니다.</li>
	<li>단백질 분석을 위해 60,000μg/g의 희석 농도로 RIPA 버퍼를 사용하고, 4°C의 저온 실내 설정에서 조직 균질기로 처리하고, 처리 후 -80°C에서 보관합니다.</li>
</ol>

심부 정맥 치료 연구를 위한 설치류 정맥 성형술 풍선 모델

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</ol>

이해 상충은 선언되지 않았습니다.

VBM은 2.5-3.5mm 범위의 풍선을 사용하여 250g ≥ 쥐에 대해 수행할 수 있습니다. 750g을 초과하는 쥐의 경우, IVC 직경의 변화보다는 복강 내 지방 조직과 장기 크기의 양이 더 많아 이 기술이 제한됩니다. 우리의 경험에 비추어 볼 때, 정맥벽 단백질 분석 또는 활성 분석 및 조직학을 위해 그룹 간의 통계적 유의성을 얻기 위해 그룹당 10마리 이상의 동물이 필요하다는 것을 발견했습니다. 수술 중 주기적인 온도 조절 및 호흡수 모니터링은 수술의 성공을 보장하고 수술 후 성실한 관리를 보장하는 데 매우 중요합니다.
VBM은 안전하고(91.2% 생존율, 83/91 시술 수행) 평균 시술 시간 30분으로 재현성이 있습니다. 시술 관련 이환율에는 마취 합병증(1%, 1/91), 오피오이드 부작용(1%, 1/91), 출혈(2.1%, 2/91) 및 혈전증(4.3%, 4/91)이 포함됩니다. IVC 출혈은 복부 장기의 간섭이 적고 와이어 삽입을 위한 더 넓은 각도를 제공하는 infrarenal IVC 옆에 삽입 지점을 둔 역행 IVC 캐뉼레이션 접근 방식을 사용하여 모델 개발 중에 크게 감소했습니다. 또한 삽입 및 주입 단계에서는 올바른 투여 압력, 팽창 시간 및 날카로운 가이드 와이어 수축을 보장하기 위해 수술 보조기를 권장합니다. 수축 시에는 삽입 지점에서 IVC 벽이 찢어지는 것을 방지하기 위해 정맥 성형 풍선의 올바른 회수를 보장해야 합니다. 풍선 과팽창 및 파열을 피하기 위해 제조업체의 압력 측정을 따릅니다. 이러한 측정은 전반적으로 보다 안정적인 접근 방식에 기여하여 출혈 합병증을 줄이고 동물의 생존을 향상시킵니다.
IVC 출혈은 다음과 같은 예방 조치로 완화할 수도 있습니다. 먼저 뒷가지의 완전한 소작과 곁가지의 결찰을 확인합니다. 이는 또한 이전의 설치류 IVC 결찰-정체 분석 5,16,17에 기반한 결과의 재현성을 보장합니다. 둘째, 완전한 지혈 제어를 보장하기 위해 근위 및 원위 클립으로 올바른 교합을 확인합니다. 마지막으로, IVC 클립을 제거하기 전에 풍선 제거 시 U-stitch 봉합사가 완전히 폐색되었는지 확인합니다. 출혈이 있는 경우, 지혈 조절이 이루어질 때까지 솜으로 된 어플리케이터로 IVC를 부드럽게 압박하면 일반적으로 출혈이 멈춥니다. 출혈이 있는 경우 흡수성 젤라틴 분말과 같은 추가 지혈 조절제를 사용할 수 있습니다.
풍선 팽창, 수축 및 U-스티치 봉합사 폐쇄 시간이 5분 미만인 경우 혈전 합병증이 최소화되어야 합니다. 필요한 경우 항응고제를 투여할 수 있습니다. 현재까지 인간에게 시행되는 최소 침습 풍선 정맥 성형술을 모방한 완전한 경피적 시술은 없습니다. 접근 혈관(쥐의 대퇴 정맥)의 크기는 완전한 혈관 내 시술에 필요한 상업적으로 이용 가능한 가장 작은 4F 칼집(1.61mm)의 외경보다 훨씬 작습니다(평균 0.81mm)18 . 한계에는 숙련된 미세외과 의사의 필요성과 특수 장비의 필요성이 포함됩니다.
결론적으로, VBM 모델은 DVT 후 심부 정맥 성형술의 임상 시나리오를 밀접하게 시뮬레이션합니다. 이는 여러 시점에서 다양한 약물 대안을 사용하여 IVC에 대한 정맥 성형 풍선의 혈관 내 효과를 연구하는 데 유용한 도구입니다. 이 기술의 향후 응용 분야에는 스텐트, 혈전 절제술 카테터, 풍선 코팅 및 새로운 약리학적 치료제를 포함한 다른 의료 기기의 전임상 테스트가 포함됩니다.

해결되지 않은 혈전으로 인한 심부 정맥 폐색은 심부 정맥 혈전증(DVT)의 흔한 결과이며 혈전 후 증후군(PTS)의 원인 중 하나이며 수십억 달러의 의료 비용이 발생하고 삶의 질에 상당한 영향을 미칩니다 1,2,3. PTS는 소동물 DVT 모델 5,6,7에서 완전히포착되지 않은 결과적인 정맥벽 섬유증4을 동반하는 독특한 염증성 병리학이며, 더 중요한 것은 이전 모델에서는 치료적 개입에 대한 반응을 평가할 수 없다는 것이다. 혈전성 정맥 폐색은 종종 스텐트 삽입술과 풍선 정맥 성형술로 치료한다 8,9; 이러한 중재는 재협착 및 폐색으로 인한 높은 재중재율로 인해 방해를 받는다10,11,12.
동맥 특이적 협착/폐색을 해결하기 위해 약물 코팅된 풍선을 사용할 수 있음에도 불구하고 심부 정맥에는 존재하지 않습니다. 재협착의 분자 기전은 정맥에서 잘 이해되지 않고 있으며 직접적인 치료법이 없다4. 따라서 우리의 목표는 정맥 성형 풍선을 통해 심부 정맥 혈전 후 폐색을 시뮬레이션하여 국소적으로 전달된 치료제를 테스트할 수 있는 동물 모델을 제시하는 것입니다. 이 모델은 혈전 후 상태를 재현하고 다양한 유형의 정맥 성형 풍선이 생체 내 정맥 벽에 어떤 영향을 미치는지 평가합니다.

<table><tbody><tr><td>3-0 DemeCRYL</td><td>DemeTech</td><td>G183019F4P</td><td>12개/박스</td></tr><tr><td>5-0 DemeCRYL</td><td>DemeTech</td><td>G285017B0P</td><td>12개/박스</td></tr><tr><td>7-0 DemeLENE</td><td>DemeTech</td><td>PM197011F13M</td><td>12개/박스</td></tr><tr><td>8-0 DemeLON</td><td>DemeTech</td><td>NL868007C7P</td><td>12개 박스당 각도</td></tr><tr><td>클립 적용자</td><td>SCANLAN</td><td>3795-01A</td><td>7-1/4&Prime; (18.5 cm)</td></tr><tr><td>Baxter 0.9% 염화나트륨 관개 병</td><td>Baxter</td><td>SKU: 195-7124</td><td>1000mL 병</td></tr><tr><td>Bovie Cautery 저온 미세 팁</td><td>대칭 수술 Inc</td><td>AA00</td><td>10/bx</td></tr><tr><td>부프레노르핀</td><td>Fidelis 동물 건강</td><td>SKU- 099114</td><td>1.3mg/mL, 3mL</td></tr><tr><td>CD (Sprague Dawley) 쥐</td><td>Charles River</td><td>Strain Code 001</td><td>Male, 400 gm</td></tr><tr><td>Clip-It 추적 가능한 타이머</td><td>추적 가능한 제품</td><td>Cat. No. 5046</td><td></td></tr><tr><td>Cotton-Tip Applicator 3"</td><td>Dukal Corporation</td><td>922-00037BX100</td><td>1000/BOX</td></tr><tr><td>효소 수술 기구 세제 및 Presoak</td><td>Medline</td><td>MDS88000B9</td><td>1 갤런</td></tr><tr><td>아이 루브</td><td>Optixcare</td><td>SKU-065441</td><td>20gm&nbsp;</td></tr><tr><td>Gaymar T/Pump Stryker 현지화된 온난/냉각 치료 시스템</td><td>Stryker</td><td>TP700</td><td></td></tr><tr><td>Heifetz 마이크로클립 12mmx2.25mm</td><td>SCANLAN</td><td>3795-20</td><td>직선</td></tr><tr><td>Heifetz 마이크로클립 12mmx2.25mm</td><td>SCANLAN</td><td>3795-28</td><td>곡선</td></tr>형 <tr><td>Heifetz 마이크로클립 8mmx1.75mm&nbsp;</td><td>SCANLAN</td><td>3795-14</td><td>직선</td></tr><tr><td>Heifetz 마이크로클립 8mmx1.75mm&nbsp;</td><td>SCANLAN</td><td>3795-18</td><td>곡선</td></tr>형 <tr><td>인플레이션 장치&nbsp;</td><td>Merit Medical</td><td>IN4130</td><td>BasixCOMPAK 아날로그 디스플레이</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>MFR VETONE</td><td>SKU-501017</td><td>100mL, 흡입용 액체</td></tr><tr><td>핀셋과 집게가 포함된 미세 수술 키트</td><td>맞춤형</td><td></td><td></td></tr><tr><td>산소, E-tank</td><td>Medline</td><td>MDM1630</td><td></td></tr><tr><td>날카로운 가이드와이어</td><td>맞춤형</td><td></td><td></td></tr><tr><td>멸균 글래드 Press-n-Seal</td><td>Glad</td><td>SKU # PSS-140</td><td>ETO 노출된</td></tr><tr><td>멸균 비직물 거즈 스폰지 2s 4ply 4x4&nbsp;</td><td>Medline</td><td>SKU PRM21444H</td><td>100Ct</td></tr><tr><td>수술용 현미경&nbsp;</td><td>자이스</td><td>S100 / OPMI 피코</td><td></td></tr><tr><td>수술용 스크럽 & 손세척</td><td>Vetoquinol</td><td>NDC: 17030-003-16</td><td>16 oz</td></tr><tr><td>초음파 젤</td><td>Medline</td><td>CTR001305</td><td>8.5 oz, 12/CS</td></tr><tr><td>초음파 시스템</td><td>Siemens</td><td>ACUSON Antares</td><td>3-D, 컬러, 연속파(CW), 펄스파(PW), Power CW/CW 스펙트럼</td></tr><tr><td>Venoplasty 풍선</td><td>맞춤형</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

설치류 하부 정맥 cava 정맥 성형술 풍선 모델

Rodent Inferior Vena Cava Venoplasty Balloon Model

풍선 정맥 성형술은 외상, 선천성 해부학적 이상, 급성 심부 정맥 혈전증(DVT) 또는 스텐트 시술의 결과로 심부 정맥 협착 및 폐색을 치료하는 데 일반적으로 사용되는 임상 기술입니다. 만성 심부 정맥 폐쇄는 조직 병리학적으로 혈전증, 섬유증 또는 둘 다를 특징으로 합니다. 현재로서는 이러한 병리학적 과정을 표적으로 삼을 수 있는 직접적인 치료법은 없습니다. 따라서 새로운 중재를 테스트하기 위한 신뢰할 수 있는 in vivo 동물 모델이 필요합니다. 설치류 생존 하대정맥(IVC) 정맥 성형 풍선 모델(VBM)을 사용하면 여러 시점에 걸쳐 비혈전성 및 혈전 후 조건에서 풍선 정맥 성형술을 연구할 수 있습니다. 코팅된 정맥 성형술 풍선과 코팅되지 않은 정맥 성형술 풍선의 국소 및 전신 효과는 실시간 중합효소 연쇄 반응(RT-PCR), 웨스턴 블롯, 효소 결합 면역 흡착 분석(ELISA), 자이모그래피, 정맥벽 및 혈전 세포 분석, 전혈 및 혈장 분석, 조직학적 분석과 같은 조직, 혈전 및 혈액 분석을 통해 정량화할 수 있습니다. VBM은 재현성이 있고, 인간의 외과적 개입을 복제하며, 국소 정맥벽 혈전 단백질 변화를 식별할 수 있고, 동일한 샘플에서 여러 분석을 수행할 수 있어 그룹당 필요한 동물 수를 줄일 수 있습니다.

VBM은 완전한 지혈 제어에서 정맥 성형 풍선의 효과를 평가하는 모델입니다. 먼저, 올바른 풍선 크기 조정을 위해 그림 1과 같이 IVC(mid-infrarenal section) 직경을 정량화했습니다. 둘째, 개발된 단계별 미세수술 기법이 그림 2에 나와 있으며, 그림 3에도 중요한 단계의 예가 나와 있습니다. 날카로운 가이드 와이어를 사용한 IVC 캐뉼레이션에 사용된 역행 접근 방식을 주목하십시오.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig02.jpg"> 그림 2: 쥐의 정맥 성형 풍선 테스트를 위한 미세수술 기법. 사용된 기술은 여기에 설명되어 있습니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig02large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig03.jpg"> 그림 3: 배포 기술의 생체 내 이미지. (A) 지혈 조절. (B) infrarenal IVC의 U-스티치. (C) 3mm 시롤리무스 코팅 풍선이 있는 U-스티치를 통한 와이어 삽입. (D) 풍선 정맥 성형술 역행 배치(Sirolimus 코팅). 약어: IVC = 하대정맥; AO = 대동맥; CBV = 코팅 풍선 정맥 성형술. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig03large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
다른 정상 정맥 혈관 측정 및 IVC와 대동맥 간의 차이점은 그림 4에 강조되어 있습니다. 혈전증 초음파 소견은 그림 5에 포함되어 있습니다. 마지막으로, 수술 전 초음파와 혈전 후 측정의 직경을 비교한 결과는 그림 6에서 확인할 수 있습니다. vessel의 클립 배치 전후에 하대정맥의 평균 펄스파 도플러 유속(mm/s)은 그림 7에 나와 있습니다.
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig04.jpg"> 그림 4: 대표적인 경복부 이중 이미지와 횡방향 IVC 직경 계산의 예. (A) 근위 IVC. (B) Mid-infrarenal IVC(중부 IVC). (C) 원위 IVC. (D) Mid-infrarenal IVC 및 (E) Abdominal aorta의 컬러 도플러 분석. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig04large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig05.jpg"> 그림 5. 클립 전후 배치 이미지를 보여주는 이미지입니다. (A) IVC 폐색을 확인하는 클립 배치 후 초음파 소견. (B) 근위 및 원위 대동맥 흐름. (C) 근위 IVC 흐름. (D) 일반적인 장골 정맥. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig05large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig06.jpg"> 그림 6. 초음파 이미지. 초음파는 15분, 30분, 45분 전후에 변화하여 IVC 폐색을 확인합니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig06large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig07.jpg"> 그림 7: 평균 펄스파 도플러 유속. 클립 배치 전후의 하대정맥의 평균 유속(mm/s)(**: P ≤ 0.01, Mann-Whitney 테스트 수행). 오차 막대는 표준 오차를 표시합니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig07large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
새로운 코팅을 사용한 다양한 정맥 성형술의 결과를 분석하려면 관심 약물의 표적 효과를 입증할 수 있는 효과적인 단백질을 측정하는 것이 좋습니다. 여기에 사용된 시롤리무스 코팅 정맥 성형술 풍선의 경우 랫트 IVC 용해물의 인산화 AKT(p-AKT) 단백질 수준을 측정하여 p-AKT가 시롤리무스14,15에 반응하여 감소하는 다운스트림 단백질이기 때문에 mTOR 경로 억제를 확인했습니다. 그림 8에서 코팅 풍선 정맥 성형술(CBV) 후 p-AKT가 가짜 그룹에 비해 현저히 감소하는 것을 관찰할 수 있습니다.
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66820/66820fig08.jpg"> 그림 8: 단백질 p-AKT 수준. 정상적인 조건에서 가짜 대 코팅 풍선 정맥 성형술(CBV)의 쥐 IVC 용해물의 단백질 수준은 시롤리무스 정맥 성형술 코팅 풍선을 사용하여 mTOR 경로 억제로 목표 효과를 확인합니다. (**: P ≤ 0.01, Mann-Whitney 테스트 수행). 오차 막대는 표준 오차를 표시합니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66820/66820fig08large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>

이 프로토콜은 비혈전성, 혈전성 및 혈전 후 심부 정맥에서 정맥 성형 풍선(VB) 중재를 테스트하기 위한 생존 설치류 모델을 제시합니다.

설치류 하부 정맥 Cava 정맥 성형술 풍선 모델

Balloon venoplasty is a commonly used clinical technique to treat deep vein stenosis and occlusion as a consequence of trauma, congenital anatomic ...

rodent-inferior-vena-cava-venoplasty-balloon-model

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

내피 활성화 및 일부 혈액 스테이시, Virchow의 깡패의 두 가지 구성 요소로 인해 정맥 혈전 형성 유형의 하부 대정 맥 결과의 내부 표면에 내피 활성화 전해 유도.

정맥 혈전증의 전해 하부 대정 맥 모델 (EIM)

하부 대정 맥 혈전증의 마우스 전체 스태시스 모델은 정맥 벽 조직 및 혈전의 같지는 금액을 산출. 이것은 정맥 벽과 occlusive 혈전 사이에 만성 염증으로 급성에서 진행을 평가 상호 작용을 평가하기위한 유용한 입증되었습니다.

하부 대정 맥 혈전증의 마우스 완전한 스테이 시스 모델

세포 및 분자 neotissue 형성에 대한 우리의 지식을 개선하기 위해, TEVG의 쥐 모델은 최근에 개발되었다. 이식은 C57BL / 6 마​​우스의 신동맥 대정맥 개재 이식으로 이식되었다. 이 모델은 우리의 임상 연구에서 달성 된 것과 유사한 결과를 얻을 수 있지만, 훨씬 단축 된 시간 과정을 통해.

마우스 모델에서 하대 정맥 끼어 이식의 주입

이 프로토콜은 쥐의 경동맥에 관내 부상의 원인이 이제부터는 신생 내막의 증식을 유도하는 풍선 카테터를 사용합니다. 이 부상에 대한 응답으로 혈관 재 형성의 메커니즘을 연구하는 잘 확립 된 모델입니다. 또한 널리 잠재적 인 치료 방법의 유효성을 결정하는데 사용된다.

쥐 경동맥의 혈관 풍선 부상과 관내 관리

폐동맥고혈압(PAH)은 폐동맥의 소멸과 우심실 부전의 발병을 유발하는 폐동맥 질환입니다. PAH의 설치류 모델은 PAH의 병태생리학을 이해하는 데 중요합니다. 여기에서는 마우스와 쥐에서 우측 심장 카테터 삽입 및 심장 초음파 검사를 통한 혈류역학적 특성을 보여줍니다.

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우리는 직경이 작은 정맥이나 동맥에 사용할 수 있는 심낭 패치 혈관 성형술 모델을 확립했습니다. 이 모델은 정맥 및 동맥 신내강 증식 형성을 비교하는 데 사용할 수 있습니다.

쥐 대동맥 또는 하대 정맥에 혈관 성형술 패치

우리가 설명 여기에 열 등 한 베 나 정 맥 협 착 증 깊은 정 맥 혈전 증의 murine 모델. 이 모델이 혈액 흐름 제한, 인 간에 있는 정 맥 혈전 증의 주요 트리거 중 하나.

열 등 한 베 나 정 맥의 협 착 증: 깊은 정 맥 혈전 증의 Murine 모델

Suprahepatic 베 나 정 맥 (SHVC)의 재건 쥐 orthotopic 간 이식에 어려운 단계에 남아 있다. 이 문서에서 우리는 소설 자석 문 합 기술을 사용 하 여 쥐에서 SHVC 재건에 대 한 단계별 프로토콜을 보여줍니다.

Orthotopic의 쥐 모델 간 이식 Suprahepatic 베 나 정 맥 재건에 대 한 새로운 자석 문 합 기술을 사용 하 여

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유출 협착증을 가진 Aortocaval 누공을 사용하여 중앙 정맥 협착증의 뮤린 모형

본 프로토콜은 정맥 이식편을 사용하여 정맥 혈관 화 수술 후 정맥 심상 증식을 감쇠하는 전략을 개발하기 위한 동맥 혈압에 정맥을 복종시킴으로써 정맥 친혈증을 실험적으로 만드는 것을 목표로 합니다.

정맥 이식편을 사용하여 동맥 혈압하에서 인티맥 증식을 평가하는 재혈관 외과를 모방한 토끼 정맥 중개 모델

자가 혈전을 사용하여 폐색전증의 최소 침습 랫드 모델을 확립하기 위한 자세한 방법론이 설명됩니다. 경색 부위를 정량화하고 폐동맥 나무를 시각화하기 위한 추가 방법도 제공됩니다.

자가 혈전을 이용한 폐색전증의 최소 침습적 쥐 모델 확립

배우세요 설치류 하부 정맥 Cava 정맥 성형술 풍선 모델을 통해 정맥 혈전증 및 면역 반응을 연구하는 방법을. 이 생존 동물 모델은 인간의 복잡한 면역 상호작용을 재현하여 새로운 치료 전략 개발에 기여합니다.

설치류 하부 정맥 Cava 정맥 성형술 풍선 모델

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