2024년 9월 27일
이 프로토콜은 하악골 복구를 분석하기 위한 포괄적이고 효율적인 방법을 제시합니다. 생쥐 모델에서 비안정화 하악골 골절에 대한 재현 가능한 기술을 설명하여 조직 손상 및 뼈 손실을 최소화하면서 내연골 뼈 복구 과정을 분석할 수 있습니다.
연구 범위는 하악 내연골 골수복리(mandibular endochondral bone repair)입니다. 우리는 뼈 손실과 연조직 손상을 최소화하면서 불안정한 하악골 골절을 위한 기술을 개발하여 내연골 복구 과정을 가장 잘 나타내는 것을 목표로 합니다. 뼈 복구 과정은 굳은살에 가해지는 힘의 영향을 받으며 해부학적 부위에 따라 다릅니다.
하악골 복구에 대한 연구를 보고하는 저자는 거의 없습니다. 우리 프로토콜의 확산은 이 특정 분야의 연구 개발을 촉진할 것입니다. 우리의 프로토콜은 하악골 골절 부위에서 과도한 골 손실과 연조직 손상을 피하여 내연골 회복을 가장 잘 나타낼 수 있는 장점이 있습니다.
시작하려면 마취된 쥐를 시술 내내 섭씨 37도로 유지되는 멸균 필드로 덮인 가열판에 등을 대고 놓습니다. 전신 마취로 인한 건조를 방지하기 위해 양쪽 눈에 눈 윤활제를 바르십시오. 지속적인 이소플루란 흡입을 위해 주둥이에 마스크를 착용합니다.
그런 다음 접착 테이프로 쥐의 팔다리를 고정합니다. 멸균 장갑을 낀 후 10% 포비돈 요오드 용액과 알코올을 여러 번 문질러 피부를 소독합니다. 턱밑 피부 접근법을 수행하려면 마이크로 가위를 사용하여 하악 각도에서 하악의 수평 가지 접합부까지 피부를 절개합니다.
피하 조직을 절개하여 교근을 노출시킵니다. 이제 골막 엘리베이터를 사용하여 하악골의 하악 경계에서 교근 부착물을 분리합니다. 엘리베이터와 함께 하악골벽을 따라 복근을 들어 올립니다.
오목한 부분의 하악 각도 앞쪽에 식염수 혈청 세척이 있는 압전 뼈 수술 장치를 사용하여 하악의 아래쪽 경계에 작은 절골술을 만듭니다. 하악골의 후방 경계와 코로나 노치를 찾습니다. 그런 다음 하악 라무스를 따라 삽입된 작은 직선 가위를 사용하여 골절을 완료하여 추가적인 근육 구멍과 부상을 방지합니다.
하악골의 아래쪽 경계에 수직으로 가위를 놓아 골절의 올바른 방향을 허용합니다. 이제 완전한 골절을 보장하기 위해 집게로 부드럽게 조작하는 동안 두 뼈 분절 사이의 전체 이동성을 확인하십시오. 별도의 스티치를 사용하여 피부 절개 부위를 봉합합니다.
골절의 방향을 확인하기 위해 두부 측방 엑스레이를 촬영합니다. 저작력을 방지하기 위해 사료와 하드 농축이 없는 마우스 케이지를 준비하십시오. 피부가 완전히 치유될 때까지 처음 일주일 동안 수술한 쥐를 단일 케이지에 격리합니다.
시술 후 4시간, 24시간, 48시간, 72시간에 부프레노르핀을 피하주사로 투여한다. 통증과 골절의 2차 변위를 피하기 위해 0일째부터 통합 기간이 끝날 때까지 쥐에게 부드러운 다이어트 젤을 먹이십시오. 부프레노르핀 주사 전 아침에 골절 후 0일째부터 4일째까지 매일 쥐의 체중을 측정한 다음 동물이 희생될 때까지 일주일에 세 번 체중을 잰다.
조직학적 이미지는 야생형 마우스에서 골절 후 14일 후에 연골 주형이 있는 부드러운 굳은살의 발달을 확인합니다.
본 연구는 마우스 모델을 사용하여 하악골의 연골내 골 재생을 분석하는 포괄적인 기술을 제시합니다. 이 방법은 조직 손상과 골 손실을 최소화하는 비고정형 하악골 골절을 유도하여, 골 재생 과정에 대한 세밀한 분석이 가능하도록 하는 데 중점을 둡니다.
마우스의 표준화된 비고정 하악골 골절 모델을 통해, 과도한 골 손실이나 연조직 손상으로 인한 교란 요인을 최소화하면서 연골내 골 재생 과정을 정밀하게 분석할 수 있습니다. 이 프로토콜은 해부학적으로 까다로운 부위에서 골 치유 역학의 고충실도 모델링을 지원하며, 골 재생 연구의 초기 단계 표적 검증 및 기전적 리스크 감소에 직접적인 정보를 제공합니다. 이러한 전환점에서의 신뢰성 있고 재현 가능한 모델은 중개 골 재생 프로그램의 예측 신뢰도를 높여줍니다.
본 프로토콜은 하악골 골절 모델을 골 재생 연구의 초기 발견 단계부터 전임상 평가 단계까지 활용할 수 있는 기초적인 도구로 제시합니다.