Name: Less-Invasive Technique for Non-stabilized Mandibular Fracture in Mouse Models (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-09-27T13:25:00.000+00:00
Duration: 4 min 13 s
Description: 학습하세요 비안정화 하악골 골절 기법을 통해 쥐 모델에서 연골성 골판 형성을 포함한 골수복 과정을 분석하는 방법을. 이 프로토콜은 조직 손상을 최소화하여 생리적 골 치유 메커니즘을 정확히 연구할 수 있게 합니다.

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<meta charset="utf8"></head><body>생쥐의 뼈 수리를 위한 표준화된 하악 골절 프로토콜

<ol><li>Thompson, Z., Miclau, T., Hu, D., Helms, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+for+intramembranous+ossification+during+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ortho+Res%22%5BJournal%5D)">A model for intramembranous ossification during fracture healing.</a> J Ortho Res. 20 (5), 1091-1098 (2002).</li>
<li>Bahney, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+biology+of+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ortho+Res%22%5BJournal%5D)">Cellular biology of fracture healing.</a> J Ortho Res. 37 (1), 35-50 (2019).</li>
<li>Yu, Y. Y., Lieu, S., Hu, D., Miclau, T., Colnot, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Site+specific+effects+of+zoledronic+acid+during+tibial+and+mandibular+fracture+repair%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Site specific effects of zoledronic acid during tibial and mandibular fracture repair.</a> PLoS One. 7 (2), e31771(2012).</li>
<li>Landry, P. S., Marino, A. A., Sadasivan, K. K., Albright, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+soft-tissue+trauma+on+the+early+periosteal+response+of+bone+to+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Trauma%22%5BJournal%5D)">Effect of soft-tissue trauma on the early periosteal response of bone to injury.</a> J Trauma. 48 (3), 479-483 (2000).</li>
<li>Colnot, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+cell+fate+decisions+within+periosteum+and+bone+marrow+during+bone+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bone+Miner+Res%22%5BJournal%5D)">Skeletal cell fate decisions within periosteum and bone marrow during bone regeneration.</a> J Bone Miner Res. 24 (2), 274-282 (2009).</li>
<li>Julien, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+contribution+of+skeletal+muscle+mesenchymal+progenitors+to+bone+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Direct contribution of skeletal muscle mesenchymal progenitors to bone repair.</a> Nat Commun. 12 (1), 2860(2021).</li>
<li>McGuire, C., Boudreau, C., Prabhu, N., Hong, P., Bezuhly, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Piezosurgery+versus+conventional+cutting+techniques+in+craniofacial+surgery%3A+A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">Piezosurgery versus conventional cutting techniques in craniofacial surgery: A systematic review and meta-analysis.</a> Plast Reconstr Surg. 149 (1), 183-195 (2022).</li>
<li>Wong, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chondrocyte-to-osteoblast+transformation+in+mandibular+fracture+repair%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Chondrocyte-to-osteoblast transformation in mandibular fracture repair.</a> J Orthop Res. 39 (8), 1622-1632 (2021).</li>
<li>Vercellotti, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technological+characteristics+and+clinical+indications+of+piezoelectric+bone+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Minerva+Stomatol%22%5BJournal%5D)">Technological characteristics and clinical indications of piezoelectric bone surgery.</a> Minerva Stomatol. 53, 207-214 (2004).</li>
<li>Wong, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chondrocyte-to-osteoblast+transformation+in+mandibular+fracture+repair%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Chondrocyte-to-osteoblast transformation in mandibular fracture repair.</a> J Orthop Res. 39 (8), 1622-1632 (2021).</li>
<li>Tian, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIF-1%CE%B1+regulates+osteoclast+activation+and+mediates+osteogenesis+during+mandibular+bone+repair+via+CT-1%5BTitle%5D)+AND+%22Oral+Dis%22%5BJournal%5D)">HIF-1α regulates osteoclast activation and mediates osteogenesis during mandibular bone repair via CT-1.</a> Oral Dis. 28 (2), 428-441 (2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>부프레노르핀 : Buprecare 0.3 mg/kg</td><td>동물보호</td><td></td><td></td></tr><tr><td>엘리베이터 OBWEGESER 폭 6mm 길이 17.5cm&nbsp;</td><td>Collin Medical</td><td>HA 5905</td><td></td></tr><tr><td>집게 : 패드 플레이트 MORIA 11cm N&deg; 5</td><td>MORIA</td><td>9906</td><td></td></tr><tr><td>난방 테이블 Bioseblab 55 cm x 33 cm</td><td>Bioseblab</td><td>707</td><td></td></tr><tr><td>바늘 홀더 : 마이크로 Halsey 바늘 홀더 - 금속&nbsp;</td><td>라보덤</td><td>21,100</td><td></td></tr><tr><td>네오 클리어&nbsp;</td><td>Merck Millipore, 독일 다름슈타트</td><td>109843&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Ocry 젤 튜브 10g (눈 윤활제)</td><td>tvm lab&nbsp; &nbsp;</td><td>3.70045E+12</td><td></td></tr><tr><td>피에조토메 2 ASS FINAL</td><td>ACTEON</td><td>X57402</td><td></td></tr><tr><td>피에조토메 삽입 Piezocision PZ3</td><td>ACTEON</td><td>F87574</td><td></td></tr><tr><td>가위 마이크로&nbsp;</td><td>MORIA</td><td>MC52</td><td></td></tr><tr><td>실크 봉합사 PERMA HAND SEIDE&nbsp; / MERSILK</td><td>ETHICON</td><td>REF 18501G&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>스트레이트 가위</td><td>MORIA</td><td>4877A</td><td></td></tr><tr><td>Vetflurane (이소 플루 란) 250ml</td><td>VIRBAC</td><td>VET066 (Centravet)</td><td></td></tr></tbody></table>

less-invasive technique for non-stabilized mandibular fracture in mouse models

Less-Invasive Technique for Non-stabilized Mandibular Fracture in Mouse Models

in vivo 수술 절차의 경우, 마우스 모델에서 비안정화 하악 골절의 이러한 절차를 최적으로 수행하기 위해서는 구체적인 학습과 훈련이 필요합니다.
비안정화 하악골 골절에 대한 이 기술을 통해 내연골 복원 과정을 연구할 수 있습니다. 안락사 후, 하악 샘플을 4% 파라포름알데히드(24시간)에서 수집했습니다. EDTA pH 8로 전체 석회질 제거 후, 절편을 파라핀에 매립시켰다. 시상 연속 절편을 수행하고, 탈파라핀화 용액에서 탈파라핀화한 다음, 표준 프로토콜을 사용하여 Sirus Red/Alcian Blue 염색 전에 재수화했습니다. 조직학적 영상은 연골 주형이 있는 부드러운 굳은살의 형성을 확인했습니다(그림 5). 뼈 치유는 micro-CT 분석에서 볼 수 있듯이 골절 후 4주에 완료됩니다. 굳은살 형성의 시작(예: 연구 목적에 따라 7일마다(7일, 14일, 21일) 또는 그 이상)부터 뼈 치유가 끝날 때까지(즉, 28일) 다양한 핵심 지점에서 조직 형태학적 및 마이크로 CT 형태 분석을 통해 뼈 복구 과정을 연구하는 것이 좋습니다.
58마리의 야생형 마우스(C57BL/6J 배경)를 대상으로 수행된 이 절차의 후향적 분석을 기반으로 프로토콜의 성공률은 86.3%이고 배제율은 13.7%입니다. 수술 후 초기 조기 자연사(3%), 임계점(1%; 점수 &gt; 3 및/또는 체중 감소 &gt; 20%)을 보인 마우스에 대한 안락사 결정, 또는 절골술의 비정상적인 위치, 하악각의 비정상적인 분할(5%) 또는 골절이 어금니 수준(n=1/58)인 경우에 대한 안락사 결정이 원인이었다. 후자의 경우 어금니 수준에서 골절의 비정상적인 분열과 함께 감염이 관찰되었습니다(n= 1/58; 표 2).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66824/66824fig01.jpg"> 
그림 1: 하악 상행 분지의 턱밑 피부 접근 이미지. 하악골의 아래쪽 경계는 피에조톰 삽입물로 골절되어 뼈 손실(화살표)을 최소화할 수 있습니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66824/66824fig01large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66824/66824fig02.jpg"> 
그림 2: 마우스 하악의 염색. 6주 된 야생형 마우스 하악골의 측면도(alizarin red / alcian blue 염색으로 염색): 1. 과두, 2. 코로나 노이드 프로세스, 3. 코로나 노이드 노치, 4. 각도 프로세스, 5. 라무스의 후방 경계, 6. 하악의 기저(또는 하악) 경계. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66824/66824fig02large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66824/66824fig03.jpg"> 
그림 3: 쥐 두개골의 X선. 야생형 6주 된 쥐의 두개골 측면 X선(시상 보기)은 골절되지 않은 쥐의 하악골 측면(왼쪽)과 골절된 쥐의 하악골 측면 및 불안정한 하악 골절의 방향(화살표)을 보여주며, 하악 경계에서 과두 전방에 위치한 관상동맥 노치(오른쪽)까지 보여줍니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66824/66824fig03large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66824/66824fig04.jpg"> 
그림 4. 최적이 아닌 조건에서 쥐 두개골의 X선. 생후 6주 된 야생형 쥐의 두개골의 측면 X선(시상도)은 하악각(화살표)의 비정상적인 골절을 보여줍니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66824/66824fig04large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66824/66824fig05.jpg"> 
그림 5: 대표 결과. 야생형 마우스(C57BL/6J)에서 골절 후 14일째 결과. 하악 골절 부위의 재건된 μCT 스캔의 대표적인 3D 관상도, 뼈 굳은살(흰색 화살표). 내연골 복구 과정의 존재를 확인하는 굳은살 연골(Sirus Red/Alcian Blue 염색)의 대표 이미지. 약어: B = 뼈, C = 연골. 스케일 바: 200 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66824/66824fig05large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td>0</td>
			<td>1</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>동물적 측면</td>
			<td>보통</td>
			<td>화장실 축소</td>
			<td>주름진 머리, 아치형 등</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>행동</td>
			<td>보통</td>
			<td>저운동성</td>
			<td>운동성 저하, 음식 섭취 감소, 체중 감소 &gt; 10 %</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>임상 징후</td>
			<td>보통</td>
			<td>흉터 염증</td>
			<td>열린 흉터, 감염</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
표 1. 수술 후 웰빙 점수 척도. 
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td>n = 58 마우스</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>성공률</td>
			<td>86.3 %</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>제외율 :</td>
			<td>13.7 %</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>조기 자연사</td>
			<td>3%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>크리티컬 점수 3&lt; 및/또는 체중 감량 &gt; 20%</td>
			<td>1%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>하악각으로 분할된 비정상 골절</td>
			<td>5%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>비정상적인 골절 분할, 어금니 수준에서</td>
			<td>1.7 %</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
표 2. 프로토콜의 성공률과 배제율.

Non-stabilized fractures can be made at mandibular sites in mice, thus making it possible to analyze bone repair using an endochondral ossification mode. ...

less-invasive-technique-for-non-stabilized-mandibular-fracture-mouse

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

이 문서는 수정된 Ilizarov 외부의 fixators의 적용을 기반으로 긴 뼈 골절을 안정화하는 방법을...

산만 Osteogenesis, 또는 임계 크기의 결함의 치유는 Intramembranous 골화을 평가하기위한 Rigidly 안정 골절 만들기

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이 프로토콜은 대퇴골 절골술의 표준화된 고정을 위해 골수내 잠금 못을 사용하는 골유합 기술을 설명하며, 이는 마우스의 정상 및 결함 있는 뼈 치유를 분석하는 데 사용할 수 있습니다.

대퇴골 절골술의 표준화 된 고정을위한 골수 내 잠금 네일은 마우스에 정상 및 결함 뼈 치유를 분석하기

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프로토콜의 목표를 일관 된 골절 골절 생성 매개 변수를 최적화 하는 것입니다. 이 프로토콜은 뼈 크기와 동물 사이 존재할 수 있는 형태 변화에 대 한 계정. 또한, 비용 효과적인, 조정 가능한 분쇄 장치 설명 되어 있습니다.

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