암컷 C57BL/6J 마우스의 정신 장애에 대한 다중 통합 사회적 스트레스 모델

본 연구는 다중통합형 사회적 스트레스 모델을 구축하여 만성 사회적 스트레스가 암컷 쥐의 정신과적 증상으로 어떻게 이어지는지 이해하는 것을 목표로 합니다. 현재 이용 가능한 대부분의 정신 장애 모델은 수컷 동물을 사용하여 확립되었습니다. 이 프로토콜은 암컷 마우스에서 이러한 장애를 연구하도록 설계된 새로운 마우스 모델을 소개합니다. 이 연구는 암컷 마우스의 정신 장애의 기저에 있는 신경생리학적 메커니즘을 조사할 수 있는 신뢰할 수 있는 동물 모델을 개발했습니다.

[해설자] 시작하려면 암컷 피험자 마우스와 우승자 후보자의 각 케이지에 길이 10cm, 내경 26mm의 아크릴 튜브를 배치하여 3일 동안 적응하고 통과하는 방법을 배울 수 있도록 합니다. 튜브 경쟁을 위해 마우스를 훈련시키려면 각 마우스의 꼬리를 부드럽게 잡고 테이블 위에 놓습니다. 그런 다음 마우스의 꼬리를 잡고 튜브의 한쪽 끝에 놓습니다. 마우스가 튜브에 들어가면 꼬리를 풀고 자발적으로 통과하도록 합니다. 이제 마우스를 튜브의 반대쪽 끝에 놓고 동일한 절차를 반복합니다. 전체 과정을 한 번 더 반복한 후 마우스를 홈 케이지로 되돌립니다. 승자 심사를 위해 길이 30cm, 내경 26mm의 아크릴 튜브를 준비하고 튜브에 보이는 중간선을 그립니다. 두 승자 후보 마우스의 꼬리를 잡고 튜브의 반대쪽 끝에 놓습니다. 중간 지점에서 들어가 만나도록 허용한 다음 동시에 손을 떼고 타이머를 시작합니다. 승자를 다른 마우스를 튜브 밖으로 밀어내는 마우스로 식별하고 1점을 부여합니다. 두 쥐를 모두 집 케이지로 돌려보냅니다. 총 점수에 따라 마우스의 순위를 매깁니다. CD1 공격자 스크리닝을 위해 C57 수컷 마우스를 CD1 수컷의 홈 케이지에 직접 3분 동안 넣습니다. 공격성의 지표로 첫 번째 공격까지의 대기 시간, 공격 횟수, 3분 이내의 공격적 행동 지속 시간을 기록하고 추가로 2일 동안 선별 절차를 반복합니다. 사회적 경쟁 실패의 경우 다중 통합 사회적 스트레스 또는 MISS 마우스와 승자 마우스를 튜브의 반대쪽 끝에 배치하여 앞으로 걸어가 중간 지점에서 만나도록 합니다. MISS 마우스는 승자에 의해 튜브 밖으로 밀려납니다. 두 마우스의 위치를 바꾸고 상호 작용을 반복합니다. 그런 다음 미스 마우스와 우승자 마우스를 모두 집 케이지로 돌려보냅니다. 수정된 대리 사회적 패배 스트레스 모델링의 경우, 공격적인 상호 작용을 대리 관찰할 수 있도록 천공된 아크릴 덮개 아래에 갇힌 CD1 공격자의 케이지 안에 암컷 MISS 마우스를 배치합니다. 수컷 C57 침입자 마우스를 케이지에 도입하여 CD1 마우스에 의해 10분 동안 물리적으로 공격합니다. 10분 후, 수컷 침입자를 제거하고 암컷 MISS 마우스와 CD1 마우스에 추가로 5분의 감각 노출을 허용합니다. 5분 후, CD1 마우스를 새로운 수컷 C57 침입자 마우스로 교체하고 전체 절차를 세 번 반복합니다. 그런 다음 MISS 마우스를 홈 케이지로 되돌립니다. 다음으로, 피할 수 없는 과밀 스트레스를 모델링하려면 침구가 들어 있는 표준 케이지 안에 불투명 슬리브를 놓습니다. 12-15마리의 암컷 마우스, 모든 MISS 마우스 또는 다른 암컷과 혼합하여 매일 30분 동안 슬리브에 도입합니다. 사회적 고립을 위해 남은 10일 모델링 기간 동안 사회적 경쟁 실패, 대리 패배 스트레스 또는 과밀 스트레스를 겪지 않을 때 MISS 마우스를 개별적으로 수용합니다. 물보다 달콤한 용액에 대한 선호도를 측정하여 무쾌감증을 평가하는 자당 선호도 테스트는 순진한 대조군에 비해 MISS에 노출된 마우스에서 자당 선호도가 유의하게 낮은 것으로 나타났습니다. 물과 자당을 모두 포함하는 자당 선호도 테스트에서 총 수분 섭취량은 MISS와 나이브 마우스 간에 유의한 차이가 없었으며, 이는 감소된 자당 선호도가 수분 소비의 변화로 인한 것이 아님을 나타냅니다. 수동적 부동성을 측정하여 행동적 절망을 평가하는 꼬리 매달린 테스트에서는 MISS에 노출된 마우스가 순진한 마우스보다 부동 시간이 훨씬 더 긴 것으로 나타났습니다. 또한, 열린 경기장 중앙에서 보낸 시간을 측정하여 불안을 평가하는 데 사용된 오픈 필드 테스트에서는 MISS에 노출된 마우스가 순진한 마우스에 비해 중앙 영역에서 훨씬 적은 시간을 보내는 것으로 나타났습니다. 팔을 벌린 것을 피함으로써 불안을 측정하는 상승된 플러스 미로는 MISS에 노출된 쥐가 순진한 대조군보다 팔을 벌린 상태에서 훨씬 적은 시간을 보냈다는 것을 보여주었습니다.