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DOI: 10.3791/67125-v
Cong Xu*1, Siyu He*1, Yuefei Zhu1, Gazelle Crasto2, Caroline Chen1, Morgan L. Clay3, Yeh-Hsing Lao3, Kam W. Leong1
1Department of Biomedical Engineering,Columbia University, 2College of Dental Medicine, Division of Periodontics,Columbia University, 3Department of Pharmaceutical Sciences, University at Buffalo,The State University of New York
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
이 프로토콜은 인간 만능 줄기세포를 사용하여 혈관 오가노이드를 생성하는 방법을 제시합니다.
이 연구는 인간 IPSC에서 균질한 혈관 오가노이드의 확장 가능한 생산을 위한 수정된 방법을 소개합니다. 새로운 ROCK 억제제와 마이크로웰 구속을 사용함으로써 이 접근법은 재현성을 향상시키고 배치 간 변동을 최소화하여 다운스트림 형태 분석 및 질병 모델링 응용 분야에 적합합니다. 단일 세포 염기서열 분석 기술은 세포 집단 내 유전체, 후성유전체, 전사체 이질성 및 역학을 밝히기 위해 오가노이드 연구에서 광범위하게 활용되고 있습니다.
조직 투명화 및 광시트 현미경과 같은 3D 이미징 기술은 3차원 컨텍스트에서 세포 형태 및 조직 구조의 신속한 고해상도 이미징을 용이하게 합니다. 처리량과 표준화는 오가노이드 연구의 핵심 과제입니다. 수동 처리는 노동 집약적이며 처리량을 제한하므로 로봇 자동화는 유망한 솔루션입니다.
IPSC 품질 관리 및 분화 프로토콜 최적화를 포함한 오가노이드 배양의 표준화는 재현성을 크게 향상시키고 배치와 세포주 간의 변동을 최소화할 수 있습니다.
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