Name: 실험용 쥐의 우유 샘플링을 위한 효율적인 1인 기법 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-28T13:45:00.000+00:00
Duration: 4 min 56 s
Description: 배우세요 실험용 쥐의 우유 샘플링을 위한 효율적인 1인 기법을 통해 수유 연구에서 샘플 손실을 최소화하고 정확한 데이터를 확보하는 방법. 이 프로토콜은 10분 이내에 0.1–0.5 mL의 우유를 수집할 수 있습니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

모든 동물 관리 및 실험 절차는 연방 지침을 따랐으며 Rutgers University Institutional Animal Care and Use Committee의 승인을 받았습니다. 암컷 마우스(C57BL/6 배경)는 생후 8주에 짝짓기를 하였다. 그들은 표준 사육사 chow ad libitum 을 먹였고 규칙적인 12:12 h light : dark cycle 아래에서 유지되었습니다. 배송일은 PD1(Post-Delivery Day 1)로 계산되었습니다. PD2(조기 수유) 및 PD10(최대 수유)에서 우유를 아래와 같이 샘플링했습니다.
1. 착유 장치의 조립 
<ol>
	<li>5/32'' 내경(ID) 폴리염화비닐(PVC) 튜브의 한쪽 끝을 진공 펌프에 부착하고 테이프를 사용하여 부착물을 고정합니다(그림 1A에서 a로 표시됨). 알림: 진공 펌프는 실험실에서 사용할 수 있는 적절한 펌프 또는 중앙 진공("집 진공"이라고도 함)으로 대체할 수 있습니다.</li>
	<li>가시가 있는 직선 커넥터를 통해 5/32'' ID PVC 튜브의 다른 쪽 끝을 1/8'' ID PVC 튜브에 연결합니다.</li>
	<li>1/8'' ID PVC 튜브의 다른 쪽 끝을 커넥터(그림 18A에서 b로 표시됨)를 통해 1G 피하 주사 바늘에 연결합니다.</li>
	<li>P200 피펫 팁의 끝을 ~0.2cm 잘라 더 큰 구멍을 만듭니다. 팁이 위쪽을 향하도록 셉텀 스토퍼의 입구를 통해 P200 파이펫 팁을 삽입합니다(그림 1B). 참고: 동물 사이에서 피펫 팁을 교체하십시오.</li>
	<li>격막 마개를 멸균 수집 튜브에 부착합니다. 18G의 피하 주사 바늘로 셉텀 스토퍼를 뚫습니다.</li>
	<li>진공 펌프를 켜고 피펫 팁 개구부에 손가락(실험실 장갑으로 덮음)을 대고 흡입 압력을 확인합니다. 알림: 올바르게 조립되면 부드러운 흡입력을 느껴야 합니다. 수집 튜브, 18G 피하 주사 바늘 및 P200 피펫 팁은 멸균 상태여야 합니다.</li>
</ol>
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67669/67669fig1.jpg"> 
그림 1: 착유 장치. (A) PVC 튜브를 통해 18G 피하 주사 바늘에 부착된 진공 펌프가 있는 착유 장치. 바늘은 마이크로 원심분리기 수집 튜브에 부착된 격막 마개를 통과합니다. 젖꼭지에서 우유를 추출하는 데 사용되는 거꾸로 된 P-200 피펫 팁은 격막 마개의 구멍을 통해 삽입됩니다. (B) 착유 장치의 단면도. (C) 설명된 방법을 사용하여 착유되는 댐. (D) 수유가 최고조에 달할 때 댐에서 채취한 대표적인 우유 분취액(0.3mL). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67669/67669fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
2. 댐과 새끼의 분리
<ol>
	<li>젖을 짜는 날에는 댐을 새끼와 분리하여 땀샘에 우유가 축적 될 수 있도록합니다.</li>
	<li>둥지에서 새끼들을 따뜻하게 유지하십시오.</li>
	<li>초기 수유 중에 모유를 채취하는 경우(예: 이 연구에서는 PD2) 2시간의 분리를 허용합니다.</li>
	<li>최대 수유 중에 모유를 채취하는 경우(예: 이 연구의 PD10) 30-45분 동안 분리할 수 있습니다.</li>
</ol>
3. 댐의 마취
<ol>
	<li>댐에서 젖을 짤 준비가 되면 4번째 젖꼭지와 5번째 젖꼭지 사이의 복막강 한쪽에 케타민/자일라진 용액(복강내, ip)을 주사합니다. 참고: 투여할 마취액의 양은 댐의 무게(Rutgers University IACUC 프로토콜에 따라 80–100mg/kg 케타민, 5–12mg/kg 자일라진)로 계산됩니다. 이 용량은 45-60분 동안 쥐를 진정시켜 모유를 채취할 수 있는 충분한 시간을 제공합니다.</li>
	<li>발을 다치지 않게 단단히 쥐어 마취를 확인하여 동물의 감각과 통증에 대한 인식을 테스트합니다. 적절한 마취는 어떤 종류의 움직임도 하지 않는 것으로 표시됩니다.</li>
	<li>마취 상태에서 건조를 방지하기 위해 댐의 눈에 수의학 안과 연고를 바르십시오.</li>
</ol>
4. 우유 수집
<ol>
	<li>마취된 댐을 단단한 작업 표면에 그녀의 등에 놓습니다. 젖을 짜기 전에 멸균 알코올 준비 물티슈로 유방 부위를 부드럽게 닦아 해당 부위를 청소하십시오.</li>
	<li>주사를 맞지 않은 복막강 측면에 있는 4쌍과 5쌍의 젖꼭지 사이에 1-2단위의 옥시토신(ip)을 투여합니다. 참고 : 옥시토신은 빠르게 흡수 될 수 있고 반감기가 짧은 작은 분자입니다 14,15. 착유는 주입 후 1분 이내에 시작해야 합니다.</li>
	<li>주로 사용하지 않는 손으로 목 부위를 부드럽게 긁어 댐을 잡습니다.</li>
	<li>우유 구슬이 보일 때까지 젖꼭지 바닥에서 젖꼭지 끝까지 유방 조직을 짜서 젖꼭지에서 우유를 수동으로 추출합니다.</li>
	<li>전원 버튼을 켜서 진공 장치를 켭니다.</li>
	<li>거꾸로 된 P200 피펫 팁을 젖꼭지에 부드럽게 적용하여 착유를 시작합니다. 우유를 빼내는 데 도움이 되도록 부드럽게 당기는 동작을 사용합니다(그림 1C).</li>
	<li>충분한 양의 우유가 수집될 때까지 모든 젖꼭지에 대해 4.4–4.6단계를 반복합니다. 알림: 착유하는 동안 실수로 우유가 진공 라인의 18G 피하 주사 바늘 또는 PVC 튜브로 유입될 수 있습니다. 이것은 다음 동물의 젖을 짜기 전에 바늘이나 PVC 튜브를 교체하여 쉽게 해결할 수 있습니다.</li>
</ol>
5. 우유 수집 후 댐 복구
<ol>
	<li>마취된 댐을 새끼들과 함께 우리로 되돌리고 따뜻하게 지내십시오. 동물이 의식을 회복할 때까지 동물을 모니터링하십시오. 참고: 댐은 암컷이 새끼에게 돌아가기 전에 별도의 케이지에서 혼자 깨어날 수 있는 경우 다시 수유를 거부할 수 있습니다. 이것은 수유 초기(PD2) 동안 모유를 채취할 때 더 일반적입니다.</li>
	<li>댐이 새끼에게서 멀어지게 하여 그녀가 깨어나기 시작할 때 완전히 회복하도록 하십시오. 이는 정상적인 동작입니다. 참고: 우리는 댐이 주기적으로 새끼에게 돌아가고 몇 시간 후에 완전히 수유로 돌아가는 것을 관찰합니다.</li>
</ol>
6. 우유 분석
<ol>
	<li>시판되는 유당 분석 키트( 재료 표 참조)를 사용하여 우유 유당을 측정하십시오. 우유를 멸균수로 75배 희석하고 키트 프로토콜에 따라 분석을 수행합니다.</li>
	<li>다른 간행물16,17에서 입증된 creamatocrit 방법을 사용하여 유지방을 측정합니다.</li>
	<li>소 혈청 알부민을 표준19로 하여 Bradford 단백질 분석18을 수행하여 우유 단백질을 추정합니다. 분석을 수행하기 전에 우유를 4,000 × g에서 4 ° C에서 15 분 동안 원심 분리하십시오. 피펫팅으로 infratatent를 추출하고 분석 전에 멸균수로 1:10으로 희석합니다.</li>
	<li>폴리아크릴아미드 겔 전기영동(PAGE)을 수행합니다. 제조업체의 지시에 따라 프리캐스트 4%–12% Bis-Tris 겔에서 10μg의 단백질을 분리합니다. 단백질을 폴리비닐리덴 플루오라이드(PVDF) 멤브레인으로 옮기고 Coomassie Blue R-250으로 염색합니다.</li>
</ol>

<meta charset="utf8"></head><body>마우스의 수유 연구에서 우유 수집을 위한 최적화된 Single-Person Method

<ol><li>Ericsson, A. C., Crim, M. J., Franklin, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+brief+history+of+animal+modeling%5BTitle%5D)+AND+%22Mo+Med%22%5BJournal%5D)">A brief history of animal modeling.</a> Mo Med. 110 (3), 201-205 (2013).</li>
<li>Bryda, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mighty+mouse%3A+The+impact+of+rodents+on+advances+in+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Mo+Med%22%5BJournal%5D)">The mighty mouse: The impact of rodents on advances in biomedical research.</a> Mo Med. 110 (3), 207-211 (2013).</li>
<li>Watford, M., Erbelding, E. J., Smith, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glutamine+metabolism+in+rat+small+intestine%3A+Response+to+lactation%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Soc+Trans%22%5BJournal%5D)">Glutamine metabolism in rat small intestine: Response to lactation.</a> Biochem Soc Trans. 14 (6), 1058-1059 (1986).</li>
<li>Robinson, A. M., Williamson, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+glucose+metabolism+in+the+lactating+mammary+gland+of+the+rat+in+vivo+and+in+vitro.+Effects+of+starvation%2C+prolactin+or+insulin+deficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+J%22%5BJournal%5D)">Comparison of glucose metabolism in the lactating mammary gland of the rat in vivo and in vitro. Effects of starvation, prolactin or insulin deficiency.</a> Biochem J. 164 (1), 153-159 (1977).</li>
<li>Kowalski, T. J., Wu, G., Watford, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+adipose+tissue+amino+acid+metabolism+in+vivo+as+assessed+by+microdialysis+and+arteriovenous+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Rat adipose tissue amino acid metabolism in vivo as assessed by microdialysis and arteriovenous techniques.</a> Am J Physiol. 273 (3 Pt 1), E613-E622 (1997).</li>
<li>Ashcroft, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+to+assess+arteriovenous+differences+across+the+liver+and+hindlimb+muscles+in+mice+following+treadmill+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol to assess arteriovenous differences across the liver and hindlimb muscles in mice following treadmill exercise.</a> STAR Protoc. 4 (1), 101985(2023).</li>
<li>Hallemeesch, M. M., Ten Have, G. A., Deutz, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+flux+measurements+across+portal+drained+viscera%2C+liver%2C+kidney+and+hindquarter+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Metabolic flux measurements across portal drained viscera, liver, kidney and hindquarter in mice.</a> Lab Animal. 35 (1), 101-110 (2001).</li>
<li>Le, H., Nguyen, M., Manso, H. E. C., Wang, M. D., Watford, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipocytes+are+the+only+site+of+glutamine+synthetase+expression+within+the+lactating+mouse+mammary+gland%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Dev+Nutr%22%5BJournal%5D)">Adipocytes are the only site of glutamine synthetase expression within the lactating mouse mammary gland.</a> Curr Dev Nutr. 8 (6), 102168(2024).</li>
<li>Giordano, A., Smorlesi, A., Frontini, A., Barbatelli, G., Cinti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((White%2C+brown+and+pink+adipocytes%3A+The+extraordinary+plasticity+of+the+adipose+organ%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">White, brown and pink adipocytes: The extraordinary plasticity of the adipose organ.</a> Eur J Endocrinol. 170 (5), R159-R171 (2014).</li>
<li>Knight, C. H., Maltz, E., Docherty, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+yield+and+composition+in+mice%3A+Effects+of+litter+size+and+lactation+number%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Biochem+Physiol+A+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Milk yield and composition in mice: Effects of litter size and lactation number.</a> Comp Biochem Physiol A Comp Physiol. 84 (1), 127-133 (1986).</li>
<li>Willingham, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+collection+methods+for+mice+and+reeves%27+muntjac+deer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Milk collection methods for mice and reeves' muntjac deer.</a> J Vis Exp. (89), e51007(2014).</li>
<li>Muranishi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+for+collecting+mouse+milk+without+exogenous+oxytocin+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechniques%22%5BJournal%5D)">Method for collecting mouse milk without exogenous oxytocin stimulation.</a> Biotechniques. 60 (1), 47-49 (2016).</li>
<li>Gómez-Gallego, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+to+collect+high+volumes+of+milk+from+mice+%28mus+musculus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Anales+de+Veterinaria+de+Murcia%22%5BJournal%5D)">A method to collect high volumes of milk from mice (mus musculus).</a> Anales de Veterinaria de Murcia. 29, 55-61 (2014).</li>
<li>DePeters, E. J., Hovey, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+collecting+milk+from+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mammary+Gland+Biol+Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Methods for collecting milk from mice.</a> J Mammary Gland Biol Neoplasia. 14 (4), 397-400 (2009).</li>
<li>Oxytocin- oxytocin injection. , 
 <a target="_blank" href="https://dailymed.nlm.nih.gov/dailymed/fda/fdaDrugXsl.cfm?setid=a9b62187-4141-487c-a9da-f42ad7f9b408&type=display">https://dailymed.nlm.nih.gov/dailymed/fda/fdaDrugXsl.cfm?setid=a9b62187-4141-487c-a9da-f42ad7f9b408&type=display</a> (2019).</li>
<li>Lucas, A., Gibbs, J. A., Lyster, R. L., Baum, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Creamatocrit%3A+Simple+clinical+technique+for+estimating+fat+concentration+and+energy+value+of+human+milk%5BTitle%5D)+AND+%22Br+Med+J%22%5BJournal%5D)">Creamatocrit: Simple clinical technique for estimating fat concentration and energy value of human milk.</a> Br Med J. 1 (6119), 1018-1020 (1978).</li>
<li>Paul, H. A., Hallam, M. C., Reimer, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+collection+in+the+rat+using+capillary+tubes+and+estimation+of+milk+fat+content+by+creamatocrit%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Milk collection in the rat using capillary tubes and estimation of milk fat content by creamatocrit.</a> J Vis Exp. (106), e53476(2015).</li>
<li>Ernst, O., Zor, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Linearization+of+the+Bradford+protein+assay%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Linearization of the Bradford protein assay.</a> J Vis Exp. (38), e1918(1918).</li>
<li>Hueso, D., Fontecha, J., Gomez-Cortes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+study+of+the+most+commonly+used+methods+for+total+protein+determination+in+milk+of+different+species+and+their+ultrafiltration+products%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Nutr%22%5BJournal%5D)">Comparative study of the most commonly used methods for total protein determination in milk of different species and their ultrafiltration products.</a> Front Nutr. 9, 925565(2022).</li>
<li>Anderson, S. M., Rudolph, M. C., Mcmanaman, J. L., Neville, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Key+stages+in+mammary+gland+development.+Secretory+activation+in+the+mammary+gland%3A+It%27s+not+just+about+milk+protein+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Breast+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Key stages in mammary gland development. Secretory activation in the mammary gland: It's not just about milk protein synthesis.</a> Breast Cancer Res. 9 (1), 204(2007).</li>
<li>Meier, H., Hoag, W. G., Mcburney, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+characterization+of+inbred-strain+mouse+milk.+I.+Gross+composition+and+amino+acid+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nutr%22%5BJournal%5D)">Chemical characterization of inbred-strain mouse milk. I. Gross composition and amino acid analysis.</a> J Nutr. 85 (3), 305-308 (1965).</li>
<li>Hohlbaum, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Severity+classification+of+repeated+isoflurane+anesthesia+in+c57bl%2F6jrj+mice-assessing+the+degree+of+distress%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Severity classification of repeated isoflurane anesthesia in c57bl/6jrj mice-assessing the degree of distress.</a> PLoS One. 12 (6), e0179588(2017).</li>
<li>Weaver, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serotonin+deficiency+rescues+lactation+on+day+1+in+mice+fed+a+high+fat+diet%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Serotonin deficiency rescues lactation on day 1 in mice fed a high fat diet.</a> PLoS One. 11 (9), e0162432(2016).</li>
<li>Statement on resuming breastfeeding after anesthesia. , Committee on Obstetric Anesthesia. 
 <a target="_blank" href="https://www.asahq.org/standards-and-practice-parameters/statement-on-resuming-breastfeeding-after-anesthesia">https://www.asahq.org/standards-and-practice-parameters/statement-on-resuming-breastfeeding-after-anesthesia</a> (2009).</li>
<li>Lee, J. J., Rubin, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breast+feeding+and+anaesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22Anaesthesia%22%5BJournal%5D)">Breast feeding and anaesthesia.</a> Anaesthesia. 48 (7), 616-625 (1993).</li>
<li>Reece-Stremtan, S., Campos, M., Kokajko, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Academy+of+Breastfeeding%2C+M.+Abm+clinical+protocol+%2315%3A+Analgesia+and+anesthesia+for+the+breastfeeding+mother%2C+revised+2017%5BTitle%5D)+AND+%22Breastfeed+Med%22%5BJournal%5D)">Academy of Breastfeeding, M. Abm clinical protocol #15: Analgesia and anesthesia for the breastfeeding mother, revised 2017.</a> Breastfeed Med. 12 (9), 500-506 (2017).</li>
<li>Oosting, A., Verkade, H. J., Kegler, D., Van De Heijning, B. J., Van Der Beek, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+and+selective+manipulation+of+milk+fatty+acid+composition+in+mice+through+the+maternal+diet+during+lactation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nutr+Sci%22%5BJournal%5D)">Rapid and selective manipulation of milk fatty acid composition in mice through the maternal diet during lactation.</a> J Nutr Sci. 4, e19(2015).</li>
<li>Silverman, J., Stone, D. W., Powers, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+lipid+composition+of+milk+from+mice+fed+high+or+low+fat+diets%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">The lipid composition of milk from mice fed high or low fat diets.</a> Lab Animal. 26 (2), 127-131 (1992).</li>
<li>Rodgers, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Practical+aspects+of+milk+collection+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Practical aspects of milk collection in the rat.</a> Lab Animal. 29 (4), 450-455 (1995).</li>
<li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+high-fat+diet+on+secreted+milk+transcriptome+in+midlactation+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Genomics%22%5BJournal%5D)">Effect of high-fat diet on secreted milk transcriptome in midlactation mice.</a> Physiol Genomics. 49 (12), 747-762 (2017).</li>
<li>Kucia, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-protein+diet+during+gestation+and+lactation+affects+mammary+gland+mrna+abundance%2C+milk+composition+and+pre-weaning+litter+growth+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Animal%22%5BJournal%5D)">High-protein diet during gestation and lactation affects mammary gland mrna abundance, milk composition and pre-weaning litter growth in mice.</a> Animal. 5 (2), 268-277 (2011).</li>
<li>Ragueneau, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+development+in+mice.+Iv%3A+Quantity+and+gross+composition+of+milk+in+five+inbred+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Early development in mice. Iv: Quantity and gross composition of milk in five inbred strains.</a> Physiol Behav. 40 (4), 431-435 (1987).</li>
<li>Falconer, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+production+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Agric+Sci%22%5BJournal%5D)">Milk production in mice.</a> J Agric Sci. 37 (3), 224-235 (1947).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1mL 극저온 바이알</td><td>Corning</td><td>430658</td><td>조기 모유 채취에 선호</td></tr><tr><td>1mL 주사기</td><td>Exel</td><td>26048</td><td></td></tr><tr><td>2mL 마이크로 원심분리기 수집 튜브</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-681-344</td><td>피크 및 후기 우유 수집에 선호</td></tr><tr><td>18G 피하 주사 바늘 BD</td><td>PrecisionGlide</td><td>305195</td><td></td></tr><tr><td>27G 피하 주사 바늘</td><td>BD PrecisionGlide</td><td>305109</td><td></td></tr><tr><td>알코올 준비 와이프</td><td>Honeywell</td><td>154818</td><td></td></tr><tr><td>Bio-Rad 단백질 분석 염료 시약 농축액</td><td>Bio-Rad</td><td>5000006</td><td></td></tr><tr><td>소 혈청 알부민</td><td>시그마-알드리치</td><td>A2153</td><td></td></tr><tr><td>Immobilon -P PVDF 멤브레인</td><td>Immobilon</td><td>IPVH00010</td><td></td></tr><tr><td>케타민</td><td>Dechra</td><td>1000001250</td><td>수의사 사무실을 통해 구매&nbsp;</td></tr><tr><td>실험실 라벨링 테이프</td><td>VWR International</td><td>89097</td><td></td></tr><tr><td>락토스 분석 키트</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MAK487</td><td></td></tr><tr><td>미니 바베드 폴리프로필렌 피팅</td><td>Cole-Parmer Instrument Company</td><td>6365-90</td><td></td></tr><tr><td>마우스 다이어트</td><td>랩 다이어트</td><td>5015</td><td></td></tr><tr><td>NuPAGE Bis-Tris 미니 단백질 젤, 4&ndash; 12%</td><td>Invitrogen</td><td>NP0335BOX</td><td></td></tr><tr><td>Optixcare 아이 루브</td><td>Aventix</td><td>N/A</td><td>수의사 사무실을 통해 구매&nbsp;</td></tr><tr><td>수의사 사무실을 통해 구매한</td> <td>Oxytocin</td><td>Bimeda</td><td>1OXY015</td>&nbsp;</tr><tr><td>P200 피펫 팁</td><td>Gilson</td><td>F1733001</td><td></td></tr><tr><td>PVC 튜빙: 1/8'' ID</td><td>VWR International</td><td>MFLX07407-75&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>PVC 튜브 : 5/32 ''ID</td><td>VWR International</td><td>MFLX07407-77</td><td></td></tr><tr><td>셉텀 스토퍼</td><td>Chemglass Life Sciences</td><td>CG-3022-91</td><td></td></tr><tr><td>진공 펌프</td><td>Drummond Scientific Co.</td><td>P-103635</td><td></td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>Akorn 동물 건강</td><td>NDC 59399-110-20</td><td>수의사 사무실을 통해 구매&nbsp;</td></tr></tbody></table>

실험용 쥐의 우유 샘플링을 위한 효율적인 1인 기법

An Efficient Single-Person Technique for Milk Sampling from Laboratory Mice

이 기술을 사용하여 21일 수유 기간 동안 서로 다른 시간에 충분한 모유를 성공적으로 샘플링했습니다. 우리는 분만일을 출산 후 1일(PD1)로 간주하며, 이 작업에서는 PD2(조기 수유)와 PD10(최대 수유)에서 각각 n = 4로 우유를 샘플링했습니다. 우리는 각 댐에서 0.1–0.5mL의 우유를 편안하게 얻었습니다(그림 1D). 이 방법을 검증하기 위해 이러한 우유 샘플의 총 다량 영양소 구성을 측정하고 학생의 t-test를 사용하여 조기 수유 시 채취한 우유와 최대 수유 시 모유 간의 차이를 비교했습니다.
우유 유당 농도는 PD2에서 12.3 ± 0.6 g/L, PD10에서 12.0 ± 0.9 g/L로 평균적으로 나타났습니다(표 1). 유지방 비율은 PD2와 PD10에서 각각 26.0 ± 1.0% 및 33.4 ± 2.5%였습니다. 지방 농도는 PD2에서 174.4 ± 7.1 g/L였고 PD10에서 224.4 ± 17.1 g/L로 상당히 높았다(표 1). 평균 단백질 함량은 PD2에서 70.1 ± 5.2 g/L, PD10에서 75.1 ± 2.6 g/L였습니다(표 1). PD2와 PD10의 총 우유 단백질 함량은 차이가 없었지만, 개별 우유 단백질의 상대적 풍부도는 달랐습니다. 구체적으로, αS1-카제인과 유청산성 단백질은 PD2 우유보다 PD10 우유에서 더 높았으며(p &lt; 0.05), β-카제인(p &lt; 0.05)은 PD10보다 PD2에서 더 높은 농도를 보였습니다(그림 2).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67669/67669fig2.jpg"> 
그림 2: 우유 단백질 분석. (A) PD2 및 PD10에서 수집된 우유의 Coomassie Blue-stained PAGE 분석. 단백질 동정은 앞서 설명한 바와 같이 수행하였다14. (B) 개별 단백질 신호는 ImageJ에서 분석되고 염색된 총 단백질로 정규화되었습니다. 결과는 표준 오차 막대와 개별 데이터 포인트를 점으로 표시하여 평균으로 표현되었습니다. PD2 및 PD10에 있는 각 단백질의 평균 풍부도는 양측 스튜던트 t-검정을 사용하여 비교되었습니다. *p &lt; 0.05, n = 4. 약어: PAGE = 폴리아크릴아미드 겔 전기영동; PDn = 배송 후 일 n. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67669/67669fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td colspan="2"></td>
			<td>평균의</td>
			<td>세엠</td>
			<td>p-값</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">알러지가 (g/L)</td>
			<td>PD2</td>
			<td>12.3</td>
			<td>0.6</td>
			<td rowspan="2">0.75</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PD10</td>
			<td>12.0</td>
			<td>0.9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">지방 (g/L)</td>
			<td>PD2</td>
			<td>174.4</td>
			<td>7.1</td>
			<td rowspan="2">0.04</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PD10</td>
			<td>224.4</td>
			<td>17.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">단백질 (g/L)</td>
			<td>PD2</td>
			<td>70.1</td>
			<td>5.2</td>
			<td rowspan="2">0.42</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PD10</td>
			<td>75.1</td>
			<td>2.6</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
표 1: PD2 및 PD10에서 수집된 우유의 다량 영양소 조성. 평균의 평균 및 표준 오차(SEM)로 표현된 결과를 분석하여 양측 학생 t-검정(n=4)을 사용하여 수유일이 우유 구성에 미치는 영향을 조사했습니다.

Rodent models have been widely used in biology since the early 20th century to study basic physiology and biochemical mechanisms. In lactation and ...

an-efficient-single-person-technique-for-milk-sampling-from

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

이 방법은 생쥐에서 유선 개발 및 기능을 해부하다하고 평가하는 방법에 대해 설명합니다. 우유 방출은 옥시토신 기반 myoepithelial 세포 수축 분석을 사용하여 평가하는 동안 Excised 내유 분비가 전체 마운트를 사용하여 개발의 정도에 대한 평가입니다.

마우스 모델에서 유선 개발 및 기능 평가

&gt;jove_content&lt;동물 모델에서 모유를 채취하면 수동적 면역에 대한 이해, 수직 전파를 담당하는 병원체 식별, 형질전환 쥐 사용을 통한 인간 모유에서 발견되는 단백질의 상업적 생산 등 다양한 연구 경로를 촉진합니다. 여기에서는 생쥐와 Reeves의 문잭 사슴에서 우유를 수집하는 간단한 방법을 설명합니다.

마우스 및 꿰 문착 사슴 우유 수집 방법

우유는 신생아의 주요 영양 공급원입니다. 우유 성분을 분석하면 자손의 건강에 영향을 미치는 모계 요인에 대한 통찰력을 얻을 수 있습니다. 이 프로토콜은 수유생쥐에서 우유 샘플을 수집하는 수동 방법을 설명하며, 이는 추가 다운스트림 분석에 사용할 수 있습니다.

모세관 튜브 및 Creamatocrit에 의한 우유 지방 함량의 평가를 사용하여 쥐의 우유 컬렉션

정액 액 화는 정액 젤에서 해방 될 정자에 대 한 필요 합니다. 이 연구는 여성 재생산 지역 포스트 성교에서 정액을 수집 하 고 정액 액 화 시간을 측정 하기 위한 절차를 제공 합니다.

후에 쥐에 있는 정액 액의 측정 및 여성 재생산 지역에서 정액 짝짓기의 컬렉션

침 샘 hypofunction는 자가 면역 질환과 방사선 치료의 빈번한 결과 이다. 이러한 질병 마우스 모델에서 침 샘 기능의 재현 평가 기술 도전 이다. 여기, 쥐에 타 액 생산의 정확 하 고 재현 가능한 측정을 위한 간단한 방법을 설명 합니다.

쥐에 있는 침 샘 기능의 측정 하는 방법

여기 억제 쥐에서 꼬리 팁 혈액 샘플링 프로토콜 자주 샘플 컬렉션에 대 한 선물이. 이 메서드는 타악기 황 호르몬 분 비의 사정 패턴에 대 한 유용 하 고 다른 순환 요인의 분석에 대 한 적응 될 수 있습니다.

타악기 황 호르몬 분 비의 평가 대 한 쥐에서 꼬리 팁 혈액 샘플링을 자주

이 연구 보고 안경 돋보기와 진공 추출 튜브 시스템을 사용 하 여 쥐에서 꼬리 정 맥에서 혈액 샘플링 합니다. 우리의 방법은 연습을 쉽게 이며 쥐에 반복 혈액 샘플링에 사용 될 수 있었다.

진공 혈액 수집 시스템 및 안경 돋보기와 비 취 쥐의 꼬리 정 맥에서 혈 수정된

여기에서는 연구 동물이 최소한의 스트레스와 불편함으로 치료제를 쉽게 섭취하도록 장려하는 구강 배당의 대체 방법으로 마이크로피펫 유도 약물 투여(MDA)를 설명합니다.

설치류 모델에서 구강 배게이지에 대한 대체 방법으로 마이크로피펫 유도 약물 투여 사용

여기에서는 면역표현형을 위한 혈액 샘플링을 예로 들어 "야생 마우스" 시설의 미생물 억제 조치를 포함한 구조 및 운영 절차를 설명합니다.

천연 마이크로바이옴을 가진 실험용 마우스를 위한 시설의 운영 및 생물 봉쇄 절차: 면역표현형 분석 절차

여기에서는 란셋을 사용한 안면 정맥 천자를 통해 쥐 피험자의 최적화된 채혈 기술을 위한 프로토콜을 제시합니다. 우리는 유세포 분석 평가와 함께 이 기술을 사용하여 형질전환, 선천성 및 리포터 균주의 세포 표현형을 특성화합니다. 혈청 사이토카인 분석 및 당뇨병 연구에도 적합합니다.

쥐 채혈을 위한 안면 정맥 정맥 천자

배우세요 실험용 쥐의 우유 샘플링을 위한 효율적인 1인 기법을 통해 수유 연구에서 샘플 손실을 최소화하고 정확한 데이터를 확보하는 방법. 이 프로토콜은 10분 이내에 0.1–0.5 mL의 우유를 수집할 수 있습니다.

실험용 쥐의 우유 샘플링을 위한 효율적인 1인 기법

더 많은 동영상 탐색