Name: 표면 플라즈몬 공명 기술을 사용한 PD-1/PD-L1 억제제 식별 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-02T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 4 s
Description: 탐색하세요 표면 플라즈몬 공명 기술을 사용한 PD-1/PD-L1 억제제 차단 분석법을 통해 암 면역요법 신약 발굴의 효율성을 높이는 고속 스크리닝 플랫폼을 구축하는 방법을 학습하세요.

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<ol><li>Ribas, A., Wolchok, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+immunotherapy+using+checkpoint+blockade%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Cancer immunotherapy using checkpoint blockade.</a> Science. 359 (6382), 1350-1355 (2018).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+and+functional+analysis+of+the+costimulatory+receptor+programmed+death-1%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Structural and functional analysis of the costimulatory receptor programmed death-1.</a> Immunity. 20 (3), 337-347 (2004).</li>
<li>Freeman, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engagement+of+the+PD-1+immunoinhibitory+receptor+by+a+novel+B7+family+member+leads+to+negative+regulation+of+lymphocyte+activation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Engagement of the PD-1 immunoinhibitory receptor by a novel B7 family member leads to negative regulation of lymphocyte activation.</a> J Exp Med. 192 (7), 1027-1034 (2000).</li>
<li>Han, Y., Liu, D., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PD-1%2FPD-L1+pathway%3A+Current+researches+in+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">PD-1/PD-L1 pathway: Current researches in cancer.</a> Am J Cancer Res. 10 (3), 727-742 (2020).</li>
<li>Lyu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recognition+of+PDL1%2FL2+by+different+induced-fit+mechanisms+of+PD1%3A+A+comparative+study+of+molecular+dynamics+simulations%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Chem+Chem+Phys%22%5BJournal%5D)">Recognition of PDL1/L2 by different induced-fit mechanisms of PD1: A comparative study of molecular dynamics simulations.</a> Phys Chem Chem Phys. 22 (3), 1276-1287 (2020).</li>
<li>Taube, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colocalization+of+inflammatory+response+with+B7-H1+expression+in+human+melanocytic+lesions+supports+an+adaptive+resistance+mechanism+of+immune+escape%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Trans+Med%22%5BJournal%5D)">Colocalization of inflammatory response with B7-H1 expression in human melanocytic lesions supports an adaptive resistance mechanism of immune escape.</a> Sci Trans Med. 4 (127), 127ra37(2012).</li>
<li>Sun, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune-related+adverse+events+associated+with+programmed+cell+death+protein-1+and+programmed+cell+death+ligand+1+inhibitors+for+non-small+cell+lung+cancer%3A+A+PRISMA+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">Immune-related adverse events associated with programmed cell death protein-1 and programmed cell death ligand 1 inhibitors for non-small cell lung cancer: A PRISMA systematic review and meta-analysis.</a> BMC Cancer. 19 (1), 558(2019).</li>
<li>Alkholifi, F. K., Alsaffar, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dostarlimab+an+inhibitor+of+PD-1%2FPD-L1%3A+A+new+paradigm+for+the+treatment+of+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Medicina%22%5BJournal%5D)">Dostarlimab an inhibitor of PD-1/PD-L1: A new paradigm for the treatment of cancer.</a> Medicina. 58 (11), 1572(2022).</li>
<li>Uzar, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+updated+patent+review+on+PD-1%2FPD-L1+antagonists+%282022-present%29%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin+Ther+Pat%22%5BJournal%5D)">An updated patent review on PD-1/PD-L1 antagonists (2022-present).</a> Expert Opin Ther Pat. 34 (8), 627-650 (2024).</li>
<li>Ai, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+status+and+outlook+of+PD-1%2FPD-L1+inhibitors+for+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Des+Devel+Ther%22%5BJournal%5D)">Research status and outlook of PD-1/PD-L1 inhibitors for cancer therapy.</a> Drug Des Devel Ther. 14, 3625-3649 (2020).</li>
<li>Conroy, M., Naidoo, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune-related+adverse+events+and+the+balancing+act+of+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Immune-related adverse events and the balancing act of immunotherapy.</a> Nat Commun. 13 (1), 392(2022).</li>
<li>Guzik, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small-molecule+inhibitors+of+the+Programmed+Cell+Death-1%2FProgrammed+Death-Ligand+1+%28PD-1%2FPD-L1%29+interaction+via+transiently+induced+protein+states+and+dimerization+of+PD-L1%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Small-molecule inhibitors of the Programmed Cell Death-1/Programmed Death-Ligand 1 (PD-1/PD-L1) interaction via transiently induced protein states and dimerization of PD-L1.</a> J Med Chem. 60 (13), 5857-5867 (2017).</li>
<li>Sifniotis, V., Cruz, E., Eroglu, B., Kayser, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+advancements+in+addressing+key+challenges+of+therapeutic+antibody+design%2C+manufacture%2C+and+formulation%5BTitle%5D)+AND+%22Antibodies%22%5BJournal%5D)">Current advancements in addressing key challenges of therapeutic antibody design, manufacture, and formulation.</a> Antibodies. 8 (2), 36(2019).</li>
<li>Beck, H., Härter, M., Haß, B., Schmeck, C., Baerfacker, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+molecules+and+their+impact+in+drug+discovery%3A+A+perspective+on+the+occasion+of+the+125th+anniversary+of+the+Bayer+Chemical+Research+Laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Discov+Today%22%5BJournal%5D)">Small molecules and their impact in drug discovery: A perspective on the occasion of the 125th anniversary of the Bayer Chemical Research Laboratory.</a> Drug Discov Today. 27 (6), 1560-1574 (2022).</li>
<li>Nguyen, H. H., Park, J., Kang, S., Kim, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface+plasmon+resonance%3A+A+Versatile+technique+for+biosensor+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Sensors+%28Basel%2C+Switzerland%29%22%5BJournal%5D)">Surface plasmon resonance: A Versatile technique for biosensor applications.</a> Sensors (Basel, Switzerland). 15 (5), 10481-10510 (2015).</li>
<li>Liu, C., Seeram, N. P., Ma, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+molecule+inhibitors+against+PD-1%2FPD-L1+immune+checkpoints+and+current+methodologies+for+their+development%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell+Int%22%5BJournal%5D)">Small molecule inhibitors against PD-1/PD-L1 immune checkpoints and current methodologies for their development: A review.</a> Cancer Cell Int. 21 (1), 239(2021).</li>
<li>Hu, K., Li, X. -J., Asmamaw, M. D., Shi, X. -J., Liu, H. -M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+high-throughput+screening+HTRF+assay+for+identification+small+molecule+inhibitors+of+Skp2-Cks1%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Establishment of high-throughput screening HTRF assay for identification small molecule inhibitors of Skp2-Cks1.</a> Sci Rep. 11 (1), 21105(2021).</li>
<li>Puopolo, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+human+PD-1%2FPD-L1+blockade+assay+based+on+surface+plasmon+resonance+%28SPR%29+biosensor%5BTitle%5D)+AND+%22Bio-protoc%22%5BJournal%5D)">Establishment of human PD-1/PD-L1 blockade assay based on surface plasmon resonance (SPR) biosensor.</a> Bio-protoc. 13 (15), e4765(2023).</li>
<li>Ding, M., Chen, Y., Lang, Y., Cui, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+cellular+prion+protein+in+cancer+biology%3A+A+potential+therapeutic+target%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">The role of cellular prion protein in cancer biology: A potential therapeutic target.</a> Front Oncol. 11, 742949(2021).</li>
<li>Li, H., Seeram, N. P., Liu, C., Ma, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Further+investigation+of+blockade+effects+and+binding+affinities+of+selected+natural+compounds+to+immune+checkpoint+PD-1%2FPD-L1%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Further investigation of blockade effects and binding affinities of selected natural compounds to immune checkpoint PD-1/PD-L1.</a> Front Oncol. 12, 995461(2022).</li>
<li>Kamrani, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+immunotherapeutic+approaches+for+cancer+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Pathol+Res+Pract%22%5BJournal%5D)">New immunotherapeutic approaches for cancer treatment.</a> Pathol Res Pract. 248, 154632(2023).</li>
<li>Yan, Y., Zhang, L., Zuo, Y., Qian, H., Liu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+checkpoint+blockade+in+cancer+immunotherapy%3A+mechanisms%2C+clinical+outcomes%2C+and+safety+profiles+of+PD-1%2FPD-L1+inhibitors%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Immunol+Ther+Exp%22%5BJournal%5D)">Immune checkpoint blockade in cancer immunotherapy: mechanisms, clinical outcomes, and safety profiles of PD-1/PD-L1 inhibitors.</a> Arch Immunol Ther Exp. 68 (6), 36(2020).</li>
<li>Chandrasekharan, G., Unnikrishnan, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+throughput+methods+to+study+protein-protein+interactions+during+host-pathogen+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">High throughput methods to study protein-protein interactions during host-pathogen interactions.</a> Eur J Cell Biol. 103 (2), 151393(2024).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BMS-202%2C+a+PD-1%2FPD-L1+inhibitor%2C+decelerates+the+profibrotic+effects+of+fibroblasts+derived+from+scar+tissues+via+ERK+and+TGF%CE%B21%2FSmad+signaling+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Immun+Inflamm+Dis%22%5BJournal%5D)">BMS-202, a PD-1/PD-L1 inhibitor, decelerates the profibrotic effects of fibroblasts derived from scar tissues via ERK and TGFβ1/Smad signaling pathways.</a> Immun Inflamm Dis. 10 (1), e591(2022).</li>
<li>Surmiak, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PD-L1+inhibitors%3A+Different+classes%2C+activities%2C+and+mechanisms+of+action%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">PD-L1 inhibitors: Different classes, activities, and mechanisms of action.</a> Int J Mol Sci. 22 (21), 11797(2021).</li>
<li>Feoli, A., Sarno, G., Castellano, S., Sbardella, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DMSO-Related+effects+on+ligand-binding+properties+of+lysine+methyltransferases+G9a+and+SETD8%5BTitle%5D)+AND+%22ChemBioChem%22%5BJournal%5D)">DMSO-Related effects on ligand-binding properties of lysine methyltransferases G9a and SETD8.</a> ChemBioChem. 25 (4), e202300809(2024).</li>
<li>Tjernberg, A., Markova, N., Griffiths, W. J., HalléN, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DMSO-Related+effects+in+protein+characterization%5BTitle%5D)+AND+%22SLAS+Discov%22%5BJournal%5D)">DMSO-Related effects in protein characterization.</a> SLAS Discov. 11 (2), 131-137 (2006).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>50 mM NaOH</td><td>Cytiva 생명 과학</td><td>100358</td><td></td></tr><tr><td>50 mM NaOH</td><td>Fisher Scientific</td><td>905376</td><td></td></tr><tr><td>96웰 폴리스티렌 마이크로플레이트</td><td>Cytiva Life Sciences</td><td>BR100503</td><td></td></tr><tr><td>아민 커플링 키트</td><td>Cytiva Life Sciences</td><td>35120</td><td></td></tr><tr><td>Biacore T200 SPR 시스템 및 평가 소프트웨어 3.2</td><td>Cytiva 생명과학</td><td>28975001</td><td></td></tr><tr><td>비오티닐화 인간 PD-1 Fc, Avitag 단백질</td><td>Acro Biosystems</td><td>PD1-H82F1</td><td></td></tr><tr><td>BMS1166</td><td>MedChemExpress</td><td>HY-102011</td><td></td></tr><tr><td>디메틸 설폭사이드(DMSO)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>276855</td><td></td></tr><tr><td>DNase Free Water</td><td>Fisher Scientific</td><td>188506</td><td></td></tr><tr><td>글리신 1.5</td><td>Cytiva 생명 과학</td><td>BR100354</td><td></td></tr><tr><td>글리신 2.0</td><td>사이티바 생명과학</td><td>BR100355</td><td></td></tr><tr><td>글리신 2.5</td><td>사이티바 생명과학</td><td>BR100356</td><td></td></tr><tr><td>글리신 3.0</td><td>사이티바 생명과학</td><td>BR100357</td><td></td></tr><tr><td>HBS-EP+ 완충액</td><td>사이티바 생명과학</td><td>BR100669</td><td></td></tr><tr><td>인간 PD-L1 Fc 태그 단백질</td><td>아크로 바이오시스템</td>즈 <td>PD-1-H5258</td><td></td></tr><tr><td>이소프로판올</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP2618-1</td><td></td></tr><tr><td>마이크로플레이트 호일, 96-Well&nbsp;</td><td>Cytiva 생명 과학</td><td>28975816</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>746398</td><td></td></tr><tr><td>플라스틱 바이알 7mm</td><td>Cytiva 생명 과학</td><td>BR100212</td><td></td></tr><tr><td>고무 캡, 유형 3</td><td>Cytiva 생명 과학</td><td>BR100502</td><td></td></tr><tr><td>시리즈 S 센서 칩 CM5</td><td>Cytiva 생명 과학</td><td>29149603</td><td></td></tr><tr><td>아세트산나트륨 4.5</td><td>Cytiva 생명 과학</td><td>100350</td><td></td></tr><tr><td>아세트산나트륨 5.0</td><td>Cytiva 생명과학</td><td>100351</td><td></td></tr><tr><td>스트렙타비딘</td><td>시그마-알드리치</td><td>S4762</td><td></td></tr></tbody></table>

표면 플라즈몬 공명 기술을 사용한 pd-1/pd-l1 억제제 식별

Identifying PD-1/PD-L1 Inhibitors with Surface Plasmon Resonance Technology

CM5 칩에서 SA의 고정화 SPR 기기 및 관련 분석 소프트웨어의 출력을 통해 데이터를 분석했으며, 이는 플로우 셀 1 및 플로우 셀 2에서 SA 단백질의 목표 RU(2000RU)가 성공적으로 달성되었음을 나타냅니다. 플로우 셀 1과 2는 플로우 셀 1에서 1902.3RU(그림 1A), 플로우 셀 2에서 1900.7RU의 최종 반응으로 CM5 칩 표면에서 SA(40μg/mL)로 고정되었습니다(그림 1B).
SA 칩에서 PD-1의 고정화 SPR 기기 및 관련 소프트웨어의 출력을 기반으로 한 데이터 분석은 플로우 셀 1의 blank cell에 대해 낮은 반응 단위(RU)와 flow cell 2에서 PD-1 리간드에 대한 목표 RU(4000RU)의 성공적인 달성을 나타냈습니다. 플로우 셀 1...

표면 플라즈몬 공명 기술을 사용한 PD-1/PD-L1 억제제 식별

The disruption of the PD-1/PD-L1 interaction is a promising strategy for cancer immunotherapy. Reliable screening platforms are essential for evaluating ...

identifying-pd-1pd-l1-inhibitors-with-surface-plasmon-resonance

Research

연구

JoVE Journal

Cancer Research

암 연구

이 비디오는 센서 칩을 사용하여 두 분자 간의 상호 작용을 연구하기 위한 표면 플라즈몬 공명(SPR) 기술에 대해 설명합니다. 공명 각도의 변화와 반사광의 강도는 두 분자의 결합 및 해리의 함수로 감지되며, 이는 두 분자 간의 상호 작용에 대한 정보를 제공합니다.

센서 칩을 사용한 생체 분자 상호 작용을 연구하기 위한 표면 플라즈몬 공명

이 비디오는 단일 세포에서 단백질 분비물을 감지하기 위한 국소 표면 플라즈몬 공명 영상을 보여줍니다. 미세유체 설정과 펩타이드 결합 플라즈몬 나노구조 칩을 사용하여 공명 각도에서 반사광 강도의 변화는 단일 세포에서 분비된 단백질과의 상호 작용을 보여줍니다.

단일 세포에서 단백질 분비물을 감지하기 위한 국소 표면 플라즈몬 공명 이미징

표면 플라스 몬 공명 (SPR)은 실시간으로 생체 분자 상호 작용을 검출하기위한 라벨없는 방법이다. 여기서, 막 단백질을위한 프로토콜 : 기술의 장단점을 논의하는 동안 수용체 상호 작용 실험은 설명한다.

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간 셀룰러 통신은 내부와 세포 외부의 각종 생리 활성 조절에 중요​​하다. 이 논문은 단일 세포 분비물의 시공간적 특성을 측정하기위한 프로토콜을 설명합니다. 이를 달성하기 위해, 종합 접근법 생균 이미징 감지 라벨없는 nanoplasmonic을 통합하는 데 사용된다.

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이 작품에서는 특별 한 광학 전송의 원리에 의해 작동 하는 높은-품질 감지 배열을 조작 하는 nanoimprinting 리소 그래피 방법을 설명 합니다. 바이오 센서 낮은-비용, 강력 하 고 사용 하기 쉬운, 그리고 심장 분을 검출할 수 있다 임상 관련 농도 (99번째 백분위 수 차단 ∼10-400 pg/mL, 분석 결과 따라)에서 혈 청에서 나.

특별 한 광학 전송 인간의 혈 청에 심장 Biomarkers 척도를 사용 하 여

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체크포인트 억제제는 암과의 싸움을 위한 치료법을 개발하는 데 중요한 표적입니다. 이 보고서는 PD-1/PDL1 복합체 형성을 차단하는 중화 다클론 항체 생성을 유도하는 새로운 PDL1 펩타이드 기반 암 백신인 PDL1-Vaxx를 소개합니다. 이 작업은 또한 이 활성을 분석하기 위한 형광 비드 기반 분석법의 개발 및 테스트에 대해 자세히 설명합니다.

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표면 플라즈몬 공명 기술을 사용한 PD-1/PD-L1 억제제 식별

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