Name: 정량적 연구를 위한 소동물 혈관 구조의 신속한 전체 마운트 고해상도 이미징 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-23T14:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 49 s
Description: 배우세요 광시트 형광 현미경과 전산유체역학을 이용하여 병아리 배아 혈관계의 고해상도 3D 이미징 및 혈역학적 힘을 정량화하는 빠른 전체 마운트 프로토콜을. 이 방법은 선천성 심장 결함 연구에 필수적인 도구입니다.

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<ol><li>Lindsey, S. E., Butcher, J. T., Vignon-Clementel, I. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cohort-based+multiscale+analysis+of+hemodynamic-driven+growth+and+remodeling+of+the+embryonic+pharyngeal+arch+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Cohort-based multiscale analysis of hemodynamic-driven growth and remodeling of the embryonic pharyngeal arch arteries.</a> Development. 145 (20), dev162578(2018).</li>
<li>Lindsey, S. E., Vignon-Clementel, I. E., Butcher, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+early+cardiac+outflow+tract+adaptive+responses+through+combined+experimental-computational+manipulations%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Assessing early cardiac outflow tract adaptive responses through combined experimental-computational manipulations.</a> Ann Biomed Eng. 49 (12), 3227-3242 (2021).</li>
<li>Salman, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+left+atrial+ligation-driven+altered+inflow+hemodynamics+on+embryonic+heart+development%3A+Clues+for+prenatal+progression+of+hypoplastic+left+heart+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Biomech+Model+Mechanobiol%22%5BJournal%5D)">Effect of left atrial ligation-driven altered inflow hemodynamics on embryonic heart development: Clues for prenatal progression of hypoplastic left heart syndrome.</a> Biomech Model Mechanobiol. 20 (2), 733-750 (2021).</li>
<li>Henning, A. L., Jiang, M. X., Yalcin, H. C., Butcher, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+three-dimensional+imaging+of+live+avian+embryonic+morphogenesis+via+micro-computed+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Quantitative three-dimensional imaging of live avian embryonic morphogenesis via micro-computed tomography.</a> Dev Dyn. 240 (8), 1949-1957 (2011).</li>
<li>Anbazhakan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+flow+modeling+reveals+improved+collateral+artery+performance+during+the+regenerative+period+in+mammalian+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Blood flow modeling reveals improved collateral artery performance during the regenerative period in mammalian hearts.</a> Nat Cardiovasc Res. 1 (8), 775-790 (2022).</li>
<li>Pan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shrinkage-mediated+imaging+of+entire+organs+and+organisms+using+uDISCO%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Shrinkage-mediated imaging of entire organs and organisms using uDISCO.</a> Nat Methods. 13 (10), 859-867 (2016).</li>
<li>Renier, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((iDISCO%3A+a+simple%2C+rapid+method+to+immunolabel+large+tissue+samples+for+volume+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">iDISCO: a simple, rapid method to immunolabel large tissue samples for volume imaging.</a> Cell. 159 (4), 896-910 (2016).</li>
<li>Vieites-Prado, A., Renier, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+clearing+and+3D+imaging+in+developmental+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Tissue clearing and 3D imaging in developmental biology.</a> Development. 148 (18), dev199369(2021).</li>
<li>Rios Coronado, P. E., Red-Horse, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancing+cardiovascular+research+with+whole-organ+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Hematol%22%5BJournal%5D)">Enhancing cardiovascular research with whole-organ imaging.</a> Curr Opin Hematol. 28 (3), 214-220 (2021).</li>
<li>Miller, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Confocal+imaging+of+the+embryonic+heart%3A+How+deep%5BTitle%5D)+AND+%22Microsc+Microanal%22%5BJournal%5D)">Confocal imaging of the embryonic heart: How deep.</a> Microsc Microanal. 11 (3), 216-223 (2005).</li>
<li>Renier, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+of+brain+activity+by+automated+volume+analysis+of+immediate+early+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Mapping of brain activity by automated volume analysis of immediate early genes.</a> Cell. 165 (7), 1789-1802 (2016).</li>
<li>Lindsey, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+and+hemodynamics+after+early+embryonic+aortic+arch+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Biomech+Model+Mechanobiol%22%5BJournal%5D)">Growth and hemodynamics after early embryonic aortic arch occlusion.</a> Biomech Model Mechanobiol. 14 (4), 735-751 (2015).</li>
<li>Humphrey, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Constrained+mixture+models+of+soft+tissue+growth+and+remodeling-twenty+years+after%5BTitle%5D)+AND+%22J+Elast%22%5BJournal%5D)">Constrained mixture models of soft tissue growth and remodeling-twenty years after.</a> J Elast. 145 (1), 49-75 (2021).</li>
<li>Updegrove, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SimVascular%3A+An+open-source+pipeline+for+cardiovascular+simulation%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">SimVascular: An open-source pipeline for cardiovascular simulation.</a> Ann Biomed Eng. 45 (3), 525-541 (2017).</li>
<li>Kim, J. S., Min, J., Recknagel, A. K., Riccio, M., Butcher, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+three-dimensional+analysis+of+embryonic+chick+morphogenesis+via+microcomputed+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Anat+Rec%22%5BJournal%5D)">Quantitative three-dimensional analysis of embryonic chick morphogenesis via microcomputed tomography.</a> Anat Rec. 294 (1), 1-10 (2011).</li>
<li>Zhang, D., Lindsey, S. Evaluation of high-resolution image accuracy for small animal vascular flow quantitation. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aZhang%2C+D+%22Bull+Am+Phys+Soc%22">Bull Am Phys Soc</a>. , https://meetings.aps.org/Meeting/DFD24/Session/X03.8 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>#5 집게</td><td>정밀 과학 도구</td><td>11252-30</td><td></td></tr> <tr><td>#55 집게</td> 정밀 <td>과학 도구</td><td>11295-51</td><td></td></tr><tr><td>0.03 인치 내경 실리콘 튜브</td><td>VWR</td><td>32829-182</td><td></td></tr><tr><td>20 & L 피펫 팁&nbsp;</td><td>VWR</td><td>76322-134</td><td></td></tr><tr><td>35mm 페트리 접시&nbsp;</td><td>VWR</td><td>10799-192</td><td></td></tr><tr><td>5mL 플라스틱 주사기&nbsp;</td><td>VWR</td><td>BD 309646</td><td></td></tr><tr><td>디클로로메탄(DCM)</td><td>시그마-알드리치</td><td>270997</td><td>MSDS를 참조하십시오. 휘관 후드 아래 측면 캐비닛에 보관</td></tr> 에<tr><td>틸 신나메이트(ECi)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>112372</td><td>4 &deg에서 보관; C</td></tr><tr><td>미세 곡선 가위&nbsp;</td><td>Fine Science Tools</td><td>14061-09</td><td></td></tr><tr><td>FITC-poly-L-lysine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P3069</td><td>-20 &deg에서 보관; C(분말, 원액), 4&ordm; C(작업 용액)</td></tr> <tr><td>형광 현미경</td><td>EVIDENT SCIENTIFIC</td><td>MVX10</td><td></td></tr><tr><td>유리 모세관(0.75mm ID)&nbsp;</td><td>Sutter Instrument</td><td>FG-GB100-75-10</td><td></td></tr><tr><td>라이트시트 현미경</td><td>Zeiss</td><td>Z.1 시스템</td><td></td></tr><tr><td>메탄올</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M1775</td><td>MSDS를 참조하십시오. 휘관 후드</td></tr><tr><td>Microforge</td><td>Narishige International USA, Inc.</td> 아래 가연성 캐비닛에 보관<td>MF2</td><td></td></tr><tr><td>마이크로매니퓰레이터</td><td>World Percision Instrrument</td><td>M3301R</td><td></td></tr><tr><td>파라포름알데히드(PFA) 4%</td><td>Thermo Scientific</td><td>J19943. K2</td><td>MSDS를 참조하십시오. -20 &deg에서 보관; C(분말), 4 &deg; C(4% 작동 용액)</td></tr><tr><td>인산염 완충 식염수(PBS)</td><td>Cytiva</td><td>SH30256.01</td><td>Tyrode</td></tr>' www.simvascular.org 벤치탑 <tr><td>SimVascular</td><td></td><td></td><td>오픈 소스 소프트웨어</td></tr>에 저장 <tr><td> s 솔루션</td><td></td><td></td> 자체 <td>제작</td></tr></tbody></table>

정량적 연구를 위한 소동물 혈관 구조의 신속한 전체 마운트 고해상도 이미징

Rapid Whole-Mount High-Resolution Imaging of Small Animal Vasculature for Quantitative Studies

여기에 제시된 신속한 전체 장착형 고해상도 이미징 프로토콜(그림 1, 표 1)은 그림 2, 그림 3 및 그림 4와 같이 명확하게 윤곽이 그려진 혈관 내피를 생성하며, 여기서 병아리 배아 혈관 내피는 GFP 형광이므로 심장 발달 초기부터 성숙한 심장 발달까지 배아 단계에 걸쳐 녹색으로 윤곽이 그려져 있습니다(그림 4). 샘플 혈관 구조가 명확하게 라벨링되지 않은 경우 poly-L-lysine 농도, 염료 고정 시간 및 심실 수축 사용(해당되는 경우)의 올바른 조합을 찾는 것이 중요합니다(LSFM 이미징 전에 배아가 형광 입체경 또는 거시경 아래에서 어떻게 보여야 하는지에 대해서는 그림 2 참조). 따뜻한 Tyrod...

In small animal models of cardiovascular development and diseases, subject-specific computational simulations of blood flow&#160;enable quantitative ...

rapid-whole-mount-high-resolution-imaging-small-animal-vasculature

Research

연구

JoVE Journal

Bioengineering

생명공학

microCT으로 대비 향상된 작은 동물 혈관 이미징 시리얼에 대한 신속하고 비용 효율 높은 처리량...

MicroCT를 사용하여 대비 향상된 베셀 영상

관상 혈관의 시각화는 심장 혈관 질병의 우리의 이해를 증진하기 위해 중요합니다. 여기에서 우리는 마이크로 계산된 Tomography (μCT) 이미징을위한 준비, radiopaque 실리콘 고무 (Microfil)로 murine 관상 vasculature을 perfusing위한 방법을 설명합니다.

마이크로 계산된 Tomography 이미징을위한 준비로서 역행 관류 및 마우스 관상 Vasculature의 작성

이 프로토콜은 다광자 현미경을 사용하여 진공 안정화 이미징 창을 사용하여 실시간으로 온전한 폐의 장기 고해상도 단일 세포 이미징을 수행하는 방법을 설명합니다.

진공 안정 이미징 창으로 폐의 장기 고해상도 생체 내에 현미경

이 원고는 세로 두 광자 현미경을 사용하여 생체 내에서 아밀로이드 플라크 축적 동안 cerebrovasculature의 리모델링을 추적하는 절차를 설명합니다. 얇아진 두개골 제제는 알츠하이머 질환의 마우스 모델에서 뇌 손상의 진행을 평가하기 위해, 형광 염료의 시각화를 가능하게한다.

종<em&gt; 생체</em&gt;은 Cerebrovasculature의 이미징 : CNS 질환에 관련성

이 프로토콜 셀 전용 형광 마커를 표현 하는 유전자 변형 생쥐의 intravital 영상을 설명 합니다. Intravital 이미징 생체 삽입형 윈도 통해 프로세스의 미세한 시각화는 가능한를 사용 하 여 고해상도 관측에 대 한 비-침략 적 방법을 제공 한다. 이 방법은 경도 과정 공부에 특히 유용 합니다.

Intravital 현미경 종양 관련 맥 관 구조를 사용 하 여 고급 등 유전자 변형 형광 생쥐 피부 집계 창 실

이 문서는 대동맥 동맥 및 해 부의 마우스 모델에 대동맥 직경 정량화에 대 한 murine 맥 관 구조 perfuse를 방사선 불 투과성 리드 기반 실리콘 고무를 사용 하 여 상세한 방법론을 설명 합니다.

Β-aminopropionitrile-유도 대동맥 동맥 및 해 부의 마우스 모델에서 Aortopathy의 양적 마이크로 CT 분석

이중 래스터 스캐닝 광음향 이미저를 설계하여 와이드 필드 이미징과 실시간 이미징을 통합했습니다.

혈관 시각화를 위한 이중 래스터 스캐닝 광음향 소형 동물 이미지

우리는 조직 변형 및 염색의 새로운 발전과 축 방향 스캔 라이트 시트 현미경의 개발을 결합하여 전체 마우스 심장의 메조스코픽 재구성 방법을 보고합니다.

전체 마우스 심장의 메조스코픽 광학 이미징

여기에서는 소형 동물을위한 고해상도 양전자 방출 단층 촬영 / 컴퓨터 단층 촬영을 사용하여 심장 기능 및 형태를 정량화하기위한 실험 이미징 프로토콜을 제시합니다. 마우스와 쥐 모두 고려되어 두 종에 대한 컴퓨터 단층 촬영 조영제의 다양한 요구 사항을 논의합니다.

소형 동물을 위한 고해상도 심장 양전자 방출 단층 촬영/컴퓨터 단층 촬영

높은 공간 해상도(100μm)와 감도를 가진 초고속 도플러 초음파(UFUS)는 간 혈관 구조에 대한 포괄적인 정성적 개요를 얻기 위한 적절한 비침습적 이미징 방식을 나타냅니다. UFUS는 또한 미세혈관 구조의 정량적 측정을 용이하게 하여 혈관 질환 메커니즘에 대한 이해를 높이는 것을 목표로 합니다.

초고속 도플러 초음파를 이용한 생쥐의 간 혈관 구조의 이미징 및 정량화

여기에서는 쥐의 뇌 미세혈관 구조를 이미지화하기 위해 12.5μm 공간 해상도를 달성하는 초음파 국소화 현미경(ULM)을 위한 프로토콜에 대해 설명합니다. 이를 통해 혈류의 방향과 속도를 자세히 시각화할 수 있어 대뇌 순환 및 혈관 질환에 대한 연구를 발전시킬 수 있는 강력한 도구를 제공합니다.

초음파 국소화 현미경을 사용한 쥐 뇌 미세혈관 구조의 2차원 초해상도 시각화

배우세요 광시트 형광 현미경과 전산유체역학을 이용하여 병아리 배아 혈관계의 고해상도 3D 이미징 및 혈역학적 힘을 정량화하는 빠른 전체 마운트 프로토콜을. 이 방법은 선천성 심장 결함 연구에 필수적인 도구입니다.

정량적 연구를 위한 소동물 혈관 구조의 신속한 전체 마운트 고해상도 이미징

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