Name: 포스파티딜이노시톨 인산염 그룹이 독 PLA2의 멤브란트로픽 작용에 미치는 영향을 조사하기 위한 리포솜 막 투과성 분석 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-26T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 31 s
Description: 배우세요 리포솜 막 투과성 분석을 통해 독성 PLA2가 유발하는 막 변화를 민감하게 검출하는 방법을. 이 비용 효율적인 기술은 막 생물물리학 및 독소 상호작용 연구에 탁월한 해상도를 제공합니다.

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<ol><li>De Matteis, A., De Camilli, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphoinositides%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta+Lipids%22%5BJournal%5D)">Phosphoinositides.</a> Biochim Biophys Acta Lipids. 1851 (6), 697-918 (2015).</li>
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<li>Hokin, L. E., Hokin, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+acetylcholine+on+the+turnover+of+phosphoryl+units+in+individual+phospholipids+of+pancreas+slices+and+brain+cortex+slices%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">Effects of acetylcholine on the turnover of phosphoryl units in individual phospholipids of pancreas slices and brain cortex slices.</a> Biochim Biophys Acta. 18, 102-110 (1955).</li>
<li>Hokin, L. E., Hokin, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphoinositides+and+protein+secretion+in+pancreas+slices%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Phosphoinositides and protein secretion in pancreas slices.</a> J Biol Chem. 233, 805-810 (1958).</li>
<li>Lolicato, F., Nickel, W., Haucke, V., Ebner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphoinositide+switches+in+cell+physiology%3A+from+molecular+mechanisms+to+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Phosphoinositide switches in cell physiology: from molecular mechanisms to disease.</a> J Biol Chem. 300, 105757(2024).</li>
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<li>De Craene, J. O., Bertazzi, D. L., Bär, S., Friant, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphoinositides%2C+major+actors+in+membrane+trafficking+and+lipid+signaling+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Phosphoinositides, major actors in membrane trafficking and lipid signaling pathways.</a> Int J Mol Sci. 18, E634(2017).</li>
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<li>Harris, J. B., Scott-Davey, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Secreted+phospholipases+A2+of+snake+venoms%3A+effects+on+the+peripheral+neuromuscular+system+with+comments+on+the+role+of+phospholipases+A2+in+disorders+of+the+CNS+and+their+uses+in+industry%5BTitle%5D)+AND+%22Toxins+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Secreted phospholipases A2 of snake venoms: effects on the peripheral neuromuscular system with comments on the role of phospholipases A2 in disorders of the CNS and their uses in industry.</a> Toxins (Basel). 5 (12), 2533-2571 (2013).</li>
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<li>Gasanoff, E. S., Dagda, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cobra+venom+cytotoxins+as+a+tool+for+probing+mechanisms+of+mitochondrial+energetics+and+understanding+mitochondrial+membrane+structure%5BTitle%5D)+AND+%22Toxins%22%5BJournal%5D)">Cobra venom cytotoxins as a tool for probing mechanisms of mitochondrial energetics and understanding mitochondrial membrane structure.</a> Toxins. 16, 287(2024).</li>
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<li>Gasanov, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Naja+naja+oxiana+cobra+venom+cytotoxins+CTI+and+CTII+disrupt+mitochondrial+membrane+integrity%3A+implications+for+basic+three-fingered+cytotoxins%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Naja naja oxiana cobra venom cytotoxins CTI and CTII disrupt mitochondrial membrane integrity: implications for basic three-fingered cytotoxins.</a> PLoS One. 10 (6), 1-28 (2015).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>V. nikolskii 독사 독 PLA2의 기본 소단위 HDP-2P, HDP-2, 순도 98.5% &nbsp;</td><td>모스크바 유기화학 연구소</td><td></td><td>PMID:18083205의 포토콜에 따라 HDP-2가 분리되었습니다. HDP-2에서 DEAE 세파덱스 A-50&nbsp에 의해 정제된 HDP-2P; 그리고 nbsp;</td></tr><tr><td>카디오리핀(심장, 소) (나트륨 소금), >99%</td><td>맥클린</td><td>C916138</td><td></td></tr><tr><td>코엔자임 A, 후지필름 와코' s NEFA 키트 & nbsp;</td><td>미국 매사추세츠주 렉싱턴</td><td></td><td></td></tr><tr><td>투석관 셀룰로오스 막 분자량 컷오프 1.0 kDa</td><td>시그마 올드리치 트레이딩 컴퍼니(Sigma Aldrich Trading Co. Ltd.), 상하이, 중국;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>디지털 제어 물탱크 온도 조절기;</td><td>영광명의료기기 유한회사, 베이징, 중국 &nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>전자 고정밀 분석 저울(FA2004&nbsp);</td><td>상하이 마이이 유한회사, 중국</td><td></td><td></td></tr><tr><td>징화 752 자외선 가시광선 분광광도계 및 nbsp;</td><td>상하이 징화 인스트루먼트 유한회사, 상하이, 중국</td><td></td><td></td></tr><tr><td>L-&alpha;-포스파티딜콜린(계란, 닭고기)...ge; 95%</td><td>맥클린</td><td>L799415</td><td></td></tr><tr><td>L-&α;-포스파티딜리노시톨(간, 소) (나트륨 염), &ge; 99%</td><td>맥클린</td><td>L780292</td><td></td></tr><tr><td>L-&알파;-인산틸리노시톨-4,5-비스포스페이트 (뇌, 돼지) (암모늄 염), &ge; 99%</td><td>맥클린</td><td>L996223</td><td></td></tr><tr><td>L-&알파;-인산염-4-인산염 (뇌, 돼지) (암모늄 염), 99%</td><td>맥클린</td><td>L970250</td><td></td></tr><tr><td>L-&알파;-인산지세린 (뇌, 돼지) (나트륨염), >99%</td><td>맥클린</td><td>L864755</td><td></td></tr><tr><td>자기 교반기 JB-3&nbsp;</td><td>상하이 레이시 JB-3</td><td></td><td></td></tr><tr><td>pH 측정기 PHS-3C&nbsp;</td><td>상하이 INESA 과학기기 유한회사, 중국</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TGL-16B 미세원심분리기;</td><td>상하이 3안팅 컴퍼니, 상하이, 중국</td><td></td><td></td></tr><tr><td>초음파 디스펜서 Yt-JY96-IIN&nbsp;</td><td>상하이 예투오 기술 유한회사, 중국</td><td></td><td></td></tr><tr><td>진공 펌프 TW-1M</td><td>팅웨이 주식회사, 중국 원링</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

포스파티딜이노시톨 인산염 그룹이 독 pla2의 멤브란트로픽 작용에 미치는 영향을 조사하기 위한 리포솜 막 투과성 분석

A Liposome Membrane Permeability Assay for Investigating the Effects of Phosphatidylinositol Phosphate Groups on Membranotropic Action of Venom PLA2

포스파티딜이노시톨 인산염 그룹이 독 PLA2의 멤브란트로픽 작용에 미치는 영향을 조사하기 위한 리포솜 막 투과성 분석

We developed a novel, cost-effective, and highly sensitive assay for assessing liposomal membrane permeability based on ligand substitution reactions ...

a-liposome-membrane-permeability-assay-for-investigating-effects

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연구

JoVE Journal

Biochemistry

생화학

우리가 맥스와 Annexin V - 복합 자석 구슬과 대상 지질 및 Annexin V - 구속력 phosphatidylserine의 합성 지질 vesicles를 사용하여 자사의 목표 지질과 단백질의 상호 작용을 테스트하려면. 대상 지질에 바인딩 단백질은 공동 정화 및 비즈에서 용출 후 분석하고 있습니다.

자기 활성 셀 정렬 (LIMACS)를 사용하여 지질 소포 - 중재 동질 크로마 토그래피 : 단백질 지질 상호 작용을 분석하는 소설 방법

이 프로토콜 세부 대형 unilamellar 지질 vesicles로 펩타이드 translocation의 양적 측정을위한 방법입니다. 이 방법은 또한 멤브레인 translocation의 속도에 대한 정보를 제공하고 효율적이고 자발적 지질 bilayers를 건너되는 펩티드를 식별하는 데 사용할 수 있습니다.

대형 Unilamellar Vesicles로 펩타이드의 Translocation 측정

이 비디오에서는 해양 말미잘인 Anthopleura dowii의 조독 추출물에서 포스포리파아제의 존재를 확인하는 분석을 보여줍니다. 이 분석은 효소 포스포리파아제(Enzyme phospholipase)가 방사형 방식으로 고체 매체에 통합된 인지질을 확산시키고 분해하는 아가로스 겔 확산 기술을 사용합니다.

Phospholipase Activity Assay: Anthopleura dowii 의 조독 추출물에서 Phospholipase 활성을 결정하기 위한 겔 확산 분석

이 동영상은 형광 염료와 담금질제로 캡슐화된 대형 단층 소포(LUV)인 세포막 모방체를 사용하여 세포 투과 펩타이드와 세포막의 상호 작용을 연구하기 위한 형광 누출 분석에 대해 설명합니다.

세포를 투과하는 펩타이드와 멤브레인의 상호작용을 연구하기 위한 형광 누출 분석

이 비디오에서는 미세유체 플랫폼이라고 하는 지지된 지질 이중층의 포스파티딜에탄올아민 지질에 태그가 지정된 pH 민감 형광 염료를 사용하여 pH 조절 분석을 사용하여 미세유체 패턴의 단백질-포스포이노시티드 상호 작용을 시연합니다. 단백질이 인지질에 결합한 후 pH의 조절은 형광 소멸을 유발합니다.

단백질-포스포이노시티드 상호작용을 검출하기 위해 지원되는 지질 이중층에 대한 pH 조절 분석

PI (4,5) P (2)는 다양한 세포 기능을 조절하지만, 세포 세포막에서의 나노 조직 잘못 이해된다. 라벨 PI 플렉스 트린 상동 도메인에 융합 된 이중 색상 형광 프로브 (4,5) P (2)에 의해, 우리는 나노 미터 스케일에서 (4,5) P 원형질막 2 공간 분포를 PI를 연구하는 새로운 방법을 기술 .

소설 형광 프로브와 플라즈마 막에서 포스파티딜 이노시톨 -4,5- 비스 포스페이트의 단일 분자 슈퍼 해상도 이미징

우리는 옵신으로 재구성된 큰 단층 리포좀에서 인지질 스크램블을 측정하기 위한 형광 기반 분석을 설명합니다.

인지질 Scramblase 활동의 형광 기반의 분석

여기서 우리는 pH 조절에 기반한 라벨없는 방법을 사용하여 단백질 - 포스 포이 노시 티드 상호 작용을 연구하기위한 마이크로 유체 플랫폼의 맥락에서지지 된 지질 이중층을 제시합니다.

PIP-on-a-chip : 단백질 - 포스 포이 노시 티드 상호 작용에 대한 라벨없는 연구

여기서, 우리는 단백질 추출물과 트랜스포파디딜리노시톨 4-인산염이 체외에서인산염을 배출하는지 여부를 결정하기 위해 형광 지질 센서와 리포좀을 사용하는 프로토콜을 설명합니다.

형광 기반 측정 인스파디딜세린/포스파디딜리노시톨 4-인산염 교환 막 간

이 프로토콜은 유니 지질 및 다중 지질 소포, 지원지질 이중층 및 일시 중단 된 지질 이중 층을 모방 하는 세포의 형성을 설명 합니다. 이러한 체외 모델은 다양한 지질 유형을 통합하도록 조정할 수 있으며 다양한 분자 및 거대 분자 상호 작용을 조사하는 데 사용할 수 있습니다.

분자 상호 작용 연구를 위한 세포 모방 지원 및 중단된 지질 이중층 모델의 조립

여기에서, 우리는 바다 말미잘에서 조독 추출물을 얻고 용혈성 및 포스포리파제 활성을 검출하는 프로토콜을 기술한다.

간단한 생물 분석법에 의한 바다 아네몬의 조추출물에서 용혈성 및 포스포리파아제 활성의 확인

배우세요 리포솜 막 투과성 분석을 통해 독성 PLA2가 유발하는 막 변화를 민감하게 검출하는 방법을. 이 비용 효율적인 기술은 막 생물물리학 및 독소 상호작용 연구에 탁월한 해상도를 제공합니다.

포스파티딜이노시톨 인산염 그룹이 독 PLA₂의 멤브란트로픽 작용에 미치는 영향을 조사하기 위한 리포솜 막 투과성 분석

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