Name: 새로운 검출 및 정량화 방법으로서의 Locked-nucleic-acid In situ Hybridization을 통한 MicroRNA 증폭 및 인식 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-07T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 6 s
Description: 학습하세요 FFPE 조직에서 microRNA와 단백질을 동시에 검출하고 정량화하는 방법을. 이 기술은 종양 미세환경에서 분자 간 공간적 관계를 관찰하며 조직 구조를 보존합니다.

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<ol><li>Smolarz, B., Nowak, A. Z., Romanowicz, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breast+cancer-epidemiology%2C+classification%2C+pathogenesis+and+treatment+%28review+of+literature%29%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Breast cancer-epidemiology, classification, pathogenesis and treatment (review of literature).</a> Cancers. 14 (10), 2569(2022).</li>
<li>Davis-Dusenbery, B. N., Hata, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microrna+in+cancer%3A+The+involvement+of+aberrant+microrna+biogenesis+regulatory+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Cancer%22%5BJournal%5D)">Microrna in cancer: The involvement of aberrant microrna biogenesis regulatory pathways.</a> Genes Cancer. 1 (11), 1100-1114 (2010).</li>
<li>Peng, Y., Croce, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+microRNAs+in+human+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Targeted+Ther%22%5BJournal%5D)">The role of microRNAs in human cancer.</a> Signal Transduct Targeted Ther. 1 (1), 15004(2016).</li>
<li>Shi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mirnas+and+cancer%3A+Key+link+in+diagnosis+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%22%5BJournal%5D)">Mirnas and cancer: Key link in diagnosis and therapy.</a> Genes. 12 (8), 1289(2021).</li>
<li>Juźwik, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA+dysregulation+in+neurodegenerative+diseases%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">MicroRNA dysregulation in neurodegenerative diseases: A systematic review.</a> Prog Neurobiol. 182, 101664(2019).</li>
<li>Pauley, K. M., Cha, S., Chan, E. K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microrna+in+autoimmunity+and+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J+Autoimmun%22%5BJournal%5D)">Microrna in autoimmunity and autoimmune diseases.</a> J Autoimmun. 32 (3-4), 189-194 (2009).</li>
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<li>Garzon, R., Marcucci, G., Croce, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+micrornas+in+cancer%3A+Rationale%2C+strategies+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Drug+Disc%22%5BJournal%5D)">Targeting micrornas in cancer: Rationale, strategies and challenges.</a> Nat Rev Drug Disc. 9 (10), 775-789 (2010).</li>
<li>Jiao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA%3A+The+impact+on+cancer+stemness+and+therapeutic+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">MicroRNA: The impact on cancer stemness and therapeutic resistance.</a> Cells. 9 (1), 8(2019).</li>
<li>Lin, B., Jiang, J., Jia, J., Zhou, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+exosomal+miRNA+biosensing+for+liquid+biopsy%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Recent advances in exosomal miRNA biosensing for liquid biopsy.</a> Molecules. 27 (21), 7145(2022).</li>
<li>Farrell, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+identification+of+circulating+miRNAs+in+bovine+serum+and+their+potential+as+novel+biomarkers+of+early+Mycobacterium+avium+subsp.+paratuberculosis+infection%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The identification of circulating miRNAs in bovine serum and their potential as novel biomarkers of early Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis infection.</a> PLoS One. 10 (7), e0134310(2015).</li>
<li>Aparicio-Puerta, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Srnabench+and+srnatoolbox+2022+update%3A+Accurate+mirna+and+sncrna+profiling+for+model+and+non-model+organisms%5BTitle%5D)+AND+%22Nuc+Acid+Res%22%5BJournal%5D)">Srnabench and srnatoolbox 2022 update: Accurate mirna and sncrna profiling for model and non-model organisms.</a> Nuc Acid Res. 50 (W1), W710-W717 (2022).</li>
<li>Friedländer, M. R., Mackowiak, S. D., Li, N., Chen, W., Rajewsky, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mirdeep2+accurately+identifies+known+and+hundreds+of+novel+microRNA+genes+in+seven+animal+clades%5BTitle%5D)+AND+%22Nuc+Acid+Res%22%5BJournal%5D)">Mirdeep2 accurately identifies known and hundreds of novel microRNA genes in seven animal clades.</a> Nuc Acid Res. 40 (1), 37-52 (2012).</li>
<li>Chou, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mirtarbase+2016%3A+Updates+to+the+experimentally+validated+miRNA-target+interactions+database%5BTitle%5D)+AND+%22Nuc+Acid+Res%22%5BJournal%5D)">Mirtarbase 2016: Updates to the experimentally validated miRNA-target interactions database.</a> Nuc Acid Res. 44 (D1), D239-D247 (2016).</li>
<li>Porichis, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+detection+of+miRNAs+and+gene-specific+mRNA+at+the+single-cell+level+by+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">High-throughput detection of miRNAs and gene-specific mRNA at the single-cell level by flow cytometry.</a> Nat Commun. 5 (1), 5641(2014).</li>
<li>Eichert, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+crystal+structure+of+an+%27all+locked%27+nucleic+acid+duplex%5BTitle%5D)+AND+%22Nuc+Acid+Res%22%5BJournal%5D)">The crystal structure of an 'all locked' nucleic acid duplex.</a> Nuc Acid Res. 38 (19), 6729-6736 (2010).</li>
<li>Viratham Pulsawatdi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+robust+multiplex+immunofluorescence+and+digital+pathology+workflow+for+the+characterisation+of+the+tumour+immune+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Oncol%22%5BJournal%5D)">A robust multiplex immunofluorescence and digital pathology workflow for the characterisation of the tumour immune microenvironment.</a> Mol Oncol. 14 (10), 2384-2402 (2020).</li>
<li>Janati-Idrissi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Looking+for+a+needle+in+a+haystack%3A+De+novo+phenotypic+target+identification+reveals+hippo+pathway-mediated+mir-202+regulation+of+egg+production%5BTitle%5D)+AND+%22Nuc+Acid+Res%22%5BJournal%5D)">Looking for a needle in a haystack: De novo phenotypic target identification reveals hippo pathway-mediated mir-202 regulation of egg production.</a> Nuc Acid Res. 52 (2), 738-754 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>10배 TRIS 완충 식염수(TBS) pH 7.6 & nbsp;</td><td>써모피셔 사이언티브</td><td>그리고 nbsp; J62662&nbsp; K7</td><td>단계 사이에 간헐적으로 세척이 일어나는 경우에</td></tr><tr><td>1x 오팔 항체 희석제/차단 &nbsp;</td><td>아코야 바이오사이언스</td><td>ARD1001EA</td><td>단백질 차단 용액</td></tr><tr><td>1x 플러스 자동화 증폭 희석제</td><td>아코야 바이오사이언스&nbsp;</td><td>FP1609</td><td>오팔 형광포를 희석하는 데 사용됩니다</td></tr><tr><td>20배 농축액 &nbsp; 식염수 시트산나트륨(SSC) 버퍼(SSC)</td><td>시그마-올드리치</td><td>S6639-1L</td><td>프로브 하이브리다이제이션 후 miRNA 워시에 대해</td></tr><tr><td>4',6-디아미디노-2-페닐린돌 (DAPI)&nbsp;</td><td>써모 피셔 사이언티픽/인비트로젠</td><td>EN62248 / 62248</td><td>핵 염색을 위해</td></tr><tr><td>ACD HybEZ II 하이브리드화 시스템</td><td>ACD 바이오테크네</td><td>321711</td><td>miRNAscope 프로토콜 중 온도를 조절하는 오븐</td></tr><tr><td>항-CD8 (D8A8Y), 토끼 mAb</td><td>세포 신호 전달 기술</td><td>85336S</td><td>이 프로토콜 최적화를 위해 사용된 1차 항체 예시</td></tr><tr><td>항디곡시제닌(마우스) HRP 접합액</td><td>리비티 헬스 사이언스 주식회사</td><td>NEF832001EA</td><td>miRNA 검출에 사용되는 2차 시약</td></tr><tr><td>항-EpCAM (E6V8Y), 래빗 mAb</td><td>세포 신호 전달 기술</td><td>93790</td><td>이 프로토콜 최적화를 위해 사용된 1차 항체 예시</td></tr><tr><td>차단 시약 분말</td><td>아코야 바이오사이언스&nbsp;</td><td>FP1012</td><td>miRNA 차단 솔루션</td></tr><tr><td>에틸 알코올 100% (200도)</td><td>파르코</td><td>111000200</td><td>탈파라핀화를 위해</td></tr><tr><td>EZ-AR1 버퍼</td><td>바이오제네X</td><td>HK521-XAK</td><td>단백질 단계에서 FFPE 조직 절편의 항원 회취에 사용됩니다</td></tr><tr><td>EZ-AR1 이레그건스 버퍼</td><td>바이오제네X</td><td>HK546-XAK</td><td>miRNA 프로브 단계에서 FFPE 조직 절편의 항원 회수에 사용됨</td></tr><tr><td>EZ-리트리버 IR 시스템</td><td>바이오제네X</td><td>MW015-IR</td><td>FFPE 조직 절편의 항원 회취에 사용되는 마이크로파</td></tr><tr><td>과산화수소 용액 30% &nbsp;</td><td>시그마-올드리치 &nbsp;</td><td>HX0640-5&nbsp;</td><td>조직 준비를 위해서요. 내인성 과산화효소 활성을 차단하고 고색 제품을 생산하는 데 도움을 줍니다</td></tr><tr><td>miR-181c-3p miRNA 프로브</td><td>치아겐</td><td>339112</td><td>이 프로토콜을 최적화하기 위해 사용된 miRNA 프로브 예시</td></tr><tr><td>miRCURY LNA miRNA ISH 버퍼 세트 (FFPE)</td><td>치아겐</td><td>339450&nbsp;</td><td>miRNA 프로브를 희석하는 데 사용됩니다</td></tr><tr><td>오팔 620</td><td>아코야 바이오사이언스&nbsp;</td><td>FP1495001KT</td><td>1차 항체 식별을 위한 형광체</td></tr><tr><td>오팔 690&nbsp;</td><td>아코야 바이오사이언스&nbsp;</td><td>FP1497001KT</td><td>1차 항체 식별을 위한 형광체</td></tr><tr><td>오팔 안티-Ms + Rb HRP</td><td>아코야 바이오사이언스</td><td>ARH1001EA</td><td>검출제로 사용되는 2차 항체</td></tr><tr><td>피어스 16% 포르말데히드 (w/v), 메탄올 무첨가</td><td>써모피셔 사이언티브</td><td>28908</td><td>조직 준비를 위한 3.7% PFA를 만드는 방법</td></tr><tr><td>프로롱 다이아몬드 안티페이드</td><td>써모피셔 사이언티브</td><td>P36970</td><td>매체 장착</td></tr><tr><td>RNAscope 프로테아제 플러스</td><td>ACD 바이오테크네</td><td>322331</td><td>조직 절편을 투과시키기 위해; 단백질을 부분적으로 소화하여 표적 miRNA 분자를 노출시킨다</td></tr><tr><td>RNAse 없는 물과 nbsp;</td><td>코닝&nbsp;</td><td>46-000-CM&nbsp;</td><td>모든 장비를 청소하고 준비하며, 필요할 때 희석제로 사용하고, nbsp; 그리고 nbsp;</td></tr><tr><td>트윈 20세</td><td>시그마-올드리치</td><td>P1379-25ML</td><td>TBS-T를 만들기 위해</td></tr><tr><td>티라마이드 신호 증폭과 시아닌 3</td><td>아코야 바이오사이언스&nbsp;</td><td>NEL744001KT</td><td>miRNA를 식별하기 위한 형광체</td></tr><tr><td>U6 및 스크램블 miRNA 프로브</td><td>치아겐</td><td>339459</td><td>선택적 제어 프로브</td></tr><tr><td>자일렌 조직학 등급</td><td>써모피셔 사이언티브</td><td>UN1307</td><td>탈파라핀화를 위해</td></tr></tbody></table>

새로운 검출 및 정량화 방법으로서의 locked-nucleic-acid in situ hybridization을 통한 microrna 증폭 및 인식

MicroRNA Amplification and Recognition through Locked-nucleic-acid In situ Hybridization as a Novel Detection and Quantification Method

새로운 검출 및 정량화 방법으로서의 Locked-nucleic-acid In situ Hybridization을 통한 MicroRNA 증폭 및 인식

When using traditional probe-based in situ hybridization (ISH) imaging detection methods, microRNAs (miRNAs) are difficult to capture due to their size, ...

microrna-amplification-recognition-through-locked-nucleic-acid-situ

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