Name: 효모 세포의 스트레스 후 생존을 정량화하기 위한 유세포 분석법과 결합된 최적화된 LIVE/DEAD 분석 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-29T14:50:00.000+00:00
Duration: 9 min 58 s
Description: 배우세요 효모 세포의 산화 스트레스 후 생존률을 정량화하는 유세포 분석법과 LIVE/DEAD 분석 기법을 활용한 세포막 무결성 평가 방법입니다. 이 프로토콜은 생물학적 스트레스 반응 연구에 활용됩니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Lourens-Hattingh, A., Viljoen, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+and+survival+of+a+probiotic+yeast+in+dairy+products%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Res+Int%22%5BJournal%5D)">Growth and survival of a probiotic yeast in dairy products.</a> Food Res Int. 34 (9), 791-796 (2001).</li>
<li>Qiu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+tolerance+phenotype+of+industrial+yeast%3A+industrial+cases%2C+cellular+changes%2C+and+improvement+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Microbiol+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Stress tolerance phenotype of industrial yeast: industrial cases, cellular changes, and improvement strategies.</a> Appl Microbiol Biotechnol. 103 (16), 6449-6462 (2019).</li>
<li>Welsh, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival%2C+persistence%2C+and+isolation+of+the+emerging+multidrugresistant+pathogenic+yeast+Candida+auris+on+a+plastic+health+care+surface%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Survival, persistence, and isolation of the emerging multidrugresistant pathogenic yeast Candida auris on a plastic health care surface.</a> J Clin Microbiol. 55 (10), 2996-3005 (2017).</li>
<li>Millard, P. J., Roth, B. L., Thi, H. P., Yue, S. T., Haugland, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+the+FUN1+family+of+fluorescent+probes+for+vacuole+labeling+and+viability+testing+of+yeasts%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Environ+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Development of the FUN1 family of fluorescent probes for vacuole labeling and viability testing of yeasts.</a> Appl Environ Microbiol. 63 (7), 2897-2905 (1997).</li>
<li>WlochSalamon, D. M., Bem, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Types+of+cell+death+and+methods+of+their+detection+in+yeast+Saccharomyces+cerevisiae%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Types of cell death and methods of their detection in yeast Saccharomyces cerevisiae.</a> J Appl Microbiol. 114 (2), 287-298 (2013).</li>
<li>Boulos, L., Prévost, M., Barbeau, B., Coallier, J., Desjardins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LIVE%2FDEAD+BacLight%3A+Application+of+a+new+rapid+staining+method+for+direct+enumeration+of+viable+and+total+bacteria+in+drinking+water%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Microbiol.+Methods%22%5BJournal%5D)">LIVE/DEAD BacLight: Application of a new rapid staining method for direct enumeration of viable and total bacteria in drinking water.</a> J. Microbiol. Methods. 37 (1), 77-86 (1999).</li>
<li>Zhang, T., Fang, H. H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+Saccharomyces+cerevisiae+viability+using+BacLight%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnol+Lett%22%5BJournal%5D)">Quantification of Saccharomyces cerevisiae viability using BacLight.</a> Biotechnol Lett. 26 (12), 989-992 (2004).</li>
<li>Stocks, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+and+use+of+the+commercially+available+viability+stain%2C+BacLight%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+A%22%5BJournal%5D)">Mechanism and use of the commercially available viability stain, BacLight.</a> Cytometry A. 61A (2), 189-195 (2004).</li>
<li>Sun, S., Baryshnikova, A., Brandt, N., Gresham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+interaction+profiles+of+regulatory+kinases+differ+between+environmental+conditions+and+cellular+states%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Syst+Biol%22%5BJournal%5D)">Genetic interaction profiles of regulatory kinases differ between environmental conditions and cellular states.</a> Mol Syst Biol. 16 (5), e9167(2020).</li>
<li>Li, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allicin+shows+antifungal+efficacy+against+Cryptococcus+neoformans+by+blocking+the+fungal+cell+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Allicin shows antifungal efficacy against Cryptococcus neoformans by blocking the fungal cell membrane.</a> Front Microbiol. 13, 1012516(2022).</li>
<li>Jin, Y., Zhang, T., Samaranayake, Y., Fang, H. H. P., Yip, H. K., Samaranayake, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+new+probes+and+stains+for+improved+assessment+of+cell+viability+and+extracellular+polymeric+substances+in+Candida+albicans+biofilms%5BTitle%5D)+AND+%22Mycopathologia%22%5BJournal%5D)">The use of new probes and stains for improved assessment of cell viability and extracellular polymeric substances in Candida albicans biofilms.</a> Mycopathologia. 159 (3), 353-360 (2005).</li>
<li>Bojsen, R., Regenberg, B., Folkesson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Saccharomyces+cerevisiae+biofilm+tolerance+towards+systemic+antifungals+depends+on+growth+phase%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Saccharomyces cerevisiae biofilm tolerance towards systemic antifungals depends on growth phase.</a> BMC Microbiol. 14, 305(2014).</li>
<li>Ryan, L. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity+of+potent+and+selective+host+defense+peptide+mimetics+in+mouse+models+of+oral+candidiasis%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicrob+Agents+Chemother%22%5BJournal%5D)">Activity of potent and selective host defense peptide mimetics in mouse models of oral candidiasis.</a> Antimicrob Agents Chemother. 58 (7), 3820-3827 (2014).</li>
<li>Chudzik, B., Koselski, M., Czuryło, A., Trębacz, K., Gagoś, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+look+at+the+antibiotic+amphotericin+B+effect+on+Candida+albicans+plasma+membrane+permeability+and+cell+viability+functions%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+Biophys.+J.+%28EBJ%29%22%5BJournal%5D)">A new look at the antibiotic amphotericin B effect on Candida albicans plasma membrane permeability and cell viability functions.</a> Eur. Biophys. J. (EBJ). 44 (1-2), 77-90 (2015).</li>
<li>Roscetto, E., Contursi, P., Vollaro, A., Fusco, S., Notomista, E., Catania, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antifungal+and+antibiofilm+activity+of+the+first+cryptic+antimicrobial+peptide+from+an+archaeal+protein+against+Candida+spp.+clinical+isolates%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Antifungal and antibiofilm activity of the first cryptic antimicrobial peptide from an archaeal protein against Candida spp. clinical isolates.</a> Sci Rep. 8 (1), 17570(2018).</li>
<li>Tang, H., Liang, J., He, B. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+optimized+LIVE%2FDEAD+assay+using+flow+cytometry+to+quantify+poststress+and+antifungaltreatment+survival+in+diverse+yeasts%5BTitle%5D)+AND+%22BioRiv%22%5BJournal%5D)">An optimized LIVE/DEAD assay using flow cytometry to quantify poststress and antifungaltreatment survival in diverse yeasts.</a> BioRiv. , (2025).</li>
<li>Stiefel, P., SchmidtEmrich, S., ManiuraWeber, K., Ren, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+aspects+of+using+bacterial+cell+viability+assays+with+the+fluorophores+SYTO9+and+propidium+iodide%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Critical aspects of using bacterial cell viability assays with the fluorophores SYTO9 and propidium iodide.</a> BMC Microbiol. 15 (1), 36(2015).</li>
<li>Rego, A., Ribeiro, A., CôrteReal, M., Chaves, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+yeast+regulated+cell+death%3A+Trespassing+the+point+of+no+return+to+loss+of+plasma+membrane+integrity%5BTitle%5D)+AND+%22Apoptosis%22%5BJournal%5D)">Monitoring yeast regulated cell death: Trespassing the point of no return to loss of plasma membrane integrity.</a> Apoptosis. 27 (9), 778-786 (2022).</li>
<li>CarmonaGutierrez, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+and+recommendations+on+yeast+cell+death+nomenclature%5BTitle%5D)+AND+%22Microbial+Cell%22%5BJournal%5D)">Guidelines and recommendations on yeast cell death nomenclature.</a> Microbial Cell. 5 (1), 4-31 (2018).</li>
<li>Miller, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+colony+size+to+measure+fitness+in+Saccharomyces+cerevisiae%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Using colony size to measure fitness in Saccharomyces cerevisiae.</a> PLoS One. 17 (10), e0271709(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>96웰 심부 웰 플레이트</td><td>써모피셔</td><td>278606</td><td>NUNC 96</td></tr><tr><td>플레이트 리더가 장착된 Attune NxT 유세포 측정기</td><td>써모피셔 A24858</td><td>A24858</td><td>오토샘플러 (A42901)</td></tr><tr><td>Candida glabrata</td><td></td><td></td><td>CG99, 임상 분리균에서 유래한 실험실 균주(Cormack & 팔코우, 1999)</td></tr><tr><td>펑가라이트 효모 LIVE/DEAD 키트</td><td>써모피셔 A24858</td><td>L34952</td><td>SYTO 9(3.34 mM)와 프로피듐 아이오다이드(20 mM)를 함유하고 있습니다. 이 두 부품은 여러 공급업체로부터 별도로 구매할 수도 있습니다.</td></tr><tr><td>과산화수소</td><td>시그마 올드리치</td><td>H1009</td><td></td></tr><tr><td>라이카 콘포컬 SP8 현미경</td><td>라이카</td><td>TCS SP8 X</td><td></td></tr><tr><td>소금</td><td>시그마 올드리치</td><td>S9888</td><td>멸균된 0.85% NaCl 용액을 만드는 데 사용됨</td></tr><tr><td>아미노산이 없는 효모 질소염기</td><td>시그마 올드리치</td><td>Y0626</td><td>2% 포도당과 아미노산 혼합물을 포함한 합성 완전 배지를 만드는 데 사용되었습니다</td></tr></tbody></table>

효모 세포의 스트레스 후 생존을 정량화하기 위한 유세포 분석법과 결합된 최적화된 live/dead 분석

An Optimized LIVE/DEAD Assay Coupled with Flow Cytometry for Quantifying Post-Stress Survival in Yeast Cells

효모 세포의 스트레스 후 생존을 정량화하기 위한 유세포 분석법과 결합된 최적화된 LIVE/DEAD 분석

Quantifying survival is a common and critical task in yeast research. LIVE/DEAD stains based on plasma membrane integrity provide a rapid and ...

an-optimized-livedead-assay-coupled-with-flow-cytometry-for

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

분열 효모의 양적 라이브 세포 형광 - 현미경 분석

출처: Chapman, I. J., et al., 유세포 분석을 사용하여 광합성 유기체(Microcystis aeruginosa)의 세포 사망률을 결정하기 위한 분자 프로브 최적화. J. Vis. 경험. (2016년)이 비디오는 형광 프로브 표지와 피코시아닌 자가형광 및 프로브 신호의 유세포 분석을 결합하여 살아있는 세포와 죽은 녹농미세낭 충 세포를 구별하는 방법을 보여줍니다.

유세포 분석을 이용한 Microcystis aeruginosa 의 생존율 분석

이 문서에서는 조사 반딧불 루시 페라 제 - GFP 융합 단백질의 사용을...

의 모니터링 단백질 접힘에 대한 결합 분석 실험<em&gt; 사카 cerevisiae의</em

유동 세포 계측법 및 현미경에 따라 두 개의 보완적인 방법은 효모에서 MAPK 경로의 활성화에 의해 유도되는 유전자 발현의 역학의 단일 세포 수준에서 정량을, 가능하게하는 표시됩니다.

단일 효모 세포에서 MAPK 유도 표현의 시간적 정량화

미생물 인구는 전체 동작을 지시 할 수있는 실질적인 세포 이질성가 포함되어 있습니다. 유동 세포 계측법을 통해 분자 프로브 분석 그러나 그것의 응용 프로그램이 종 사이에서 변화, 세포의 생리 학적 상태를 확인할 수 있습니다. 이 연구는 과소 평가하거나 거짓 긍정적 인 결과를 기록하지 않고, 정확하게 cyanobacterium 인구 내에서 세포 사망을 결정하는 프로토콜을 제공합니다.

분자 프로브 최적화 (광합성 생물의 세포 사망을 확인하는 방법<em&gt; Microcystis aeruginosa의</em&gt;) 유동 세포 계측법을 사용하여

신진대사에 대한 연구는 면역학 연구와 점점 더 관련성이 높아지고 있습니다. 여기에서는 마우스 비장 세포와 T 및 B 림프구에서 해당작용 및 미토콘드리아 호흡을 측정하기 위한 최적화된 방법을 제시합니다.

최적화 된 프로토콜은 림프구에 해당 작용과 미토콘드리아 호흡을 분석하는

단백질 집계 세포 산화 스트레스 elicits. 이 프로토콜 amyloidogenic 단백질의 세포내 주와 관련 된, cytometry 사용 하 여 산화 스트레스 모니터링 하는 방법을 설명 합니다. 접근은 아 밀 로이드 β 펩 티 드의 가용성과 집계 경향이 이체의 동작을 연구 하는 데 사용 됩니다.

효 모 세포 산화 스트레스에 단백질 집단의 영향 평가

본 문서는 S. 세레비시아 및 HEK293T 세포 모두에서 단백질 자가 조립을 정량화하는 FRET 기반 유동 세포 분석 프로토콜에 대해 설명합니다.

유세포분석으로 생체내 단백질 자가 조립 검출 및 특성화

효모 성장 표현형은 마이크로콜로 성장하는 고정 된 세포의 매우 병렬 시간 경과 이미징을 통해 정확하게 측정됩니다. 동시에, 스트레스 내성, 단백질 발현 및 단백질 국소화를 모니터링할 수 있고, 통합된 데이터 세트를 생성하여 환경 및 유전적 차이뿐만 아니라 동종 세포 간의 유전자 발현 이질성, 변조 성장을 연구할 수 있습니다.

성장과 유전자 발현의 이질성을 측정하는 마이크로콜로니의 높은 처리량 라이브 이미징

여기에서는 효소 변형 분석을 위해 효모 표면 표시 기질을 사용하기 위한 프로토콜을 소개합니다. 이 플랫폼은 대표적인 효소 변형 분석법으로 기질 중 하나에 대한 티로신 인산가수분해효소 SHP-2의 탈인산화 활성 분석을 사용하여 시연되었습니다.

효모 표면에 표시된 단백질의 Enzymatic modification and flow cytometry assessment (효소 변형 및 유세포 분석 평가)

배우세요 효모 세포의 산화 스트레스 후 생존률을 정량화하는 유세포 분석법과 LIVE/DEAD 분석 기법을 활용한 세포막 무결성 평가 방법입니다. 이 프로토콜은 생물학적 스트레스 반응 연구에 활용됩니다.

효모 세포의 스트레스 후 생존을 정량화하기 위한 유세포 분석법과 결합된 최적화된 LIVE/DEAD 분석

더 많은 동영상 탐색