난 모델에서의 폐고혈압-우심실 부전에서의 구조적 운동 요법

우리는 난 모델에서 운동이 폐고혈압-우심실 부전의 병태생리에 미치는 영향을 연구하고 있습니다. 폐고혈압 우심실 부전에서의 운동 효과는 내성이 제한적이고 심폐 보상 위험이 부족해 명확하지 않습니다. 하지만 이 프로토콜은 통제된 평가를 가능하게 합니다.

우선, 필요한 시약을 모으고 실험 작업 공간을 마련하세요. 생리식염수 플러시 세 번 복용하세요. 각각에서 1밀리리터씩 빼세요.

각 주사기에 1,000단위가 들어 있는 헤파린 용액 1밀리리터를 추가하세요. 폐기물용과 혈액 채취용으로 각각 10밀리리터 주사기 두 개, 혈액 가스 채취용 1밀리리터 주사기 다섯 개를 준비하세요. 5밀리리터 주사기를 사용해 5,000단위 헤파린이 포함된 헤파린 용액 5밀리리터를 채취하여 우심실 또는 RV 라인을 고정합니다.

필요 시 사용할 수 있도록 알테플라제(alteplase) 2밀리그램과 멸균수 2밀리리터를 다시 조합하세요. 1밀리리터 주사기 하나와 5밀리리터 주사기 하나를 준비해 20에서 22게이지 바늘로 고장성 식염수를 채우세요. 압력 트랜스듀서를 구해 압력 튜빙의 암컷 루어 쪽 끝과 수컷 루어 쪽을 연결하세요.

트랜스듀서 하단 루어 끝이 캡이 되어 있는지 확인하세요. 튜브를 3방향 스톱콕에 연결하고 22게이지 후버 바늘을 연결하세요. 고장성 생리식염수로 관을 세척해 바늘에서 액체가 빠져나갈 때까지 세척하세요.

그 다음 스톱콕을 바늘 쪽으로, 파란색 캡에서 멀어지게 고정하여 커프에 접근할 수 있게 하세요. 1리터 백에서 2밀리리터의 생리식염수를 제거하고, 2,000단위의 헤파린이 들어 있는 2밀리리터의 헤파린 용액으로 교체하세요. 생리식염수 백을 압력 백 안에 넣은 후, 정맥 주사 스파이크를 이용해 접근 백에 삽입합니다.

압력 주머니를 지상에서 약 2미터 높이에 걸어두세요. 그리고 압력백의 3방향 스톱콕을 핸들이 튜빙에 수직이 되도록 돌리세요. 핸드펌프로 봉지를 부풀려 압력 표시기가 약 250밀리미터 수은에서 녹색으로 변할 때까지 유지하세요.

압력을 유지하기 위해 3방향 스톱콕을 가방 쪽으로 돌립니다. 정맥 주사 라인의 수컷 끝을 트랜스듀서의 암컷 끝에 연결합니다. 다음으로, 압력 튜빙의 암컷 미끼 쪽을 트랜스듀서 쪽 수컷 끝에 연결합니다.

그리고 튜브의 수컷 끝을 스톱콕의 암컷 미끼 쪽에 연결하세요. 22게이지 휴버 바늘을 3방향 스톱콕의 수컷 끝에 부착한 후, 헤파린 백을 열고 정맥 주사 라인을 세척하여 헤파린화된 식염수가 후퍼 바늘을 통해 배출될 때까지 세척합니다. 3방향 스톱콕을 후버 바늘 쪽으로 돌려 잠근다.

폐고혈압 RV 기능 실패의 양 모델을 사용하고, PA 커프와 RV 압력 포트를 이용해 기구를 장착하세요. 수술 후 회복 1주일이 지나면, 적응한 러닝머신을 운동실로 옮겨 검사합니다. 양에게 할터를 씌우고 동물을 러닝머신 위로 이끌며, 네 다리를 작은 상자 위에 올려놓고 앞쪽에 위치시킵니다.

포트를 촉진하고 알코올 물티슈로 피부를 닦으세요. 휴버 바늘을 사용해 PA 포트에 접근하세요. 랩 차트 홈페이지를 열고 나서 '새로 시작'을 선택하고 '설정'을 클릭한 후 기기와 채널을 선택하세요.

채널 수를 4개로 설정하고 채널 1을 PA 커프 압력, RV 압력, RV 수축기 압력, 심박수 이름으로 변경하세요. 주기적 측정을 선택하세요. 소스로 가서 채널 2 RV 압력을 선택하고, 최대값으로 측정한 후 확인을 클릭하세요. 채널 4 심박수에 대해 반복하되, 측정을 심박수로 변경하세요.

채널 1과 2에 대해 계산이 선택되지 않았는지 확인하세요. PA 포트는 헤드 쪽에, RV 포트는 테일 쪽에 더 가깝게 위치하여 접근 방향을 정확히 하세요. 양과 컴퓨터 사이에 심장 높이에 위치한 트랜스듀서를 설치하고, 두 압력 트랜스듀서를 인터페이스 케이블에 연결합니다.

트랜스듀서가 영점 조정 및 보정된 후, 시작을 클릭하여 400헤르츠에서 RV 및 PA 커프 압력파 형태를 기록하기 시작합니다. 스톱콕을 위로 돌려 PA 커프 압력파 형태를 변환합니다. 그 다음 스톱콕을 양 쪽으로 끄면 파형을 닫습니다.

RV 라인의 3방향 스톱콕에 헤파린 플러시 하나를 놓고, 전체 라인을 RV 포트로 플러시하세요. 주사기를 부드럽게 당겨 어두운 피가 다시 나올 때까지 계속하세요. 스톱콕을 트랜스듀서 쪽으로 끄세요.

먼저, 빈 10밀리리터 주사기를 사용해 RV 혈액 10밀리리터를 채취하세요. 그 다음 1밀리리터 주사기로 0.2에서 0.4밀리리터의 RV 혈액을 샘플로 채취합니다. 스톱을 위로 돌리세요.

RV 압력 변환기의 파란색 탭을 당겨 밸브를 열고 라인에 피가 없을 때까지 계속 세척하세요. 러닝머신 노브를 30으로 설정하고 10분간 유지하며 첫 운동 속도를 시작하세요. 10분 간격 동안 PA 커프 라인을 주기적으로 열어 PA 커프 압력을 전달하세요.

10분 간격이 끝날 무렵, 앞서 보여준 것처럼 혈액 가스를 측정하세요. 혈액 채취, 라인 세척, 운동 동작을 러닝머신 설정 40, 50, 30, 0에서 반복하세요. 1밀리리터의 고장성 식염수를 사용해 커프를 150에서 200밀리미터의 수은으로 부풀립니다.

인플레이션 후 몇 분간 RV 압력을 변환하여 내성을 확인하세요. 혼합 정맥 산소포화도는 1주차부터 8주차까지 러닝머신 최대 속도에서 비교적 안정적으로 유지되었습니다. RV 수축기 압력은 1주차부터 8주차까지 상승했습니다.

운동 중 이동 거리는 1주차에서 8주차까지 증가했지만, PA 커프 압력은 8주차에 약 777밀리미터의 수은으로 증가했습니다. 선택한 러닝머신 속도에서는 혼합 정맥 산소포화도가 감소하고, 운동 속도가 증가함에 따라 RV 수축기 압력이 증가했습니다. 이 프로토콜은 운동 중 실시간으로 혈역학적 값을 측정할 수 있게 해줍니다.

이 프로토콜의 주요 과제는 포트 접근 또는 연습을 유지하는 것입니다. 특히 PA 커프의 압력을 유지하는 것. 앞으로 더 자세히 측정하고자 하는 지표 중 하나는 운동과 회복 중 산소 소비량입니다.