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<ol><li>Thomas, F. H., Vanderhyden, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oocyte-granulosa+cell+interactions+during+mouse+follicular+development%3A+regulation+of+kit+ligand+expression+and+its+role+in+oocyte+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Biol+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Oocyte-granulosa cell interactions during mouse follicular development: regulation of kit ligand expression and its role in oocyte growth.</a> Reprod Biol Endocrinol. 4 (1), 19(2006).</li>
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<li>Kedem, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activated+ovarian+endothelial+cells+promote+early+follicular+development+and+survival%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ovarian+Res%22%5BJournal%5D)">Activated ovarian endothelial cells promote early follicular development and survival.</a> J Ovarian Res. 10 (1), 64(2017).</li>
<li>Converse, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multinucleated+giant+cells+are+hallmarks+of+ovarian+aging+with+unique+immune+and+degradation-associated+molecular+signatures%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Multinucleated giant cells are hallmarks of ovarian aging with unique immune and degradation-associated molecular signatures.</a> PLoS Biol. 23 (6), e3003204(2025).</li>
<li>Bafor, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+single+cells+from+individual+mouse+ovaries+for+flow+cytometry+and+functional+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Isolation of single cells from individual mouse ovaries for flow cytometry and functional analysis.</a> STAR Protoc. 4 (4), 102710(2023).</li>
<li>Shepherd, T. G., Thériault, B. L., Campbell, E. J., Nachtigal, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary+culture+of+ovarian+surface+epithelial+cells+and+ascites-derived+ovarian+cancer+cells+from+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Primary culture of ovarian surface epithelial cells and ascites-derived ovarian cancer cells from patients.</a> Nat Protoc. 1 (6), 2643-2649 (2006).</li>
<li>Beschta, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rapid+and+robust+method+for+the+cryopreservation+of+human+granulosa+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Histochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">A rapid and robust method for the cryopreservation of human granulosa cells.</a> Histochem Cell Biol. 156 (5), 509-517 (2021).</li>
<li>Tingen, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+macrophage+and+theca+cell-enriched+stromal+cell+population+influences+growth+and+survival+of+immature+murine+follicles+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Reproduction%22%5BJournal%5D)">A macrophage and theca cell-enriched stromal cell population influences growth and survival of immature murine follicles in vitro.</a> Reproduction. 141 (6), 809-820 (2011).</li>
<li>O'Mara, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+mirabegron+treatment+increases+human+brown+fat%2C+HDL+cholesterol%2C+and+insulin+sensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Chronic mirabegron treatment increases human brown fat, HDL cholesterol, and insulin sensitivity.</a> J Clin Invest. 130 (5), 2209-2219 (2020).</li>
<li>Zink, N., Stock, A. -K., Vahid, A., Beste, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+neurophysiological+mechanisms+underlying+the+adaptability+to+varying+cognitive+control+demands%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Hum+Neurosci%22%5BJournal%5D)">On the neurophysiological mechanisms underlying the adaptability to varying cognitive control demands.</a> Front Hum Neurosci. 12, 411(2018).</li>
<li>Zhao, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Methods+Primers%22%5BJournal%5D)">Organoids.</a> Nat Rev Methods Primers. 2 (1), 94(2022).</li>
<li>Yang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids%3A+the+current+status+and+biomedical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22MedComm%22%5BJournal%5D)">Organoids: the current status and biomedical applications.</a> MedComm. 4 (3), e274(2023).</li>
<li>Alzamil, L., Nikolakopoulou, K., Turco, M. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+systems+to+study+the+human+female+reproductive+tract+and+pregnancy%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Differ%22%5BJournal%5D)">Organoid systems to study the human female reproductive tract and pregnancy.</a> Cell Death Differ. 28 (1), 35-51 (2021).</li>
<li>Pierson Smela, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Directed+differentiation+of+human+iPSCs+to+functional+ovarian+granulosa-like+cells+via+transcription+factor+overexpression%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Directed differentiation of human iPSCs to functional ovarian granulosa-like cells via transcription factor overexpression.</a> eLife. 12, e83291(2023).</li>
<li>Dipali, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-organizing+ovarian+somatic+organoids+preserve+cellular+heterogeneity+and+reveal+cellular+contributions+to+ovarian+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">Self-organizing ovarian somatic organoids preserve cellular heterogeneity and reveal cellular contributions to ovarian aging.</a> Aging Cell. 25 (1), e70333(2026).</li>
<li>Di Nisio, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silk-ovarioids%3A+establishment+and+characterization+of+a+human+ovarian+primary+cell+3D-model+system%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod+Open%22%5BJournal%5D)">Silk-ovarioids: establishment and characterization of a human ovarian primary cell 3D-model system.</a> Hum Reprod Open. 2025 (3), hoaf042(2025).</li>
<li>Nikanfar, S., Leonel, E. C. R., Damdimopoulou, P., Flaws, J. A., Amorim, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+phthalate+exposure+on+human+ovarian+extracellular+matrix+composition%3A+insights+from+a+3D+spheroid+model%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of phthalate exposure on human ovarian extracellular matrix composition: insights from a 3D spheroid model.</a> Environ Res. 279, 121797(2025).</li>
<li>Briley, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproductive+age-associated+fibrosis+in+the+stroma+of+the+mammalian+ovary%5BTitle%5D)+AND+%22Reproduction%22%5BJournal%5D)">Reproductive age-associated fibrosis in the stroma of the mammalian ovary.</a> Reproduction. 152 (3), 245-260 (2016).</li>
<li>Converse, A., Zaniker, E. J., Amargant, F., Duncan, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recapitulating+folliculogenesis+and+oogenesis+outside+the+body%3A+encapsulated+in+vitro+follicle+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Recapitulating folliculogenesis and oogenesis outside the body: encapsulated in vitro follicle growth.</a> Biol Reprod. 108 (1), 5-22 (2023).</li>
<li>Dean, M., Jin, V., Russo, A., Lantvit, D. D., Burdette, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+of+the+extracellular+matrix+and+colonization+of+the+ovary+in+metastasis+of+fallopian-tube-derived+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Carcinogenesis%22%5BJournal%5D)">Exposure of the extracellular matrix and colonization of the ovary in metastasis of fallopian-tube-derived cancer.</a> Carcinogenesis. 40 (1), 41-51 (2019).</li>
<li>Charalambous, C., Webster, A., Schuh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aneuploidy+in+mammalian+oocytes+and+the+impact+of+maternal+ageing%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Aneuploidy in mammalian oocytes and the impact of maternal ageing.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 24 (1), 27-44 (2023).</li>
<li>Rowley, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+molecular+weight+hyaluronan+induces+an+inflammatory+response+in+ovarian+stromal+cells+and+impairs+gamete+development+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Low molecular weight hyaluronan induces an inflammatory response in ovarian stromal cells and impairs gamete development in vitro.</a> Int J Mol Sci. 21 (3), 1036(2020).</li>
<li>Amargant, F., Vieira, C., Pritchard, M. T., Duncan, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+low-dose+anti-fibrotic+treatment+attenuates+ovarian+aging+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Geroscience%22%5BJournal%5D)">Systemic low-dose anti-fibrotic treatment attenuates ovarian aging in the mouse.</a> Geroscience. 47 (3), 3475-3495 (2024).</li>
</ol>

```html
<table><tbody><tr><td>0.2 &mu;m, Polyethersulfone syringe filter</td><td>Corning</td><td>431229</td><td></td></tr><tr><td>1.5 mL microcentrifuge tubes</td><td>MIDSCI</td><td>PR-MCT15</td><td></td></tr><tr><td>100 mL glass beaker</td><td>Fisherbrand</td><td>FB100100</td><td></td></tr><tr><td>100 mm Petri dishes</td><td>Corning</td><td>351029</td><td></td></tr><tr><td>15 mL conical tubes</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>339651&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>24-well plates (TC-treated)</td><td>Corning</td><td>353047</td><td></td></tr><tr><td>28-gauge insulin needles</td><td>Exel International</td><td>26027</td><td></td></tr><tr><td>35 mm Petri dishes</td><td>Corning</td><td>351008</td><td></td></tr><tr><td>3&beta;-HSD antibody</td><td>Cosmo Bio</td><td>K0607</td><td>1:1000</td></tr><tr><td>4% Paraformaldehyde</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>1574100</td><td></td></tr><tr><td>40 &micro;m cell strainer</td><td>Corning</td><td>431750</td><td></td></tr><tr><td>45 mm watch glass</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>7054345</td><td></td></tr><tr><td>50 mL concial tubes</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>339652&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>60 mL sterile syringe</td><td>Air-Tite</td><td>ML60</td><td></td></tr><tr><td>60 mm TC-treated plates</td><td>Corning</td><td>353037</td><td></td></tr><tr><td>6-well plates (TC-treated)</td><td>Corning</td><td>353046</td><td></td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Hoefer</td><td>GR140-500</td><td>Gel strength >1200 g/cm2; Gel Temperature 36 &deg;C</td></tr><tr><td>Autoclave sterilization pouch</td><td>Fisherbrand</td><td>01-812-55</td><td></td></tr><tr><td>Biotinylated Goat Anti-Mouse IgG</td><td>Vector Laboratories</td><td>BA-9200-1.5</td><td>1:200</td></tr><tr><td>Biotinylated Goat Anti-Rabbit IgG</td><td>Vector Laboratories</td><td>PK-6101</td><td>1:200</td></tr><tr><td>Biotinylated Goat Anti-Rat IgG</td><td>Vector Laboratories</td><td>BA-9400-1.5</td><td>1:100</td></tr><tr><td>Bluing reagent</td><td>Fisherbrand</td><td>23-245681</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge with swing bucket rotor for 50 mL conical tubes</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>Sorvall X1R Pro-MD</td><td></td></tr><tr><td>Class II biosafety cabinet</td><td>The Baker Company</td><td>SG403A</td><td></td></tr><tr><td>Cleaved Caspase-3 (CC3) antibody</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>9579T</td><td>1:250</td></tr><tr><td>CO2 incubator</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>Heracell VIOS 160i CO2 Incubator</td><td></td></tr><tr><td>Collagenase, Type IV, powder</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>17-104-019</td><td></td></tr><tr><td>C-Series Mouse Cytokine Antibody Array 3 Kit</td><td>RayBiotech</td><td>AAM-CYT-3-8</td><td></td></tr><tr><td>Cytoseal XYL</td><td>Epredia</td><td>83124</td><td></td></tr><tr><td>Deoxyribonuclease I from bovine pancreas</td><td>Millipore Sigma</td><td>DN25-100MG</td><td>Dnase I</td></tr><tr><td>Dissecting microscissors</td><td>World Precision Instruments</td><td>WPI-14003</td><td></td></tr><tr><td>Dissecting scissors</td><td>World Precision Instruments</td><td>WPI-15922</td><td></td></tr><tr><td>Dissection microscope</td><td>Leica</td><td>MZ9.5, S9 series</td><td></td></tr><tr><td>DPBS, no calcium, no magnesium</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>14-190-250</td><td>pH 7.0&ndash;7.3</td></tr><tr><td>Eosin</td><td>Fisherbrand</td><td>23-314631</td><td></td></tr><tr><td>F4/80 antibody</td><td>Bio-Rad</td><td>MCA497G</td><td>1:50</td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum, certified, heat inactivated, United States</td><td>Gibco, ThermoFisher Scientific</td><td>10082147</td><td></td></tr><tr><td>Fine-tipped dissecting forceps</td><td>World Precision Instruments</td><td>WPI-14098</td><td></td></tr><tr><td>FOXL2 antibody</td><td>Abcam</td><td>ab246511</td><td>1:200</td></tr><tr><td>Graefe Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>1105010</td><td></td></tr><tr><td>Hematoxylin</td><td>EK Industries</td><td>EKI 47971GL</td><td></td></tr><tr><td>Hemocytometer</td><td>MedOne</td><td>DHCN015</td><td></td></tr><tr><td>Imaging System</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>EVOS FL Auto</td><td></td></tr><tr><td>IntestiCult Organoid Growth Medium (Mouse)</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>06005</td><td>Basal medium, Supplements 1 and 2</td></tr><tr><td>Laminar flow hood</td><td>IVFtech</td><td>IVFtech sterile workstation</td><td></td></tr><tr><td>Leibovitz's L-15 Medium</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>11415114</td><td></td></tr><tr><td>Microscope slides</td><td>Mercedes Scientific</td><td>MER 7255/90/WH/CC</td><td></td></tr><tr><td>MicroTissues 3D Petri Dish micro-mold spheroids</td><td>Millipore Sigma</td><td>Z764043-6EA</td><td>Silicone casts for agarose micromolds</td></tr><tr><td>Modified Davidson's Fixative</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>6413350</td><td></td></tr><tr><td>OVCAR8-RFP cells</td><td></td><td></td><td>Joanna Burdette PhD, University of Illinois Chicago 선물</td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin</td><td>Millipore Sigma</td><td>P4333-100ML</td><td></td></tr><tr><td>Picrosirius Red staining solution</td><td>StatLab</td><td>STPSRPT</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640 Medium (ATCC modification)</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>A1049101</td><td></td></tr><tr><td>Tabletop centrifuge</td><td>Eppendorf</td><td>Centrifuge 5430 R&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Trypan blue</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>T10282</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin-EDTA (0.05%), phenol red</td><td>Gibco, ThermoFisher Scientific</td><td>25300054</td><td></td></tr><tr><td>Vimentin antibody</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>5741S</td><td>1:100</td></tr><tr><td>&alpha;MEM, GlutaMAX Supplement, no nucleosides</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>32561102</td><td></td></tr></tbody></table>
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난소 미세환경 탐구: 마우스 난소 체세포의 분리, 2d 배양 및 오가노이드 배양 방법

Probing the Ovarian Microenvironment: Methods for Isolation, 2D Culture, and Organoid Culture of Mouse Ovarian Somatic Cells

난소 미세환경 탐구: 마우스 난소 체세포의 분리, 2D 배양 및 오가노이드 배양 방법

The ovary consists of heterogeneous populations of somatic cells, both within the follicle and the surrounding stroma, which are critical to support ...

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Research

연구

JoVE Journal

Developmental Biology

발생생물학

그들의 입체적인 맥락에서 정상 세포의 문화 세포 변형 및 tumorigenesis에 필요한 초기 이벤트를 연구하는 다른 방법을 나타냅니다. 이 방법은 난소암 형성 초기에 이벤트를 연구 정상 난소와 oviductal 세포를 성장하는 데 사용됩니다.

난소와 Oviducts의 3 차원 조직 문화 알긴산의 Hydrogels

이 프로토콜은 신생아 마우스와 사춘기 쥐에서 개별 난소에서 난소를 사용하여, 마우스 난소 조직의 주요 문화 / 공동 문화를 설명합니다. 배양 기술은 난소에 외인성 제제의 효과의 조사를 가능하게하여 생리 고도로 개발을 지원하고, 난포 사이의 상호 작용.

문화 공동 문화 마우스의 난소와 난소

여기에서는 난소암 세포의 부착, 침습 및 증식을 조사하기 위한 도구로서 일차 인간 중피 세포와 세포외 기질로 층을 이룬 섬유아세포로 구성된 복막강 내막의 3차원 체외 모델을 구성하는 프로토콜을 제시합니다.

인간의 복강의의 Organotypic 문화 난소 암 보급의 초기 단계 모델링

여기, 선물이 직렬 구분 없이 교양된 난소 젊은 쥐의 모 낭을 계량 하는 프로토콜. 전체 기관 면역 형광 및 조직 삭제를 사용 하 여, 실제 단면 광 단면으로 대체 됩니다. 샘플 준비 및 시각화의이 방법은 기관 무결성을 유지 하 고 특정 셀의 자동화 된 정량화를 용이 하 게.

전체 산 면역 형광 및 교양된 마우스 난소의 여 포 정량화

난소 조직 문화 여 포 개발, 배 란, 그리고 여 포가 폐쇄 증의 모델로 사용할 수 있습니다 하 고 동적 난소 프로세스의 규제 메커니즘을 나타냅니다.

난소 조직 문화 현상을 마우스 난소에서 시각화 하

소 난소 피질의 체외 문화와 난소 미세 환경에 대한 영양 계단 단계 식단의 효과가 제시됩니다. 난소 피질 조각7 일 동안 배양 하 고 스테로이드, 사이토 카인, 그리고 여포 단계 평가 되었다. 계단 단계 다이어트 치료는 문화에서 여포 진행의 결과로 증가 스테로이드 발생했다.

소 난소 피질 조직 배양

이 프로토콜은 다양한 질병 단계의 난소암 오가노이드 확립을 위한 체계적인 프레임워크를 제공하고 환자별 변동성 문제를 해결하여 수율을 높이고 후속 응용 분야에서 강력한 장기 확장을 가능하게 합니다. 여기에는 조직 처리, 파종, 배지 요구 사항 조정 및 면역형광 염색을 위한 자세한 단계가 포함됩니다.

난소암 오가노이드의 바이오뱅킹 전략: 조직학적 아형 및 질병 단계에 걸친 환자 간 이질성 해결

이 프로토콜은 일차 인간 난소 표면 상피(hOSE) 세포에서 3차원(3D) 조직 오가노이드를 확립하는 방법을 설명합니다. 이 프로토콜에는 갓 채취한 난소에서 hOSE 분리, hOSE의 세포 확장, 동결 보존-해동 절차 및 오가노이드 유도가 포함됩니다. 면역형광(Immunofluorescence), 정량 분석(quantitative analysis) 및 스크리닝 플랫폼으로서의 유용성 입증(showcasing utility as a screening platform)이 포함되어 있습니다.

조직 재생을 연구하기 위한 플랫폼으로서의 인간 난소 표면 상피 오가노이드

이 프로토콜은 시험관 내 및 생체 내에서 고급 장액성 난소 암종(HGSOC) 마우스 모델의 개발을 자세히 설명합니다. 쥐 나팔관 오가노이드의 파생, 인간 HGSOC 유전학을 요약하기 위한 유전자 변형, 종양의 생체 내 발달을 위한 동계 마우스의 난소 활액낭에 도입.

고급 장액성 난소 암종 모델링을 위한 나팔관 상피 세포의 마우스 유래 오가노이드 라인 개발

우리는 시험관 내 배우자 형성을 보완하는 새로운 스캐폴드가 없는 아가로스 곰팡이에서 난소 난포를 배양하는 방법을 설명합니다.

스캐폴드 프리 마우스 난소 난포 배양을 위한 맞춤형 아가로스 몰드의 생산 및 사용

Northwestern University, Chicago.  우리는 기질이 풍부한 난소 분획에서 마우스 난소 체세포를 분리하고, 스캐폴드 없는 접근법을 사용하여 마우스 난소 체세포 오가노이드를 생성하는 방법을 설명합니다.

난소 미세환경 탐구: 마우스 난소 체세포의 분리, 2D 배양 및 오가노이드 배양 방법

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